Результат интеллектуальной деятельности: СБОР ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НООТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ

Изобретение относится к медицине, конкретно к клинической фармакологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции нарушений высшей нервной деятельности при заболеваниях ЦНС и касается сборов, обладающих ноотропным действием, получаемых из растительного сырья.

Синтетические лекарственные средства, используемые для лечения этих заболеваний, по своей терапевтической эффективности не всегда удовлетворяют требованиям клинической фармакологии, прежде всего в связи с наличием ряда побочных эффектов: повышенная раздражительность, беспокойство, нарушение сна, тремор, повышение сухожильных рефлексов, головокружение, а также диспептические расстройства, усиление коронарной недостаточности, повышение артериального давления, субфебрилитет, аллергические реакции, изменение картины крови и состояния внутренних органов, что ограничивает их применение, особо в условиях трудовой деятельности [1, 2]. Сборы лекарственных растений могут сыграть существенную роль в решении данной проблемы.

Адекватного прототипа в литературе не обнаружено.

Известно использование сгущенного экстракта княжика сибирского (патент РФ №2276992, МПК A61K 36/71, 9/20, опубл. 2006 г. ), сухого экстракта бересты (патент РФ №2300389, МПК A61K 36/18Б, 25/00, опубл. 2007 г. ), водных или водно-этанольных или углекислотных экстрактов растений рода незабудка (Myosotis) (патент РФ №2335293, МПК A61K 36/30, 25/08, 25/28, опубл. 2008 г. ), 40% спиртового экстракта растительного сырья (трава сушеницы топяной, корни шлемника байкальского, побеги пятилистника кустарникового, корневище кровохлебки аптечной, корни пиона уклоняющегося, плоды шиповника и трава горца птичьего) (патент РФ №2331432, МПК A61K 36/739, 36/53, 36/65, 36/704, 36/28, 25/28, опубл. 2008 г. ), 70% спиртового экстракта hairy root культуры корней шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi (патент РФ №2438691, МПК A61K 36/539, 25/00, 25/28, 35/00, 11/02, опубл. 2012 г. ) в качестве ноотропного средства. Однако указанные средства недостаточно эффективны ввиду малой биодоступности из-за слабого или отсутствия такового выраженного влияния на сосудистую микроциркуляцию, гепатопротекторного действия, а также адаптогенного и иммунотропного эффектов. Кроме того, эти средства требуют применения этилового спирта или других растворителей, что усложняет и удорожает технологический процесс получения и последующего применения пациентами. Применение сборов отличается комплексным эффектом воздействия, сохранением нативности биологически активных веществ и, как следствие, выраженным фармакологическим эффектом, а также простотой применения. В литературе отсутствуют данные о применении сборов лекарственных растений ноотропного действия.

Задачей данного изобретения является расширение арсенала средств растительного происхождения для защиты ЦНС, обладающих ноотропным действием.

Поставленная задача решается путем применения в качестве сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, состава при следующем соотношении компонентов, %: трава лабазника вязолистного (20-30), трава манжетки обыкновенной (10-20), побеги черники обыкновенной (10-20) и зеленые листья бадана толстолистного (40-50).

Новым является то, что впервые в качестве сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, используют состав, содержащий траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного.

Сбор получают путем механического смешивания предварительно высушенных и измельченных травы лабазника вязолистного, травы манжетки обыкновенной, побегов черники обыкновенной и зеленых листьев бадана толстолистного. Травы, побеги и листья измельчали до частиц размером не более 5 мм. Во всех случаях измельченную пыль отсеивали сквозь сито с диаметром отверстий 0,18-0,2 мм.

Добавленные в сбор компоненты имеют следующие характеристики:

