ПРОИЗВОДНОЕ ДИФЕНИЛСУЛЬФИДА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРОДУКТ, КОТОРЫЙ СОДЕРЖИТ ЕГО В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ИНГРЕДИЕНТА

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новому производному дифенилсульфида, которое является эффективным в качестве лекарственного средства, или к его фармацевтически приемлемой соли или гидрату, и антагонисту рецептора сфингозин-1-фосфата 3 (S1P3), а также к лекарственному средству, содержащему их в качестве активного ингредиента.

Уровень техники

Сфингозин-1-фосфат (S1P) рассматривался только как промежуточный метаболит в метаболизме сфингозина. Однако сообщалось, что S1P обладает стимулирующим действием в отношении роста клеток и регулирующим действием в отношении функции подвижности клеток, и теперь стало ясно, что S1P является новым липидным медиатором, который проявляет различные физиологические действия, такие как апоптозное действие, действие регуляции морфологии клеток и сужение кровеносных сосудов (непатентные документы 1 и 2).

Указанный S1P сочетает два действия, действие в качестве внутриклеточного вторичного мессенджера и действие в качестве межклеточного медиатора. Исследования действия S1P в качестве межклеточного медиатора являются особенно активными. Сообщалось, что информация передается через множество G-белок-связанных рецепторов, присутствующих на поверхности клеточной мембраны (ген дифференцировки эндотелия, EDG) (непатентные документы 1 и 3). В настоящее время известно пять подтипов S1P рецепторов, включающие Edg-1, Edg-3, Edg-5, Edg-6 и Edg-8, которые называются S1P₁, S1P₃, S1P₂, S1P₄ и S1P₅, соответственно.

В различных исследованиях указанных S1P рецепторов сообщалось, что так называемый регулятор S1P рецептора, который проявляет агонистическое или антагонистическое действие против указанного рецептора, эффективен против широкого спектра заболеваний. В патентном документе 2 и непатентных документах 4-7 сообщается, что антагонист S1P3 эффективен в качестве терапевтического или профилактического лекарственного средства при сужении дыхательных путей, бронхиальной астме, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), эмфиземе легких, стенозе трахеи, диффузном панбронхиолите, бронхите в результате инфекции, болезни соединительной ткани или трансплантации, диффузном гамартоангиомиоматозе легких, респираторном дистресс-синдроме взрослых (РДСВ), интерстициальном пневмоните, раке легкого, гиперчувствительной пневмонии, идиопатической интерстициальной пневмонии, фиброзе легких, сепсисе или цитокиновом шторме при инфекции, вызванной вирусом гриппа или респираторным синцитиальным вирусом (RSV).

Кроме того, в патентных документах 3-6 показано, что антагонист S1P3 также эффективен против артериосклероза, гипертрофии интимы кровеносных сосудов, солидных опухолей, диабетической ретинопатии, ревматоидного артрита, остановки сердца, ишемических реперфузионных нарушений, спазмов кровеносных сосудов мозга после субарахноидального кровоизлияния, стенокардии или инфаркта миокарда, вызванного спазмами коронарных сосудов, гломерулонефрита, тромбоза, болезни легких, вызванной отеком легких, такой как РДСВ, сердечной аритмии, болезни глаз, повышенного внутриглазного давления, глаукомы, глаукоматозной ретинопатии, оптической нейропатии, дегенерации желтого пятна и т.п.

Далее, хотя в настоящее время существует рекомбинантная форма человеческого активированного белка C (rhAPC) в лекарственных средствах, эффективных в качестве терапевтических средств при сепсисе, rhAPC также может вызывать геморрагию в качестве побочного эффекта. Таким образом, существует потребность в разработке новых терапевтических или профилактических средств против сепсиса, которые не проявляют таких побочных эффектов. В непатентных документах 5 и 7 сообщается, что рецептор S1P3 способствует полиорганной недостаточности, вызванной сепсисом, на основе анализа с использованием мышей с нокаутом по S1P3, что позволяет, таким образом, предположить, что антагонист S1P3 может быть эффективным в качестве терапевтического или профилактического средства против сепсиса. Кроме того, сообщалось, что антагонист S1P1 повышает проницаемость стенок сосудов и вызывает отек легких (непатентный документ 8). Таким образом, для того чтобы новое терапевтическое или профилактическое средство против сепсиса обладало высоким уровнем безопасности, такое терапевтическое или профилактическое средство должно оказывать слабое антагонистическое действие в отношении S1P1, предпочтительно проявлять агонистическое действие в отношении S1P1 и более предпочтительно не проявлять действия против S1P1 рецептора.

Известные регуляторы S1P рецептора включают, например, соединения, представленные следующей общей формулой (A), описанной в патентном документе 1:

Формула 1

(где в формуле (A) R¹ представляет собой атом водорода, атом галогена, галогенированную или негалогенированную низшую алкильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, гидроксигруппу, фенильную группу, аралкильную группу, низшую алкоксигруппу, содержащую 1-4 атома углерода, трифторметилоксигруппу, необязательно замещенную аралкилоксигруппу, необязательно замещенную феноксигруппу, циклогексилметилоксигруппу, пиридилметилоксигруппу, циннамилоксигруппу, нафтилметилоксигруппу, феноксиметильную группу, гидроксиметильную группу, гидроксиэтильную группу, низшую алкилтиогруппу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкилсульфинильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкилсульфонильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, бензилтиогруппу, ацетильную группу, нитрогруппу или цианогруппу; R² представляет собой атом водорода, атом галогена, галогенированную или негалогенированную низшую алкильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкоксигруппу, содержащую 1-4 атома углерода, аралкильную группу или аралкилоксигруппу; R³ представляет собой атом водорода, атом галогена, трифторметильную группу, низшую алкильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкоксигруппу, содержащую 1-4 атома углерода, гидроксигруппу, бензилоксигруппу, фенильную группу, низшую алкоксиметильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, или низшую алкилтиогруппу, содержащую 1-4 атома углерода; R⁴ представляет собой атом водорода, атом галогена, трифторметильную группу, низшую алкильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкоксиметильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, низшую алкилтиометильную группу, содержащую 1-4 атома углерода, гидроксиметильную группу, фенильную группу или аралкильную группу; R⁵ представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу, содержащую 1-4 атома углерода; X представляет собой O, S, SO или SO₂; и Y представляет собой -CH₂O-, -CH₂-, -CH=CH-, -CF=CF-, -CH₂CH₂-, -CH₂CFH-, -CH₂CF₂- или -CH(О)CF₂-).

Однако патентный документ 1 не включает сложные моноэфирные производные 2-аминофосфорной кислоты или производные 3-аминофосфоновой кислоты, имеющие дифенилсульфидный скелет, в котором гидроксильная группа заменяет фенильную группу. Кроме того, тот факт, что сложные моноэфирные производные 2-аминофосфорной кислоты или производные 3-аминофосфоновой кислоты, имеющие такую структуру, демонстрируют превосходное антагонистическое действие в отношении S1P3 рецептора, также не известен.

Другие примеры известных регуляторов S1P рецептора включают соединения, представленные следующей общей формулой (B) в патентном документе 6:

Формула 2

(где в формуле (B) R¹ представляет собой атом хлора, нормальную алкильную группу, содержащую 1-3 атома углерода, или трифторметильную группу; R² представляет собой атом фтора или атом хлора; R³ представляет собой нормальную алкильную группу, содержащую 1-3 атома углерода; X представляет собой атом кислорода или атом серы; и n равен целому числу 2 или 3).

Далее, среди соединений, представленных общей формулой (B), сообщалось, что оптически активные соединения, представленные общей формулой (Ba):

Формула 3

(где в формуле (Ba) R¹, R³ и X являются такими, как определено выше).

Сообщалось, что оптически активные соединения, представленные общей формулой (Ba), обладают слабым S1P3 агонистическим действием и превосходным агонистическим действием против S1P1 и/или S1P4. Однако соединения, имеющие инвертированный асимметричный центр по отношению к оптически активным соединениям, представленным общей формулой (Ba), не известны. Кроме того, тот факт, что такие оптически активные соединения демонстрируют превосходное антагонистическое действие в отношении S1P3 рецептора, также не известен.

Патентный документ 1: WO04074297 проспект.

Патентный документ 2: WO03020313 проспект.

Патентный документ 3: выложенная заявка на патент Японии 2005-247691.

Патентный документ 4: WO07043568 проспект.

Патентный документ 5: WO06063033 проспект.

Патентный документ 6: WO08018427 проспект.

Непатентный документ 1: Y. Takuma et al., Mol. Cell. Endocrinol., 177, 3 (2001).

Непатентный документ 2: Y. Igarashi, Ann, N.Y. Acad. Sci., 845, 19 (1998).

Непатентный документ 3: H. Okazaki et al., Biochem. Biophs. Res. Commun., 190, 1104(1993).

Непатентный документ 4: Y. Gon et. al., Proc Natl Acad Sci U S A. 102(26), 9270 (2005).

Непатентный документ 5: F. Nissen et al., Nature, 452, 654(2008).

Непатентный документ 6: D. Christina et al., Am. J. Pathol., 170(1), 281(2007).

Непатентный документ 7: F. Nissen et al., Blood, 113(12), 2859(2009).

Непатентный документ 8: M.G.Sanna et al., Nature Chemical biology, 2, 434 (2006).

Сущность изобретения

Задачи, решаемые настоящим изобретением

Задачей настоящего изобретения является предоставление производного дифенилсульфида, обладающего превосходной S1P3 антагонистической активностью.

Способы решения задач

В результате интенсивных исследований S1P3 антагониста, авторы настоящего изобретения обнаружили, что новое производное дифенилсульфида обладает превосходным S1P3 антагонистическим действием, что составляет сущность настоящего изобретения.

В частности, первый аспект изобретения относится к производному дифенилсульфида или его фармацевтически приемлемой соли или гидрату, представленным общей формулой (1):

Химическая формула 4

(где в формуле (1) R¹ представляет собой алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, R² представляет собой пропильную группу или аллильную группу, X представляет собой метилен или атом кислорода, и Z представляет собой атом галогена).

Далее, второй аспект изобретения относится к производному дифенилсульфида согласно первому аспекту изобретения или к его фармацевтически приемлемой соли или гидрату, где соединение, представленное общей формулой (1), представлено общей формулой (1a):

Химическая формула 5

(где в формуле (1a) R¹ и R² являются такими, как определено в первом аспекте изобретения).

Третий аспект изобретения относится к производному дифенилсульфида согласно первому аспекту изобретения или к его фармацевтически приемлемой соли или гидрату, где соединением, представленным общей формулой (1), является моноэфир (R)-2-аллил-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}бутилфосфорной кислоты или моноэфир (S)-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}-2-пропилбутилфосфорной кислоты.

Четвертый аспект изобретения относится к лекарственному средству, которое включает производное дифенилсульфида согласно любому из аспектов изобретения (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль или гидрат.

Кроме того, пятый аспект изобретения относится к лекарственному средству согласно четвертому аспекту изобретения, где лекарственное средство является терапевтическим или профилактическим средством при сужении дыхательных путей, бронхиальной астме, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), эмфиземе легких, стенозе трахеи, диффузном панбронхиолите, бронхите в результате инфекции, болезни соединительной ткани или трансплантации, диффузном гамартоангиомиоматозе легких, респираторном дистресс-синдроме взрослых (РДСВ), интерстициальном пневмоните, раке легкого, гиперчувствительной пневмонии, идиопатической интерстициальной пневмонии, фиброзе легких, сепсисе или цитокиновом шторме при инфекции, вызванной вирусом гриппа или респираторным синцитиальным вирусом (RSV).

Более того, шестой аспект изобретения относится к лекарственному средству согласно четвертому аспекту изобретения, где лекарственное средство является терапевтическим или профилактическим средством при артериосклерозе, утолщении интимы кровеносных сосудов, солидных опухолях, диабетической ретинопатии, суставном ревматизме, остановке сердца, ишемических реперфузионных нарушениях, спазмах сосудов мозга после субарахноидального кровотечения, стенокардии или инфаркте миокарда, вызванном спазмами коронарных сосудов, гломерулонефрите, тромбозе, болезни легких, вызванной отеком легких, сердечной аритмии, болезни глаз, повышенном внутриглазном давлении, глаукоме, глаукоматозной ретинопатии, оптической нейропатии или дегенерации желтого пятна.

