Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВЫСОКОДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ЭНДОМЕТРИОИДНОЙ АДЕНОКАРЦИНОМЫ ТЕЛА МАТКИ У ПАЦИЕНТОК ПЕРИМЕНОПАУЗАЛЬНОГО ПЕРИОДА

Список сокращений:

ПГЭ - простая гиперплазия эндометрия

КГЭ - комплексная гиперплазия эндометрия без атипии

КАГЭ - комплексная атипическая гиперплазия эндометрия с атипией

ЭИН - эндометриальная интраэпителиальная неоплазия

ЭАК - эндометриоидная аденокарцинома

MGMT- O6-метилгуанин-ДНК метилтрансфераза

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и патологической анатомии, предназначено для дифференциальной диагностики различных форм ГЭ, ЭИН и эндометриоидной адеденокарциномы у пациенток перименопаузального периода.

Изучение патогенеза различных форм гиперплазии эндометрия (ГЭ), ЭИН и ЭАК у женщин перименопаузального периода является одной из актуальных задач, что обусловлено высокой частотой рецидивирования процесса и возможностью малигнизации, которая происходит в 29% случаев [1].

По данным литературы в 40% и более случаев выявлен рак эндометрия в базальных слоях эндометрия при дооперационном диагнозе атипической гиперплазии эндометрия по результатам исследования соскобов эндометрия [2]. В настоящее время установлено, что в ходе канцерогенеза развиваются не только генетические, но и эпигенетические нарушения, важнейшими из которых является метилирование генов [3]. Метилирование ДНК - это процесс энзиматического присоединения метальной группы к основаниям в составе ДНК. Аномальное метилирование генов-супрессоров опухолевого роста зачастую обнаруживается в предраковых состояниях эндометрия [3]. Высокая частота метилирования генов-супрессоров при гиперплазии эндометрия с атипией и при раке эндометрия может служить маркером ранних стадий неопластического процесса не только в эндометрии, но и в других тканях [4, 5]. Другим приоритетным направлением диагностики и таргетной терапии гиперпластических и предраковых процессов эндометрия является эффективный мониторинг показателей межклеточных контактов. Онкомаркер эзрин - белок, принадлежащий к семейству трансмембранных гликопротеинов, ответственных за межклеточные связи между эпителиальными клетками, эпителиальными и стромальными клетками.

Эзрин относится к новым независимым прогностическим маркерам в развитии ЭАК [6].

Задача изобретения - повысить эффективность дифференциальной диагностики и прогнозирования развития рака эндометрия при различных формах ГЭ и ЭИН на основании иммуногистохимического исследования процесса метилирования и экспрессии эзрина в эндометрии.

Поставленная задача решается путем иммуногистохимического изучения процессов метилирования и экспрессии эзрина в эндометрии на разных стадиях опухолевой прогрессии, что позволит обосновать дифференцированный подход к выбору тактики лечения больных с различными формами ГЭ и ЭИН у женщин перименопаузального периода. Практически способ осуществляется следующим образом:

Морфологические исследования выполняли на операционном материале: 9 удаленных маток (экстирпация матки с придатками) и 26 соскобах эндометрия. Материал фиксировался в 10% забуференном формалине, заливался в парафин. Серийные срезы толщиной 4 мкн окрашивались гематоксилином и эозином, а также использовались для иммуногистохимических реакций.

Иммуногистохимическое исследование

Демаскировка антигенов проводилась в ретривере с цитратным буфером с ph=6,0, при температуре - 120C° в течение 20 минут. Для определения экспресии эзрина применялись кроличьи моноклональные антитела, фирмы Cell. Signaling, в разведении 1:100. Разводили раствором для разведения антител Emerald antibody diluent (фирма Cell MARQUE). Для изучения совокупного уровня метилирования использовались кроличьи моноклональные антитела к MGMT (фирма EPITOMICS) в разведении 1:100. Для определения экспрессии Ki-67 и PTEN применялись моноклональные антитела к антигену Ki-67 (Dako, в разведение 1:100) и PTEN (Dako, в разведение 1:100). Ставились положительные и отрицательные контроли. Результаты реакций оценивались полуколичественным методом с рассчетом баллов по количеству окрашенных клеток одного типа: 2 балла - до 20% положительных клеток, 4 балла - более 20% но менее 40%, 6 баллов - более и равное 40%. Экспрессия Ki-67 подсчитывалась в процентах на 3000 клеток одного типа.

