ТЕРПЕНГЛИКОЗИДЫ С УЛУЧШЕННОЙ РАСТВОРИМОСТЬЮ

Настоящая заявка претендует на приоритет предварительной патентной заявки US 61/302206, поданной 8 февраля 2010 г., содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.

Настоящее изобретение относится к комплексам включения, содержащим по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость комплекса включения превышает растворимость по существу чистого терпенгликозида как такового. Изобретение также относится к способам повышения растворимости по существу чистого терпенгликозида, включающим смешивание по существу чистого терпенгликозида с по меньшей мере одним циклодекстрином с образованием по меньшей мере одного комплекса включения. Изобретение также относится к композициям, включающим по меньшей мере один комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, и к способам их получения.

Терпенгликозиды могут включать, например, стевиолгликозиды и могрозиды. Стевиолгликозиды выделяют и экстрагируют из растения Stevia rebaudiana (Bertoni) ("стевия"), выращиваемом в коммерческих масштабах в Японии, Сингапуре, Тайване, Малайзии, Южной Корее, Китае, Израиле, Индии, Бразилии, Австралии и Парагвае. Могрозиды выделяют и экстрагируют из вьющегося растения Siraitia grosvenorii Swingle (Luo Han Guo), в основном выращиваемого в Китае. Терпенгликозиды представляют собой некалорийные подсластители, обладающие улучшенными функциональными и органолептическими свойствами, по сравнению со свойствами множества интенсивных подсластителей. Например, сладость обработанных форм стевии может превышать сладость сахара в 70-400 раз. Тем не менее, использование по существу чистых терпенгликозидов часто ограничивается или затрудняется их низкой растворимостью в воде или полной нерастворимостью в воде. Кроме того, Терпенгликозиды могут содержать горький компонент, иметь терпкий и/или металлический привкус и/или устойчивое послевкусие или долго удерживающийся привкус. Кроме того, вкус терпенгликозидов может распознаваться с задержкой.

Соответственно, было бы желательно разработать методику или способ усиления или повышения растворимости по существу чистых терпенгликозидов. Это позволило бы повысить сладость композиции. Также было бы желательно изыскать методику или способ улучшения вкуса и/или послевкусия по существу чистых терпенгликозидов.

Таким образом, один из аспектов настоящего изобретения позволяет решать по меньшей мере одну из указанных выше проблем посредством предоставления комплексов включения, содержащих по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость комплекса включения превышает растворимость по существу чистого терпенгликозида как такового. Дополнительный аспект настоящего изобретения относится к комплексу включения, содержащему по меньшей мере два по существу чистых терпенгликозида и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость комплекса включения превышает растворимость по существу чистых терпенгликозидов как таковых.

Например, по существу чистый терпенгликозид может быть выбран из ребаудиозида A; ребаудиозида B; ребаудиозида C; ребаудиозида D; ребаудиозида E; ребаудиозида F; стевиозида; стевиолбиозида; дулкозида A; рубузозида; стевиола; стевиол-13-O-β-D-гликозида; суавиозида A; суавиозида B; суавиозида G; суавиозида Н; суавиозида I; суавиозида J; изостевиола; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-(3-O-α-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-(4-O-α-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-β-D-гпюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-гидрокси-каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-метил-16-оксо-17-норкауран-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозилβ-D-глюкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил]-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-гидрокси-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-Dглюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-16-гидроксикауран-18-овой кислоты; 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глкжопиранозил)окси]-16-гидроксикауран-18-овой кислоты; 1-[13-гидроксикаур-16-ен-18-оат]-β-D-глюкопирануроновой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-гидрокси-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного (2-O-β-D-глюкопиранозил-β-Dглюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-α-L-рамнопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-Dглюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-оксо-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-оксо-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-(6-O-β-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-фруктофуранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (6-О-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-β-Dглюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (4-O-(2-O-α-D-глюкопиранозил)-α-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-Dглюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; могрозида E; могрозида I A; могрозида I E; могрозида II A; могрозида II A₁; могрозида II B; могрозида II E; могрозида III; могрозида III A₂; могрозида IV; могрозида IV A; могрозида V; могрозида VI; 11-оксомогрозида, 11-оксомогрозида I A; 11-оксомогрозида I A_I; 20-гидрокси-11-оксомогрозида I A_I; 11-оксомогрозида II A_I; 7-оксомогрозида II E; 11-оксомогрозида II E; 11-деоксимогрозида III; 11-оксомогрозида IV A; 7-оксомогрозида V; 11-оксомогрозида V; могрола; 11-оксомогрола; сиаменозида; сиаменозида-1; изомогрозида; изомогрозида V; а также их полиморфных и аморфных форм.

Также, неограничивающие примеры по меньшей мере одного циклодекстрина могут включать α-циклодекстрин, β-циклодекстрин, γ-циклодекстрин или производные названных соединений.

Другой аспект изобретения относится к композиции, например, употребляемой внутрь через рот композиции или композиции напитка, включающей по меньшей мере один комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость по меньшей мере одного комплекса включения составляет более 0,1% при комнатной температуре. Например, растворимость по меньшей мере одного комплекса включения может составлять от 0,1% до 7%.

Другой аспект изобретения относится к способу повышения растворимости по существу чистого терпенгликозида, включающему смешивание по существу чистого терпенгликозида с по меньшей мере одним циклодекстрином с образованием по меньшей мере одного комплекса включения. Растворимость по меньшей мере одного комплекса включения превышает растворимость по существу чистого терпенгликозида как такового.

Другие аспекты изобретения включают улучшение вкусовых свойств употребляемой внутрь через рот композиции или композиции напитка добавлением в композицию комплекса включения по существу чистого терпенгликозида и циклодекстрина согласно изобретению.

Другие цели и преимущества изобретения частично рассмотрены в приведенном ниже описании, а частично могут стать очевидными после прочтения изобретения или могут стать понятны при воплощении изобретения.

Цели и преимущества изобретения могут быть реализованы с помощью элементов и комбинаций, на которые обращено особое внимание в прилагаемой формуле изобретения.

Очевидно, что представленное выше краткое описание и представленное ниже подробное описание представляют собой примеры и приведены для разъяснения, а не для ограничения объема изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг.1 представлена рентгенограмма порошка гамма-циклодекстрина.

На Фиг.2 представлен ¹H ЯМР спектр не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина.

На Фиг.3 представлен ¹H ЯМР спектр гамма-циклодекстрина, связанного в комплекс с ребаудиозидом D.

На Фиг.4 представлен ¹H ЯМР спектр гамма-циклодекстрина, связанного в комплекс с ребаудиозидом A.

На Фиг.5 представлен ¹H ЯМР спектр гамма-циклодекстрина, связанного в комплекс с ребаудиозидом C.

На Фиг.6a-6d представлены полученные способом ДСК (дифференциальной сканирующей калориметрии, англ. Differential scanning calorimetry, сокращенно DSC) термограммы не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида A, не связанного в комплекс ребаудиозида C и не связанного в комплекс ребаудиозида D.

На Фиг.7а представлена полученная способом ДСК термограмма механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом А.

На Фиг.7b представлена полученная способом ДСК термограмма комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида А.

На Фиг.8а представлена полученная способом ДСК термограмма механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом С.

На Фиг.8b представлена полученная способом ДСК термограмма комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида С.

На Фиг.9а представлена полученная способом ДСК термограмма механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D.

На Фиг.9b представлена полученная способом ДСК термограмма комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.9c представлена полученная способом ДСК термограмма гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.10а представлены инфракрасные спектры не связанного в комплекс ребаудиозида А.

На Фиг.10b представлены инфракрасные спектры не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина.

На Фиг.11а представлены четыре совмещенных инфракрасных спектра: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида A, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом A и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида A.

На Фиг.11b представлен в увеличенном виде участок названных выше спектров в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.12а представлены два совмещенных инфракрасных спектра:

механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом A и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида A.

На Фиг.12b представлен в увеличенном виде участок названных выше спектров в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.13 представлены инфракрасные спектры не связанного в комплекс ребаудиозида C.

На Фиг.14а представлены четыре совмещенных инфракрасных спектра: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида C, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида C.

На Фиг.14b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.14а, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.15а представлены два совмещенных инфракрасных спектра: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида C.

На Фиг.15b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.15b, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.16 представлены инфракрасные спектры не связанного в комплекс ребаудиозида D.

На Фиг.17а представлены четыре совмещенных инфракрасных спектра: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида D, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.17b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.17а, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.18а представлены два совмещенных инфракрасных спектра: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.18b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.18а, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.19а представлены два совмещенных инфракрасных спектра:

механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.19b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.19а, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.20а представлены три совмещенных инфракрасных спектра: не связанного в комплекс ребаудиозида D, гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.20b представлен в увеличенном виде участок спектров, показанных на Фиг.20а, в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1.

На Фиг.21а представлен спектр КР (спектр комбинационного рассеяния (рамановский спектр)) не связанного в комплекс ребаудиозида A.