Далее, седьмой аспект изобретения относится к лекарственному средству согласно четвертому аспекту изобретения, где лекарственное средство является терапевтическим или профилактическим средством при сепсисе.

Кроме того, восьмой аспект изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей производное дифенилсульфида согласно любому из аспектов изобретения (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль или гидрат и фармацевтически приемлемый носитель.

Преимущества изобретения

Согласно настоящему изобретению может быть предложено производное дифенилсульфида, обладающее превосходным S1P3 антагонистическим действием и селективностью в отношении S1P3. Кроме того, производное дифенилсульфида настоящего изобретения может безопасно применяться в качестве лекарственного средства, поскольку оно вызывает слабый гемолиз, повреждение ткани или угнетение ЦНС, или не вызывает их. Кроме того, производное дифенилсульфида настоящего изобретения стабильно в водном растворе. Соединение настоящего изобретения, обладающее указанными превосходными свойствами, эффективно в качестве профилактики или терапии при сепсисе, сужении дыхательных путей, бронхиальной астме, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), эмфиземе легких, стенозе трахеи, диффузном панбронхиолите, бронхите в результате инфекции, болезни соединительной ткани или трансплантации, диффузном гамартоангиомиоматозе легких, респираторном дистресс-синдроме взрослых (РДСВ), интерстициальном пневмоните, раке легкого, гиперчувствительной пневмонии, идиопатической интерстициальной пневмонии, фиброзе легких, сепсисе или цитокиновом шторме при инфекции, вызванной вирусом гриппа или респираторным синцитиальным вирусом (RSV), артериосклерозе, утолщении интимы кровеносных сосудов, солидных опухолях, диабетической ретинопатии, ревматоидном артрите, остановке сердца, ишемических реперфузионных нарушениях, спазмах сосудов мозга после субарахноидального кровотечения, стенокардии или инфаркте миокарда, вызванном спазмами коронарных сосудов, гломерулонефрите, тромбозе, болезни легких, вызванной отеком легких, такой как РДСВ, сердечной аритмии, болезни глаз, повышенном внутриглазном давлении, глаукоме, глаукоматозной ретинопатии, оптической нейропатии и дегенерации желтого пятна.

Способ осуществления изобретения

В следующем описании определение функциональных групп в общих формулах может быть опущено при отсылке к уже приведенному определению. Указанные ссылочные определения относятся к определению, приведенному в следующем описании вариантов осуществления. Естественно, следует понимать, что такие ссылочные определения не относятся к определениям функциональных групп соединений, приведенных как предшествующий уровень техники.

"Атомом галогена", используемым в настоящем изобретении, является атом фтора, атом хлора, атом брома или атом йода.

Примеры "алкоксигруппы, содержащей 1-6 атомов углерода" включают метоксигруппу, этоксигруппу, н-пропоксигруппу, н-бутоксигруппу, изопропоксигруппу и трет-бутоксигруппу.

Далее, в настоящем изобретении, для получения превосходного S1P3 антагонистического действия и в целях безопасности для живого организма, R¹ предпочтительно представляет собой алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, при этом этоксигруппы являются наиболее предпочтительными.

Кроме того, R² предпочтительно представляет собой пропильную группу или аллильную группу.

Более того, X предпочтительно представляет собой метилен или атом кислорода, при этом атом кислорода является наиболее предпочтительным.

Кроме того, Z предпочтительно представляет собой атом галогена, при этом атом хлора является наиболее предпочтительным.

Примеры фармацевтически приемлемой соли в настоящем изобретении включают кислотно-аддитивную соль, такую как гидрохлоридная соль, гидробромидная соль, ацетатная соль, трифторацетатная соль, метансульфонатная соль, цитратная соль или тартратная соль, и аддитивную соль основания, такую как соль натрия, соль калия, соль кальция, соль магния или соль алюминия.

Из соединений, представленных общей формулой (1), соединение, в котором X представляет собой атом кислорода, в частности, соединение, представленное общей формулой (1d), может быть получено, например, на основе следующего способа синтеза A:

Формула 6

(где в формуле (1d) R¹ представляет собой алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода, R² представляет собой пропильную группу или аллильную группу, и Z представляет собой атом галогена).

Способ синтеза A

Формула 7

В способе синтеза A оптически активное соединение, представленное общей формулой (4), может быть получено при взаимодействии оптически активного соединения, представленного общей формулой (2), с соединением, представленным общей формулой (3), в присутствии основания (стадия A-1):

Формула 8

(где в формуле (4) R³ представляет собой алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода; и R² является таким, как определено выше).

Формула 9

(где в формуле (2) R³ является таким, как определено выше).

Формула 10

(где в формуле (3), A^a представляет собой обычную уходящую группу, такую как атом галогена, метансульфонилоксигруппа, пара-толуолсульфонилоксигруппа или трифторметансульфонилоксигруппа; и R² является таким, как определено выше).

В частности, сначала в реакционном растворителе, таком как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, соединение, представленное общей формулой (2), обрабатывают при -78°C с использованием основания. Затем соединение, представленное общей формулой (3), подвергают взаимодействию при -78°C с полученным анионом соединения, представленного общей формулой (2). Затем температуру постепенно повышают до нормальной температуры, с получением соединения, представленного общей формулой (4). Примеры основания, которое может использоваться в данной реакции, включают н-бутиллитий и диизопропиламид лития, при этом предпочтительным является н-бутиллитий.

В настоящем описании термин "нормальная температура" означает 15-25°C, как определено в Фармакопее Японии.

В способе синтеза A оптически активное соединение, представленное общей формулой (6), может быть получено при взаимодействии оптически активного соединения, представленного общей формулой (4), с соединением, представленным общей формулой (5), в присутствии основания (стадия A-2):

Формула 11

(где в формуле (6) A^b представляет собой обычную уходящую группу, такую как атом галогена, метансульфонилоксигруппа, пара-толуолсульфонилоксигруппа или трифторметансульфонилоксигруппа; и R², R³ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 12

(где в формуле (5) A^c представляет собой обычную уходящую группу, такую как атом галогена, метансульфонилоксигруппа, пара-толуолсульфонилоксигруппа или трифторметансульфонилоксигруппа; и A^b и Z являются такими, как определено выше).

В частности, сначала в реакционном растворителе, таком как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, соединение, представленное общей формулой (4), обрабатывают при -78°C с использованием основания. Затем соединение, представленное общей формулой (5), подвергают взаимодействию при -78°C с полученным анионом соединения, представленного общей формулой (4). Затем температуру постепенно повышают до нормальной температуры, с получением соединения, представленного общей формулой (6). Примеры основания, которое может использоваться в данной реакции, включают н-бутиллитий и диизопропиламид лития, при этом предпочтительным является н-бутиллитий.

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (7), может быть получено при кислотном гидролизе соединения, представленного общей формулой (6), с последующей защитой аминогруппы стандартным защитным реагентом.

Формула 13

(где в формуле (7) R⁴ представляет собой обычную защитную группу для аминогруппы; и A^b, R², R³ и Z являются такими, как определено выше).

R⁴ в формуле (7) специально не ограничен, при условии, что он защищает аминогруппу. Например, можно использовать ацильную группу, такую как ацетильная группа, или карбамат, такой как трет-бутоксикарбонил или бензилоксикарбонил (стадия A-3).

В частности, сначала в неорганической или органической кислоте, или в смешанном растворе неорганической или органической кислоты и воды или органического растворителя, соединение, представленное общей формулой (6), подвергают кислотному гидролизу при нормальной температуре. В данном случае, в качестве неорганической кислоты может быть использована хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота или подобные. В качестве органической кислоты может быть использована трифторуксусная кислота или подобные. Далее, в качестве органического растворителя может быть использован метанол, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, этилацетат или подобные. Из перечисленного, предпочтительно при проведении кислотного гидролиза используют водный раствор трифторуксусной кислоты.

Затем после нейтрализации основанием, с получением сложного аминоэфира, указанный аминоэфир и ацилхлорид или ангидрид кислоты подвергают взаимодействию при температуре от 0°C до нормальной температуры, в растворителе, с получением соединения, представленного общей формулой (7). Примеры растворителя, который может быть использован на данной стадии, включают этилацетат, тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид, 1,4-диоксан, метиленхлорид, хлороформ, метанол, этанол и ацетонитрил. В качестве ацилхлорида может быть использован ацетилхлорид, бензилоксикарбонилхлорид или подобные. В качестве ангидрида кислоты может быть использован уксусный ангидрид, ди-трет-бутилдикарбонат или подобные. Из них предпочтительно проводить взаимодействие с использованием ди-трет-бутилдикарбоната.

В способе синтеза A, соединение, представленное общей формулой (8), может быть получено при восстановлении соединения, представленного общей формулой (7) (стадия A-4).

Формула 14

(где в формуле (8) A^b, R², R⁴ и Z являются такими, как определено выше).

Например, в реакционном растворителе, таком как тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, этанол, метанол или подобные, соединение, представленное общей формулой (7), восстанавливают с использованием восстановителя при температуре от 0°C до температуры кипения с обратным холодильником, и предпочтительно при нормальной температуре. Примеры восстановителя, который может быть использован, включают боран, производные алкилборанов, такие как 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-BBN), металлогидридные комплексы, такие как диизобутилалюминийгидрид ((iBu)₂AlH), борогидрид натрия (NaBH₄), борогидрид лития (LiBH₄), алюмогидрид лития (LiAlH₄) или подобные. Предпочтительно восстановителем является борогидрид лития.

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (10), может быть получено при взаимодействии соединения, представленного общей формулой (8), и соединения, представленного общей формулой (9).

Формула 15

(где в формуле (10) R⁵ представляет собой атом водорода или обычную защитную группу для фенольной гидроксильной группы; и R¹, R², R⁴ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 16

(где в формуле (9) R¹ и R⁵ являются такими, как определено выше).

Обычная защитная группа для фенольной гидроксильной группы специально не ограничена, при условии, что она защищает фенольную гидроксильную группу. Например, может использоваться метильная группа, бензильная группа, метоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа, ацетильная группа или трет-бутоксикарбонильная группа (стадия A-5).

Например, данная реакция может быть проведена в таком реакционном растворителе, как толуол, N,N-диметилформамид, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, в присутствии неорганического или органического основания, с использованием катализатора, при температуре от нормальной до температуры кипения с обратным холодильником. Примеры неорганических оснований, которые могут быть использованы, включают карбонат натрия или трет-бутоксид калия. Примеры органических оснований, которые могут быть использованы, включают диизопропилэтиламин. Далее, примеры катализатора, который может быть использован, включают соединения палладия, такие как трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) или ацетат палладия (II). Предпочтительно используют трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0).

Соединение фосфина, такое как 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен, бис[2-(дифенилфосфино)фениловый] эфир или 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен, может быть добавлено к реакционному растворителю в качестве ускорителя реакции.

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (12), может быть получено при взаимодействии соединения, представленного общей формулой (10), и соединения, представленного общей формулой (11) (стадия A-6).

Формула 17

(где в формуле (12) R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 18

(где в формуле (11) R³ является таким, как определено выше).

Например, данная реакция может быть проведена в присутствии тетрабромида углерода и пиридина, без растворителя или с использованием такого растворителя, как метиленхлорид, хлороформ, ацетонитрил, этилацетат, тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, при температуре от 0°C до нормальной температуры.

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (1d), может быть получено при кислотном гидролизе или обработке соединения, представленного общей формулой (12), нуклеофильным реагентом, таким как триметилсилилбромид или триметилсилилиодид (стадия A-7).