1. Трава лабазника вязолистного (Filipendula ulmaria (L.) Maxim.) содержит простые фенолы (спиреин, монотропитин, рододендрол, салигенин, салицин, изосалицин), флавоноиды (кверцетин, кемпферол, апигенин, лютеолин, таксифолин, изокверцитрин, авикулярин, гиперозид, спиреозид, 4'-O-β-D-галактопиранозид кверцетина, рутин), органические кислоты (бензойная, салициловая, м-гидроксибензойная, анисовая, ванилиновая, гентизиновая, галловая, п-кумаровая, кофейная, хлорогеновая, феруловая, хинная), дубильные вещества (гидролизуемые, в т.ч. эллаговая кислота), тритерпеновые соединения (урсоловая, олеаноловая кислоты), амины, аминокислоты (валин, глутаминовая кислота, гистидин) и неорганические компоненты, таким образом, улучшает интегративные показатели мозговой деятельности в норме и при патологии (например, на фоне кофеиновой интоксикации), обладает антистрессорным, адаптогенным, ноотропным, анксиолитическим, гепатопротекторным и иммунотропным действием. Использование данного компонента позволяет избегать некоторых побочных эффектов ноотропов (повышенная раздражительность, беспокойство, нарушение сна, головокружение, диспептические расстройства, изменение картины крови и состояния внутренних органов).

2. Трава манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.) содержит простые фенолы (арбутин), флавоноиды (лютеолин, апигенин, кемпферол, кверцетин, гиперозид, лютеолин-7-глюкозид, апигенин-7-глюкозид, рутин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, кофейная, хлорогеновая, эллаговая, лутеоновая), дубильные вещества (эллаготанины: агримониин, лаевигатин, педункулагин), полисахариды, витамины (аскорбиновая кислота, рибофлавин), азотистые основания нуклеиновых кислот, аминокислоты (валин, лейцин, изолейцин, треонин, метионин, лизин, фенилаланин, пролин, оксилизин, аспарагиновая и глютаминовая кислоты, глицин), макро- и микроэлементы, что обеспечивает гемореологическое, гиполипидемическое, ноотропное, а также гипогликемическое, лимфотропное и иммунокорригирующее действие, что улучшает биодоступность биологически активных веществ.

3. Побеги черники обыкновенной (Vaccinium myrtillus L.) содержат простые фенолы (гидрохинон, рододендрол, рододендрин, арбутин), флавоноиды (в том числе антоцианы), фенолкарбоновые кислоты (галловая, ванилиновая, гентизиновая, кофейная, феруловая, хлорогеновая), кумарины (умбеллиферон, эскулетин, скополетин, фраксетин), гидролизуемые дубильные вещества, тритерпеновые соединения (α-амирин, олеаноловая, урсоловая кислоты), аминокислоты (валин, треонин), способствуют проявлению ноотропного, антиоксидантного, а также антидиабетического действия, придают сбору выраженные свойства улучшать сосудистую микроциркуляцию мозга, что дополнительно обеспечивает большую биодоступность, способствуя воздействию биологически активных веществ на клеточном уровне.

4. Зеленые листья бадана толстолистного (Bergenia crassifolia (L.) Fritsch.) содержат простые фенолы (гидрохинон, арбутин), флавоноиды (кверцетин, кемпферол, апигенин, лютеолин, таксифолин, изокверцитрин, рутин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, гентизиновая, кофейная, феруловая, хлорогеновая), кумарины (бергенин, эскулетин), гидролизуемые и конденсированные дубильные вещества, полисахариды, каротиноиды, аминокислоты, что способствует эффективному улучшению процесса обучения и памяти в норме, а также при различных патологических состояниях, обуславливает выраженную антигипоксическую, адаптогенную и антиоксидантную активности.

Следовательно, заявляемый сбор улучшает показатели интегративной деятельности мозга: память, стимулирует процессы обучения (особенно при их нарушении), увеличивает уровень бодрствования мозга и устойчивость организма к воздействию повреждающих факторов (гипоксия, интоксикация, травма, стресс и др.), а также сосудистую микроциркуляцию, повышает адаптацию организма наряду с гепатопротекторным и иммунотропным эффектами.

В литературе отсутствуют данные о применении в качестве сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, состава, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного.

Компоненты и их содержание подобраны экспериментально. Использование травы лабазника вязолистного, травы манжетки обыкновенной, побегов черники обыкновенной и зеленых листьев бадана толстолистного в составе сбора по предлагаемому назначению стало возможным благодаря выявлению экспериментально его новых свойств, а именно способности нормализовать функции ЦНС за счет ноотропного действия.

Новый сбор, содержащий траву лабазника вязолистного (20-30%), траву манжетки обыкновенной (10-20%), побеги черники обыкновенной (10-20%) и зеленые листья бадана толстолистного (40-50%), проявил в результате проведенного экспериментального изучения ноотропное действие.