На Фиг.21b представлен спектр КР не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина.

На Фиг.22а и 22b представлены четыре совмещенных спектра КР: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида A, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом A и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида A.

На Фиг.23 представлен спектр КР комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида A.

На Фиг.24а и 24b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом A и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида A.

На Фиг.25 представлен спектр КР не связанного в комплекс ребаудиозида C.

На Фиг.26а и 26b представлены четыре совмещенных спектра КР: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида C, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида C.

На Фиг.27а и 27b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C, полученные при 512 и 256 сканированиях.

На Фиг.28 представлен спектр КР комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида C.

На Фиг.29а и 29b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида C.

На Фиг.30 представлен спектр КР не связанного в комплекс ребаудиозида D.

На Фиг.31а и 31b представлены четыре совмещенных спектра КР: не связанного в комплекс гамма-циклодекстрина, не связанного в комплекс ребаудиозида D, механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и наложение спектров гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.32а и 32b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D, полученные при 512 и 256 сканированиях.

На Фиг.33а и 33b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

На Фиг.34а и 34b представлены два совмещенных спектра КР: механической смеси гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом D и гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D.

Ниже подробно рассмотрены примеры осуществления изобретения и иллюстративные примеры.

Согласно изобретению может быть получен комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость комплекса включения превышает растворимость по меньшей мере одного по существу чистого терпенгликозида как такового при комнатной температуре. Например, растворимость по меньшей мере одного комплекса включения может составлять более 0,2%, например, более 1% или более 1,5%, или более 2%, или более 2,5%, или более 3%, или более 3,5%, или более 4%, или более 4,5%, или более 5%. Изобретение также позволяет получать комплекс включения, содержащий по меньшей мере два по существу чистых терпенгликозида и по меньшей мере один циклодекстрин.

Например, по существу чистый терпенгликозид может быть выбран из ребаудиозида A; ребаудиозида B; ребаудиозида C; ребаудиозида D; ребаудиозида E; ребаудиозида F; стевиозида; стевиолбиозида; дулкозида A; рубузозида; стевиола; стевиол-13-O-β-β-гликозида; суавиозида A; суавиозида B; суавиозида G; суавиозида H; суавиозида I; суавиозида J; изостевиола; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-(3-O-α-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-(4-O-а-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-гидрокси-каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-метил-16-оксо-17-норкауран-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-люкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил]-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-гидрокси-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-16-гидроксикауран-18-овой кислоты; 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-16-гидроксикауран-18-овой кислоты; 1-[13-гидроксикаур-16-ен-18-оат]-β-D-глюкопирануроновой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-гидрокси-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного (2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D- глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-α-L-рамнопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-оксо-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-17-оксо-каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-(6-O-β-D-глюкопиранозил)-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-фруктофуранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (6-О-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-[3-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (4-O-(2-O-α-D-глюкопиранозил)-α-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного (2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозилового) эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-15-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-глюкопиранозил-3-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-3-O-[β-D-глюкопиранозил-(β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; сложного β-D-глюкопиранозилового эфира 13-[(2-O-6-деокси-β-D-глюкопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]каур-16-ен-18-овой кислоты; могрозида E; могрозида I A; могрозида I E; могрозида II A; могрозида II A_I; могрозида II B; могрозида II E; могрозида III; могрозида III A₂; могрозида IV; могрозида IV A; могрозида V; могрозида VI; 11-оксомогрозида; 11-оксомогрозида I A; 11-оксомогрозида I A_I; 20-гидрокси-11-оксомогрозида I A₁; 11-оксомогрозида II A_I; 7-оксомогрозида II E; 11-оксомогрозида II E; 11-деоксимогрозида III; 11-оксомогрозида IV A; 7-оксомогрозида V; 11-оксомогрозида V; могрола; 11-оксомогрола; сиаменозида; сиаменозида-1; изомогрозида; изомогрозида V; а также их полиморфных и аморфных форм.

Используемый в настоящем описании термин "чистота" означает массовую процентную долю терпенгликозидного соединения, содержащегося в экстракте терпенгликозида в неочищенной или очищенной форме. Используемый в настоящем описании термин "по существу чистый" означает чистоту, равную или превышающую 95%. Для получения по существу чистого терпенгликозида может требоваться очистка неочищенного экстракта. Способы подобной очистки известны специалистам в данной области техники. Один из примеров способов очистки терпенгликозида, например, ребаудиозида A, описан в опубликованной патентной заявке US 2007/0292582, содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.

Используемый в настоящем описании термин "полиморфизм" означает способность вещества существовать в двух или более кристаллических состояниях, в кристаллической решетке которых молекулы имеют разное расположение и/или конформацию. Полагают, что полиморфизм проявляют приблизительно 30% всех соединений. Полиморфизм может вызывать изменение физических свойств, например, плотности, температуры плавления и скорости растворения. Полиморфные модификации могут быть идентифицированы с помощью методик, хорошо известных специалистам в данной области техники, например, с помощью рентгеноструктурного анализа порошков (англ. powder x-ray diffraction, сокращенно XRPD). Например, полиморфная форма может представлять собой сольват или гидрат. Специалистам в данной области техники должно быть известно, что на тип полиморфных форм вещества могут влиять, например, вид водно-органического раствора и температура, применяемые во время очистки соединения.

Например, в некоторых примерах осуществления может быть использована полиморфная форма стевиозида. Использование разных способов очистки может приводить к образованию по меньшей мере двух различных полиморфных форм стевиозида. Например, Формы 1: гидрата стевиозида и Формы 2: сольвата стевиозида (метанольный сольват 2А и этанольный сольват 2В). Также может быть использована третья полиморфная форма стевиозида, безводный стевиозид. Специалисты в данной области техники должны понимать, что на тип получаемых полиморфных модификаций композиции по существу чистого стевиозида может влиять тип органических растворителей и/или водно-органических растворов и/или значения температур, применяемых при очистке. Такие полиморфные формы описаны, например, в опубликованной патентной заявке US 2007/0292764, содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.

В некоторых примерах осуществления может быть использована полиморфная форма ребаудиозида A, например, гидрат или сольват. Очистка ребаудиозида A может приводить к образованию разных полиморфных форм ребаудиозида A. Например, Формы 1: Гидрата ребаудиозида; Формы 2: безводного ребаудиозида A; и Формы 3: Сольвата ребаудиозида. Специалисты в данной области техники должны понимать, что на тип получаемых полиморфных модификаций композиции по существу чистого ребаудиозида может влиять тип органических растворителей и/или водно-органических растворов и/или значения температур, применяемых при очистке. В некоторых примерах осуществления может быть использована, например, аморфная форма ребаудиозида А. Такие полиморфные и аморфные формы описаны, например, в опубликованной патентной заявке US 2008/0292582.

В по меньшей мере одном примере осуществления по существу чистый терпенгликозид выбран из ребаудиозида A, ребаудиозида С и ребаудиозида D. В дополнительном примере осуществления по существу чистый терпенгликозид представляет собой ребаудиозид A в форме гидрата.

Для повышения растворимости и улучшения свойств при растворении плохорастворимых соединений или полиморфных форм может быть образован комплекс включения с циклодекстрином. Циклодекстрины представляют собой циклические олигосахариды, содержащие по меньшей мере шесть глюкопиранозных звеньев. Обычно они принимают тороидальную форму, имеющую внутреннюю полсть, обладающую меньшей гидрофильностью, чем внешняя часть конструкции циклодекстрина. Они могут образовывать комплексы включения и в этом случае заключать в себе другие молекулы. Циклодекстрины могут изменять физико-химические свойства заключенных молекул, например, их растворимость. Используемый в настоящем описании термин "циклодекстрин" означает любой циклодекстрин, который повышает растворимость по меньшей мере одного по существу чистого терпенгликозида.

Например, по меньшей мере один циклодекстрин может быть выбран из α-циклодекстрина, β-циклодекстрина, γ-циклодекстрина и их производных. В некоторых примерах осуществления по меньшей мере один циклодекстрин выбран из α-циклодекстрина, β-циклодекстрина и γ-циклодекстрина. В одном из примеров осуществления по меньшей мере один циклодекстрин представляет собой γ-циклодекстрин. Для получения комплексов включения может быть использован любой из доступных циклодекстринов или их производных, как таковой или в виде смеси одного или более циклодекстринов.

Например, комплекс включения согласно изобретению может включать по меньшей мере одно производное циклодекстрина. Например, производное циклодекстрина может быть модифицировано или замещено гидроксильными группами, находящимися во внешней или внутренней полости циклодекстрина. Неограничивающие примеры таких производных циклодекстринов включают алкилированные Циклодекстрины; гидроксиалкилированные Циклодекстрины; этилкарбоксиметилциклодекстрины; сульфонированные Циклодекстрины и простые эфиры сульфоалкилциклодекстринов; Циклодекстрины, замещенные аммонийными группами, фосфатными группами и гидроксильными группами, а также соли перечисленных соединений; фторированные циклодекстрины; и циклодекстрины, замещенные сахаридами. Производные обычно получают модификацией или замещением гидроксильных групп, находящихся на внешней или внутренней поверхности циклодекстрина. Модификации могут быть произведены для повышения растворимости соединения в воде и для повышения стабильности комплекса включения. Модификации также могут быть произведены с целью изменения физических характеристик комплекса. Модификации указанных и других типов хорошо известны в данной области техники.

