СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕЙКОЗА МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Изобретение относится к ветеринарии, касается способа профилактики молодняка крупного рогатого скота и может быть использовано для повышения устойчивости молодняка крупного рогатого скота к заражению вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).

В условиях изменения окружающей среды возрастает влияние биотических и абиотических факторов на адаптивные реакции организма животных, зависящие главным образом от резервов их иммунной системы, основная задача которой - контроль постоянства внутренней среды и защита от экзо- и эндоантигенов [1, 2, 3, 4]. Данные специальной литературы свидетельствуют о том, что у животных чаще всего встречается функциональная иммунологическая недостаточность, когда организм не в состоянии противодействовать антигенной нагрузке, вызванной, как правило, ассоциациями бактерий, грибов, вирусов и других биологических агентов [5, 6, 7, 8]. При лейкозе крупного рогатого скота также развивается феномен иммунологической недостаточности, обусловленной влиянием ВЛКРС [9, 10, 11, 12, 13]. Проведенными исследованиями, доказано, что в среднем у 22% инфицированных лейкозом коров в клинико-гематологической стадии болезни (предопухолевая фаза) возникает декомпенсаторный вторичный иммунодефицит, данное указывает на то, что иммунодепрессия возникает задолго до возникновения стойкого «лейкозного» лейкоцитоза [14]. Для нормализации качественных и количественных составляющих иммунной системы используют комплекс методов иммунотерапии, одним из которых является применение иммунотропных препаратов [15].

Изменение иммунореактивности в ответ на введение иммуномодуляторов (ИМД) зависит от множества факторов (химическая структура, доза, способ и схема введения, состояние организма и т.д.). Для эффективного применения ИМД необходимо знать предельно допустимую дозу, превысив которую, можно вместо ожидаемой стимуляции иммунного ответа получить иммуносупрессию, на какое звено в системе иммунитета направлено действие и какой препарат нужно использовать при лечении конкретной патологии. Показанием для применения ИМД служит любая иммунологическая недостаточность, вызванная острой или хронической инфекцией, стрессом, антибиотико- или медикаментозной терапией, антгельминтиками и т.д. Поскольку инфекционные заболевания практически всегда сопровождаются иммуносупрессией, актуальным представляется научно обоснованный подход к выбору тех ИМД, которые способны повышать естественную резистентность организма за счет стимуляции функциональной активности фагоцитирующих и антигенпрезентирующих клеток, выработки антител, усиления цитотоксической активности лимфоцитов и естественных киллерных клеток, индукции синтеза интерферона и других цитокинов.

В настоящее время к эффективным ИМД относят ряд препаратов, разнообразных по своей природе и по производимому эффекту: биологически активные вещества типа интерлейкинов и лимфокинов [16], фракционированные экстракты из ткани вилочковой железы и костного мозга (18), фармакологические синтетические средства, такие как левамизол, аналоги нуклеозидов [17, 18], витамины [19], прооксиданты [20], ликопид (Kandel R.A. et al., 1990), препараты растительного происхождения [21, 22].

Известны способы профилактики лейкоза с применением иммунокорректоров (Т- и В-активинов, лигфола, фоспренила, Е-селена, янтарного биостимулятора, полиоксидония, ронколейкина).

Довольно часто применяемые препараты обладают значительными побочными реакциями, токсичностью, отсутствием избирательного стимулирующего эффекта на клетки иммунной системы вследствие ингибирующего влияния продуктов метаболизма совместно используемых фармакологических препаратов [23, 24].

На сегодняшний день арсенал средств, влияющих на функциональную активность всех звеньев иммунной системы (Т- и В-лимфоциты и фагоцитирующие клетки), ограничен [25, 26]. Адекватная иммунокоррекция требует экспериментальной проверки эффективности новых ИМД при любой патологии.

Предварительно проанализировали влияние ИМД, рекомендуемых для применения в ветеринарной практике, на показатели иммунной системы организма лабораторных, сельскохозяйственных, домашних животных (таблица 1).

