Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОСТЕОАРТРОЗА У ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарной артрологии и ортопедии, и может быть использовано при лечении животных с остеоартрозом коленного и других суставов.

Известен способ лечения остеоартрозов у животных с применением нестероидных противовоспалительных препаратов-ингибиторов циклооксигеназы (норокарп, римадил) (П.Р. Пульняшенко. Некоторые осложнения со стороны желудочно-кишечного тракта у мелких домашних животных при лечении болевого синдрома с использованием нестороидных противовоспалительных препаратов и глюкокортикоидов / Пульняшенко П.Р. // Ветеринария Кубани. - №3. - 2007. - С.26-27). При данном способе блокируется циклооксигеназа в цикле арахидоновой кислоты, оказывается анальгезирующий и противовоспалительный эффект в пораженном суставе.

Однако этот способ не оказывает прямого хондропротективного действия, а также имеет ряд неблагоприятных для жизни побочных эффектов в виде гастропатий, что значительно снижает возможности его применения у животных.

Известен также способ лечения, при котором в пораженный сустав (или внутривенно) вводят препараты гиалуроновой кислоты (хионат) (Динамика изменения синовиальной жидкости, суставного хряща и опорно-двигательной функции конечности при лечении вторичного остеоартроза крупных суставов у собак препаратом Хионат / С.А. Ягников, Я.А. Кулешова, М.М. Захарова, С.Г. Роденска-Лоповок // Ветеринарная клиника. - №12(31). - 2004. - С.20-24). Препарат призван оказать хондропротективное, болеутоляющее действие.

Недостатками этого способа являются длительность курса лечения, высокая стоимость и слабый положительный эффект.

Известен «Способ лечения остеоартроза коленного сустава» (Патент RU №2455028, 2012 г., опубликован 10.09.2007). При данном способе за 1-2 часа перед манипуляцией производят забор крови из кубитальной вены в специальные одноразовые пластиковые мешки гемаконы емкостью 450 мл, содержащие 63 мл антикоагулянта на основе цитрата, содержание тромбоцитов в которой составляет от 162 до 358 тыс./мкл (в среднем 256 тыс./мкл). Кровь центрифугируют на роторной центрифуге PC 6-7 минут в режиме 2500 об/мин. Полученную в супернатанте аутоплазму подвергают второму центрифугированию в течение 30 мин в режиме 3000 об/мин. После чего бедную тромбоцитами аутоплазму удаляют, с извлечением 15-20 мл богатой тромбоцитами аутоплазмы. Содержание тромбоцитов в полученной аутоплазме составляет от 725 до 3029 тыс./мкл (в среднем 1354 тыс./мкл). Полученную эритроцитарную массу возвращают в кровяное русло. Полученную богатую тромбоцитами аутоплазму смешивают с 0,25% раствором CaCl₂ в соотношении 3:1. Наружным доступом, после местной анестезии кожи, производят пункцию коленного сустава с введением в полость сустава 10 мл богатой тромбоцитами аутоплазмы. Затем 4-5 мл богатой тромбоцитами аутоплазмы вводят в наиболее болезненные зоны параартикулярных тканей, которые определяют при пальпации. Описанную процедуру осуществляют 2 раза с интервалом 5-7 дней.

Недостатками этого способа является то, что он относится к гуманитарной медицине (используется для лечения людей) и не предназначен для лечения животных. Способ отличается сложностью выполнения и предполагает значительный объем забора крови, необходимой для получения плазмы, что практически невозможно получить у мелких животных. Необходимость введения аутоплазмы в сустав и окружающие его ткани сопряжено с сильной болью и риском развития осложнений в виде отеков, инфильтратов, абсцессов, а также длительное двухэтапное центрифугирование ограничивает применение способа в ветеринарии.

Технической задачей изобретения является создание способа лечения остеоартроза у животных за счет упрощения способа получения плазмы, уменьшения объема крови, необходимой для получения плазмы, а также за счет щадящего метода введения.