Например, могут быть использованы коммерчески доступные циклодекстрины, такие как циклодекстрины, поставляемые Компаниями Cyclolab Ltd., поставляемые под торговым наименованием TRAPPSOL® Компанией CDT, Inc., поставляемые под торговым наименованием CAVAMAX® Компанией Wacker, поставляемые под торговым наименованием KLEPTOSE® и CRYSMEB® Компанией Roquette и поставляемые под торговым наименованием САРТИ301-® Компанией CYDEX Pharmaceuticals.

По существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин образуют комплекс включения. Используемый в настоящем описании термин "комплекс включения" означает, что по существу чистый терпенгликозид и циклодекстрин находятся в близком контакте друг с другом, например, по существу чистый терпенгликозид и циклодекстрин полностью или частично ассоциированы или контактируют, то есть не обязательно находятся в состоянии комплекса включения все время.

Например, если по существу чистый терпенгликозид присутствует в количестве, превышающем количество, которое может быть введено в комплекс включения с по меньшей мере одним циклодекстрином, то по существу чистый терпенгликозид может присутствовать в свободной форме. Свободные по существу чистые терпенгликозиды также включены в объем настоящего изобретения. Количество свободного или не связанного в комплекс по существу чистого терпенгликозида может определяться количеством и типом циклодекстрина, комплексообразующей способностью или требуемой концентрацией, применяемым способом получения комплексов включения и другими параметрами, известными специалисту в данной области техники.

В по меньшей мере одном примере осуществления растворимость по существу чистого терпенгликозида в воде повышается, если он находится в виде комплекса включения. Согласно изобретению, растворимость по существу чистого терпенгликозида повышается таким образом, что в водной композиции может растворяться большее количество по существу чистого терпенгликозида, как в свободном состоянии, так и в виде комплекса включения, по сравнению с по существу чистым терпенгликозидом при отсутствии циклодекстрина.

Например, растворимость в воде может составлять от 0,1% до 7%, например от 0,2% до 7%, например, от 0,2% до 5%. В некоторых примерах осуществления растворимость в воде может составлять от 0,5% до 7%, например, от 1% до 5% или от 2% до 5%, или от 3% до 5%, или от 4% до 5%.

В некоторых примерах осуществления отношение количества по существу чистого терпенгликозида к количеству циклодекстрина составляет от 1:1 до 1:20. Например, это отношение может составлять от 1:1 до 1:19 или от 1:1 до 1:15, или от 1:1 до 1:9, или от 1:1 до 1:8, или от 1:1 до 1:7, или от 1:1 до 1:6, или от 1:1 до 1:5, или от 1:1 до 1:4.

Другой аспект изобретения относится к композиции, например, употребляемой внутрь через рот композиции, например композиции напитка, включающей по меньшей мере один комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, причем растворимость комплекса включения превышает растворимость по существу чистого терпенгликозида как такового.

В по меньшей мере одном примере осуществления композиция включает по меньшей мере один циклодекстрин, выбранный из α-циклодекстрина, β-циклодекстрина, γ-циклодекстрина и их производных. Например, циклодекстрин может представлять собой γ-циклодекстрин.

Например, по существу чистый терпенгликозид может присутствовать в композиции в количестве, составляющем от 0,2% до 7% масс.от общей массы композиции. В по меньшей мере одном примере осуществления по меньшей мере один по существу чистый терпенгликозид присутствует в количестве, составляющем от 0,5% до 5%, масс. от общей массы композиции, например, от 1% до 5% или от 2% до 5%, или от 3% до 5%.

В некоторых примерах осуществления композиция обладает улучшенным вкусом. Например, композиция может меньше горчить и/или не иметь или иметь менее стойкое послевкусие. В некоторых примерах осуществления композиция, содержащая комплекс включения согласно изобретению, обладает более сахароподобным вкусом и/или менее выраженным металлическим вкусом по сравнению с композицией, включающей по меньшей мере один терпенгликозид, но не содержащей комплекс включения. Например, по восприятию вкус может быть более чистым, с меньшим количеством металлических ноток. В по меньшей мере одном примере осуществления распознавание вкуса композиции, содержащей комплекс включения согласно изобретению, происходит быстрее, чем у композиции, включающей по меньшей мере один терпенгликозид, но не содержащей комплекс включения.

В общем случае, количество комплекса включения согласно изобретению в композиции может изменяться в широких пределах в зависимости от типа композиции и требуемых свойств композиции, например, сладости. Специалисты в данной области техники могут легко определить подходящее количество комплекса включения до его введения в композиции согласно изобретению.

В настоящем описании термин "употребляемая внутрь через рот композиция" означает вещество, которое контактирует с ротовой полостью человека или животного, включая вещества, которые берут в рот и затем выплевывают, и вещества, которые выпивают, съедают, проглатывают или употребляют вовнутрь, которые безопасны для употребления человеком или животным при потреблении в известном приемлемом количестве. Такие композиции включают, например, пищевые продукты, напитки, табак, нутрицевтические препараты, продукты для гигиены/косметики полости рта и подобные им продукты. Неограничивающие примеры таких продуктов включают негазированные и газированные напитки, например, колу, имбирные эли, напитки, ароматизированные сассафрасом, сидры, безалкогольные напитки с фруктовым вкусом (например, безалкогольные напитки с цитрусовым вкусом, например, лимона-лайма или апельсина), порошковые безалкогольные напитки и подобные им напитки; фруктовые соки, полученные из фруктов или овощей, фруктовые соки, включающие выжатые соки или подобные им соки, фруктовые соки, содержащие частицы фруктов, фруктовые напитки, напитки из фруктовых соков, напитки, содержащие фруктовые соки, напитки, содержащие фруктовые вкусовые добавки, овощные соки, соки, содержащие овощи и смешанные соки, содержащие фрукты и овощи; спортивные напитки, энергетические напитки, близкие к воде и подобные им напитки (например, вода с натуральными или синтетическими вкусовыми добавками); виды чая или предпочитаемые напитки, например, кофе, какао, черный чай, зеленый чай, чай улунг и подобные им напитки; напитки, содержащие молочные компоненты, например, молочные напитки, кофе с молочными компонентами, кофе с молоком, чай с молоком, фруктовые напитки с молоком, питьевой йогурт, напитки, содержащие молочнокислые бактерии или подобные им напитки; молочные продукты; выпечные изделия; десерты, например, йогурт, желе, питьевые желе, пудинги, желе со взбитыми сливками, бланманже, пирожки, шоколадное печенье, муссы и подобные им продукты, подслащенные пищевые продукт, употребляемые с чаем или после еды; замороженные пищевые продукты; холодные кондитерские изделия, например, виды мороженого, например, мороженое, замороженное молоко, молочное мороженое и подобные им изделия (пищевые продукты, в которых подсластители и множество других видов сырья добавляют в молочные продукты и полученную смесь перемешивают и замораживают), и замороженные кондитерские изделия, например, шербеты, десертное мороженое и подобные им изделия (пищевые продукты, в которых множество видов сырья добавляют в жидкость, содержащую сахар, и полученную смесь перемешивают и замораживают); мороженое; обычные кондитерские изделия, например, выпечные кондитерские изделия или кондитерские изделия, приготовленные на пару, например, пирожные, крекеры, пресное печенье, булочки с начинкой из бобового джема и подобные им изделия; рисовые оладьи и лепешки; столовые продукты; обычные кондитерские изделия с сахаром, например, жевательную резинку (например, включающую композиции, которые включают по существу нерастворимую в воде основу жевательной резинки, например, чикли или его заменители, включающие каучуки jetulong, guttakay или определенные съедобные натуральные и синтетические полимеры или воски), леденцы, мягкие конфеты, мятную карамель, нугу, жевательные конфеты и подобные им продукты; соусы, включающие соусы с фруктовыми вкусовыми добавками, шоколадные соусы и подобные им соусы; съедобные гели; кремы, включающие масляные кремы, кисели, взбитые сливки и подобные им изделия; джемы, включающие клубничный джем, мармелад и подобные им джемы; хлеб, включающий сладкий хлеб и подобный ему хлеб или другие содержащие крахмал продукты; специи; общеупотребительные приправы, включающие ароматизированный соевый соус, добавляемый в жареное мясо, жареную птицу, жареное на гриле мясо и подобные им блюда, а также томатный кетчуп, соусы, бульон для лапши и подобные им продукты; обработанные сельскохозяйственные продукты, продукты животноводства или морепродукты; обработанные мясные продукты, например, колбасу и подобные продукты; автоклавированные пищевые продукты, соленья, презервы, кипяченые в соевом соусе, деликатесы, гарниры; закуски, например, картофельные чипсы, печенье или подобные им продукты; продукты из злаков; лекарственные препараты или препараты общего действия, вводимые через рот или помещаемые в ротовую полость (например, витамины, сиропы от кашля, капли от кашля, жевательные лекарственные таблетки, аминокислоты, лекарственные препараты или фармацевтические средства с горьким вкусом, подкисляющие вещества или подобные им вещества), где лекарственный препарат может представлять собой твердое вещество, жидкость, гель или находиться в газообразной форме, например, представлять собой пилюлю, таблетку, спрей, капсулу, сироп, капли, драже, порошок и подобные формы; продукты личной гигиены, например, другие оральные композиции, водимые в ротовую полость, например, освежители ротовой полости, полоскания для горла, полоскания для ротовой полости, зубную пасту, средства для чистки зубов, зубную косметику, средства для ароматизации рта в аэрозольной упаковке, средства для отбеливания зубов и подобные им средства; диетические добавки; табачные продукты, включающие изделия для курения табака и не для курения табака, например, нюхательный табак, сигаретный, трубочный и сигарный табак, и все формы табака, например, измельченный табачный наполнитель, листовой табак, черенковый табак, табак с черешками, гомогенизированный листовой провяленный табак, восстановленные связующие вещества и восстановленный из табачной пыли табак, табачная пыль или эфирные источники в листах, гранулах или других формах, заменители табака, полученные из не содержащих табак материалов, соусированный или жевательный табак; корм для животных; и нутрицевтические продукты, которые включают любые пищевые продукты или часть пищевого продукта, который может обеспечивать лечебное или оздоровляющее действие.

