Результат интеллектуальной деятельности: СТАБИЛЬНЫЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ НА ОСНОВЕ АКТИНОМИЦИНА Д ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ

Изобретение относится к медицине, химико-фармацевтической промышленности, а именно к соединениям, обладающим противоопухолевой активностью, и касается получения инъекционной лекарственной формы природных олигопептидногетероциклических антибиотиков, продуцируемых различными «плесневыми» актиномицинами, в частности актиномицина Д [1-5]. Актиномицин выделяют из продуктов жизнедеятельности Actinomyces parvullus и используют в основном в качестве противоопухолевого средства. Дактиномицин (актиномицин Д) входит в схемы лечения опухоли Вильмса (в сочетании с радиотерапией) [6-8], рабдомиосаркомы (в комбинации с винкристином/винкристином и циклофосфамидом) [9-13], метастатической хориокарциномы, неметастатической хориокарциномы, метастатической несеминоматозной карциномы яичек [4, 14-15], саркомы Юнга (в составе комплексной терапии) [16-18], гроздевидной саркомы (в сочетании с лучевой терапией) [19] и других видов злокачественных опухолей у детей и взрослых [4, 15, 20-22].

Применение актиномицинов позволяет значительно повысить эффективность комплексной терапии опухолей [4, 15, 23], а также остеоартритов [24].

Актиномицин Д впервые был запатентован в Германии (патент N 1172680) в качестве хромопептидного антибиотика с потенциальной антиканцерной активностью для некоторых видов раковых опухолей, в частности раковой опухоли Wilm′s, желудочной хориокарциномы и саркомы Kaposi. Механизм цитотоксического действия актиномицинов и антрациклиновых противоопухолевых антибиотиков обусловлен главным образом ингибированием выработки нуклеиновых кислот посредством интеркаляции между парами азотистых оснований, нарушением процесса вторичной спирализации дезоксирибонуклеиновой кислоты за счет взаимодействия с ДНК-топоизомеразой II и связыванием с липидами, входящими в состав клеточных мембран. Показано, что актиномицин Д в субмикромолярных концентрациях сильно ингибирует ДНК-зависимый синтез РНК и в меньшей степени синтез ДНК. Предполагается, что в основе цитотоксического механизма лежит ингибирование активности РНК-полимеразы [25-30]. Все это обусловливает высокую антимитотическую активность на фоне низкой избирательности действия. Актиномицины, как и антрациклины, оказывают иммунодепрессивное, а именно - миелосупрессивное влияние и антибактериальный эффект, однако в качестве антимикробных средств они используются редко.

Наиболее широко известный препарат Дактиномина производства фирмы Рекордати (Recordati)., Inc. (Cosmegen for injection (dactinomycin for injection) prescribing information. Whitehouse Station, NJ; 2005 Jun) [3] выпускается в форме лиофилизированного порошка для инъекций и содержит 1,0 мг или 0,5 мг дактиномицина и 200 мг маннитола. Известен патент на дактиномицин в комбинации с циклодекстринами и маннитолом (US 6048845 A Pharmaceutical formulation, 2000) в лиофилизированной форме.

Из анализа приведенных выше информационных материалов закономерно формулируется цель настоящего изобретения, а именно: создание стабильного фармацевтического состава на основе субстанций дактиномицина, позволяющего снизить риск нарушения качества производимого лекарственного средства, повысить стабильность при хранении и значительно снизить риск контаминации при разведении лиофильного порошка непосредственно перед употреблением, как в случае Cosmegen (Dactinomycin, Injection, Merck & Company, NDA 50-682/S-020 3/19/03 3/26/03 Cosmegen (Dactinomycin) Injection, Merck & Company, NDA 50-682/S-019) и его аналогов.

Известна инъекционная лекарственная форма противоопухолевого антибиотика актиномицинового ряда Дактиномицина (Cosmegen®), способ получения которой включает приготовление раствора дактиномицина 500 мкг/20 мг и маннитола в 1 мл, стерилизующую фильтрацию, розлив во флаконы и лиофилизацию раствора во флаконах [Cosmegen for injection. FDA Access data. FDA application no 050682]. Этот препарат является близким по составу и достигаемому результату, в котором для обеспечения стабильности дактиномицина при хранении препарата добавляют криопротектор (маннитол), затем разливают во флаконы или ампулы и лиофилизируют (Cosmegen for injection. FDA Access data. FDA application no 050682). Препарат представляет собой лиофилизированный порошок для приготовления инъекционного раствора. Непосредственно перед применением его растворяют и готовят раствор для инъекций.