Техническая задача решается тем, что в известном способе лечения остеоартроза у животных воздействием на пораженный сустав обогащенной тромбоцитами аутоплазмой, полученной до процедуры путем забора аутокрови, ее центрифугированием, активацией обогащенной тромбоцитами плазмы раствором CaCl₂ и введением в полость сустава, забор крови осуществляется за 15-20 минут до начала процедуры в количестве 10-15 мл, центрифугирование проводится одноэтапно при скорости 1000 об/мин в течение 10 минут, объем полученной обогащенной тромбоцитами аутоплазмы составляет 0,5-1 мл с концентрацией тромбоцитов от 1000 до 1200 тыс./мкл, активация осуществляется 10% раствором CaCl₂ в соотношении 1:10, количество процедур на курс лечения составляет 3-4 с интервалом 7 или 10 дней.

На фиг. 1 представлена васкуляризация синовиальной оболочки при проведении диагностической артроскопии до лечения.

На фиг. 2 представлены фрагменты фибриновых нитей, неровности и дефекты суставных поверхностей при проведении диагностической артроскопии до лечения.

На фиг. 3 представлены гипертрофированные синовиальные ворсины, обнаруженные при проведении диагностической артроскопии до лечения.

На фиг. 4 представлены суставная поверхность и синовиальная оболочка коленного сустава при проведении диагностической артроскопии после лечения.

На фиг. 5 представлено отсутствие васкуляризации синовиальных ворсин при проведении диагностической артроскопии после лечения.

Способ осуществляется следующим образом.

Для получения обогащенной тромбоцитами аутоплазмы за 15-20 минут до процедуры у животного выполняют аспирацию периферической крови из вены в количестве 10-15 мл в пробирку с цитратом натрия. Пробирку центрифугируют на центрифуге при скорости 1000 об/мин в течение 10 минут. После центрифугирования из пробирки отбирают нижний слой плазмы, обогащенной тромбоцитами, с концентрацией клеток 1000-1200 тыс/мкл. Полученную аутоплазму активируют путем смешивания с 10% раствором CaCl₂ в соотношении 1:10. После проведения артроцентеза в полость сустава вводится аутоплазма в количестве от 0,5 до 1 мл. Процедуру выполняют 3-4 раза с интервалом 5-7 дней.

Клинический пример 1.

Собака, сука, питбультерьер, 4 года. Первое обращение за ветеринарной помощью - 20.09.13. Жалобы владельца на хромоту правой тазовой конечности опирающего типа в течение продолжительного периода времени (3 месяца). Травмам не подвергалась. Клиническим осмотром выявлена незначительная атрофия бедренной группы мышц, при пальпации - незначительная болезненность, крепитация, тугоподвижность коленного сустава. Выполнено рентгенографическое исследование, при котором отмечено неравномерное сужение суставной щели, склероз субхондральной кости, затемнение пространства между коленной чашкой и дистальным эпифизом бедренной кости. Также была выполнена диагностическая артроскопия, при которой обнаружились следующие изменения: хондромаляция II степени (фиг.1), генерализованный синовит (фиг. 3), фрагменты фибриновых нитей в полости сустава (фиг.2). На основании комплексного обследования был поставлен диагноз: остеоартроз II стадии правого коленного сустава. 23.09.13 начато лечение. Для этого у животного был произведен забор крови в количестве 10 мл в пробирку с цитратом натрия. Пробирка центрифугировалась на центрифуге ОПН-8 в течение 10 минут при скорости 1000 об/мин. После этого из пробирки в шприц отобрали нижний слой плазмы, обогащенной тромбоцитами, в количестве 0,7 мл.