В по меньшей мере одном примере осуществления, употребляемая внутрь через рот композиция представляет собой напиток, например, газированный или негазированный напиток, включающий по меньшей мере один комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин. Например, в некоторых примерах осуществления по меньшей мере один комплекс включения согласно изобретению присутствует в употребляемой внутрь через рот композиции в количестве, составляющем от 0,1% до 7% масс. от общей массы композиции.

Кроме того, специалистам в данной области техники должно быть понятно, что композиция может быть адаптирована для получения требуемой калорийности. Например, по меньшей мере один комплекс включения согласно изобретению может быть смешан с по меньшей мере одним другим подсластителем, например, низкокалорийным или некалорийным синтетическим подсластителем и/или другими добавками, в результате чего получают употребляемую внутрь через рот композицию с предпочтительной калорийностью и/или вкусом.

Например, композиции согласно изобретению могут дополнительно включать по меньшей мере один отличный от первого подсластитель. По меньшей мере один отличный от первого подсластитель может представлять собой подсластитель любого типа, например, натуральный или синтетический подсластитель. В по меньшей мере одном примере осуществления по меньшей мере один отличный от первого подсластитель выбран из натуральных подсластителей. В другом примере осуществления по меньшей мере один отличный от первого подсластитель выбран из синтетических подсластителей. В некоторых примерах осуществления композиция включает по меньшей мере два подсластителя, отличных от первого.

Например, по меньшей мере один отличный от первого подсластитель может представлять собой калорийный углеводный подсластитель. Неограничивающие примеры подходящих калорийных углеводных подсластителей включают сахарозу, фруктозу, глюкозу, эритрит, мальтит, лактит, сорбит, маннит, ксилит, D-тагатозу, трегалозу, галактозу, рамнозу, циклодекстрин (например, α-циклодекстрин, β-циклодекстрин и γ-циклодекстрин), рибулозу, треозу, арабинозу, ксилозу, ликсозу, аллозу, альтрозу, маннозу, идозу, лактозу, мальтозу, инвертированный сахар, изотрегалозу, неотрегалозу, палатинозу или изомальтулозу, эритрозу, деоксирибозу, гулозу, талозу, эритрулозу, ксилулозу, псикозу, туранозу, целлобиозу, глюкозамин, маннозамин, фукозу, глюкуроновую кислоту, глюконовую кислоту, глюконолактон, абеквозу, галактозамин, ксилоолигосахариды (ксилотриозу, ксилобиозу и подобные им вещества), гентиоолигосахариды (гентиобиозу, гентиотриозу, гентиотетраозу и подобные им вещества), галактоолигосахариды, сорбозу, нигероолигосахариды, фруктоолигосахариды (кестозу, нистозу и подобные им вещества), мальтотетраол, мальтотриол, мальтоолигосахариды (мальтотриозу, мальтотетраозу, мальтопентаозу, мальтогексаозу, мальтогептаозу и подобные им вещества), лактулозу, мелибиозу, рафинозу, рамнозу, рибозу, изомеризованные жидкие сахара, например, сироп из кукурузы/крахмала с высоким содержанием фруктозы (англ. high fructose corn/starch syrup, сокращенно HFCS) (например, HFCS55, HFCS42 или HFCS90), парные сахара, соевые олигосахариды и сироп из глюкозы.

Например, по меньшей мере один подсластитель может представлять собой синтетический подсластитель. Используемый в настоящем описании термин "синтетический подсластитель" обозначает любую композицию, не встречающуюся естественным образом в природе и имеющую характерную интенсивность сладости, превышающую сладость сахарозы, фруктозы или глюкозы, но содержащую меньшее количество калорий. Неограничивающие примеры синтетических подсластителей, подходящих для осуществления настоящего изобретения, включают сукралозу (трихлоргалактосахарозу), ацесульфам калия, аспартам, алитам, сахарин, неогесперидин дигидрохалькон, цикламат, неотам, сложный 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-гидрокси-4-метоксифенил)пропил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина, сложный 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилбутил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина, сложный 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-метокси-4-гидроксифенил)пропил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина, их соли и подобные им вещества.

Другие подсластители, подходящие для включения в примеры осуществления изобретения, включают, например, натуральные и синтетические интенсивные подсластители. Используемые в настоящем описании термины "натуральный интенсивный подсластитель" (NHPS), "композиция NHPS" и "композиция натуральных интенсивных подсластителей" являются синонимами. "NHPS" означает любой подсластитель, встречающийся в природе, который может находиться в неочищенном виде, в виде экстракта, в очищенном виде или любой другой форме, сам по себе или в комбинации подсластителей и который отличается тем, что интенсивность его сладости превышает интенсивность сладости сахарозы, фруктозы или глюкозы, но при этом он содержит меньше калорий. Неограничивающие примеры NHPS, подходящих для включения в примеры осуществления настоящего изобретения, включают: ребаудиозид A, ребаудиозид B, ребаудиозид C (дулкозид B), ребаудиозид D, ребаудиозид E, ребаудиозид F, дулкозид A, рубузозид, стевию, стевиозид, могрозид IV, могрозид V, подсластитель Luo Han Guo, сиаменозид, монатин и его соли (монатин SS, RR, RS, SR), куркулин, глицирризиновую кислоту и ее соли, тауматин, монеллин, мабинлин, браззеин, хернандульцин, филлодульцин, глицифиллин, флоридзин, трилобатин, байунозид, осладин, полиподозид A, птерокариозид A, птерокариозид B, мукуроциозид, фломизозид I, периандрин I, абрузозид A, и циклокариозид I. NHPS также включают модифицированные NHPS. Модифицированные NHPS включают NHPS, которые были изменены естественным способом. Неограничивающие примеры модифицированных NHPS включают NHPS, которые были подвергнуты ферментации, контактировали с ферментом или подверглись замещению, или NHPS, из которых были получены производные. В одном из примеров осуществления по меньшей мере один модифицированный NHPS может быть использован в комбинации с по меньшей мере одним NHPS. В другом примере осуществления может быть использован по меньшей мере один модифицированный NHPS, не содержащий NHPS. Таким образом, модифицированные NHPS могут заменять NHPS или могут быть использованы в комбинации с NHPS в любом из рассмотренных примеров осуществления. Для краткости предлагаемого описания примеров осуществления, модифицированные NHPS не рассматриваются отдельно как альтернатива немодифицированных NHPS; напротив, следует понимать, что модифицированные NHPS могут быть использованы вместо NHPS в любом примере осуществления настоящего изобретения.

В по меньшей мере одном примере осуществления композиция согласно изобретению включает по меньшей мере одну дополнительную добавку.

Например, композиция согласно изобретению может включать по меньшей мере одну добавку и/или композицию, улучшающую сладкий вкус, предназначенную для восстановления сбалансированного временного и/или вкусового профиля композиции. Применение добавок и/или композиций, улучшающих сладкий вкус, для улучшения временного и/или вкусового профиля композиций подсластителей подробно описано в находящихся на рассмотрении одновременно поданных патентных заявках US 11/561148, US 11/561158 и в опубликованной патентной заявке US 2008/0292765, содержания которых полностью включены в настоящее описание посредством ссылки.