Что касается реакции кислотного гидролиза, кислотный гидролиз может быть выполнен в неорганической кислоте, такой как хлористоводородная кислота или бромистоводородная кислота, или в смешанном растворе органического растворителя, такого как метанол или этанол, и неорганической кислоты, при температуре кипения с обратным холодильником. Далее, обработка с использованием нуклеофильного реагента может быть осуществлена при взаимодействии с триметилсилилбромидом или триметилсилилиодидом при температуре от 0°C до нормальной температуры, с использованием ацетонитрила или метиленхлорида в качестве предпочтительного реакционного растворителя. Альтернативно, обработка нуклеофильным реагентом может быть также осуществлена при взаимодействии с комбинацией триметилсилилхлорида и бромида натрия или комбинацией триметилсилилхлорида и йодида натрия.

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (7), может быть также получено, например, на основе следующего способа синтеза B.

Способ синтеза B

Формула 19

В способе синтеза B оптически активное соединение, представленное общей формулой (14), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-2, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (13), и соединения, представленного общей формулой (5) (стадия B-1).

Формула 20

(где в формуле (14), A^b, R³ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 21

(где в формуле (13) R³ является таким, как определено выше).

В способе синтеза B оптически активное соединение, представленное общей формулой (15), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-1, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (14), и соединения, представленного общей формулой (3) (стадия B-2).

Формула 22

(где в формуле (15), A^b, R², R³ и Z являются такими, как определено выше).

В способе синтеза B соединение, представленное общей формулой (7), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-3, с использованием соединения, представленного общей формулой (15) (стадия B-3).

В способе синтеза A соединение, представленное общей формулой (10), может быть получено, например, на основе следующего способа синтеза C.

Способ синтеза C

Формула 23

В способе синтеза C оптически активное соединение, представленное общей формулой (17), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-2, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (4), и соединения, представленного общей формулой (16) (стадия C-1).

Формула 24

(где в формуле (17) R¹, R², R³, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 25

(где в формуле (16) R¹, R⁵, A^c и Z являются такими, как определено выше).

В способе синтеза C соединение, представленное общей формулой (18), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-3, с использованием соединения, представленного общей формулой (17) (стадия C-2).

Формула 26

(где в формуле (18) R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

В способе синтеза C соединение, представленное общей формулой (10), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-4, с использованием соединения, представленного общей формулой (18) (стадия C-3).

В способе синтеза C соединение, представленное общей формулой (18), может быть получено, например, на основе следующего способа синтеза D.

Способ синтеза D

Формула 27

В способе синтеза D, оптически активное соединение, представленное общей формулой (19), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-2, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (13), и соединения, представленного общей формулой (16) (стадия D-1).

Формула 28

(где в формуле (19) R¹, R³, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

В способе синтеза D оптически активное соединение, представленное общей формулой (20), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-1, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (19), и соединения, представленного общей формулой (3) (стадия D-2).

Формула 29

(где в формуле (20) R¹, R², R³, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

В способе синтеза D соединение, представленное общей формулой (18), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-3, с использованием соединения, представленного общей формулой (20) (стадия D-3).

В способе синтеза A из соединений, представленных общей формулой (10), соединение, в котором R¹ представляет собой цианогруппу или ацетильную группу, и R⁵ представляет собой обычную защитную группу для фенола, в частности, соединение, представленное общей формулой (10a), может быть получено, например, согласно следующему способу синтеза E.

Формула 30

(где в формуле (10a) R^1a представляет собой ацетильную группу или цианогруппу, и R^5a представляет собой обычную защитную группу для фенольной гидроксильной группы; и R², R⁴ и Z являются такими, как определено выше).

R^5a специально не ограничен, при условии, что он защищает фенольную гидроксильную группу. Например, может быть использована метильная группа, бензильная группа, метоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа, ацетильная группа или трет-бутоксикарбонильная группа.

Способ синтеза E

Формула 31

В способе синтеза E оптически активное соединение, представленное общей формулой (22), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-5, с использованием оптически активного соединения, представленного общей формулой (8), и соединения, представленного общей формулой (21).

Формула 32

(где в формуле (22) R^5b представляет собой обычную защитную группу для фенольной гидроксильной группы; и R², R⁴ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 33

(где в формуле (21) R^5b является таким, как определено выше).

R^5b специально не ограничен, при условии, что он защищает фенольную гидроксильную группу. Например, может быть использована метильная группа, бензильная группа, метоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа, ацетильная группа или трет-бутоксикарбонильная группа (стадия E-1).

В способе синтеза E соединение, представленное общей формулой (23), может быть получено при защите фенольной гидроксильной группы соединения, представленного общей формулой (22) (стадия E-2).

Формула 34

(где в формуле (23) R², R⁴, R^5a, R^5b и Z являются такими, как определено выше).

Данная реакция может быть проведена согласно любой методике, которая обычно используется для защиты фенольной гидроксильной группы. Например, реакция может быть проведена в таком растворителе, как ацетонитрил, тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид, метиленхлорид или хлороформ, в присутствии неорганического или органического основания, при взаимодействии соединения, представленного общей формулой (22), с хлоридом или ацилхлоридом. В качестве неорганического основания могут быть использованы карбонат калия или подобные. В качестве органического основания может быть использован триэтиламин, диизопропилэтиламин или подобные. Кроме того, примеры хлорида, который может быть использован, включают метоксиметилхлорид, трет-бутилдиметилсилилхлорид и бензилхлорид. Примеры ацилхлорида, который может быть использован, включают ацетилхлорид. Из них предпочтительно для защиты фенольной гидроксильной группы используют метоксиметилхлорид. Кроме того, реакция может быть проведена при температуре от 0°C до нормальной температуры.

В способе синтеза E соединение, представленное общей формулой (24), может быть получено при удалении R^5b в соединении, представленном общей формулой (23) (стадия E-3).

Формула 35

(где в формуле (24) R², R⁴, R^5a и Z являются такими, как определено выше).

Реакция специально не ограничена, при условии, что методика обычно используется для удаления защитной группы фенольной гидроксильной группы, и R^5a не удаляют. Будет описан пример, в котором R^5b является силильной защитной группой, такой как трет-бутилдиметилсилильная группа. В данном случае, реакция удаления защитных групп может быть проведена в таком реакционном растворителе, как тетрагидрофуран, ацетонитрил или метиленхлорид, с использованием соединения фтора, такого как тетрабутиламмонийфторид или гидрофторид-пиридин, и предпочтительно тетрабутиламмонийфторид. Указанная реакция удаления защитных групп может быть проведена при температуре от 0°C до температуры кипения с обратным холодильником, и предпочтительно при 0°C.

В способе синтеза E соединение, представленное общей формулой (25), может быть получено при взаимодействии соединения, представленного общей формулой (24), с N-фенилтрифторметансульфонимидом (стадия E-4).

Формула 36

(где в формуле (25) R², R⁴, R^5a и Z являются такими, как определено выше).

Например, указанная реакция может быть осуществлена при взаимодействии с N-фенилтрифторметансульфонимидом в присутствии органического основания, такого как пиридин, триэтиламин или подобные, с использованием такого растворителя, как метиленхлорид, хлороформ, толуол или подобные, при 0°C-80°C, и предпочтительно при нормальной температуре.

В способе синтеза E соединение, представленное общей формулой (10a), может быть получено на основе известного способа с использованием цианида цинка (например, Synth. Commun., 25, 3255-3261 (1995)), или известного способа с использованием реакции Хека (например, J. Org., Chem., 55, 3654-3655 (1990)), из соединения, представленного общей формулой (25) (стадия E-5).

Будет описан пример, в котором R^1a является цианогруппой. В данном случае, реакция может быть осуществлена в присутствии цианида цинка в таком реакционном растворителе, как толуол, N,N-диметилформамид, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или подобные, с использованием катализатора, при температуре от нормальной до температуры кипения с обратным холодильником. Примеры катализаторов, которые могут быть использованы, включают соединения палладия, такие как тетракистрифенилфосфинпалладий(0) или трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0), и предпочтительно тетракистрифенилфосфинпалладий(0). Далее, соединение фосфина, такое как 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен или 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан, может быть добавлено к реакционному растворителю в качестве ускорителя реакции.

Будет описан другой пример, в котором R^1a является ацетильной группой. В данном случае, реакция может быть осуществлена в присутствии органического основания с использованием катализатора и ускорителя реакции, в таком растворителе, как толуол, N,N-диметилформамид, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или подобные, при взаимодействии с бутилвиниловым эфиром. В качестве органического основания может быть использован триэтиламин, диизопропилэтиламин или подобные. Далее, в качестве катализатора может быть использован ацетат палладия (II). В качестве ускорителя реакции может быть использован 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан. Реакция может быть проведена при температуре от нормальной до температуры кипения с обратным холодильником.

Из соединений, представленных общей формулой (1), соединение, в котором X является метиленом, в частности, соединение, представленное общей формулой (1e), может быть получено, например, на основе следующего способа синтеза F.

Формула 37

(где в формуле (1e) R¹, R² и Z являются такими, как определено выше).

Способ синтеза F

Формула 38

В способе синтеза F соединение, представленное общей формулой (26), может быть получено при окислении соединения, представленного общей формулой (10) (стадия F-1).

Формула 39

(где в формуле (26) R¹, R², R⁴, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

Данная реакция может быть осуществлена при использовании стандартного способа окисления с получением альдегида из спирта. Примеры данной окислительной обработки могут включать окислительную обработку, в которой используют комплекс оксида хрома-пиридина, такой как хлорхромат пиридиния или дихромат пиридиния, или окисление, в котором используют гипервалентный йод, такое как окисление Десса-Мартина. Альтернативно, может быть использовано окисление диметилсульфоксидом с использованием различных активирующих диметилсульфоксид агентов, таких как оксалилхлорид, трифторуксусный ангидрид, уксусный ангидрид, дициклогексилкарбодиимид или комплекс триоксида серы-пиридина.

В способе синтеза F соединение, представленное общей формулой (29), может быть получено, например, при взаимодействии соединения, представленного общей формулой (26), и соединения, представленного общей формулой (27), в реакционном растворителе в присутствии основания.

Формула 40

(где в формуле (29) R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

Формула 41

(где в формуле (27) R³ является таким, как определено выше).

Примеры основания, которое может быть использовано в данной реакции, включают гидрид натрия, гидрид калия, алкоксид натрия, алкоксид калия или н-бутиллитий, и предпочтительно н-бутиллитий. В качестве реакционного растворителя может быть использован тетрагидрофуран, диэтиловый эфир или 1,4-диоксан. Далее, температура реакции может быть установлена от -78°C до нормальной температуры.

В способе синтеза F соединение, представленное общей формулой (30), может быть получено при восстановлении соединения, представленного общей формулой (29) (стадия F-3).

Формула 42

(где в формуле (30) R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и Z являются такими, как определено выше).

Например, указанная реакция может быть осуществлена в присутствии катализатора каталитического гидрирования, в таком растворителе, как этанол, метанол, тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид или этилацетат, при давлении от нормального до повышенного давления водорода при нормальной температуре. Примеры катализаторов каталитического гидрирования, которые могут быть использованы, включают палладий на углероде, платину на углероде, оксид платины, родий на углероде или рутений на углероде.

Кроме того, данная реакция также может быть осуществлена путем восстановления диимида. Например, реакция может быть осуществлена с использованием азодикарбоксилата калия в присутствии уксусной кислоты в таком растворителе, как пиридин, этанол, метанол, диметилсульфоксид или 1,4-диоксан, при температуре от нормальной температуры до нагревания до температуры кипения с обратным холодильником.

В способе синтеза F соединение, представленное общей формулой (1e), может быть получено на основе такого же способа, как на стадии A-7, с использованием соединения, представленного общей формулой (30) (стадия F-4).

Кроме того, способ синтеза соединения, представленного общей формулой (16), может быть осуществлен на основе способа, описанного в проспектах WO 03029184, WO 03029205, WO 04026817, WO 04074297 и WO 050444780.