Плазму активировали 10% раствором CaCl₂ в соотношении 1:10. Процедуру артроцентеза проводили без релаксации. Животное уложили набок таким образом, чтобы пунктируемый сустав находился сверху, параллельно поверхности стола. Пораженный сустав согнули под углом 90°. Приготовили место пункции - удалили шерсть, обработали кожу 96% спиртом. Введение иглы в сустав провели у медиального края связки коленной чашки между коленной чашкой и местом прикрепления связки к шероховатости болыпеберцовой кости. Иглу ввели под прямым углом через кожу, продвинув в вентрокаудальном направлении, при этом отметили «провал иглы» и отсутствие беспокойства животного, что подтверждает правильное положение иглы в полости сустава. После пункции ввели активированную обогащенную тромбоцитами аутоплазму. 30.09.13 при повторном осмотре было отмечено незначительное уменьшение хромоты пораженной конечности. Процедуру интраартикулярного введения плазмы, обогащенной тромбоцитами, повторили 10.10.13. При клиническом осмотре отмечено значительное уменьшение хромоты, увеличение амплитуды движений в коленном суставе и отсутствие крепитации. Восстановился объем бедренной группы мышц. Владельцами отмечено увеличение двигательной активности животного. 20.10.13 проведена последняя процедура интраартикулярного введения плазмы, обогащенной тромбоцитами. 30.10.10 для осуществления контроля эффективности лечения была проведена повторная артроскопия. При этом было отмечено уменьшение количества фибриновых нитей в полости сустава, уменьшение синовита (фиг.4), хондромаляция I степени (фиг.5). Данные повторной артроскопии подтверждают значительный положительный эффект способа лечения остеоартроза. Повторный осмотр животного проведен через 4 месяца: полное отсутствие хромоты, высокая двигательная активность.

Клинический пример 2.

Собака, кобель, 11 месяцев, кокер-спаниель. Владелец обратился за ветеринарной помощью 22.11.13 с жалобами на хромоту левой грудной конечности у животного. При клиническом осмотре выявлено наличие тугоподвижности, болезненности при пальпации левого запястного сустава. На рентгенограмме обнаружены изменения, характерные для остеоартроза II стадии, на основании чего поставлен диагноз - остеоартроз лучезапястного сустава. 24.11.13 у животного выполнен забор крови в количестве 10 мл в пробирку с цитратом натрия. Пробирка центрифугировалась на центрифуге ОПН-8 в течение 10 минут при скорости 1000 об/мин. После этого из пробирки в шприц отобрали нижний слой плазмы, обогащенной тромбоцитами, в количестве 0,5 мл. Плазму активировали 10% раствором CaCl₂ в соотношении 1:10. Интраартикулярное введение аутоплазмы проводили без релаксации. Животное уложили в дорзо-вентральное положение, чтобы пунктируемый сустав находился сверху, параллельно поверхности стола. Лучезапястный сустав левой конечности согнули под углом 90°, приготовили место пункции. Прокол выполнили, отступив 3-5 мм дистально относительно края сустава лучевой кости у латерального края сухожилия лучевого разгибателя запястья. Иглу продвигали вперед под прямым углом в медиапальмарном направлении и ввели обогащенную тромбоцитами плазму. 4.12.13 проведен повторный осмотр животного, клинических изменений отмечено не было, процедуру интраартикулярного введения аутоплазмы повторили. 14.12.13 при осмотре животного было отмечено незначительное уменьшение хромоты. Процедуру повторили еще дважды с интервалом 7 дней. Повторное обследование спустя 2 месяца выявило полное отсутствие хромоты и высокую двигательную активность.

Положительный эффект данного способа лечения обусловлен тем, что при введении в полость сустава плазмы, обогащенной тромбоцитами, происходит высвобождение цитокиновых факторов роста, таких как PDGF (фактор роста, синтезируемый тромбоцитами), TGF-J3 (бета-трансформирующий фактор роста), VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), EGF (эпителиальный фактор роста), IGF (инсулино-подобный фактор роста). Вышеуказанные факторы - биологические агенты - вызывают миграцию и пролиферацию мезенхимальных клеток-предшественников, стимулируют остеогенез, неоангиогенез и способствуют хондрогенезу. Восстановление поврежденного хряща и субхондральной кости клинически проявляется уменьшением или полным прекращением хромоты на длительное время, а отсутствие побочных эффектов и простота метода делают его возможным применять для лечения остеоартроза у животных.

Описанный способ лечения остеоартроза был применен у 11 животных с остеоартрозом II-IV степени коленного, лучезапястного, тазобедренного суставов. У всех животных в короткий период времени удалось добиться значительного уменьшения или полного прекращения хромоты на длительный период времени (от 4 до 6 месяцев). Побочных эффектов и осложнений при применении способа отмечено не было.