СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ОСЛОЖНЕНИЙ У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА, АССОЦИИРОВАННОЙ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2-ГО ТИПА

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска прогрессирования стенокардии напряжения, развития гипертрофии левого желудочка и ожирения у больных ишемической болезнью сердца, сочетанной с сахарным диабетом 2-го типа.

В современной медицине успешное лечение многих заболеваний все в большей степени связывают с правильным учетом генетических особенностей пациента. Большое значение уделяется изучению генетических предикторов нарушения в работе сердечно-сосудистой системы. Однако на развитие хронических заболеваний сердечно-сосудистой системы может влиять большое число различных генов [1]. Это обстоятельство служит причиной низкой эффективности использования учета генетических факторов в оценке вероятности развития нарушений сердечно-сосудистой системы при хронических заболеваниях. В специальной литературе приводятся противоречивые данные о возможности использования генетических факторов в прогнозировании тяжести течения и риска развития осложнений при ИБС [2]. Сопутствующие заболевания способны кардинально влиять на развитие ИБС. Это в полной мере относится к сахарному диабету 2-го типа, способному существенно осложнить течение ИБС [3]. Однако в настоящее время практически нет данных о возможности использования генетических предикторов для прогнозировании тяжести течения и риска развития осложнений при ИБС, сопряженной с сахарным диабетом 2-го типа.

Таким образом, разработка способа прогнозирования риска осложнений при сочетанном течении ИБС и сахарного диабета 2-го типа на основе учета генетических факторов является весьма актуальной.

Адекватного прототипа в изученной патентной и научно-медицинской литературе не обнаружено.

Задачей изобретения является разработка способа, позволяющего прогнозировать с высокой вероятностью развитие осложнений при ИБС, ассоциированной с сахарным диабетом 2-го типа.

Поставленную задачу решают выявлением генетического полиморфизма Т1565С гена ITGB3 у пациентов с ИБС, протекающей на фоне сахарного диабета 2-го типа. При обнаружении у больных аллеля С гена ITGB3 прогнозируют повышенный риск прогрессирования стенокардии напряжения, развития гипертрофии левого желудочка и ожирения.

Клинический прогноз риска развития осложнений при ИБС, ассоциированной с сахарным диабетом 2-го типа, с помощью выявления полиморфизма Т1565С гена ITGB3 не вытекает из уровня техники в данной области и неочевиден для специалиста.

Идентичная совокупность признаков в патентной и научно-медицинской литературе не обнаружена.

Изобретение может быть использовано в клинической практике для стратификации риска и выделения групп пациентов, характеризующихся повышенным риском неблагоприятного прогрессирования ИБС и развития осложнений для своевременной корректировки проводимой терапии.

Исходя из вышеизложенного, следует считать, что предлагаемое изобретение соответствует условиям патентоспособности: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания.

У пациента с диагнозом ИБС, протекающей на фоне сахарного диабета 2-го типа, забирают 2 мл венозной крови в вакутейнер с ЭДТА. Полученный биологический материал используют для выделения ДНК стандартным методом. В образцах ДНК определяют полиморфизм Т1565С гена ITGB3, проводя аллель-специфичную полимеразную цепную реакцию (ПЦР) с помощью коммерческого набора «SNP-экспресс» (НПФ «Литех», г. Москва). Продукты амплификации анализируют электрофоретическим методом в 3%-ном агарозном геле, содержащем 1 мкг/мл бромистого этидия. При выявлении носительства аллеля С гена ITGB3 в гетерозиготной или гомозиготной форме прогнозируется повышенный риск дальнейшего прогрессирования стенокардии напряжения и развития гипертрофии левого желудочка, а также высокая вероятность ожирения. При отсутствии носительства аллеля С гена ITGB3 прогнозируется низкий риск развития осложнений и благоприятное течение основного заболевания.

Способ апробирован при наблюдении за 144 пациентами с диагнозом ишемическая болезнь сердца, поступивших в отделение реабилитации НИИ кардиологии (Томск). Из них 45 имели ИБС, сочетанную с сахарным диабетом 2-го типа, а остальные составили группу сравнения. Из лейкоцитов венозной крови пациентов выделяли ДНК стандартным методом с осаждением изопропанолом с последующей отмывкой 70%-ным этанолом. Полиморфные варианты Т1565С гена ITGB3 определили путем аллель-специфичной ПЦР с дальнейшей электрофоретической детекцией в 3%-ном агарозном геле с бромистым этидием. Проводили сравнительный анализ частоты встречаемости ожирения, гипертрофии левого желудочка и функциональных классов I, II и III стенокардии напряжения между носителями генотипов ТТ и ТС+СС гена ITGB3 в исследуемых группах. Для этого использовали критерий χ2 Пирсона или двусторонний точный теста Фишера. Уровень значимости был принят за р<0,05.

При сопоставлении полученных результатов (таблица) выявлено, что в группе с монопатологией носительство аллеля С гена ITGB3 не влияло на тяжесть стенокардии напряжения, гипертрофию левого желудочка или частоту ожирения. В случае сочетанной патологии ИБС и сахарного диабета 2-го типа мы получили достоверную ассоциацию носительства аллеля С гена ITGB3 с тяжестью течения стенокардии напряжения и наличием гипертрофии левого желудочка, а также с частотой ожирения.

Сравнительная эффективность оценки полиморфизма гена ITGB3 у больных ИБС и больных ИБС сопряженной с СД2 типа показана на клинических примерах.