Производное дифенилсульфида или его фармацевтически приемлемая соль или гидрат согласно настоящему изобретению демонстрируют превосходное S1P3 антагонистическое действие и могут применяться для получения лекарственного средства на основе антагонистического действия в отношении рецептора сфингозин-1-фосфорной кислоты 3 (S1P3). Более конкретно, лекарственное средство, содержащее по меньшей мере один тип или более таких соединений в качестве активного ингредиента, эффективно в качестве терапевтического или профилактического средства при заболеваниях, в отношении которых S1P3 антагонист, как известно, является эффективным терапевтическим или профилактическим средством. Примеры заболеваний, в отношении которых антагонист S1P3, как известно, является эффективным терапевтическим или профилактическим средством, включают сепсис, сужение дыхательных путей, бронхиальную астму, хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ), эмфизему легких, стеноз трахеи, диффузный панбронхиолит, бронхит в результате инфекции, болезни соединительной ткани или трансплантацию, диффузный легочный гамартоангиомиоматоз, респираторный дистресс-синдром взрослых (РДСВ), интерстициальный пневмонит, рак легкого, гиперчувствительную пневмонию, идиопатическую интерстициальную пневмонию, фиброз легких, сепсис или цитокиновый шторм при инфекции, вызванной вирусом гриппа или респираторным синцитиальным вирусом (RSV).

Кроме того, помимо вышеописанных заболеваний, лекарственное средство настоящего изобретения также эффективно для терапии или профилактики заболеваний, в отношении которых, как известно, эффективно S1P3 антагонистическое действие. Примеры заболеваний, в отношении которых, как известно, эффективно S1P3 антагонистическое действие, включают артериосклероз, утолщение интимы кровеносных сосудов, солидные опухоли, диабетическую ретинопатию, ревматоидный артрит, остановку сердца, ишемические реперфузионные нарушения, спазмы сосудов мозга после субарахноидального кровотечения, стенокардию или инфаркт миокарда, вызванный спазмами коронарных сосудов, гломерулонефрит, тромбоз, болезнь легких, вызванную отеком легких, такую как РДСВ, сердечную аритмию, болезнь глаз, повышенное внутриглазное давление, глаукому, глаукоматозную ретинопатию, оптическую нейропатию и дегенерацию желтого пятна.

Лекарственное средство настоящего изобретения можно вводить перорально. Альтернативно, лекарственное средство настоящего изобретения можно также вводить парентерально, например, ректально, подкожно, внутривенно, внутримышечно или трансдермально.

Для применения в качестве лекарственного средства, соединение настоящего изобретения или его фармацевтически приемлемая соль или гидрат могут находиться в форме твердой композиции, жидкой композиции или некоторых других композиций. Оптимальную форму выбирают в соответствии с необходимостью. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть получена путем смешивания соединения настоящего изобретения с фармацевтически приемлемым носителем. В частности, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть получена стандартными методами приготовления лекарственных форм в виде таблетки, пилюли, капсулы, гранулы, порошка, дисперсии, жидкости, эмульсии, суспензии, препарата для инъекции или подобного путем добавления стандартных разбавителей, наполнителей, связующих веществ, дезинтегрантов, составов для нанесения покрытия, сахарных покрытий, регуляторов pH, солюбилизаторов или водных или неводных растворителей.

Настоящее изобретение далее описано на основе следующих конкретных примеров. Однако настоящее изобретение не ограничивается указанными примерами.

Справочный пример 1

(2R,5R)-2-аллил-2-(4-бром-2-хлорфенил)этил-3,6-диметокси-5-изопропил-2,5-дигидропиразин

Химическая формула 43

В атмосфере аргона раствор н-бутиллития в гексане (1,60 моль/л, 11,16 мл) добавляли при -78°C к раствору (5R)-2-аллил-3,6-диметокси-5-изопропил-2,5-дигидропиразина (3,64 г) в тетрагидрофуране (60 мл), с получением реакционного раствора. Затем указанный реакционный раствор перемешивали при -78°C в течение 30 минут. Раствор 4-бром-2-хлор-1-(2-иодэтил)бензола (6,73 г) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли к реакционному раствору, и реакционный раствор перемешивали при -78°C в течение 30 минут, и затем при 0°C в течение 1 часа. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=70:1), с получением целевого продукта (6,04 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,69 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,10 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,79 (1H, ддд, J=12,8, 11,6, 4,9 Гц), 2,02 (1H, ддд, J=12,8, 11,6, 4,9 Гц), 2,27-2,48 (4H, м), 2,54 (1H, дд, J=13,4, 7,3 Гц), 3,69 (3H, с), 3,70 (3H, с), 3,95 (1H, д, J=3,1 Гц), 4,97 (1H, дд, J=10,4, 2,4 Гц), 5,01 (1H, д, J=17,7 Гц), 5,61-5,72 (1H, м), 7,01 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,27 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,47 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 441 [M+H]⁺.

Справочный пример 2

Метил-(R)-2-аллил-4-(4-бром-2-хлорфенил)-2-трет-бутоксикарбониламинобутират

Химическая формула 44

Раствор 50% трифторуксусная кислота-вода (108 мл) добавляли к соединению справочного примера 1 (5,44 г), с получением первого реакционного раствора. Указанный первый реакционный раствор перемешивали при нормальной температуре в течение 1 часа, и затем оставляли при нормальной температуре на ночь. Первый реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Экстракт концентрировали, и затем полученный в результате остаток растворяли в ацетонитриле (86 мл). Затем добавляли ди-трет-бутоксидикарбонат (11,0 г), с получением второго реакционного раствора. Второй реакционный раствор перемешивали при нормальной температуре в течение 1 часа, и затем оставляли при нормальной температуре на ночь. Затем ко второму реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали второй реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=6:1), с получением целевого продукта (6,16 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,45 (9H, с), 2,08 (1H, ддд, J=13,4, J=11,0, 5,5 Гц), 2,39-2,51 (2H, м), 2,51-2,61 (1H, м), 2,67 (1H, тд, J=12,8, 4,9 Гц), 3,00-3,14 (1H, м), 3,74 (3H, с), 5,07 (1H, д, J=4,9 Гц), 5,10 (1H, с), 5,52-5,69 (1H, м), 7,03 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,29 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,48 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 446 [M+H]⁺.

Справочный пример 3

(R)-2-[2-(4-бром-2-хлорфенил)этил]-2-трет-бутоксикарбониламино-4-пентен-1-ол

Химическая формула 45

Борогидрид лития (1,04 г) добавляли при охлаждении льдом к раствору соединения справочного примера 2 (6,16 г) в тетрагидрофуране (95 мл), с получением реакционного раствора. Затем этанол (9,5 мл) по каплям добавляли к реакционному раствору. Затем полученный в результате раствор перемешивали в течение 2 часов при охлаждении льдом. К реакционному раствору добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=2:1), с получением целевого продукта (3,20 г) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,43 (9H, с), 1,80-1,94 (2H, м), 2,32 (1H, тд, J=14,1, 7,9 Гц), 2,44 (1H, дд, J=14,1, 6,7 Гц), 2,63-2,77 (2H, м), 3,69-3,79 (2H, м), 4,09 (1H, ушир.с), 4,72 (1H, с), 5,19 (1H, дд, J=6,1, 1,8 Гц), 5,22 (1H, с), 5,80-5,91 (1H, с), 7,11 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,31 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,49 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 418 [M+H]⁺.

Справочный пример 4

(2R,5R)-2-(4-бром-2-хлорфенил)этил-3,6-диметокси-5-изопропил-2-пропил-2,5-дигидропиразин

Химическая формула 46

Целевой продукт (8,01 г) получали в виде бесцветного масла, подвергая (5R)-3,6-диметокси-2-пропил-5-изопропил-2,5-дигидропиразин (5,21 г) взаимодействию по методике, аналогично справочному примеру 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,70 (3H, д, J=6,7 Гц), 0,86 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,11 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,15-1,30 (2H, м), 1,49-1,62 (1H, м), 1,71-1,84 (2H, м), 1,98 (1H, тд, J=12,4, 4,8 Гц), 2,29-2,47 (3H, м), 3,69 (3H, с), 3,70 (3H, с), 3,95 (1H, д, J=3,0 Гц), 7,01 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,27 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,46 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+):443 [M+H]⁺.

Справочный пример 5

Метил-(S)-4-(4-бром-2-хлорфенил)-2-трет-бутоксикарбониламино-2-пропилбутират

Химическая формула 47

Целевой продукт (35,6 г) получали в виде бесцветного масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 4 (53,4 г) по методике, аналогично справочному примеру 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,89 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,96-1,10 (1H, м), 1,25-1,39 (1H, м), 1,46 (9H, с), 1,69 (1H, ддд, J=13,9, 11,5, 4,8 Гц), 1,99-2,10 (1H, м), 2,20-2,35 (1H, м), 2,42 (1H, ддд, J=13,9, 11,5, 4,8 Гц), 2,49-2,60 (1H, м), 2,64 (1H, тд, J=13,9, 4,8 Гц), 3,74 (3H, с), 5,62 (1H, ушир.с), 7,03 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,29 (1H, дд, J=8,5, 1,8 Гц), 7,48 (1H, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 448 [M+H]⁺.

Справочный пример 6

(R)-2-[2-(4-бром-2-хлорфенил)этил]-2-трет-бутоксикарбониламинопентан-1-ол

Химическая формула 48

Целевой продукт (28,6 г) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 5 (35,6 г) по методике, аналогично справочному примеру 3.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,96 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,29-1,42 (2H, м), 1,44 (9H, с), 1,53-1,62 (2H, м), 1,81 (1H, ддд, J=13,9, 11,5, 5,4 Гц), 1,93 (1H, ддд, J=13,9, 11,5, 5,4 Гц), 2,59-2,75 (2H, м), 3,73 (2H, д, J=6,7 Гц), 4,15 (1H, ушир.с), 4,62 (1H, ушир.с), 7,11 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,31 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,49 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 420 [M+H]⁺.

Справочный пример 7

1-Циклопропил-4-(метоксиметокси)бензол

Химическая формула 49

Диизопропилэтиламин (77,6 мл) и хлорметилметиловый эфир (33,7 мл) добавляли к раствору 4-циклопропилфенол (24,0 г) в метиленхлориде (250 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 15 минут при охлаждении льдом, и затем оставляли на ночь при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водным раствором (1 моль/л) гидроксида натрия, водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением целевого продукта (27,6 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,59-0,62 (2H, м), 0,86-0,93 (2H, м), 1,80-1,90 (1H, м), 3,47 (3H, с), 5,14 (2H, с), 6,94 (2H, дт, J=9,2, 2,4 Гц), 7,01 (2H, дт, J=9,2, 2,4 Гц).

EIMS (+): 178 [M]⁺.

Справочный пример 8

5-Циклопропил-2-(метоксиметокси)тиофенол

Химическая формула 50

В атмосфере аргона раствор н-бутиллития в гексане (1,59 моль/л, 63,5 мл) при охлаждении льдом добавляли к раствору соединения справочного примера 7 (15,0 г) в тетрагидрофуране (120 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа при той температуре. Реакционный раствор охлаждали до -78°C. Добавляли серу (3,23 г) и перемешивали раствор в течение 30 минут, и затем в течение 10 минут при охлаждении льдом. К реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Раствор экстрагировали диэтиловым эфиром, затем органический слой экстрагировали водным раствором (1 моль/л) гидроксида натрия. Уровень pH раствора понижали до 4 с использованием концентрированной хлористоводородной кислоты, затем раствор экстрагировали диэтиловым эфиром. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением целевого продукта (12,1 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,61 (2H, дт, J=6,1, 4,9 Гц), 0,86-0,92 (2H, м), 1,75-1,86 (1H, м), 3,50 (3H, с), 3,76 (1H, с), 5,20 (2H, с), 6,80 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц), 6,98 (1H, д, J=8,6 Гц), 6,98 (1H, д, J=2,4 Гц).

EIMS (+): 210 [M]⁺.

Справочный пример 9

6-Этокси-1,3-бензоксатиол-2-он

Химическая формула 51

Карбонат калия (533 мг) и этилиодид (160 мкл) добавляли к раствору 6-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-она (336 мг) в N,N-диметилформамиде (10 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 4 часов при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду. Выпавшие в осадок кристаллы отделяли фильтрованием, тщательно промывали водой и диизопропиловым эфиром, и затем сушили при пониженном давлении, с получением целевого продукта (245 мг) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,42 (3H, т, J=6,7 Гц), 4,02 (2H, кв, J=6,7 Гц), 6,84 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц), 6,91 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,18 (1H, д, J=8,6 Гц).