Цель изобретения - расширение арсенала средств и способов профилактики лейкоза молодняка крупного рогатого скота за счет повышения иммунобиологической защиты организма.

Поставленная цель достигается способом профилактики лейкоза молодняка крупного рогатого скота с применением риботана.

Риботан - комплексный иммуномодулирующий препарат, состоит из смеси низкомолекулярных полипептидов (0,5-1 кD) и низкомолекулярных фрагментов РНК. Препарат усиливает защитные механизмы организма и способствует профилактике и лечению чумы, вирусного энтерита, гепатита, вирусного конъюнктивита, гриппа, парагриппа, а также демодекоза и дерматофитозов животных. Риботан предупреждает развитие стрессовых состояний. Риботан эффективен для предупреждения и ослабления последствий стрессовых состояний у животных при транспортировке, в предоперационный и послеоперационный периоды, а также при лечении различных незаразных болезней в комплексе с другими лекарственными средствами [27].

Способ осуществляется следующим образом.

Телкам 6-месячного возраста внутримышечно вводят риботан в дозе 3 мл/гол. однократно с интервалом в 2 недели в течение 6 месяцев.

Осуществимость способа определяли в научно-производственных опытах в условиях хозяйства, неблагополучного по лейкозу, с уровнем инфицированности коров ВЛКРС 40-50% и заболеваемости до 5%. Технология содержания: содержание привязное, в послемолозивном периоде телятам выпаивают непастеризованное сборное молоко, серологическое исследование на лейкоз первый раз проводят в 6-месячном возрасте.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Осуществимость способа определяли на двух группах серонегативных (РИД- и ПЦР-отрицательных) 6-месячных телок по 10 голов в каждой. Телкам первой группы (опытной) внутримышечно вводили риботан в дозе 3 мл/гол. однократно с интервалом в 2 недели в течение 6 месяцев. Телкам второй группы (контрольной) по той же схеме инъецировали физраствор. Эффективность профилактики оценивали по результатам серологических (реакция иммунодиффузии с гликопротеидным антигеном ВЛКРС), молекулярно-биологических (ПЦР), клинико-гематологических исследований и иммунологических исследований (таблицы 2 и 3).

Как видно из таблицы 2, до начала опыта отсутствовали достоверные различия в гематологических показателях у телят опытной и контрольной групп. У опытных телок после окончания опыта не выявлено РИД-положительных реакций, тогда как в контрольной группе РИД-положительные реакции отмечались у 20,0% телок. Методом ПЦР в конце опыта среди телок опытной и контрольной групп инфицированных животных не выявлено. Содержание лейкоцитов и лимфоцитов у телят опытной и контрольной групп находилось в пределах физиологической нормы. Показатели абсолютного содержания лейкоцитов и лимфоцитов и относительного содержания лимфоцитов у телят опытной группы имели тенденцию к снижению в сравнении с контролем. Показатель сегментоядерных нейтрофилов в контрольной группе был достоверно ниже на 17,2% в сравнении с опытной группой, что свидетельствовало о предлейкозном состоянии. Как видно из таблицы 3, до начала опыта у телят обеих групп ряд иммунобиологических показателей не имел достоверных различий. Однако после окончания опытов у телят опытной группы содержание ВНСММ, указывающее на уровень эндогенной интоксикации, был достоверно ниже на 22% в сравнении с телятами контрольной группы. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (показатели антигенной нагрузки) у телят опытной группы было достоверно ниже на 19% по сравнению с контролем. Содержание иммуноглобулинов G, М, А у телят опытной группы существенно не отличалось от контрольных животных. Отсутствие криоглобулинов у опытных телят свидетельствует о повышенной резистентности к заболеваниям. Показатель бактерицидной активности (БАСК) у телят опытной группы превышал соответствующий показатель телят контрольной группы на 15%, а показатель лизоцимной активности (ЛАСК) - на 69%. Тенденция к положительному изменению ряда иммунобиологических показателей у опытных животных по сравнению с контрольными животными свидетельствовало о поддержании гомеостаза на уровне, обеспечивающем устойчивость к заражению ВЛКРС.