Однако производство лиофилизированного препарата представляет собой дорогостоящий процесс. Кроме того, существует необходимость приготовления раствора препарата непосредственно перед введением, что усложняет работу медицинского персонала в асептических условиях. Данная форма препарата неудобна для больных. При вскрытии ампулы часто в препарат попадает стекло, тяжело разводить препарат перед употреблением водой, трудно его дозировать. Разведенный препарат должен быть сразу использован и не может храниться, а при назначении его маленьким детям значительная часть его просто выбрасывается. Лиофильное высушивание снижает лечебно-профилактическую активность препарата и значительно удорожает производство. Вышеизложенные причины обусловили выполнение настоящей работы по созданию жидкой формы препарата Дактиномицина. Исключение процесса лиофильного высушивания исключает необходимость растворения препарата перед введением и устраняет нарушения необходимых условий стерильности для инъекционных лекарственных форм.

Наиболее близким аналогом (прототип) к заявленному изобретению является препарат Акномид Д® (№ ЛП-002036 2013-04-01 от Адиком ООО (Россия), производитель Брынцалов-А (Россия)), представляющий собой раствор для внутривенного введения и перфузии 0,5 мг/мл, содержащий 0,5 мг Дактиномицина и вспомогательное вещество Реополиглюкин, раствор для инфузий (10% раствор декстрана с молекулярной массой от 3000 до 4000, в изотоническом растворе натрия хлорида) - до 1 мл. Срок хранения препарата Акномид®, согласно Инструкции, составляет 3 года.

Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента жидких форм препаратов для инъекций на основе Актиномицина Д, обладающих стабильным фармацевтическим составом.

Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в реализации указанного назначения путем создания фармацевтического состава для инъекций в форме раствора, который содержит в качестве активного ингредиента растворенный в 0,2% натрия гидроксида (повышающий рН щелочной раствор) или фосфатном буфере с рН 6,5-7,5 актиномицин Д, в качестве вспомогательного вещества - углевод, выбранный из маннитола и декстрозы, и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов, мас.%:

В результате осуществления изобретения удается:

1) получить стабильную фармацевтическую жидкую форму Дактиномицина для инъекций, которая по стабильности, сохранению фармацевтической активности и токсикологическим свойствам не уступает прототипу и существующим на рынке лиофилизатам Дактиномицина, с упрощенной технологией производства, исключающей процедуру лиофильного высушивания и процедуру растворения препарата перед введением;

2) снизить энергетические и трудовые затраты и в конечном итоге снизить себестоимость препарата при его изготовлении;

3) повысить хранимоспособность (сроки сохранения активности и стерильности) по сравнению с жидкими формами препаратов Дактиномицина.

В качестве углевода предлагается использовать маннитол или 10% раствор декстрозы (декстрана) с молекулярной массой 3000-4000 в изотоническом растворе натрия хлорида.

Предлагаемое соотношение компонентов является оптимальным, найдено экспериментально и обеспечивает улучшение параметров стабильности препарата (стабильное качество в течение 3-х и более лет) по сравнению с прототипом (Акномид Д®) с сохранением терапевтического действия, а также улучшение цветности раствора.

Описанный технический результат достигается системой технологических решений и созданием экономичной технологии получения инъекционных препаратов высокого качества, отвечающей требованиям Государственной Фармакопеи РФ XI и XII изданий, к стерильным инъекционным препаратам. Заявленный состав получают следующими приемами: в реактор вместимостью 10 л наливают 9,5 л воды для инъекций и добавляют концентрированный фосфатный буфер при постоянном перемешивании и контроле рН. Добавление фосфатного буфера прекращают при установлении рН 6,5-7,5, который (водородный показатель) стабильно поддерживается в продолжение 5 мин. Возможно введение в раствор вместо фосфатного буфера щелочного агента, в качестве которого используется 0,2%-ный раствор натрия гидроксида (едкого натрия) до значения рН 7,0-8,0. Не отключая мешалку, добавляют предварительно взвешенное необходимое количество углевода и тщательно перемешивают. Производят контрольное измерение рН. Затем при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина, предварительно взвешенную в соответствие с ее количеством в готовой лекарственной форме. Если рН находится в пределах 5,5-7,5, открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения углевода. После растворения проводят стерилизующую фильтрацию полученного раствора в асептических условиях, дозированно разливают в ампулы (или флаконы) и запаивают (закупоривают крышками типа «флип-топ»).