EIMS (+): 196 [M]⁺.

Справочный пример 10

5-Этокси-2-гидрокситиофенол

Химическая формула 52

В атмосфере аргона алюмогидрид лития (119 мг) при охлаждении льдом добавляли к раствору соединения справочного примера 9 (245 мг) в тетрагидрофуране (12,5 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 30 минут при охлаждении льдом. Затем к реакционному раствору добавляли хлористоводородную кислоту (1 моль/л) и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением целевого продукта (210 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,38 (3H, т, J=7,3 Гц), 3,10 (1H, с), 3,96 (2H, кв, J=7,3 Гц), 5,73 (1H, с), 6,78 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 6,87 (1H, д, J=9,2 Гц), 6,98 (1H, д, J=3,1 Гц).

EIMS (+): 170 [M]⁺.

Справочный пример 11

6-трет-бутилдиметилсилилокси-1,3-бензоксатиол-2-он

Химическая формула 53

Имидазол (972 мг) и трет-бутилхлордиметилсилан (2,15 г) добавляли к раствору 6-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-она (2,00 г) в N,N-диметилформамиде (60 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 4 часов при нормальной температуре. Затем к реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Экстракт промывали водой и насыщенным раствором соли в указанном порядке, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток впоследствии очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=20:1), с получением целевого продукта (3,00 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,20 (6H, с), 0,98 (9H, с), 6,77 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц), 6,87 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,14 (1H, д, J=8,6 Гц).

CIMS (+): 283 [M+H]⁺.

Справочный пример 12

5-трет-бутилдиметилсилилокси-2-гидрокситиофенол

Химическая формула 54

Целевой продукт (2,72 г) получали в виде бесцветного масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 11 (3,00 г) по методике, аналогично справочному примеру 10.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,16 (6H, c), 0,97 (9H, c), 3,06 (1H, c), 5,73 (1H, c), 6,71 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц), 6,81 (1H, д, J=2,4 Гц), 6,93 (1H, д, J=8,6 Гц).

CIMS (+): 257 [M+H]⁺.

Справочный пример 13

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 55

В атмосфере газообразного аргона раствор трис(дибензилиденацетон)дипалладия (87,0 мг) и 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантена (111 мг) в диоксане (1,8 мл), в качестве реакционного раствора, кипятили с обратным холодильником в течение 30 минут. Затем к реакционному раствору добавляли раствор соединения справочного примера 3 (400 мг) в диоксане (2,0 мл), диизопропилэтиламин (0,32 мл) и раствор соединения справочного примера 10 (195 мг) в диоксане (1,0 мл), и перемешивали реакционный раствор в течение 3 часов при кипячении с обратным холодильником. Затем соединение справочного примера 10 (33,0 мг) добавляли к реакционному раствору, который затем кипятили с обратным холодильником в течение 14 часов. Затем при охлаждении льдом добавляли воду. Нерастворимое вещество удаляли фильтрованием при использовании целита и промывали фильтрат этилацетатом. Фильтрат экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=10:1), с получением целевого продукта (342 мг) в виде коричневого масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,39 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,43 (9H, c), 1,77-1,91 (2H, м), 2,32 (1H, дд, J=13,9, 7,9 Гц), 2,43 (1H, дд, J=13,9, 7,3 Гц), 2,59-2,75 (2H, м), 3,67-3,79 (2H, м), 3,97 (2H, кв, J=6,7 Гц), 4,15 (1H, ушир.c), 4,71 (1H, c), 5,17 (1H, д, J=3,6 Гц), 5,21 (1H, c), 5,78-5,91 (1H, м), 6,04 (1H, c), 6,91 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 6,93-7,21 (1H, м).

ESIMS (+): 508 [M+H]⁺.

Справочный пример 14

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(2-трет-бутоксикарбонилгидрокси-5-этоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 56

В атмосфере аргона ди-трет-бутилдикарбонат (101 мг) и триэтиламин (0,052 мл) добавляли к раствору соединения справочного примера 13 (156 мг) в ацетонитриле (3,1 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 2,5 дней при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=10:1), с получением целевого продукта (182 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,36 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,44 (9H, с), 1,51 (9H, с), 1,87 (2H, ддд, J=11,5, 6,1, 1,8 Гц), 2,33 (1H, дд, J=13,9, 8,5 Гц), 2,45 (1H, дд, J=13,9, 6,7 Гц), 2,64-2,78 (2H, м), 3,68-3,81 (2H, м), 3,94 (2H, кв, J=7,3 Гц), 4,73 (1H, с), 5,19 (1H, д, J=3,6 Гц), 5,22 (1H, с), 5,79-5,93 (1H, м), 6,78-6,84 (2H, м), 7,09 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,15 (2H, с), 7,33 (1H, с).

ESIMS (+): 608 [M+H]⁺.

Справочный пример 15

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(2-трет-бутоксикарбонилгидрокси-5-этоксифенилтио)фенил}-1-диметоксифосфорилоксибутан

Химическая формула 57

В атмосфере газообразного аргона тетрабромид углерода (190 мг) и триметилфосфит (0,068 мл) при охлаждении льдом добавляли к раствору соединения справочного примера 14 (175 мг) в пиридине (0,57 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 4 часов при той же температуре. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Органический слой последовательно промывали хлористоводородной кислотой (1 моль/л), водой и насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1), с получением целевого продукта (194 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,36 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,44 (9H, с), 1,51 (9H, с), 1,75-1,92 (1H, м), 1,90-2,10 (1H, м), 2,42-2,57 (2H, м), 2,64-2,75 (2H, м), 3,77 (3H, с), 3,80 (3H, д, J=1,2), 3,90-4,01 (2H, м), 4,11 (1H, дд, J=9,7, 4,8 Гц), 4,22 (1H, дд, J=9,7, 4,8 Гц), 4,60 (1H, ушир.с), 5,17-5,25 (2H, м), 5,75-5,88 (1H, м), 6,78-6,84 (2H, м), 7,09 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,10-7,17 (2H, м), 7,32 (1H, т, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 716 [M+H]⁺.

Пример 1

Моноэфир (R)-2-аллил-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}бутилфосфорной кислоты

Химическая формула 58

Раствор хлористый водород-метанол (5-10%, 15 мл) добавляли к соединению справочного примера 15 (193 мг), с получением первого реакционного раствора. Указанный первый реакционный раствор перемешивали в течение 1 дня при нормальной температуре. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, и затем в атмосфере аргона к остатку добавляли ацетонитрил (2,7 мл), с получением второго реакционного раствора. Йодтриметилсилан (0,19 мл) при охлаждении льдом добавляли к указанному второму реакционному раствору. Затем второй реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов при той же температуре. Ко второму реакционному раствору добавляли холодную воду в большом избытке. Супернатант удаляли, после чего полученное коричневое масло растворяли в метаноле. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, и затем полученный в результате продукт растворяли в тетрагидрофуране и к полученному раствору добавляли ацетонитрил. Полученный в результате осадок собирали фильтрованием, с получением целевого продукта (63,3 мг) в виде бесцветного твердого вещества.

Оптическое вращение: [α]_D ²⁶ +2,74 (c 0,31, MeOH).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 1,23 (1H, т, J=6,7 Гц), 1,60-1,77 (1H, м), 2,30-2,50 (1H, м), 2,62-2,73 (1H, м), 3,77 (2H, дт J=22,4, 12,1 Гц), 3,87 (2H, кв, J=6,7 Гц), 5,16-5,29 (2H, м), 5,77-5,84 (1H, м), 6,71 (1H, д, J=2,4 Гц), 6,79-6,87 (2H, м), 7,07-7,14 (2H, м), 7,26 (1H, д, J=7,9 Гц).

HRESIMS (+): 488,10694 (вычислено для C₂₁H₂₈ClNO₆PS 488,10635).

Справочный пример 16

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-циклопропил-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 59

Целевой продукт (2,2 г, включая примеси) получали в виде зеленого масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 3 (1,5 г) и соединение справочного примера 8 (1,13 г) по методике, аналогично справочному примеру 13. Полученные вещества использовали в следующей реакции как таковые, без любой дополнительной очистки.

Справочный пример 17

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-циклопропил-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-1-диметоксифосфорилоксибутан

Химическая формула 60

Целевой продукт (1,43 г) получали в виде коричневого масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 16 (2,2 г, включая примеси) по методике, аналогично справочному примеру 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,57-0,60 (2H, м), 0,88-0,91 (2H, м), 1,44 (9H, с), 1,78-1,84 (2H, м), 1,96-2,04 (1H, м), 2,44-2,56 (2H, м), 2,68-2,73 (2H, м), 3,38 (3H, с), 3,77 (3H, с), 3,80 (3H, с), 4,12 (1H, дд, J=9,8, 4,3 Гц), 4,23 (1H, дд, J=9,8, 4,3 Гц), 4,59 (1H, ушир.с), 5,15 (2H, с), 5,19-5,23 (2H, м), 5,76-5,85 (1H, м), 6,98 (1H, д, J=8,6, 1,8 Гц), 7,00 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,08 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,09 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,17 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,23 (1H, д, J=1,2 Гц).

ESIMS (+): 656 [M+H]⁺.

Справочный пример 18

(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-циклопропил-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-1-диметоксифосфорилокси-2-(1-гидроксипропил)бутан

Химическая формула 61

В атмосфере газообразного аргона соединение справочного примера 17 (1.41 г) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл). Затем к раствору соединения справочного примера 17 при охлаждении льдом по каплям добавляли комплекс борана-тетрагидрофурана (1,01 моль/л раствор в тетрагидрофуране, 3,2 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали при той же температуре в течение 1,5 часов. Затем при охлаждении льдом добавляли воду (20 мл) и гидрат пербората натрия (644 мг), и перемешивали реакционный раствор в течение 3 часов при нормальной температуре. Реакционный раствор разбавляли водой и затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=1:2), с получением целевого продукта (979 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,56-0,60 (2H, м), 0,87-0,92 (2H, м), 1,40 (9H, с), 1,60-1,66 (2H, м), 1,75-1,82 (4H, м), 2,68 (2H, т, J=8,6 Гц), 3,38 (3H, с), 3,66-3,69 (2H, м), 3,78 (3H, д, J=3,7 Гц), 3,80 (3H, д, J=3,7 Гц), 4,12-4,16 (1H, м), 4,22-4,26 (1H, м), 4,61 (1H, ушир.с), 5,15 (2H, с), 6,97 (1H, дд, J=8,6, 2,5 Гц), 6,98 (1H, д, J=8,6, 1,8 Гц), 7,00 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,06 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,09-7,12 (2H, м), 7,23 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 674 [M+H]⁺.

Справочный пример 19

Моноэфир (R)-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-циклопропил-2-гидроксифенилтио)фенил}-2-(1-гидроксипропил)бутилфосфорной кислоты

Химическая формула 62

Целевой продукт (120 мг) получали в виде бесцветного аморфного вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 18 (535 мг) по методике, аналогично примеру 1.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 0,49-0,53 (2H, м), 0,80-0,84 (2H, м), 1,46-1,81 (7H, м), 2,61 (2H, ушир,с), 3,33-3,39 (2H, м), 3,71 (2H, ушир.с), 6,85 (1H, д, J=8,6 Гц), 6,92-6,99 (4H, м), 7,25 (1H, д, J=7,3 Гц).

HRESIMS (+): 502.12175 (вычислено для C₂₂H₃₀ClNO₆PS 502,12200).