Пример 2. Формировали 4 группы серонегативных (РИД- и ПЦР-отрицательных) 6-месячных телок по 10 голов в каждой - три группы опытные, одна группа контрольная. Телкам первой опытной группы вводили внутримышечно риботан в дозе 3 мл/гол. однократно с интервалом в 2 недели в течение 6 месяцев. Телкам второй опытной группы вводили внутримышечно лигфол в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев. Телкам третьей опытной группы вводили внутримышечно фоспренил четырехкратно с интервалом между инъекциями в 7 дней в дозе 5 мл и пятикратно с интервалом между инъекциями в 30 дней в дозе 10 мл. Телкам контрольной группы препаратов не применяли. За животными вели клинические наблюдения, серологическое тестирование с использованием РИД проводили ежеквартально. Результаты представлены в таблице 4.

Из таблицы 4 видно, что в опытных группах получены сопоставимые результаты, что подтвердило достижение поставленной цели - расширение арсенала средств и способов профилактики лейкоза крупного рогатого скота. Кроме того, в опытных группах отмечалось повышение среднесуточного прироста живой массы тела в среднем на 24,0-33,0% по сравнению с контролем (первая опытная группа - 439,0±5,0 г; вторая опытная группа - 414,0±4,4 г; третья опытная группа - 444,0±0,66 г; контрольная группа - 333,3±1,79 г).

Полученные результаты научно-производственных испытаний заявленного способа свидетельствуют о высокой потенциальной возможности риботана для повышения устойчивости животных к заражению к ВЛКРС в системе противолейкозных мероприятий. Способ обеспечивает сохранение активности иммунной системы и естественной резистентности в пределах показателей физиологической нормы в течение последующих 6 месяцев, что обеспечивает высокий уровень иммунобиологической защиты организма и профилактирует появление РИД-положительных реакций.

Источники информации

1. Урбан В.П. Применение иммуномодуляторов при коррекции иммунодефицитов у свиней / В.П. Урбан, А.А. Буянов, А.Н. Гречухин и др. // Тез. докл. 3-й Всесоюз. конф. по эпизоотологии (Новосибирск, 24-26 сентября 1991 г.). Новосибирск, 1991. - С. 309-311.

2. Донник И.М. Биологические особенности и устойчивость к лейкозу крупного рогатого скота в различных экологических условиях Урала: Дис… д-ра биол. наук. Екатеринбург, 1997. - 371 с.

3. Павлова А.И. Проблема адаптации крупного рогатого скота в Якутии: Дис. д-ра ветеринар. наук. Новосибирск, 1997. - 284 с.

4. Hadden J.W. In vitro analysis of immunomodulators. / J.W. Hadden. // Stand. Immunopharmacol. Natur. and Synth, immunomodul.: Proc. Symp., Annecy, 15-17 May, 1992. Basel, 1992. - P. 93-95.

5. Чекишев B.M. Иммунологические аспекты резистентности телят: Дис… д-ра. ветеринар. наук. Новосибирск, 1983. - 344 с.

6. Джупина С.И. Особенности проявления эпизоотического процесса в промышленных комплексах и меры профилактики / С.И. Джупина // Сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-е. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1988. - С. 3-12.

7. Федоров Ю.Н. Иммунодефицита домашних животных / Ю.Н. Федоров, О.А. Верховский. М., 1996. - 95 с.

8. Valpotic V. Effect of orally administred allogenic immunoglobulins on humoral immunity in piglets throughout the perinatal period. / V. Valpotic, M. Gerencer, Z. Modric et al. // Period, biol. 1986. - Vol. 88, Suppl. №1/A. - P. 455-456.

9. Гулюкин М.И. Состояние и перспективы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин, Н.В. Замараева, В.Н. Абрамов, И.И. Барабанов // Ветеринария. 1999. - №12. - С. 3-8.