Новые свойства и состав сбора, явным образом не вытекают из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Впервые установлено, что в качестве сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, можно использовать состав, содержащий траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного.

Идентичной совокупности лекарственных растений не обнаружено в патентной и научно-медицинской литературе.

Предлагаемый сбор лекарственных растений с успехом может быть использован в практическом здравоохранении для коррекции заболеваний ЦНС.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания.

Пример 1. Траву лабазника вязолистного (Filipendula ulmaria (L.) Maxim.), траву манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.), побеги черники обыкновенной (Vaccinium myrtillus L.), зеленые листья бадана толстолистного (Bergenia crassifolia (L.) Fritsch.) высушенные воздушным способом, измельчают до мелкодисперсного порошка (влажность 6,5%) (ПС).

Пример 2. Приготовление отвара осуществляют следующим образом: 10,0 г сбора заливают 120 мл воды (1:10, с учетом коэффициента водопоглощения), нагревают на кипящей водяной бане 30 мин, процеживают горячим, отжимают сырье, после охлаждения доводят объем полученного отвара водой до 100 мл (ОС).

Пример 3. Приготовление настоя осуществляют следующим образом: 10,0 г сбора заливают 120 мл воды (1:10, с учетом коэффициента водопоглощения), нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, процеживают горячим, отжимают сырье, после охлаждения доводят объем полученного отвара водой до 100 мл (НС).

Фармакологические исследования выполнены на 72 аутбредных мышах-самцах CD-I (I категории, согласно сертификату) массой 20-22 г. Животные получены из отдела экспериментальных биологических моделей Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга» (Томск). Эксперименты осуществляли в зимний период. Работы в рамках экспериментальных методик выполняли с 9 до 15 ч. Животных содержали в стандартных условиях вивария на обычном рационе кормления (за исключением тех случаев, где иные условия оговариваются особо) в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей (г. Страсбург, 1986).

Фармакологические эффекты нового сбора, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, оценивали по влиянию на когнитивно-мнестические функции после гипоксического воздействия, моделируемого в условиях методики гипоксии гермообъема [3].

Высушенный измельченный сбор, отвар и настой растительного сбора вводили животным курсом ежедневно в течение 5 дней через зонд в желудок в виде раствора или взвеси в воде за 1 час до начала экспериментальных манипуляций. Высушенный измельченный до мелкодисперсного порошка сбор вводили в дозе 500 мг/кг. Доза отвара и настоя составила 5 мл/кг. Данная доза соответствует количеству сбора (порошка) по содержанию экстрактивных веществ. Указанные дозы определены как наиболее активные в предварительных экспериментах. В качестве препарата сравнения (прототип) использовали сухой экстракт корня шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) в дозе 50 мг/кг. Животные контрольных групп получали эквивалентное количество воды.

Полученные экспериментальные данные обрабатывали статистически. О достоверности различий судили методом проверки вероятности нулевой гипотезы с использованием t критерия Стьюдента и углового метода Фишера для сравнения долей. Различия считали достоверными при р≤0,05.

Пример 4: Ориентировочно-исследовательское поведение изучали в условиях модели «открытое поле», представляющей один из наиболее часто используемых методических приемов, применяемых для суждения о функциональном состоянии ЦНС [4]. Экспериментальная установка «открытое поле» представляет собой камеру размером 40×40×20 см с квадратным полом и стенками белого цвета. Ее пол, разделенный на 16 квадратов, имеет в каждом из них круглое отверстие диаметром 3 см. Сверху камера освещается электрической лампой накаливания мощностью 100 Вт, расположенной на высоте 1 м от пола. Мышь помещают в один из углов камеры и в течение 2 мин регистрируют количество перемещений с квадрата на квадрат (горизонтальная активность), количество вставаний на задние лапки (вертикальная активность), количество обследований отверстий (норковый рефлекс), количество умываний (груминг) и количество актов дефекации по количеству фекальных шариков (болюсов).

Перенесенная гипоксическая травма вызывает нарушения эксплоративного поведения животных. В группе гипоксического контроля отмечается снижение ориентировочно-исследовательской активности (горизонтальных перемещений и вертикальных стоек, норкового рефлекса) в 4,6 раза относительно интактных животных (табл. 1).