Справочный пример 20

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(2-трет-бутоксикарбонилокси-5-этоксифенилтио)фенил}-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 63

Соединение справочного примера 14 (122 мг) растворяли в этаноле (2 мл), затем к раствору соединения справочного примера 14 добавляли 10% палладий на активированном угле (12 мг), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 10 часов при нормальной температуре в атмосфере водорода (1 атм). Нерастворимое вещество удаляли при использовании целита. Растворитель в фильтрате удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением целевого продукта (123 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,96 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,36 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,39-1,58 (4H, м), 1,51 (9H, с), 1,59 (9H, с), 1,53-1,60 (2H, м), 1,75-1,84 (1H, м), 1,86-1,95 (1H, м), 2,60-2,74 (2H, м), 3,74 (2H, д, J=6,1 Гц), 3,94 (2H, кв, J=7,3 Гц), 4,22 (1H, ушир.с), 4,64 (1H, ушир.с), 6,78-6,83 (2H, м), 7,09 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,15-7,16 (1H, м), 7,33 (1H, д, J=1,2 Гц).

ESIMS (+): 610 [M+H]⁺.

Справочный пример 21

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(2-трет-бутоксикарбонил-окси-5-этоксифенилтио)фенил}-1-диметоксифосфорилокси-2-пропилбутан

Химическая формула 64

Целевой продукт (106 мг) получали в виде бесцветного масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 20 (100 мг) по методике, аналогично справочному примеру 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,47 (9H, с), 1,51 (9H, с), 1,63-1,82 (5H, м), 1,99-2,05 (1H, м), 2,64-2,69 (2H, м), 3,77 (3H, д, J=1,2 Гц), 3,94 (2H, кв, J=7,3 Гц), 4,09-4,12 (1H, м), 4,23-4,26 (1H, м), 4,51 (1H, ушир.с), 6,79-6,83 (2H, м), 7,09 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,12 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,15 (1H, дд, J=7,9, 1,8 Гц), 7,33 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 718 [M+H]⁺.

Пример 2

Моноэфир (S)-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}-2-пропилбутилфосфорной кислоты

Химическая формула 65

Целевой продукт (37 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 21 (103 мг) по методике, аналогично примеру 1.

Оптическое вращение: [α]_D ²⁸ -5,7 (c 0,34, MeOH).

Оптическое вращение: [α]_D ²⁵ +16,2 (c 0,5, ДМФА).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 0,89 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,23 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,29-1,32 (2H, м), 1,50-1,75 (4H, м), 2,61-2,66 (2H, м), 3,70-3,81 (2H, м), 3,87 (2H, кв, J=7,3 Гц), 6,71 (1H, д, J=3,1 Гц), 6,82 (1H, дд, J=8,6, 3,1 Гц), 6,86 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,10 (1H, дд, J=8,0, 1,8 Гц), 7,12 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,28 (1H, д, J=8,0 Гц).

HRESIMS (+): 490,12195 (вычислено для C₂₁H₃₀ClNO₆PS 490,12200).

Справочный пример 22

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-трет-бутилдиметилсилилокси-2-гидроксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 66

Целевой продукт (3,22 г) получали в виде коричневого масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 3 (3,6 г) и соединение справочного примера 12 (2,65 г) по методике, аналогично справочному примеру 13.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,17 (6H, с), 0,97 (9H, с), 1,58 (9H, с), 1,81-1,88 (2H, м), 2,32 (1H, дд, J=13,5, 8,0 Гц), 2,43 (1H, дд, J=13,5, 6,7 Гц), 2,62-2,70 (1H, м), 3,68-3,78 (2H, м), 4,71 (1H, ушир.с), 5,17-5,21 (2H, м), 5,80-5,90 (1H, м), 6,05 (1H, с), 6,87-6,98 (4H, м), 7,03 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,10 (1H, д, J=8,0 Гц).

ESIMS (+): 594 [M+H]⁺.

Справочный пример 23

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-трет-бутилдиметилсилилокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 67

Карбонат калия (446 мг) добавляли к раствору соединения справочного примера 22 (1,75 г) в ацетоне (14,7 мл). Затем по каплям при охлаждении льдом добавляли хлорметилметиловый эфир (0,25 мл), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 4 часов при той же температуре. К реакционному раствору добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=4:1), с получением целевого продукта (1,44 г) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,08 (6H, с), 0,91 (9H, с), 1,44 (9H, с), 1,78-1,95 (2H, м), 2,34 (1H, дд, J=14,1, 7,9 Гц), 2,46 (1H, дд, J=14,1, 6,7 Гц), 2,65-2,82 (1H, м), 3,45 (3H, с), 3,68-3,82 (2H, м), 4,74 (1H, ушир.с), 5,13 (2H, с), 5,16-5,25 (2H, м), 5,80-5,95 (1H, м), 6,53 (1H, д, J=3,1 Гц), 6,68 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,00 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,18 (2H, с), 7,32 (1H, с).

ESIMS (+): 638 [M+H]⁺.

Справочный пример 24

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-гидрокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 68

Тетрабутиламмонийфторид (1,0 моль/л раствор в тетрагидрофуране, 6,20 мл) при охлаждении льдом добавляли к раствору соединения справочного примера 23 (3,96 г) в тетрагидрофуране (31 мл), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа при той же температуре. К реакционному раствору добавляли воду. Тетрагидрофуран удаляли из реакционного раствора перегонкой при пониженном давлении, и полученный в результате остаток экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои последовательно промывали водой (20 мл) и насыщенным раствором соли и сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=12:1→1:2). Твердое вещество, полученное в результате данной очистки, суспендировали в смеси гексан-диэтиловый эфир (4:1) и затем собирали фильтрованием, с получением целевого продукта (2,87 г) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,44 (9H, с), 1,80-2,03 (2H, м), 2,34 (1H, дд, J=14,1, 7,9 Гц), 2,40-2,55 (1H, м), 2,70-2,85 (2H, м), 3,47 (3H, с), 3,65-3,78 (2H, м), 4,77 (1H, ушир.с), 5,13 (2H, с), 5,17-5,27 (2H, м), 5,78-5,95 (1H, м), 6,45 (1H, с), 6,65 (1H, дд, J=8,6, 3,1 Гц), 7,00 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,21 (2H, с), 7,38 (1H, с).

ESIMS (+): 524 [M+H]⁺.

Справочный пример 25

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(2-метоксиметилокси-5-трифторметансульфонилоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 69

В атмосфере газообразного аргона триэтиламин (0,75 мл) и N-фенилбис(трифторметансульфонимид) (954 мг) при охлаждении льдом добавляли к суспензии соединения справочного примера 24 (1,40 г) в дихлорметане (13,4 мл), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 3 часов при нормальной температуре. N-фенилбис(трифторметансульфонимид) (143 мг) дополнительно добавляли к реакционному раствору, и затем раствор перемешивали в течение 2 часов при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=4:1), с получением целевого продукта (1,77 г) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,44 (9H, с), 1,83-2,00 (2H, м), 2,34 (1H, дд, J=14,1, 8,6 Гц), 2,47 (1H, дд, J=14,1, 6,7 Гц), 2,70-2,87 (2H, м), 3,47 (3H, с), 3,70-3,85 (2H, м), 4,75 (1H, ушир.с), 5,18-5,26 (2H, м), 5,24 (2H, с), 5,80-5,96 (1H, м), 6,78 (1H, д, J=3,1 Гц), 7,05 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,16 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,27 (2H, с), 7,43 (1H, д, J=1,2 Гц).

ESIMS (+): 656 [M+H]⁺.

Справочный пример 26

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-циано-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}бутан-1-ол

Химическая формула 70]

В атмосфере газообразного аргона тетракистрифенилфосфинпалладий (69,3 мг), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (33,3 мг) и цианид цинка (141 мг) добавляли к раствору соединения справочного примера 25 (200 мг) в N,N-диметилформамиде (1,5 мл), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 4 часов при 80°C. После охлаждения реакционного раствора к нему добавляли воду. Затем реакционный раствор экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=12:1→1:2), с получением целевого продукта (114 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,45 (9H, с), 1,85-2,04 (2H, м), 2,36 (1H, дд, J=13,9, 8,5 Гц), 2,47 (1H, дд, J=13,9, 6,7 Гц), 2,70-2,86 (2H, м), 3,45 (3H, с), 3,70-3,84 (2H, м), 4,76 (1H, ушир.с), 5,17-5,26 (2H, м), 5,29 (2H, с), 5,81-5,97 (1H, м), 7,13-7,21 (2H, м), 7,23-7,32 (2H, м), 7,42 (1H, д, J=1,2 Гц), 7,45 (1H, дд, J=8,5, 1,8 Гц).

ESIMS (+): 533 [M+H]⁺.

Справочный пример 27

(R)-2-аллил-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-циано-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-1-диметоксифосфорилоксибутан

Химическая формула 71

Целевой продукт (309 мг) получали в виде бесцветного масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 26 (304 мг) по методике, аналогично справочному примеру 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 1,38 (9H, с), 1,60-1,73 (1H, м), 1,75-1,90 (1H м), 2,35-2,44 (2H, м), 2,62-2,72 (2H, м), 3,25 (3H, с), 3,65 (3H, д, J=1,2 Гц), 3,68 (3H, д, J=1,2 Гц), 3,95-4,05 (1H, м), 4,05-4,18 (1H, м), 5,08-5,20 (2H, м), 5,35 (2H, с), 5,68-5,84 (1H, м), 6,70 (1H, ушир.с), 7,25-7,36 (3H, м), 7,39 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,46 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,63 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц).

ESIMS (+): 641 [M+H]⁺.

Справочный пример 28

Моноэфир (R)-2-аллил-2-амино-4-{2-хлор-4-(5-циано-2-гидроксифенилтио)фенил}бутилфосфорной кислоты

Химическая формула 72

Целевой продукт (42,5 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 27 (300 мг) по методике, аналогично примеру 1.

Оптическое вращение: [α]_D ²⁵ -9,0 (c 0,50, MeOH).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 1,60-1,82 (2H, м), 2,30-2,42 (2H м), 2,62-2,80 (2H, м), 3,68-3,88 (2H, м), 5,14-5,30 (2H, м), 5,72-5,90 (1H, м), 7,06 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,14 (1H, дд, J=8,5, 1,8 Гц), 7,26 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,31 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,50 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,62 (1H, дд, J=8,5, 1,8 Гц).

HRESIMS (+): 469,07566 (вычислено для C₂₀H₂₃ClN₂O₅PS 469,07538).

Справочный пример 29

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-[2-хлор-4-(5-гидрокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил]-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 73

Соединение справочного примера 24 (919 мг) растворяли в этаноле (17,5 мл), затем добавляли 10% палладий на активированном угле (92 мг). Затем смесь перемешивали в течение 17,5 часов при нормальной температуре в атмосфере водорода (1 атм). Твердое вещество удаляли фильтрованием при использовании целита. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением остатка (916 мг). Указанный остаток растворяли в метаноле (20 мл), и затем добавляли 10% палладий на активированном угле (93 мг). Затем смесь перемешивали в течение 5 часов при нормальной температуре в атмосфере водорода. Добавляли дополнительную порцию 10% палладия на активированном угле (92 мг) и перемешивали смесь в течение еще 14,5 часов. Нерастворимое вещество удаляли фильтрованием при использовании целита, и растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении, с получением целевого продукта (850 мг) в виде твердого вещества телесного цвета.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,97 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,31-1,47 (2H, м), 1,44 (9H, с), 1,49-1,64 (2H, м), 1,83-2,02 (2H, м), 2,63-2,81 (2H, м), 3,48 (3H, с), 3,70 (2H, д, J=6,1 Гц), 4,33 (1H, ушир.с), 4,65 (1H, ушир.с), 4,95 (1H, ушир.с), 5,14 (2H, с), 6,37-6,45 (1H, м), 6,64 (1H, дд, J=8,6, 2,4 Гц), 7,01 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,20-7,25 (2H, м), 7,38-7,42 (1H, м).

ESIMS (+): 526 [M+H]⁺.