10. Смирнов П.Н. Проблемы адаптации сельскохозяйственных животных в Сибири / П.Н. Смирнов, В.В. Храмцов, С.И. Джупина и соавт.: под ред. П.Н. Смирнова. Новосибирск, 1995. - 257 с.

11. Храмцов В.В. Факторы, провоцирующие развитие лейкоза крупного рогатого скота / В.В. Храмцов // Диагностика и меры борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в Республике Молдова: Тез. докл. Респ. конф. Кишинев, 1994. - С. 33-35.

12. Крикун В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толерантность / В.А. Крикун. - Ветеринария, 2002. №6. - С. 6-9.

13. Kabeya Н. Host immune responses in the course of bovine leukemia virus infection / H. Kabeya, K. Ohashi, M. Onuma // J. Vet. Med. Sci. 2001. - 63 (7): 703-8.

14. Пономаренко Д.Г. Патоморфологическое проявление иммунодефицита у крупного рогатого скота при лейкозе / Д.Г. Пономаренко, С.С. Абакин, Т.И. Лапина // Журнал «Ветеринарный врач» 2009, №1, стр. 19-22.

15. Пономаренко Д.Г. Патоморфологическое проявление иммунодефицита у крупного рогатого скота при лейкозе / Д.Г. Пономаренко, С.С. Абакин, Т.И. Лапина // Журнал «Ветеринарный врач» 2009, №1, стр. 19-22.

16. Земсков В.М. Неспецифические иммуностимуляторы / В.М. Земсков // Успехи соврем. биологии. 1991. - Т.3, вып. 5. - С. 707-721.

17. Кондратенко И.В. Интерлейкин-2 и его роль в развитии иммунодефицитов и других иммунопатологических состояний / И.В. Кондратенко, А.А. Ярилин, Л.Н. Хахалин // Иммунология. 1992. - №1. - С. 6-9.

18. Wang Q.R. Dissecting the hemopoietic microenvironment. IV. The effects of several growth factors on the in vitro growth of murine bone marrow CFU-F / Q. R. Wang, Z.J. Yan, N.S. Wolf // Exp. Hematol. 1990. - Vol. 18, № 4. - P. 341-347.

19. Cybulski M.G. The role of IL-1 in neutrophil leukocyte emigration in suced by endotoxin / M.C. Cybulski, I.G. Colditz, H. Movat // Amer. J. Path. 1986. - Vol. 124, №3. - P. 367-372.

20. Кетлинский С.А. Перспективы клинического применения рекомбинантных цитокинов / С.А. Кетлинский // Вест. РАМН. - 1993. №2. - С. 14-17.

21. Зайцева Л.Г. К механизму комбинированного воздействия иммуномодуляторов на фагоцитарные клетки / Л.Г. Зайцева, Е.И. Васильева // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994. - №4. - С. 73-74.

22. Ширинский B.C. Надежность иммунной системы и проблемы вторичных иммунодефицитов / B.C. Ширинский // Вестн. АМН СССР. 1992. - №12. - С. 43-45.

23. Козлов В.А. Интерлейкин-1: роль в иммунитете / В.А. Козлов, Н.Ю. Громыхина // Иммунология. 1987. - №4. - С. 24-29.

24. Набиулин Р.Р. Роль простагландинов в развитии иммунодефицита и регуляции регенерации после травмы: автореф. дис.. канд. мед. наук. / Р.Р. Набиулин. Новосибирск, 1991. - С. 25.

25. Никитенко В.И. и др., 2008; Иванов В.В. и др., 2008;

26. Шлык И.В., Пивоварова Л.П., Арискина О.Б., Осипова И.В., Полозова Е.В. Полиоксидоний в лечении пострадавших с тяжелой термической травмой // Здравоохранение и медицинские технологии. - №4. - 2008. - С. 10-13.

27. Инструкция по применению риботана - www.vetlek.ru.