Пример 1. Больной П., 61 год. В 53 года перенес инфаркт миокарда, после чего наблюдается в отделении реабилитации НИИ кардиологии и находится на учете в кардиологическом диспансере. Диагноз: ИБС, стабильная стенокардия напряжения I ФК, ХСН I ФК (NYHA), гипертоническая болезнь 3 ст. Пациенту было проведено генетическое исследование, для чего использовано ДНК, выделенное стандартным методом из лейкоцитов венозной крови. Полиморфные варианты Т1565С гена ITGB3 определили путем аллель-специфичной ПЦР. При анализе полиморфизма Т1565С гена ITGB3 у больного выявлен генотип ТС. В соответствии с рекомендациями Российского кардиологического сообщества от 2008 года больному была подобрана оптимальная терапия. За время наблюдения у пациента не было прогрессирования стенокардии напряжения, не обнаружено гипертрофии левого желудочка и нет ожирения (ИМТ 24 кг/м²). Фракция выброса левого желудочка составляет 65% (В-режим).

Пример 2. Больной С., 54 года. В 48 лет перенес инфаркт миокарда, после чего наблюдается в отделении реабилитации НИИ кардиологии и находится на учете в кардиологическом диспансере. Диагноз: ИБС, стабильная стенокардия напряжения I ФК, ХСН I ФК (NYHA), гипертоническая болезнь 3 ст. Больному подобрана оптимальная терапия в соответствии с рекомендациями Российского кардиологического сообщества от 2008 года. Пациенту было проведено определение полиморфных вариантов Т1565С гена ITGB3, для чего использовано ДНК, выделенное стандартным методом из лейкоцитов венозной крови. Определение проводили, выполняя аллель-специфичную ПЦР. При анализе выявленного полиморфизма гена ITGB3 у пациента установлен генотип ТТ. За время наблюдения у пациента не было прогрессирования стенокардии напряжения, не обнаружено гипертрофии левого желудочка и нет ожирения (ИМТ 27,1 кг/м²). Фракция выброса левого желудочка составляет 72% (В-режим).

Приведенные примеры показывают отсутствие ассоциации полиморфизма Т1565С гена ITGB3 с развитием осложнений при ИБС, не сопряженной с СД 2-го типа.

Пример 3. Больной Б., 39 лет. В 38 лет перенес инфаркт миокарда. Наблюдается в отделении реабилитации НИИ кардиологии и находится на учете в кардиологическом диспансере. У пациента выявлен сахарный диабет 2-го типа. Использую ДНК, выделенную стандартным методом из лейкоцитов венозной крови, пациенту было проведено определение полиморфных вариантов Т1565С гена ITGB3. Определение проводили, выполняя аллель-специфичную ПЦР. При анализе полиморфизма Т1565С гена ITGB3 у пациента выявлен (неблагоприятный) генотип ТС. В настоящее время пациент имеет: ИБС, стабильную стенокардию напряжения III ФК, ХСН III ФК (NYHA), гипертоническую болезнь 3 ст. Фракция выброса левого желудочка составляет 49% (В-режим). У пациента обнаружена гипертрофия левого желудочка и ожирение (ИМТ 31,4 кг/м²).

Пример 4. Больной К., 52 года. В 40 лет пациент поступил в НИИ кардиологии с острым инфарктом миокарда. В настоящее время наблюдается в отделении реабилитации НИИ кардиологии и находится на учете в кардиологическом диспансере. У пациента выявлен сахарный диабет 2-го типа. Пациенту было проведено генетическое исследование, для чего использовано ДНК, выделенное стандартным методом из лейкоцитов венозной крови. Полиморфные варианты Т1565С гена ITGB3 определили путем аллель-специфичной ПЦР. При анализе полиморфизма Т1565С гена ITGB3 у пациента обнаружен (благоприятный) генотип ТТ. Больному подобрана оптимальная терапия в соответствии с рекомендациями Российского кардиологического сообщества от 2008 года. В настоящее время диагноз пациента: ИБС, стабильная стенокардия напряжения I ФК, ХСН II ФК (NYHA), сахарный диабет 2-го типа (достигнутый HbA1c - 6,5%), гипертоническая болезнь 3 ст. Фракция выброса левого желудочка составляет 55% (В-режим). За период наблюдения не наблюдалось прогрессирования ФК стенокардии напряжения, нет гипертрофии левого желудочка и ожирения (ИМТ 24,7 кг/м²). Пациент полностью скомпенсирован.

Приведенные примеры показывают наличие ассоциации полиморфизма Т1565С гена ITGB3 с развитием осложнений в случае сопряжения ИБС и СД 2-го типа.

Предлагаемое изобретение может быть использовано в клинической практике, при оценке риска прогрессирования ИБС и развития гипертрофии левого желудочка, а также ожирения у пациентов, страдающих ИБС, ассоциированной с сахарным диабетом 2-го типа. Изобретение позволяет своевременно скорректировать лечение пациентов, имеющих ИБС, ассоциированную с СД 2-го типа.

Литература

1. Пузырев В.П., Степанов В.А., Макеева О.А. Синтропные гены болезней сердечно-сосудистого континуума. Медицинская генетика. - 2009. - №3. - С. 31-38.

2. Воронина Е.Н. Мембранные рецепторы тромбоцитов: функции и полиморфизм / Е.Н. Воронина, М.Л. Филипенко, Д.С. Сергеевичев, И.В. Пикалов // Вестник ВОГиС. - 2006. - Т. 10, №3. - С. 553-564.

3. WHO [Электронный ресурс]. - 2013. - URL: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs312/en/ (дата обращения: 24.04.2014).