Справочный пример 30

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-[2-хлор-4-(2-метоксиметилокси-5-трифторметансульфонилоксифенилтио)фенил]-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 74

Целевой продукт (1,20 г) получали в виде бесцветного масла, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 29 (1,31 г) по методике, аналогично справочному примеру 25.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,97 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,31-1,49 (2H, м), 1,44 (9H, с), 1,56-1,61 (2H, м), 1,80-1,88 (1H, м), 1,91-1,99 (1H, м), 2,67-2,80 (2H, м), 3,47 (3H, с), 3,75 (2H, д, J=5,5 Гц), 4,22 (1H, ушир.с), 4,66 (1H, с), 5,24 (2H, с), 6,78 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,05 (1H, дд, J=9,2, 2,8 Гц), 7,16 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,25-7,28 (2H, м), 7,43 (1H, с).

ESIMS (+): 658 [M+H]⁺.

Справочный пример 31

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-[2-хлор-4-(5-циано-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил]-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 75

Целевой продукт (313 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 30 (543 мг) по методике, аналогично справочному примеру 26.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,98 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,31-1,45 (2H, м), 1,45 (9H, c), 1,56-1,62 (2H, м), 1,83-1,90 (1H, м), 1,94-2,02 (1H, м), 2,68-2,81 (2H, м), 3,46 (3H, c), 3,75-3,77 (2H, м), 4,20 (1H, ушир.c), 4,66 (1H, c), 5,29 (2H, c), 7,15 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,17 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,25-7,28 (2H, м), 7,43 (1H, д, J=1,5 Гц), 7,46 (1H, дд, J=8,6, 1,5 Гц).

ESIMS (+): 535 [M+H]⁺.

Справочный пример 32

(S)-4-[4-(5-ацетил-2-метоксиметилоксифенилтио)-2-хлорфенил]-2-трет-бутоксикарбониламино-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 76

В атмосфере газообразного аргона соединение справочного примера 30 (525 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (8,0 мл) и затем добавляли н-бутилвиниловый эфир (0,512 мл, 3,99 ммоль), триэтиламин (0,112 мл), ацетат палладия (17,9 мг) и 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (65,8 мг), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 5,5 часов при 80°C. К реакционному раствору при охлаждении льдом добавляли хлористоводородную кислоту (1 моль/л), затем реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Органический слой 3 раза промывали насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1→1:1), с получением целевого продукта (373 мг) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,96 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,30-1,44 (2H, м), 1,44 (9H, c), 1,55-1,59 (2H, м), 1,77-1,85 (1H, м), 1,89-1,96 (1H, м), 2,50 (3H, c), 2,62-2,75 (2H, м), 3,38 (3H, c), 3,72-3,74 (2H, м), 4,21 (1H, ушир.c), 4,65 (1H, c), 5,27 (2H, c), 7,14-7,20 (3H, м), 7,30 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,83 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,87 (1H, дд, J=8,6, 2,1 Гц).

ESIMS (+): 552 [M+H]⁺.

Справочный пример 33

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-[2-хлор-4-(5-циано-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил]-1-диметоксифосфорилокси-2-пропилбутан

Химическая формула 77

Целевой продукт (356 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 31 (311 мг) по методике, аналогично справочному примеру 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,97 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,34-1,45 (2H, м), 1,45 (9H, c), 1,63-1,76 (2H, м), 1,80-1,87 (1H, м), 2,02-2,10 (1H, м), 2,70-2,78 (2H, м), 3,45 (3H, c), 3,79 (3H, д, J=11,0 Гц), 3,80 (3H, д, J=11,0 Гц), 4,13 (1H, дд, J=9,8, 4,3 Гц), 4,27 (1H, дд, J=9,8, 4,3 Гц), 4,54 (1H, ушир.c), 5,29 (2H, c), 7,14 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,17 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,25-7,27 (2H, м), 7,42 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,46 (1H, дд, J=8,6, 1,8 Гц).

ESIMS (+): 643 [M+H]⁺.

Справочный пример 34

(S)-4-[4-(5-ацетил-2-метоксиметилоксифенилтио)-2-хлорфенил]-2-трет-бутоксикарбониламино-1-диметоксифосфорилокси-2-пропилбутан

Химическая формула 78

Целевой продукт (401 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 32 (371 мг) по методике, аналогично справочному примеру 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,96 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,31-1,42 (2H, м), 1,44 (9H, c), 1,59-1,71 (2H, м), 1,74-1,82 (1H, м), 1,97-2,07 (1H, м), 2,50 (3H, c), 2,64-2,72 (2H, м), 3,38 (3H, c), 3,78 (3H, д, J=11,0 Гц), 3,79 (3H, д, J=11,0 Гц), 4,11 (1H, дд, J=9,8, 4,9 Гц), 4,25 (1H, дд, J=9,8, 4,9 Гц), 4,52 (1H, ушир.c), 5,27 (2H, c), 7,15-7,16 (2H, м), 7,19 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,30 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,84 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,88 (1H, дд, J=8,6, 2,1 Гц).

ESIMS (+): 660 [M+H]⁺.

Справочный пример 35

Моноэфир (S)-2-амино-4-[2-хлор-4-(5-циано-2-гидроксифенилтио)фенил]-2-пропилбутилфосфорной кислоты

Химическая формула 79

Целевой продукт (166 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 33 (347 мг) по методике, аналогично примеру 1.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 0,88 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,25-1,36 (2H, м), 1,48-1,61 (2H, м), 1,67-1,78 (2H, м), 2,63-2,67 (2H, м), 3,70-3,81 (2H, м), 7,07 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,14 (1H, дд, J=8,6, 1,8 Гц), 7,26 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,32 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,48 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,61 (1H, дд, J=8,6, 2,1 Гц).

HRESIMS (+): 471,09108 (вычислено для C₂₀H₂₅ClN₂O₅PS 471,09103).

Справочный пример 36

Моноэфир (S)-4-[4-(5-ацетил-2-гидроксифенилтио)-2-хлорфенил]-2-амино-2-пропилбутилфосфорной кислоты

Химическая формула 80

Целевой продукт (210 мг) получали в виде бледно-желтого твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 34 (393 мг) по методике, аналогично примеру 1.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 0,88 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,24-1,37 (2H, м), 1,51-1,62 (2H, м), 1,68-1,77 (2H, м), 2,44 (3H, c), 2,62-2,66 (2H, м), 3,76-3,85 (2H, м), 7,04 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,10 (1H, дд, J=8,6, 1,8 Гц), 7,16 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,29 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,79 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,85 (1H, дд, J=8,6, 2,1 Гц).

HRESIMS (+): 488,10680 (вычислено для C₂₁H₂₈ClNO₆PS 488,10635).

Справочный пример 37

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-2-пропилбутан-1-ол

Химическая формула 81

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}-2-пропилбутан-1-ол получали, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 6 (830 мг) и соединение справочного примера 10 (403 мг) по методике, аналогично справочному примеру 13. Затем, подвергая полученное соединение аналогичному взаимодействию, как в справочном примере 23, целевой продукт (139 мг) получали в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,96 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,35 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,38-1,42 (1H, м), 1,44 (9H, c), 1,55-1,60 (1H, м), 1,78-1,85 (1H, м), 1,88-1,98 (1H, м), 3,44 (3H, c), 3,74 (2H, кв, J=6,7 Гц), 4,15 (1H, ушир.c), 4,63 (1H, ушир.c), 5,12 (2H, c), 6,69 (1H, д, J=3,1 Гц), 7,77 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,07 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,16-7,17 (2H, м), 7,31-7,32 (1H, м).

ESIMS (+): 554 [M+H]⁺.

Справочный пример 38

(S)-2-трет-бутоксикарбониламино-4-{2-хлор-4-(5-этокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-2-пропилбутан-1-аль

Химическая формула 82

Соединение справочного примера 37 (466 мг) растворяли в диметилсульфоксиде (4,2 мл), и затем добавляли триэтиламин (1,2 мл) и комплекс триоксида серы-пиридина (669 мг), с получением реакционного раствора. Затем реакционный раствор перемешивали в течение 1,5 часов при нормальной температуре. К реакционному раствору добавляли воду со льдом, затем реакционный раствор экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=6:1), с получением целевого продукта (367 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,90 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,08-1,10 (1H, м), 1,25-1,32 (1H, м), 1,35 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,46 (9H, c), 1,59-1,68 (1H, м), 1,96-2,01 (1H, м), 2,12-2,18 (1H, м), 2,43-2,49 (2H, м), 2,57-2,62 (1H, м), 3,44 (3H, c), 3,92 (2H, кв, J=6,7 Гц), 5,12 (2H, c), 5,38 (1H, ушир.c), 6,70 (1H, д, J=3,1 Гц), 6,76 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,06-7,10 (2H, м), 7,14 (1H, дд, J=8,0, 1,8 Гц), 7,30 (1H, д, J=3,1 Гц), 9,31 (1H, c).

ESIMS (+): 552 [M+H]⁺.

Справочный пример 39

Диметил-(S)-3-трет-бутоксикарбониламино-5-{2-хлор-4-(5-этокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-3-пропил-1-пентенилфосфат

Химическая формула 83

В атмосфере газообразного аргона тетраметилметилендифосфонат (201 мг) растворяли в тетрагидрофуране (7 мл) и затем по каплям при -78°C добавляли н-бутиллитий (1,65 моль/л раствор в гексане, 0,52 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 30 минут при той же температуре. Затем раствор соединения справочного примера 38 (367 мг) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям добавляли к реакционному раствору при -78°C и перемешивали реакционный раствор в течение 2 часов при нормальной температуре. Насыщенный водный раствор хлорида аммония добавляли к реакционному раствору и экстрагировали реакционный раствор этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Безводный сульфат натрия удаляли фильтрованием, и затем растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1→1:2), с получением целевого продукта (369 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,93 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,30-1,32 (4H, м), 1,35 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,44 (9H, c), 1,67-1,77 (1H, м), 2,01-2,09 (1H, м), 2,56-2,68 (2H, м), 3,46 (3H, м), 3,72 (3H, c), 3,75 (3H, c), 3,92 (2H, кв, J=7,3 Гц), 5,12 (2H, c), 5,67 (1H, т, J=17,7 Гц), 6,69-6,77 (3H, м), 7,07 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,11 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,15 (1H, дд, J=8,0, 1,8 Гц), 7,31 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 658 [M+H]⁺.

Справочный пример 40

Диметил-(S)-3-трет-бутоксикарбониламино-5-{2-хлор-4-(5-этокси-2-метоксиметилоксифенилтио)фенил}-3-пропилпентилфосфонат

Химическая формула 84

Соединение справочного примера 39 (369 мг) растворяли в пиридине (11 мл), и затем добавляли азодикарбоксилат дикалия (1,09 г) и уксусную кислоту (0,48 мл), с получением реакционного раствора. Указанный реакционный раствор перемешивали в течение 64 часов при нормальной температуре. Реакционный раствор разбавляли толуолом. Нерастворимое вещество удаляли при использовании целита. Растворитель в фильтрате удаляли перегонкой при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=1:2), с получением целевого продукта (150 мг) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,24-1,56 (4H, м), 1,35 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,43 (9H, c), 1,69-1,77 (2H, м), 1,85-2,10 (3H, м), 2,60-2,64 (2H, м), 3,44 (3H, м), 3,73 (3H, c), 3,76 (3H, c), 3,92 (2H, кв, J=7,3 Гц), 4,27 (1H, ушир.c), 5,12 (2H, c), 6,69 (1H, д, J=3,1 Гц), 6,76 (1H, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,07 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,12 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,16 (1H, дд, J=8,0, 1,8 Гц), 7,31 (1H, д, J=1,8 Гц).

ESIMS (+): 660 [M+H]⁺.

Пример 3

(S)-3-амино-5-{2-хлор-4-(5-этокси-2-гидроксифенилтио)фенил}-3-пропилпентилфосфоновая кислота

Химическая формула 85

Целевой продукт (60 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества, подвергая взаимодействию соединение справочного примера 40 (145 мг) по методике, аналогично примеру 1.

Оптическое вращение: [α]_D ²³ +1,8 (c 0,32, MeOH).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц): δ 0,88 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,23 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,29 (2H, ушир.с), 1,54 (4H, ушир.с), 1,70-1,81 (4H, м), 2,61 (2H, ушир.с), 3,87 (2H, кв, J=6,7 Гц), 6,70 (1H, д, J=3,1 Гц), 6,80-6,88 (2H, м), 7,09-7,12 (2H, м), 7,28 (1H, д, J=8,0 Гц).