Неограничивающие примеры подходящих добавок и/или композиций, улучшающих сладкий вкус, включают: углеводы, полиолы, аминокислоты и соответствующие им соли, полиаминокислоты и соответствующие им соли, пептиды, сахарные кислоты и соответствующие им соли, нуклеотиды и соответствующие им соли, органические кислоты, неорганические кислоты, органические соли, включающие соли органических кислот и соли органических оснований, соли неорганических кислот и оснований, горькие соединения, ароматизаторы и ароматизирующие ингредиенты, вяжущие вещества, белки или гидролизаты белков, поверхностно-активные вещества, эмульгаторы, флавоноиды, спирты, полимеры, другие вкусовые добавки, улучшающие сладкий вкус, придающие сахароподобные характеристики, натуральные интенсивные подсластители и комбинации перечисленных соединений.

Используемый в настоящем описании термин "добавка, улучшающая сладкий вкус", означает любой материал, придающий более сахароподобный временной профиль или сахароподобный вкусовой профиль или оба эти качества синтетическому подсластителю, добавляемому в композиции согласно настоящему изобретению.

Неограничивающие примеры подходящих аминокислотных добавок, улучшающих сладкий вкус, пригодных для включения в примеры осуществления настоящего изобретения, включают: аспарагиновую кислоту, аргинин, глицин, глютаминовую кислоту, пролин, треонин, теанин, цистеин, цистин, аланин, валин, тирозин, лейцин, изолейцин, аспарагин, серин, лизин, гистидин, орнитин, метионин, карнитин, аминомасляную кислоту (α-, β- или γ-изомеры), глютамин, гидроксипролин, таурин, норвалин, саркозин и их солевые формы, например, натриевые или калиевые соли или кислотные соли. Улучшающие сладкий вкус аминокислотные добавки также могут находиться в D- или L-конфигурации и образовывать моно-, ди- или три-формы одинаковых или различных аминокислот. Дополнительно, если это не противоречит изобретению, аминокислоты могут представлять собой α-, β-, γ-, δ- и ε-изомеры. Комбинации перечисленных выше аминокислот и соответствующих им солей (например, солей натрия, калия, кальция, магния или других щелочных или щелочноземельных металлов или кислотных солей) также представляют собой подходящие добавки, улучшающие сладкий вкус, для некоторых примеров осуществления. Аминокислоты могут быть натуральными или синтетическими. Аминокислоты также могут быть модифицированными. Модифицированными аминокислотами называются любые аминокислоты, в которых было произведено присоединение, отщепление или замещение по меньшей мере одного атома, или была выполнена комбинация перечисленных действий (например, получена N-алкиламинокислота, N-ациламинокислота или N-метиламинокислота). Неограничивающие примеры модифицированных аминокислот включают производные аминокислот, например, триметилглицин, N-метилглицин и N-метилаланин. Согласно настоящему изобретению модифицированные аминокислоты включают как модифицированные, так и немодифицированные аминокислоты. Согласно настоящему изобретению аминокислоты также включают пептиды и полипептиды (например, дипептиды, трипептиды, тетрапептиды и пентапептиды), например, глютатион и L-аланил-L-глютамин. Подходящие улучшающие сладкий вкус полиаминокислотные добавки включают поли-L-аспарагиновую кислоту, поли-L-лизин (например, поли-L-α-лизин или поли-L-ε-лизин), поли-L-орнитин (например, поли-L-α-орнитин или поли-L-ε-орнитин), поли-L-аргинин, другие полимерные формы аминокислот и их солевые формы (например, соли кальция, калия, натрия или магния, например, мононатриевую соль L-глютаминовой кислоты). Улучшающие сладкий вкус полиаминокислотные добавки также могут находиться в D- или L-конфигурации. Дополнительно, если это не противоречит изобретению, полиаминокислоты могут представлять собой α-, β-, γ-, δ- и ε-изомеры. Комбинации перечисленных выше полиаминокислот и соответствующих им солей (например, солей натрия, калия, кальция, магния или других щелочных или щелочноземельных металлов или кислотных солей) также представляют собой подходящие для некоторых примеров осуществления добавки, улучшающие сладкий вкус. Рассматриваемые полиаминокислоты также могут включать сополимеры различных аминокислот. Полиаминокислоты могут быть натуральными или синтетическими. Полиаминокислоты также могут быть модифицированными, то есть в них может быть произведено присоединение, отщепление или замещение по меньшей мере одного атома, или быть выполнена комбинация перечисленных действий (например, получена N-алкилполиаминокислота или N-ацилполиаминокислота). Согласно настоящему изобретению полиаминокислоты включают как модифицированные, так и немодифицированные полиаминокислоты. Неограничивающие примеры модифицированных полиаминокислот включают полиаминокислоты, имеющие разные молекулярные массы (MW), например, поли-L-α-лизин, имеющий MW, составляющую 1500, MW, составляющую 6000, MW, составляющую 25200, MW, составляющую 63000, MW, составляющую 83000, или MW, составляющую 300000.

Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус добавок на основе сахарных кислот включают: альдоновую, уроновую, альдаровую, альгиновую, глюконовую, глюкуроновую, глукаровую, галактаровую, галактуроновую кислоту и их соли (например, соли натрия, калия, кальция, магния или другие физиологически приемлемые соли), и комбинации перечисленных соединений.

Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус нуклеотидных добавок включают: инозинмонофосфат (англ. inosine monophosphate, сокращенно IMP), гуанозинмонофосфат (англ. guanosine monophosphate, сокращенно GMP"), аденозинмонофосфат (англ. adenosine monophosphate, сокращенно AMP), цитозинмонофосфат (англ. cytosine monophosphate, сокращенно СМР), урацилмонофосфат (англ. uracil monophosphate, сокращенно UMP), инозиндифосфат, гуанозиндифосфат, аденозиндифосфат, цитозиндифосфат, урацилдифосфат, инозинтрифосфат, гуанозинтрифосфат, аденозинтрифосфат, цитозинтрифосфат, урацилтрифосфат, их соли со щелочными или щелочноземельными металлами и комбинации перечисленных соединений. Рассматриваемые нуклеотиды также могут включать родственные нуклеотидам добавки, например, нуклеозиды или основания нуклеиновых кислот (например, гуанин, цитозин, аденин, тимин, урацил).

Подходящие улучшающие сладкий вкус добавки на основе органических кислот включают любые соединения, которые содержат фрагмент -СООН. Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус добавок на основе органических кислот включают: С2-С30 карбоновые кислоты, замещенные гидроксилом С2-С30 карбоновые кислоты, бензойную кислоту, замещенные бензойные кислоты (например, 2,4-дигидроксибензойную кислоту), замещенные коричные кислоты, гидроксикислоты, замещенные гидроксибензойные кислоты, замещенные циклогексилкарбоновые кислоты, дигалловую (дубильную) кислоту, молочную кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, глюконовую кислоту, глюкогептоновые кислоты, адипиновую кислоту, гидроксилимонную кислоту, яблочную кислоту, фруктовую кислоту (смесь яблочной, фумаровой и винной кислот), фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, янтарную кислоту, хлорогеновую кислоту, салициловую кислоту, креатин, кофеиновую кислоту, желчные кислоты, уксусную кислоту, аскорбиновую кислоту, альгиновую кислоту, эриторбовую кислоту, полиглютаминовую кислоту, глюконо-дельта-лактон и их соли со щелочными или щелочноземельными металлами, а также их производные. Кроме того, добавки на основе органических кислот могут находиться в любой из D- или L-конфигураций.

Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус добавок на основе солей органических кислот включают: натриевые, кальциевые, калиевые и магниевые соли всех органических кислот, например, соли лимонной кислоты, яблочной кислоты, винной кислоты, фумаровой кислоты, молочной кислоты (например, лактат натрия), альгиновой кислоты (например, альгинат натрия), аскорбиновой кислоты (например, аскорбат натрия), бензойной кислоты (например, бензоат натрия или бензоат калия) и адипиновой кислоты. Примеры применяемых улучшающих сладкий вкус добавок на основе органических кислот могут представлять собой органические кислоты, необязательно замещенные по меньшей мере одной группой, выбранной из водорода, алкила, алкенила, алкинила, галогена, галогеналкила, карбоксила, ацила, ацилокси, амино, амидо, карбоксильных производных, алкиламино, диалкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфо, тиола, имина, сульфонила, сульфенила, сульфинила, сульфамила, карбоксалкокси, карбоксамидо, фосфонила, фосфинила, фосфорила, фосфино, сложного тиоэфира, простого тиоэфира, ангидрида, оксимино, гидразино, карбамил, фосфо, фосфонато и любой другой полезной функциональной группы, при условии, что добавки на основе замещенных органических кислот улучшают сладкий вкус синтетического подсластителя.

Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус добавок на основе неорганических кислот включают фосфорную кислоту, фосфористую кислоту, полифосфорную кислоту, соляную кислоту, серную кислоту, угольную кислоту, дигидрофосфат натрия и их соли со щелочными или щелочноземельными металлами (например, Mg/Ca-инозитгексафосфат).

Неограничивающие примеры подходящих улучшающих сладкий вкус добавок на основе горьких соединений включают кофеин, хинин, мочевину, масло горького апельсина, нарингин, кассию и их соли.