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и удовлетворяет условиям подлинности по соотношению интенсивностей поглощения (Е): Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Полученный раствор хранили в течение 3 лет при температуре не выше 15°С (таблица 1).

Сравнительные испытания в течение срока годности хранения разработанного стабильного фармацевтического состава жидкой формы и лиофилизированной лекарственной формы Дактиномицина (Cosmegen®, Merck) показали, что разработанный стабильный фармацевтический состав для инъекций дактиномицина Д стабилен при хранении и по качественным показателям (включая количественное содержание дактиномицина Д) не отличается от лиофилизированной формы препарата Дактиномицина - Cosmegen®, Merck. Полученную жидкую форму можно хранить в продолжение 3,5 лет по данным стабильности на день подачи изобретения.

Примечание: испытания проведены на флаконах с исходным содержанием дактиномицина 0,5 мг/мл; представлены средние данные трехсерий препаратов; ГФ XII - Государственная Фармакопея РФ, XII издание, с. - страница.

Здесь следует отметить, что в отличие от раствора для внутривенного введения и перфузии Дактиномина Д (Акномид Д®, производитель ЗАО «Брынцалов-А», Россия, спектр поглощения 0,0025% раствора разработанного фармацевтического состава в области длин волн 200-550 нм в кювете толщиной слоя 10 мм имеет пики максимумов поглощения при длине волны 240+/-1 нм и 445+/-1 нм, а соотношение интенсивностей пиков при длине волны 240+/-1 нм к интенсивности поглощения при 445 нм составляет от 1,30 до 1,50, а также рН в интервале 5,5-7,5 (таблица 1).

Достижение стабильного поддержания соотношения интенсивности пиков и отсутствие их смещения в разработанном фармацевтическом составе - жидкой лекарственной форме Дактиномицина подтверждает достижение стабильности при хранении разработанной лекарственной формы без изменения конформационного состояния Дактиномицина, с одной стороны, и по показателям количественного определения и подлинности соответствует монографиям на лиофилизат Дактиномицина, представленным в U.S. Pharmacopeia 29 (Фармакопея США) в соответствие со стандартом USP Dactinomycin RS.

Приведенные отличительные признаки фармацевтического состава в литературе не описаны, а их влияние на достижение технического результата не следует из известного уровня знаний в области технологии производства существующих лекарственных препаратов Дактиномицина и, следовательно, удовлетворяет критериям «новизна» и «изобретательский уровень».

Поставленная задача решается введением в состав препарата углевода (например, маннит, мальтоза и т.д.), который в качестве консерванта и стабилизатора обеспечивает устойчивость (стабильность) жидкого препарата при хранении, если предварительно Дактиномицин растворен в буферном растворе с рН 6,5-7,5. Исключение процесса лиофильного высушивания устраняет необходимость растворения препарата перед введением, позволяет упростить технологию производства лекарственной формы, снизить энергетические и трудовые затраты и в конечном счете снизить себестоимость препарата.

Примеры фармацевтического состава Дактиномицина для инъекционного раствора, предназначенного для внутривенного введения и инфузий.

Пример 1. Раствор Дактиномицина для инъекций или инфузий готовят следующим образом. В реактор вместимостью 9,0 л заливают воду для инъекций и доводят фосфатным буфером до рН 6,8-7,2 и добавляют 200,0 г маннита при постоянном перемешивании и под контролем рН раствора. После полного растворения маннита при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина в количестве 5,00 г. Если рН получившегося раствора находится в пределах 5,5-7,5, открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения субстанции Дактиномицина. Полученный раствор пропускают через стерилизирующий фильтр с диаметром 0,22 мкм. В асептических условиях проводят розлив в ампулы (флаконы) и запаивают (закупоривают) и помещают их в кассеты. Конечная концентрация Дактиномицина в ампуле 0,5 мг/мл (0,05%), маннита 20 мг/мл (2,0%). Затем производят маркировку и переносят в контурные ячейки и коробки.