HRESIMS (+): 488,14296 (вычислено для C₂₂H₃₂ClNO₅PS 488,14273).

Результаты, подтверждающие эффективность соединений, представленных в качестве примеров, далее будут показаны в экспериментальных примерах 1, 2 и 3.

Экспериментальный пример 1

Супрессионный эффект тестируемого соединения против мобилизации клеточного кальция в клетках, экспрессирующих S1P3 рецептор человека, под действием S1P (сфингозин-1-фосфорной кислоты)

Экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO субкультивировали в питательной среде Хэма F-12, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку и 300 мкг/мл генетицина. Экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO подвергали обработке 0,25% трипсином, затем отбирали с чашки и культивировали в жидкой питательной среде Хэма F-12, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку и 300 мкг/мл генетицина. Затем экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO пересевали в 96-луночный черный планшет с прозрачным дном (BD Falcon Biocoat) при плотности 2,5×10⁴/100 мкл/лунка. Затем экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO выращивали в течение двух ночей при 37°C в среде 5% CO₂. На следующий день лунки промывали питательной средой Хэма F-12, содержащей 100 мкл 0,1% бычьего сывороточного альбумина без жирных кислот (BSA). Указанную промывку выполняли 3 раза. Питательную среду заменяли питательной средой Хэма F-12, содержащей 0,1% BSA, и затем выдерживали в условиях недостатка сыворотки в течение 6 часов в CO₂-инкубаторе при 37°C.

По истечении указанных 6 часов питательную среду удаляли. Затем добавляли 50 мкл/лунка буфера для введения Fluo3 и выращивали культуры еще в течение 1 часа. Буфер для введения Fluo3 в клетки приготавливали следующим образом. Сначала смешивали равные количества Fluo3-AM (Dojindo) и плюроника F-127 (20% раствор в ДМСО, Invitrogen). Затем смесь Fluo3-AM и плюроника F-127 добавляли в буфер Хэнка/HEPES (сбалансированный солевой раствор Хэнка, содержащий 20 мМ HEPES (pH 7,4), 0,1% BSA (без жирных кислот) и 2,5 мМ пробенецида), с получением буфера для введения Fluo3 в клетки, содержащего Fluo3-AM в конечной концентрации 4 мкМ.

После инкубирования в течение 1 часа, лунки промывали 3 раза 100 мкл буфера Хэнка/HEPES. 100 мкл того же буфера, в котором растворяли тестируемое соединение (0,125 нМ, 1,25 нМ, 12,5 нМ, 125 нМ, 1,25 мкМ) или ДМСО, добавляли в каждую лунку и затем инкубировали в течение 30 минут при 37°C в спектрофотофлуориметре для микропланшетов (FLEX Station (Molecular Device Co., Ltd.)). Затем добавляли 25 мкл S1P, приготовленного в концентрации, в 5 раз превышающей конечную концентрацию в серийном разведении (конечная концентрация 0,1 нМ, 1 нМ, 10 нМ, 100 нМ и 1 мкМ), после чего флуоресценцию Fluo3, обусловленную мобилизацией кальция, детектировали и измеряли при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны детектирования 525 нм, используя тот же прибор. На основе данных измерения, увеличение флуоресценции вычисляли путем вычитания минимальной интенсивности флуоресценции из максимальной интенсивности флуоресценции. Вычисленное увеличение флуоресценции использовали для аппроксимации кривой зависимости между концентрацией S1P и увеличением флуоресценции при использовании программы PRISM 4 (GraphPad). На основании результатов вычисляли значение EC₅₀ без обработки соединением и значение EC₅₀ после обработки соединением для каждой концентрации. На основе полученных значений проводили анализ Шильда для определения константы диссоциации Kd. Результаты показаны в таблице 1. В таблице 1 1 нмоль/л> значение Kd≥0,1 нмоль/л обозначено как "+", 0,1 нмоль/л> значение Kd≥0,01 нмоль/л обозначено как "++", и 0,01 нмоль/л> значение Kd обозначено как "+++".

Экспериментальный пример 2

Тест на мобилизацию внутриклеточного кальция под действием производного тестируемого соединения против клетки, экспрессирующей S1P3 рецептор человека

Экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO пересевали в питательную среду Хэма F-12, содержащую 10% фетальную телячью сыворотку и 300 мкг/мл генетицина. Клетки CHO, экспрессирующие S1P3 рецептор человека, подвергали обработке 0,25% трипсином, затем отбирали с чашки и культивировали в жидкой питательной среде Хэма F-12, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку и 300 мкг/мл генетицина. Затем экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO пересевали в 96-луночный черный планшет с прозрачным дном (BD Falcon Biocoat) при плотности 2,5×10⁴/100 мкл/лунка. Затем экспрессирующие S1P3 рецептор человека клетки CHO выращивали в течение двух ночей при 37°C в среде 5% CO₂. На следующий день лунки промывали питательной средой Хэма F-12, содержащей 100 мкл 0,1% бычьего сывороточного альбумина без жирных кислот (BSA). Указанную промывку выполняли 3 раза. Питательную среду заменяли питательной средой Хэма F-12, содержащей 0,1% BSA, и затем выдерживали в условиях недостатка сыворотки в течение 6 часов в CO₂-инкубаторе при 37°C.

По истечении указанных 6 часов питательную среду удаляли. Затем добавляли 50 мкл/лунка буфера для введения Fluo3 и выращивали культуры еще в течение 1 часа. Буфер для введения Fluo3 в клетки приготавливали следующим образом. Сначала смешивали равные количества Fluo3-AM (Dojindo) и плюроника F-127 (20% раствор в ДМСО, Invitrogen). Затем смесь Fluo3-AM и плюроника F-127 добавляли в буфер Хэнка/HEPES (сбалансированный солевой раствор Хэнка, содержащий 20 мМ HEPES (pH 7,4), 0,1% BSA (без жирных кислот) и 2,5 мМ пробенецида), с получением буфера для введения Fluo3 в клетки, содержащего Fluo3-AM в конечной концентрации 4 мкМ.

После инкубирования в течение 1 часа, лунки промывали 3 раза 100 мкл буфера Хэнка/HEPES. Затем добавляли 100 мкл того же буфера и инкубировали культуры в течение 15 минут при 37°C в спектрофотофлуориметре для микропланшетов (FLEX Station (Molecular Device Co., Ltd.)). Затем добавляли 25 мкл того же буфера, разведенного ДМСО, или S1P, приготовленного в концентрации, в 5 раз превышающей конечную концентрацию в серийном разведении, или тестируемого соединения (конечная концентрация 0,1 нМ, 1 нМ, 10 нМ, 100 нМ, 1 мкМ и 10 мкМ), после чего флуоресценцию Fluo3, обусловленную мобилизацией кальция, детектировали и измеряли при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны детектирования 525 нм, используя тот же прибор. На основе данных измерения, увеличение флуоресценции вычисляли путем вычитания минимальной интенсивности флуоресценции из максимальной интенсивности флуоресценции. Процентное увеличение флуоресценции (%) тестируемого соединения вычисляли на основе разности 100% между увеличением флуоресценции при добавлении растворителя и увеличением флуоресценции при действии на 10^-6М S1P. Значение EC₅₀ определяли с использованием программы PRISM (GraphPad) как действие производного тестируемого соединения на мобилизацию внутриклеточного кальция.

Значение EC₅₀ соединений примера 1 и примера 2 превышало 10 мкмоль/л (>10 мкмоль/л). Кроме того, оценка антагонистического действия S1P1 рецептора с применением способа экспериментального примера 1 показала, что значение Kd соединений примера 1 и примера 2 составляло 2,66 нмоль/л и 1,60 нмоль/л, соответственно.

Экспериментальный пример 3

Модель сепсиса при лигировании и пунктировании слепой кишки

Данную модель широко используют в качестве модели полимикробного абдоминального сепсиса, вызванного попаданием в брюшную полость бактерий из кишечника. Эксперимент проводили согласно методу, описанному в непатентном документе 9 (D. Rittirsch et al., Nature Protocols, 4, 31 (2009)).

Подготовка мышей с сепсисом в результате лигирования и пунктирования слепой кишки (CLP)

Использовали крыс Wistar (Charles River Laboratories, Japan Inc., самец 8 недель). Брюшную полость крыс вскрывали под анестезией изофлураном и выводили аппендикс. Аппендикс лигировали стерилизованной шелковой нитью и на конце аппендикса делали 10 сквозных отверстий, используя иглу 18 G для шприца. После обработки, аппендикс возвращали в организм и накладывали швы на разрез. Затем подкожно вводили физиологический солевой раствор в дозе 30 мл/кг. После этого крыс возвращали в их клетки и наблюдали в течение 7 дней для определения уровня выживаемости.

Способ введения тестируемого соединения

Тестируемое соединение вводили непрерывно через катетер, введенный в бедренную вену, в дозе 0,1 мг/кг/час. Введение тестируемого соединения начинали через 1 час после завершения процедуры CLP.

Для группы, которой вводили соединение примера 2, был обнаружен статистически значимый эффект (действие повышения длительности выживаемости, логарифмический ранговый критерий p<0,01), который перемещал кривую выживаемости вправо по сравнению с группой введения среды. Кроме того, хотя в группе введения среды все тестируемые субъекты погибали в течение 1 дня, для группы, которой вводили соединение примера 2, обнаруживали действие увеличения уровня выживаемости, при этом 25% тестируемых субъектов выживали через 3 дня, тогда как 12,5% выживали даже через 7 дней. Данные результаты указывают на то, что соединение примера 2 эффективно против сепсиса.

На основании вышеприведенных результатов ясно, что, несмотря на демонстрацию превосходного антагонистического действия против S1P3 рецептора человека, соединение настоящего изобретения проявляет более слабое или не проявляет какого-либо антагонистического действия или агонистического действия против рецептора S1P1 по сравнению с антагонистическим действием в отношении S1P3 рецептора человека. Кроме того, также было подтверждено, что соединение настоящего изобретения демонстрирует превосходное ингибирующее действие против сепсиса.

Промышленная применимость

Согласно настоящему изобретению может быть предложено производное дифенилсульфида, обладающее превосходной S1P3 антагонистической активностью и S1P3 селективностью. Кроме того, производное дифенилсульфида согласно настоящему изобретению может стабильно применяться в качестве лекарственного средства, поскольку оно вызывает слабый или не вызывает какого-либо гемолиза, повреждения ткани или успокоительного действия ЦНС. Кроме того, производное дифенилсульфида согласно настоящему изобретению стабильно в водном растворе. Соединение согласно настоящему изобретению, обладающее этими превосходными свойствами, эффективно в качестве профилактического или терапевтического лекарственного средства при сужении дыхательных путей, бронхиальной астме, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), эмфиземе легких, стенозе трахеи, диффузном панбронхиолите, бронхите в результате инфекции, болезни соединительной ткани или трансплантации, диффузном гамартоангиомиоматозе легких, респираторном дистресс-синдроме взрослых (РДСВ), интерстициальном пневмоните, раке легкого, гиперчувствительной пневмонии, идиопатической интерстициальной пневмонии, фиброзе легких, сепсисе, цитокиновом шторме при инфекции, вызванной вирусом гриппа или респираторным синцитиальным вирусом (RSV), артериосклерозе, гипертрофии интимы кровеносных сосудов, солидных опухолях, диабетической ретинопатии, суставном ревматизме, остановке сердца, ишемических реперфузионных нарушениях, спазмах кровеносных сосудов мозга после субарахноидального кровоизлияния, стенокардии или инфаркте миокарда, вызванном спазмами коронарных сосудов, гломерулонефрите, тромбозе, болезни легких, вызванной отеком легких, такой как РДСВ, сердечной аритмии, болезни глаз, повышенном внутриглазном давлении, глаукоме, глаукоматозной ретинопатии, оптической нейропатии и дегенерации желтого пятна.