Другой аспект изобретения относится к способам повышения растворимости по существу чистого терпенгликозида, включающим смешивание по существу чистого терпенгликозида с по меньшей мере одним циклодекстрином с образованием по меньшей мере одного комплекса включения, причем растворимость по меньшей мере одного комплекса включения превышает растворимость по существу чистого терпенгликозида как такового.

В данной области техники известны различные способы образования комплексов включения. Согласно изобретению комплекс включения может быть получен любым способом, известным специалистам в данной области техники. Например, комплекс включения может быть получен с помощью лиофилизации (сублимационной сушки), совместного осаждения, размалывания, перемешивания с нагреванием и вымешивания. Примеры способов получения комплексов включения с циклодекстрином описаны в опубликованной патентной заявке US 2009/0012146.

Например, комплекс включения может быть образован с помощью лиофилизации. Например, согласно одному из способов, эквимолярные количества по существу чистого терпенгликозида и циклодекстрина растворяют в воде в количествах, составляющих от 1 до 5 частей, и нагревают при перемешивании до 60°С. К полученной смеси по каплям добавляют 95% этанол (или другой спирт, например, метанол или смесь спиртов) до получения прозрачного раствора. После того, как раствор станет прозрачным, его охлаждают до комнатной температуры и затем подвергают лиофилизации в течение 48 часов. В некоторых случаях может быть использован метанол.

В одном из примеров осуществления комплекс включения объединяют со употребляемой внутрь через рот композицией, например, композицией напитка. В некоторых примерах осуществления композиция напитка представляет собой газированный или негазированный напиток.

По существу чистый терпенгликозид может быть смешан с по меньшей мере одним циклодекстрином до или после добавления в употребляемую внутрь через рот композицию. Например, по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин могут образовывать комплекс до или после добавления в употребляемую внутрь через рот композицию, например, после добавления. Например, ребаудиозид A может быть введен в комплекс с гамма-циклодекстрином до добавления в употребляемую внутрь через рот композицию. Комплекс включения может находиться в чистой, разбавленной или концентрированной форме в виде жидкости (например, раствора), твердого вещества (например, порошка, агрегата, гранул, зерен, блока, кристаллического вещества или подобной формы) или суспензии.

Другой аспект изобретения относится к способу улучшения вкуса употребляемой внутрь через рот композиции. В одном из примеров осуществления способ улучшения вкуса употребляемой внутрь через рот композиции включает добавление комплекса включения согласно изобретению к употребляемой внутрь через рот композиции.

В некоторых примерах осуществления, в которых используют больше одного комплекса включения, добавление каждого комплекса к употребляемой внутрь через рот композиции может быть произведено одновременно, поочередно, в случайном порядке или в любом другом порядке.

В некоторых примерах осуществления изобретения композиция представляет собой имеющую улучшенный временной и/или вкусовой профиль столовую композицию подсластителей, включающую по меньшей мере один комплекс включения, содержащий по существу чистый терпенгликозид и по меньшей мере один циклодекстрин, по меньшей мере один объемообразующий агент и необязательно по меньшей мере одну композицию, улучшающую сладкий вкус, и/или агент, предотвращающий слипание.

Неограничивающие примеры подходящих "объемообразующих агентов" включают мальтодекстрин (10 DE, 18 DE или 5 DE), твердый остаток кукурузного сиропа (20 или 36 DE), сахарозу, фруктозу, глюкозу, инвертированный сахар, сорбит, ксилозу, рибулозу, маннозу, ксилит, маннит, галактит, эритрит, мальтит, лактит, изомальт, мальтозу, тагатозу, лактозу, инулин, глицерин, пропиленгликоль, полиолы, полидекстрозу, фруктоолигосахариды, целлюлозы и производные целлюлозы и их смеси. Дополнительно по меньшей мере один объемообразующий агент выбран из гранулированного сахара (сахарозы) или других калорийных подсластителей, например, кристаллической фруктозы, других углеводов и сахарных спиртов. В одном из примеров осуществления объемообразующий агент может быть использован в качестве композиции, улучшающей сладкий вкус.

В по меньшей мере одном примере осуществления столовый подсластитель согласно изобретению включает по меньшей мере одну сахарозу, например, по меньшей мере один полиол сахарозы.

Используемый в настоящем описании термин "агент, предотвращающий слипание", означает любую композицию, которая предотвращает, снижает, замедляет или подавляет присоединение, связывание или контакт по меньшей мере одной молекулы подсластителя с другой молекулой подсластителя. В альтернативном варианте "агент, предотвращающий слипание" может означать любую композицию, которая способствует образованию однородного содержимого и равномерному растворению. Согласно некоторым примерам осуществления, неограничивающие примеры агентов, предотвращающих слипание, включают винный камень (кислый виннокислый калий), силикат кальция, диоксид кремния, микрокристаллическую целлюлозу (Avicel, FMC BioPolymer, Philadelphia, Pa.) и фосфат трикальция. В по меньшей мере одном примере осуществления агенты, предотвращающие слипание, присутствуют в столовой композиции подсластителей в количестве, составляющем приблизительно от 0,001 до приблизительно 3% масс. от массы столовой композиции подсластителей.

Столовые композиции подсластителей могут быть изготовлены и упакованы в виде множества различных форм и могут иметь любую форму, известную в данной области техники. Неограничивающие примеры форм столовых композиций подсластителей могут включать порошки, гранулы, пакеты, таблетки, саше, драже, кубики, твердые вещества или жидкости.

Несмотря на то, что числовые значения и параметры, упоминаемые в обобщенном описании изобретения, представляют собой приблизительные величины, если не указано обратное, числовые значения, представленные в примерах, приведены с максимально возможной точностью. Тем не менее, любое числовое значение обязательно содержит определенную погрешность, связанную со стандартным отклонением измерений соответствующих величин.

Ниже для иллюстрации настоящего изобретения приведены конкретные неограничивающие примеры определенных примеров осуществления.

ОПИСАНИЕ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пример 1

Рентгенограммы порошка циклодекстрина

Получали рентгенограммы (XRPD) порошков образца циклодекстрина. Образец исследовали с помощью дифрактометра PANalytical X'Pert PRO MPD, в котором падающий луч, создаваемый излучением Cu, получали с помощью длиннофокусного источника Optix с точной фокусировкой. Для фокусировки прохождения рентгеновского излучения Cu-Kα через образец и попадания излучения на детектор использовали многослойное зеркало с эллиптическим распределением коэффициента отражения. Для уточнения положения пика Si 111, перед проведением анализа исследовали образец кремния (NIST SRM 640c). Отобранную часть образца заключали между пленками толщиной 3 мкм и анализировали в режиме пропускания. Для снижения до минимума фона, создаваемого воздухом, использовали оптический затвор. Для подавления уширения падающего и дифрагированного пучка при осевом отклонении применяли щелевую систему Соллера. Дифрактограммы получали с помощью сканирующего позиционно-чувствительного детектора (X'Celerator), расположенного в 240 мм от образца, и программного обеспечения Data Collector, версия 2.2b. Условия записи данных для каждой дифрактограммы указаны над изображением в разделе "Данные" настоящего описания и включают параметры щели расходимости (англ. divergence slit, сокращенно DS), расположенной до зеркала, и антирассеивающей щели (англ. antiscatter slit, сокращенно SS) для падающего пучка.

Как видно из Фиг.1, XRPD анализ гамма-циклодекстрина подтвердил его аморфное строение.

Пример 2

Получение комплекса включения

А. Комплекс γ-СР и Reb A (гидратная форма)

Эквимолярные количества гидратной формы Ребаудиозида ("Reb") A смешивали с одним ммол γ-циклодекстрина (γ-CD) и суспендировали в воде (10 мл). Полученный раствор нагревали при перемешивании до 67°С. К нему добавляли по каплям 95% этанол до тех пор, пока раствор не начинал становиться прозрачным, т.е. в течение 5 минут (1,5 мл). Как только раствор становился прозрачным, его охлаждали до комнатной температуры и затем подвергали лиофилизации в течение 48 часов.

В. Комплекс γ-СР и Reb C

Эквимолярные количества Reb C смешивали с одним ммол γ-циклодекстрина и суспендировали в воде (10 мл). Раствор нагревали при перемешивании до 67°С. К полученной смеси по каплям добавляли 95% этанол до тех пор, пока раствор не начинал становиться прозрачным, в течение 5 минут (3,0 мл). Как только раствор становился прозрачным, его охлаждали до комнатной температуры и затем подвергали лиофилизации в течение 48 часов.

С. Комплекс А γ-СР и Reb D

Эквимолярные количества Reb D смешивали с одним ммол γ-циклодекстрина и суспендировали в воде (30 мл), метаноле (30 мл) и этаноле (10 мл) и нагревали при энергичном перемешивании до 60°С в течение 30 минут. Как только раствор становился прозрачным, его охлаждали до комнатной температуры и затем подвергали лиофилизации в течение 48 часов.