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и удовлетворяет условиям подлинности по соотношению интенсивностей поглощения (Е): Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Через 3 года полученный фармацевтический состав в ампулах удовлетворял условиям подлинности, имел рН в пределах 5,5-7,5 и содержал 0,5 мг/мл Дактиномицина.

Пример 2. Раствор Дактиномицина для инъекций или инфузий готовят следующим образом. В реакторе вместимостью 10,0 л предварительно готовят 10% раствор декстрана с молекулярной массой от 3000 до 4000 с добавлением хлорида натрия и воды для инъекций до получения изотонического раствора. рН раствора доводят до рН 6,5-7,5 0,2% раствором гидроксида натрия при постоянном перемешивании и под контролем рН раствора. После полного растворения при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина в количестве 5,00 г. Если рН находится в пределах 5,5-7,5, то открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения субстанции Дактиномицина. Полученный раствор пропускают через стерилизирующий фильтр с диаметром 0,22 мкм. В асептических условиях проводят розлив в ампулы (флаконы) и запаивают (закупоривают) и помещают их в кассеты. Конечная концентрация Дактиномицина в ампуле 0,5 мг/мл (0,05%). Затем производят маркировку и переносят в контурные ячейки и коробки.

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и имеет соотношение Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Через 3 года полученный фармацевтический состав в ампулах удовлетворял условиям подлинности, имел рН в пределах 5,5-7,5 и содержал 0,5 мг/мл Дактиномицина.

Пример 3. Раствор Дактиномицина для инъекций или инфузий готовят следующим образом. В реактор вместимостью 9,0 л заливают воду для инъекций, доводят фосфатным буфером до рН 6,5-7,5 и добавляют 800 г маннита при постоянном перемешивании и под контролем рН раствора. После полного растворения при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина в количестве 15,00 г. Если рН находится в пределах 5,5-7,5, открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения субстанции Дактиномицина. Полученный раствор пропускают через стерилизирующий фильтр с диаметром 0,22 мкм. В асептических условиях проводят розлив в ампулы (флаконы) и запаивают (закупоривают) и помещают их в кассеты. Конечная концентрация Дактиномицина в ампуле 1,5 мг/мл (0,15%), маннита 80 мг/мл (8,0%). Затем производят маркировку и переносят в контурные ячейки и коробки.

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и удовлетворяет условиям подлинности по соотношению интенсивностей пиков поглощения (Е) раствора: Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Через 3 года полученный фармацевтический состав в ампулах удовлетворял условиям подлинности, имел рН в пределах 5,5-7,5 и содержал 1,5 мг/мл Дактиномицина.

Пример 4. Раствор Дактиномицина для инъекций или инфузий готовят следующим образом. В реакторе вместимостью 10,0 л предварительно готовят 20% раствор маннита с добавлением хлорида натрия и воды для инъекций до получения изотонического раствора. рН раствора доводят до рН 6,8-7,2 0,2% раствором гидроксида натрия при постоянном перемешивании и под контролем рН раствора. После полного растворения при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина в количестве 2,00 г. Если рН находится в пределах 5,5-7,5, то открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения субстанции Дактиномицина. Полученный раствор пропускают через стерилизирующий фильтр с диаметром 0,22 мкм. В асептических условиях проводят розлив в ампулы (флаконы) и запаивают (закупоривают) и помещают их в кассеты. Конечная концентрация Дактиномицина в ампуле 0,2 мг/мл (0,02%). Затем производят маркировку и переносят в контурные ячейки и коробки.

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и имеет соотношение Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Через 3 года полученный фармацевтический состав в ампулах удовлетворял условиям подлинности, имел рН в пределах 5,5-7,5 и содержал 0,2 мг/мл. Дактиномицина.