Курсовое введение предлагаемого сбора в виде порошка, отвара, настоя, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, оказывает защитное влияние на функциональное состояние ЦНС животных (табл. 1), перенесших гипоксическую травму. Применение сбора увеличивает ориентировочно-исследовательскую активность в тесте «открытое поле» при регистрации через 15 мин после воздействия в 2,1-3,1 раза по сравнению с животными группы гипоксического контроля. Использование сбора в виде порошка, отвара или настоя способствует восстановлению показателей эксплоративного поведения преимущественно за счет повышения горизонтальной и вертикальной активностей, норкового рефлекса. При введении отвара и настоя отмечается более выраженное увеличение двигательной активности в сравнении с группой гипоксического контроля, особенно горизонтальных перемещений и вертикальных стоек. Однако в сравнении с ними препарат сравнения оказывает меньшее восстанавливающее влияние на ориентировочно-исследовательское поведение животных, перенесших гипоксическую травму.

Пример 5: Влияние на обучение и память исследовали при выработке и воспроизведении условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ). Методика УРПИ [5] основана на подавлении врожденного рефлекса предпочтения темного пространства у грызунов. Экспериментальная установка представляет камеру, состоящую из двух отсеков - большого (светлого) и малого (темного). Животное помещают в светлый отсек и через некоторое время оно переходит в темный, после чего отверстие, соединяющее оба отсека, перекрывают дверкой и на пол темного отсека, представляющего собой решетку из параллельных чередующихся электродов, подают электрический ток импульсами продолжительностью 50 мс частотой 5 Гц и амплитудой 50 мА. Через 10 с дверку открывают и животное может выскочить в светлый отсек с обычным полом. В результате описанной процедуры у животных вырабатывают условный рефлекс избегания темного пространства. При проверке рефлекса животное помещают в угол камеры светлого отсека, противоположный от входа, и наблюдают в течение 3 мин. Регистрируют время первого захода в темный отсек (латентное время захода), суммарное время пребывания в темном отсеке, количество животных с выработанным рефлексом. Критерием наличия рефлекса считают отсутствие захождения животного в темный отсек в течение 3 мин с момента помещения мыши в светлую камеру. Проверку сохранности рефлекса осуществляют на 14 и 21 сут после выработки рефлекса.

Перенесенное гипоксическое воздействие способствует ухудшению сохранности УРПИ при его проверках в группе гипоксического контроля, что указывает нарушение условно-рефлекторного поведения у животных (табл. 2).

Курсовое введение предлагаемого сбора в виде порошка, отвара, настоя, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, увеличивает сохранность УРПИ и способствует воспроизводимости рефлекса от 70 до 90% при проверках на 14 и 21 сут после выработки у животных, перенесших гипоксическую травму (табл. 2). При этом препарат сравнения существенно уступает всем объектам исследования (порошок, отвар, настой сбора) по воспроизводимости условного рефлекса в ранние сроки (14 сут) при проверке.

Таким образом, при изучении влияния сбора, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, на некоторые показатели состояния ЦНС экспериментальных животных (увеличение сохранности УРПИ и двигательной активности после гипоксического воздействия) установлено его выраженное ноотропное действие, превосходящее экстракт шлемника байкальского (препарат сравнения) по уровню восстановления показателей ориентировочно-исследовательского поведения и воспроизводимости условного рефлекса в ранние сроки после перенесенной гипоксической травмы.

На основании проведенных экспериментальных исследований можно сделать вывод о том, что применение сбора, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, является перспективным для получения более высокого лечебного эффекта.

Технический результат достигнут благодаря использованию сбора, содержащего траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной и зеленые листья бадана толстолистного, в качестве ноотропного, что позволило расширить арсенал средств растительного происхождения, обладающих ноотропным действием, с повышенной терапевтической эффективностью. Литература

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М: Новая Волна, 2002. - Т. 1. - С. 31-142.

2. Малин Д.И. Побочное действие психотропных средств. - М.: Вузовская книга, 2000. - С. 184-189.

3. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - С. 276-296.

4. Walsh R.N., Cummins R.A. The open - field test: a critical review // Psychol. Bull. - 1976. - V. 83. - P. 482-504.

5. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Дж. П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. - М.: Высшая школа, 1991. - 175-177.