D. Комплекс В γ-СР и Reb D

В этом случае раствор описанного выше примера C после перемешивания пропускали через гомогенизатор при 120 К Psi (дюйм/см²) и затем подвергали лиофилизации. Это делали для того, чтобы затем выяснить, разрушает ли гомогенизация некоторые из электронных взаимодействий, стабилизирующих комплексы включения.

Пример 3

Данные ЯМР

Были зарегистрированы ¹H ЯМР спектры образцов, полученных в Примере 2, которые сравнивали со спектрами раствора циклодекстрина, не содержащего терпенгликозида. Исследование ¹H ЯМР выполняли на установке Varian 600, работающей на частоте 600 МГц. Образцы растворяли в оксиде дейтерия, создавая концентрации 3-4 моль/л. В качестве эталона использовали химический сдвиг при 4,7 м.д., обусловленный присутствием воды в растворителе. Типичные параметры при регистрации ¹H ЯМР спектров составляли: 64 сканирований, релаксационная задержка - 1 секунда, и угол подачи импульса 45 градусов.

Для подтверждения или опровержения образования комплекса включения, химические сдвиги протонов в диапазоне от 5,3 м.д. до 3,2 м.д. эталонного образца (Фиг.2) сравнивали с сигналами растворов, полученных в Примере 2 (Фиг.3-5). Из Фиг.3-5 видно, что эти протоны имеют химические сдвиги в области более сильного поля из-за экранирования включенной молекулой. Это согласуется с образованием комплекса включения в препаратах, получение которых описано в Примере 2.

Пример 4

Данные ДСК

Была проведена дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) не связанных в комплекс компонентов комплексов включения (Фиг.6a-d), их механических смесей и комплексов включения (Фиг.7-9). ДСК анализ проводили с помощью дифференциального сканирующего калориметра ТА Instruments Q2000. Калибровку температуры производили с помощью отслеживаемого металлического индия, предоставленного Национальным институтом по стандартизации и технологии (англ. National Institute of Standards and Technology, сокращенно NIST). Образец помещали на алюминиевую чашку для ДСК, закрываемую крышкой, и точно записывали массу. Крышки чашек для всех образцов, за исключением ребаудиозида A, C и D перфорировали вручную накалыванием очень мелких отверстий. Взвешенную алюминиевую чашку, сконструированную в виде чашки для образца, помещали на эталонную сторону ячейки. Циклодекстрин и стевиолгликозиды нагревали от -30°С либо до 250°С, либо до 300°С, со скоростью 10°С/мин. Комплексы включения и механические смеси нагревали от обычной температуры до 125°С со скоростью 10°С/мин, выдерживали при постоянной температуре 125°С в течение одной минуты, быстро охлаждали до 20°С и затем нагревали до 300°С со скоростью 10°С/мин.

На Фиг.6а-9 с представлены результаты анализов ДСК. Во время первого цикл нагревания для каждого образца был получена широкая эндотерма (кривая эндотермического процесса), начинающая от обычной температуры и достигающая конца цикла вблизи 125°С, что согласуется с отщеплением воды, адсорбированной гигроскопичными образцами. Перекрывающий эндотермический пик наблюдается вблизи 100°С для механической смеси ребаудиозида C с гамма-циклодекстрином (Фиг.8а) и ребаудиозида D с гамма-циклодекстрином (Фиг.9а). Этот второй термический процесс, происходящий вблизи 100°С, не был отнесен к изменениям механических смесей. Не прибегая к какой-либо теории, в соответствии с его эндотермическим характером, этот процесс может быть объяснен присутствием в образцах кристаллического материала (например, представлять собой переход твердое-твердое или плавление) или энтальпийной релаксацией аморфного материала. Не прибегая к какой-либо теории можно предположить, что отсутствие эндотермического пика вблизи 100°С в термограммах комплексов включения (Фиг.8b и Фиг.9b) согласуется с существованием стабилизирующего взаимодействия, затрудняющего кристаллизацию стевиолгликозидов, которое может проявляться во время или до проведения анализа ДСК и указывает на присутствие комплекса циклодекстрина и ребаудиозида C.

При проведении второго цикла нагревания каждой из механических смесей (Фиг.7а, 8а и 9а) был получен выраженный эндотермический пик при температуре выше 200°С (ниже температуры разложения). Не прибегая к какой-либо теории можно отметить, что этот эндотермический пик аналогичен по температуре пику, отнесенному к плавлению на термограмме каждого соответствующего стевиолгликозида. Напротив, вторые циклы нагревания комплексов включения привели к появлению лишь широких, относительно слабо выраженных пиков термических явлений, проявляющихся до температуры разложения.

Не прибегая к какой-либо теории можно предположить, что отсутствие ярко выраженного эндотермического пика плавления выше 200°С в термограммах комплексов включения (Фиг.7b, Фиг.8b и Фиг.9b) означает наличие стабилизирующего взаимодействия, затрудняющего кристаллизацию аморфных стевиолгликозидов. Лишь в термограмме гомогенизированного комплекса включения ребаудиозида D и гамма-циклодекстрина (Фиг.9c) был обнаружен заметный пик при ожидаемой температуре плавления, что предположительно означает, что гомогенизация разрушает стабилизирующие взаимодействия комплекса включения.

Кроме того, выше приблизительно 260°С кривая термограммы, представленной на Фиг.8b, остается гладкой до начала разложения. Напротив, в термограмме, представленной на Фиг.8c, имеется слабо выраженное эндотермическое явление при 278°С, что совпадает с температурой плавления ребаудиозида D. Не прибегая к какой-либо теории можно предположить, что такой результат указывает на то, что в гомогенизированном комплексе включения ребаудиозида D и гамма-циклодекстрина может присутствовать некоторое небольшое количество кристаллического стевиолгликозида (Фиг.8c). Не прибегая к какой-либо теории можно отметить, что отсутствие эндотермы на Фиг.8b является ожидаемым результатом для комплекса включения, в котором стабилизирующее взаимодействие препятствует кристаллизации и последующему плавлению.

Пример 5

Данные ИК спектроскопии

Терпенгликозиды, циклодекстрин и различные комплексы и механические смеси анализировали с помощью инфракрасной (ИК) спектроскопии. ИК спектры регистрировали на спектрофотометре Magna-IR 860® с возможностью получения инфракрасных спектров с Фурье-преобразованием (англ. Fourier transform infrared, сокращенно FT-IR) (Thermo Nicolet), снабженном источником ИК излучения Ever-Glo (средняя/дальняя область), светоделителем на основе бромида калия (КВг), действующем в расширенном диапазоне, и детектором на основе дейтерированного триглицинсульфата (англ. deuteated triglycine sulfate, сокращенно DTGS). Уточнение длины волны производили с помощью NIST SRM 1921b (полистирол). Сбор данных осуществляли с помощью устройства (Thunderdome™, Thermo Spectra-Tech) для измерения нарушенного полного внутреннего отражения (англ. attenuated total reflectance, сокращенно ATR), содержащего кристалл германия (Ge). Каждый спектр представлял собой сумму 256 сканирований, полученных при спектральном разрешении 4 см^-1. Набор фоновых данных получали, используя чистый кристалл Ge. Спектр в виде логарифмической зависимости от 1/R (R=отражательная способность) получали делением двух указанных полученных массивов данных друг на друга.

Спектры не связанного в комплекс reb A, циклодекстрина, reb C и reb D представлены на Фиг.10а, 10b, 13 и 16, соответственно. В инфракрасных спектрах циклодекстрина и стевиолгликозидов были сделаны поправки на присутствие водяных паров, и было произведено нормирование интенсивности. Были получены спектральные комбинации ИК спектров (Фиг.11а, 11b, 14a, 14b, 17а и 17b), включающие спектр циклодекстрина и каждого стевиолгликозида; масштаб каждого из составляющих спектров выбирали таким образом, чтобы получить суммарный спектр, близкий спектру соответствующей механической смеси. С полученными суммарными спектрами были совмещены инфракрасные спектры соответствующих полученных механических смесей (показанных в виде нижних кривых на каждом изображении). Инфракрасные спектры циклодекстрина и каждого из стевиолгликозидов показанных в виде верхних кривых на каждом изображении. Вычисленные суммарные спектры хорошо согласуются со спектрами механических смесей.

На Фиг.12а, 15а и 18а представлено совмещение нормированных по интенсивности инфракрасных спектров каждого из комплексов включения и соответствующих им механических смесей. На Фиг.12b, 15b и 18b в увеличенном виде представлены спектры в диапазоне приблизительно 1800-800 см^-1. На инфракрасных спектрах комплексов включения и соответствующих механических смесей видны явно выраженные изменения положений и интенсивностей полос, что указывает на различия в составах твердых фаз каждого набора образцов. Некоторые их примеры описаны ниже.