Пример 5. Раствор Дактиномицина для инъекций или инфузий готовят следующим образом. В реакторе вместимостью 10,0 л предварительно готовят 20% раствор декстрозы с добавлением хлорида натрия и воды для инъекций до получения изотонического раствора. рН раствора доводят до рН 6,8-7,2 0,2% раствором гидроксида натрия при постоянном перемешивании и под контролем рН раствора. После полного растворения при постоянном перемешивании загружают небольшими порциями субстанцию Дактиномицина в количестве 50,00 г. Если рН находится в пределах 5,5-7,5, то открывают вентиль подачи стерильного азота в реактор и барботируют в продолжение 30 мин. Затем доводят объем раствора в реакторе до 10 л, корректируют рН, перемешивают и барботируют азотом до полного растворения субстанции Дактиномицина. Полученный раствор пропускают через стерилизирующий фильтр с диаметром 0,22 мкм. В асептических условиях проводят розлив в ампулы (флаконы) и запаивают (закупоривают) и помещают их в кассеты. Конечная концентрация Дактиномицина в ампуле 0,05 мг/мл (0,5%), декстрозы 20 мг/мл. Затем производят маркировку и переносят в контурные ячейки и коробки.

Полученный фармацевтический состав для инъекций представляет собой прозрачную жидкость желтовато-оранжевого цвета. Препарат стерилен, апирогенен, нетоксичен, имеет рН 5,5-7,5 и имеет соотношение Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5.

Через 3 года полученный фармацевтический состав в ампулах удовлетворял условиям подлинности, имел рН в пределах 5,5-7,5 и содержал 0,05 мг/мл, Дактиномицина.

Таким образом, разработанный фармацевтический состав обладает высокой стабильностью при хранении в течение 3,5 лет (данные на момент подачи изобретения), позволяет сохранить удовлетворение препарата критериям подлинности: соотношению интенсивностей пиков поглощения (Е) раствора: Е₂₄₀/Е₄₄₅ в пределах 1,3-1,5; исключить проведение процедуры растворения субстанции непосредственно перед употреблением, как в случае лиофилизированных форм Дактиномицинов, упростить технологию производства лекарственной формы путем исключения процедуры лиофильного высушивания и значительного снижения энергозатрат производственного процесса, что в конечном итоге позволяет значительно сократить себестоимость препарата, не снижая качества и хранимоспособности жидкой инъекционной формы Дактиномицина по сравнению с существующими лиофилизатами данного лекарственного средства.

Список литературы

1. Векшин Н.Л. Биофизика ДНК-актиномициновых нанокомплексов. Пущине 2009. С. 192.

2. Sobell Н.М. Actinomycin and DNA transcription. Proc Natl Acad Sci USA. 1985; 82(16):5328-31.

3. Merck & Co., Inc. Cosmegen for injection (dactinomycin for injection) prescribing information. Whitehouse Station, NJ; 2005 Jun.

4. AHFS drug information 2006. McEvoy G.K., ed. Dactinomycin. Bethesda, MD: American Society of Health-System Pharmacists; 2006:1009-11.

5. Chen F., Sha F., Chin K., Chou S. The nature of actinomycin D binding to d(AACCAXYG) sequence motifs. Nucleic Acids Res. 2004; 32: 271 - 277.

6. Abd El-Aal HH, Habib EE, Mishrif MM: Wilms′tumor: the experience of the pediatric unit of Kasr El-Aini center of radiation oncology and nuclear medicine (NEMROCK). J Egypt Natl Cane Inst. 2005; 17(4):308-14.

7. Malogolowkin M.H., Green D.M., Cotton С. et al. Coccia National Wilms Tumor Study Group. Treatment of Wilms tumor relapsing after initial treatment with vincristine, actinomycin D and doxorubicin. A report from the National Wilms Tumor Study (NWTS) Group. ASCO Meeting Abstracts. 2005; 23: 8507.

8. Wilms′tumor. From: CancerNet / PDQ. Physician data query (database). Bethesda, MD: National Cancer Institute; 2001 Oct.

9. Childhood rhabdomyosarcoma. From: CancerNet / PDQ. Physician data query (database). Bethesda, MD: National Cancer Institute; 2001 Oct.

10. Breitfeld P.P., Meyer W.H. Rhabdomyosarcoma: New Windows of Opportunity. Oncologist. 2005; 10: 518-527.

11. Lhomme C., Even C., Duvillard P. et al. Efficacy and safety of the APE (actinomycin D, cisplatin, etoposide) regimen for the management of high-risk gestational trophoblastic neoplasia. ASCO Meeting Abstracts. 2012; 30: 5028.

12. Khatua S., Nair C.N., Ghosh K. Immune-mediated thrombocytopenia following dactinomycin therapy in a child with alveolar rhabdomyosarcoma: the unresolved issues. J Pediatr Hematol Oncol. 2004; 26(11): 777-9.

13. Miyachi M., Kakazu N., Yagyu Sh. et al. Restoration of p53 Pathway by Nutlin-3 Induces Cell Cycle Arrest and Apoptosis in Human Rhabdomyosarcoma Cells. Clin. Cancer Res. 2009; 15: 4077-4084.

14. Veal G.J., Errington J., Elsworth A.M. et al. Pharmacokinetics of actinomycin D in children with cancer. AACR Meeting Abstracts. 2004; 2004: 630-631.

15. Anon. Drugs of choice for cancer. Treat Guidel Med Lett. 2003; 1: 41-52.

16. Palmerini E., Bertoni F., Mercuri M. et al. Six drugs induction chemotherapy for patients with localised Ewing sarcoma (ES): A pilot study. ASCO Meeting Abstracts. 2006; 24: 9537.

17. Ewing′s family of tumors including primitive neuroectodermal tumor (PNET). From: CancerNet / PDQ. Physician data query (database). Bethesda, MD: National Cancer Institute; 2001 Oct.

18. Tural D., Mandel N., Dervisoglu S. et al. Extraskeletal Ewing′s Sarcoma Family of Tumors in Adults: Prognostic Factors and Clinical Outcome. Jpn. J. Clin. Oncol. 2012; 42: 420-426.

19. Walczak B.E., Irwin R.B. Sarcoma Chemotherapy. J. Am. Acad. Orthop. Surg. 2013; 21: 480-491.

20. Xu H., Krystal G.W. Actinomycin D Decreases Mcl-1 Expression and Acts Synergistically with ABT-737 against Small Cell Lung Cancer Cell Lines. Clin. Cancer Res. 2010; 16: 4392-4400.

21. Gestational trophoblastic tumor. From: CancerNet / PDQ. Physician data query (database). Bethesda, MD: National Cancer Institute; 2001 Jun.

22. Testicular cancer. From: CancerNet / PDQ. Physician data query (database). Bethesda, MD: National Cancer Institute; 2001 Aug.

23. Lhomme C., Even C., Duvillard P. et al. Efficacy and safety of the APE (actinomycin D, cisplatin, etoposide) regimen for the management of high-risk gestational trophoblastic neoplasia. ASCO Meeting Abstracts. 2012; 30: 5028.

24. Luo Q., Sun Y., Liu W. et al. A Novel Disease-Modifying Antirheumatic Drug, Iguratimod, Ameliorates Murine Arthritis by Blocking IL-17 Signaling, Distinct from Methotrexate and Leflunomide. J. Immunol. 2013; 191: 4969-4978.

25. Overington J.P., Al-Lazikani В., Hopkins A.L. How many drug targets are there? Nat Rev Drug Discov. 2006;5(12): 993-6.

26. Yang X.L., Wang A.H. Structural studies of atom-specific anticancer drugs acting on DNA. Pharmacol Ther. 1999 Sep; 83(3): 181-215.

27. Aliotta J.M, de Paz N., Mandy P. et al. Actinomycin D Blocks Transcription of Surfactant В mRNA in Marrow Cells Co-Cultured with Lung. Blood (ASH Annual Meeting Abstracts). 2008; 112: 2898.

28. Cervantes-Gomez F., Nimmanapalli R., Gandhi V. Transcription Inhibition of Heat Shock Proteins: A Strategy for Combination of 17-Allylamino-17-Demethoxygeldanamycin and Actinomycin D. Cancer Res. 2009; 69: 3947-3954.

29. Lo Y., Tseng W., Chuang С, Hou M. The structural basis of actinomycin D-binding induces nucleotide flipping out, a sharp bend and a left-handed twist in CGG triplet repeats. Nucleic Acids Res. 2013; 41: 4284-4294.

30. Chen R., Tsai C., Plunkett W. Transcription inhibition by Actinomycin D as a mechanism-based approach to treatment of Bcr-Abl-positive chronic myelogenous leukemia. AACR Meeting Abstracts. 2007; 2007: 3211.