В спектрах комплексов включения (Фиг.12а, 12b, 15а, 15b, 18а, 18b, 19а и 19b) вблизи 1750 см^-1 имеется полоса карбонильной группы стевиолгликозида, имеющая большую относительную интенсивность, чем более слабая полоса в виде плеча вблизи 1730 см^-1. Напротив, спектры механических смесей гамма-циклодекстрина с ребаудиозидом C и D (Фиг.15а, 15b, 18а и 18b) содержат только единственную полосу вблизи 1730 см^-1; спектры механической смеси ребаудиозида A и гамма-циклодекстрина (Фиг.12а и 12b) содержат обе полосы в области проявления карбонильной группы, но полоса вблизи 1750 см^-1 выглядит как плечо более интенсивной полосы в области 1730 см^-1.

В данных наблюдались характеристические спектральные особенности колебаний молекул циклодекстрина. Например, в спектрах образцов циклодекстрина и механических смесей, наиболее выраженная полоса валентных колебаний С-O находится вблизи 1026 см^-1; тем не менее, в спектрах комплексов включения эта полоса сдвинута до 1023 см^-1. Аналогично, полоса малой интенсивности, находящаяся при 1150 см"¹ в спектрах образцов циклодекстрина и механических смесей, в спектрах комплексов включения сдвинута до 1155 см^-1.

Другие заметные различия в спектрах комплексов включения (Фиг.12а, 12b, 15а, 15b, 18а и 18b) и соответствующих механических смесей (Фиг.11а, 11b, 14a, 14b, 17a и 17b) включают заметно пониженную интенсивность полосы при 1080 см^-1 в спектрах комплексов включения и различия в форме и относительных интенсивностях широкой полосы валентных колебаний гидроксила и серии полос в области валентных колебаний группы СН.

Не прибегая к какой-либо теории можно отметить, что сдвиги полос и аномальные интенсивности в спектрах комплексов включения согласуются с предполагаемым взаимодействием между циклодекстрином и стевиолгликозидами. Следует отметить, что в процессе анализа не определяли аморфный/кристаллический характер стевиолгликозидов, и термические явления, отмечаемые по данным ДСК, позволяют сделать заключение о возможности протекания кристаллизации в аморфных образцах, что затрудняет интерпретацию спектроскопических данных. Тем не менее, сдвиги полос колебаний молекулы циклодекстрина (по данным XRPD циклодекстрин представляет собой аморфное вещество (Фиг.1)) дополнительно свидетельствуют в пользу гипотезы стабилизирующего взаимодействия, существующего в комплексах включения.

Различия в интенсивностях полос можно отметить в разных областях спектров гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D и спектров комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D (Фиг.20а и Фиг.20b). Спектральные области, в которых наблюдаются различия в интенсивностях, соответствуют частотам полос в спектре ребаудиозида D (верхняя кривая), что свидетельствует о присутствии примесной фазы этого стевиолгликозида в образце. Данные ДСК, полученные для гомогенизированного комплекса включения, также указывают на возможное наличие примесной фазы (слабая эндотерма вблизи температуры плавления). Не прибегая к какой-либо теории можно предположить, что эта примесь представляет собой некоторое количество стевиолгликозида, не связанного в комплекс включения, образовавшегося в результате гомогенизации.

Кроме того, в области 1750-1730 см^-1 на Фиг.20b, спектр комплекса включения ребаудиозида D содержит пик при 1750 см"¹, имеющий более слабо выраженное плечо вблизи 1730 см^-1. Напротив, спектр гомогенизированного комплекса включения ребаудиозид D содержит пики сходных интенсивностей при обеих указанных частотах, но пик при 1730 см^-1 выражен несколько сильнее. Пик при 1750 см^-1 уникален для комплексов включения. Пик при 1730 см^-1 совпадает с полосой в спектре не связанного в комплекс ребаудиозида D и в спектре механической смеси ребаудиозида D и гамма-CD (Фиг.17b).

Аналогично, пик вблизи 1230 см^-1 в спектрах комплексов включения имеет более высокую интенсивность в спектре комплекса включения ребаудиозида D в сравнении со спектром гомогенизированного комплекса включения ребаудиозида D. Пик при 1230 см_-1 также совпадает с полосой в спектрах соответствующего стевиолгликозида и механической смеси. Не прибегая к какой-либо теории можно заключить, что гомогенизированный комплекс включения ребаудиозида D состоит из смеси фаз. Области спектральных различий между комплексом включения ребаудиозида D и гомогенизированным комплексом включения ребаудиозида D соответствуют проявлениям стевиолгликозидного компонента образца.

Пример 6

Данные Рамановских спектров

Терпенгликозиды, циклодекстрин, различные комплексы и механические смеси исследовали с помощью Рамановской спектроскопии (спектроскопии комбинационного рассеяния, КР). Спектры КР регистрировали с помощью модуля FT-Raman, присоединенного к спектрофотометру Nexus 670 FT-IR (Thermo Nicolet), снабженному детектором на основе арсенида индия-галлия (англ. indium gallium arsenide, InGaAs). Уточнение длины волны производили с помощью серы и циклогексана. Образцы для анализа получали, помещая образец в гранулодержатель. Поглощенная каждым образцом мощность излучения лазера Nd:YVO₄ составляла приблизительно 0,5 Вт (длина волны накачки 1064 нм). Каждый спектр представлял собой сумму 256 или 512 сканирований, произведенных при спектральном разрешении 4 см^-1.

Спектры КР обрабатывали аналогично данным инфракрасной спектроскопии. Спектры не связанных в комплекс reb A, циклодекстрина, reb C и reb D представлены на Фиг.21а, 21b, 25 и 30, соответственно. Спектры различных комплексов представлены на Фиг.23 и 28. Совмещение суммарных спектров КР и спектров соответствующих механических смесей представлено на Фиг.22а, 22b, 26а, 26b, 31а и 31b. Вычисленные суммарные спектры хорошо согласуются со спектрами механических смесей.

Для определения воздействия Рамановского лазера на целостность образцов, спектры КР образцов механических смесей и комплексов включения записывали после проведения 256 и 512 сканирований сбора данных. Между двумя спектрами каждого образца наблюдали лишь незначительные различия, за исключением механической смеси ребаудиозида C (Фиг.27а и 27b) и механической смеси ребаудиозида D (Фиг.32а и 32b). На изображениях представлены спектры КР, полученные после 256 и 512 циклов сбора спектральных данных. Анализ Рамановских данных проводили на спектрах, полученных после 256 циклов сбора данных для всех образцов.

На Фиг.24а, 24b, 29а, 29b, 33а, 33b, 34а и 34b представлено совмещение нормированных по интенсивности спектров КР каждого комплекса включения и соответствующих им механических смесей. Положения и интенсивности полос различны в спектрах КР комплексов включения и спектрах соответствующих механических смесей, что указывает на различия в составах твердых фаз каждого набора образцов. Например, в каждом спектре механической смеси имеются слабые пики вблизи 1280 и 1230 см^-1, которые отсутствуют в спектрах комплексов включения, за исключением гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D (Фиг.34а и 34b), в котором при этих частотах имеются лишь очень слабые пики. Кроме того, пик при 1660 см^-1, отнесенный к области валентных колебаний С=С стевиолгликозидов, сдвинут на 4 см^-1 в область более высоких частот в спектре комплекса включения ребаудиозида A (Фиг.24а и 24b) и уширен в спектрах гомогенизированного комплекса включения гамма-циклодекстрина и ребаудиозида D (Фиг.34а и 34b) и комплекса включения ребаудиозида D (Фиг.33а и 33b).

Дополнительные различия между спектрами КР комплексов включения и соответствующих механических смесей включают: относительно более узкий пик циклодекстрина вблизи 480 см^-1 в спектрах образцов комплексов включения; и возникновение одного острого пика при 743 см^-1 в спектрах каждого образца комплекса включения, в то время как спектрах механических смесей в этой области присутствует один или более пиков, имеющих переменную ширину и частоту.

Пример 7

Растворимость

Была определена растворимость в воде комплексов включения, полученных в Примере 2. Для измерения растворимости по существу чистый терпенгликозид в комплексе с циклодекстрином смешивали с водой, перемешивая магнитной мешалкой в течение времени, составляющего менее 1 минуты. Для получения образца 1, 234,19 мг комплекса γ-cd - Reb A (гидратная форма), полученного как описано в Примере 2(А), смешивали с водой, получая раствор общей массой 7 г (что эквивалентно 100 мг Reb А). Для получения образца 2, 473 мг комплекса γ-cd - Reb C, полученного как описано в Примере 2(В), смешивали с водой, получая раствор общей массой 10 г (что эквивалентно 200 мг Reb C). Для получения образца 3, удваивали количество комплекса включения, используемого получения образца 2. Для получения образца 4, 107,5 мг комплекса γ-CD - Reb D, полученного как описано в Примере 2(С), смешивали с водой, получая раствор общей массой 5 г (что эквивалентно 50,0 мг Reb D).

В течение нескольких суток за растворами наблюдали визуально (периодически перемешивая) для установления появления осадков. Результаты представлены ниже в Таблице 1. Полученные растворы с высокой концентрацией оставались прозрачными в течение времени, составляющего от 4 до 30 суток.