Результаты исследования

Основные гистологические признаки простой ГЭ без атипии [Рис. 1, а] сводятся к увеличению числа желез и изменению их формы, незначительному увеличению соотношения стромального и железистого компонентов при отсутствии цитологической атипии и низкой экспрессии Ki67 как в паренхиме, так и в строме, а также сохраненная экспрессия PTEN. При КГЭ [Рис. 1, б] характерна более выраженная пролиферация и тесное расположение желез, имеющих сложную архитектонику с почкообразными и папиллярными разрастаниями, а также увеличение железисто-стромального соотношения и экспрессии Ki67 в паренхиме и сохраненная экспрессия PTEN. При этой форме ГЭ отмечаются эпителиальная стратификация и отсутствие клеточной атипии. КАГЭ [Рис. 1, в] характеризуется цитологической атипией, а именно отсутствием полярности, увеличением и стратификацией ядер, изменением их формы, увеличением ядерно-цитоплазматического соотношения, нерегулярными комплексами хроматина, повышенной экспрессией Ki67 и незначительным уменьшением экспрессии PTEN в отдельных эпителиальных клетках. ЭИН [Рис. 1, в, г, д] выявляется в виде очага 2-3 мм в диаметре со скученными железами, малым содержанием стромы (<50%), атипией эпителиальных клеток, относительно высоким Ki67 и потерей экспрессии PTEN [7]. ЭАК [Рис. 1, е] характеризуется выраженной атипией клеток и ядер эпителиальных элементов в пределах предшествующих структур без нарушения целостности базальной мембраны. Отличительными особенностями ЭАК служат отсутствие инвазии стромы опухолевыми клетками, сохранность предшествующих структур эндометрия и базальных желез, наличие воспалительной инфильтрации опухолево-измененного эпителиального пласта при отсутствии ее в окружающем эндометрии [7].

Иммуногистохимическое исследование О6-метилгуанин-ДНК метилтрансферазы (MGMT) (кодирует белок, отвечающий за восстановление ДНК после различных повреждений с помощью метилирования азотистых оснований)

При определении профиля процесса метилирования иммуногистохимическим методом MGMT выявлен в виде гранул коричневого цвета в ядрах и в цитоплазме эпителиальных клеток, а также в клетках стромы при КАГЭ и ЭИН [Рис. 2, Рис. 3, а]. В контрольной группе (нормальный эндометрий в фазе пролиферации) продукт реакции выявлен в отдельных эпителиальных клетках в следовых количествах, 0 баллов [Рис. 2, а]. В случаях простой ГЭ гранулы коричневого цвета выявлялись в отдельных эпителиальных клетках, отмечался низкий уровень фермента, который колебался в пределах 2-4 баллов и в среднем составил 2,67±1,56 [Рис. 2, б]. При КГЭ без атипии продукт реакции выявлялся в группах эпителиальных клеток и локализовался в ядрах и цитоплазме. Получены умеренные и высокие цифры метилирования от 2 до 6 баллов, в среднем - 3,56±1,94 [Рис. 2, в]. При КАГЭ и ЭИН продукт реакции выявлялся в ядрах и цитоплазме во всех эпителиальных и стромальных клетках [Рис. 2, г, д], получены умеренные и высокие цифры метилирования от 4 до 6 баллов, в среднем - 4,80±1,79. В клетках ЭАК продукт реакции выявлен в отдельных клетках в следовых количествах, отмечалось резко слабое метилирование или отсутствие, цифры метилирования не превышали 2 баллов и в среднем составили 1,0±1,5 [Рис. 2, е].

Следовательно, нами установлено, что метилирование генов под действием MGMT возрастает при ПГЭ и КГЭ и достигает своего апогея на стадии КАГЭ и ЭИН, снижаясь при ЭАК.

Иммуногистохимическое исследование эзрина

При иммуногистохимическом исследовании эзрин выявлялся в железистом и покровном эпителии неизмененного эндометрия в апикальной части клеток. Однако при развитии патологических процессов наблюдалось появление эзрина и в цитоплазме клеток. Соотношения апикальной и цитоплазматической локализации эзрина варьировало при разных видах патологии эндометрия [Рис. 3б, 3в]. В нормальном эндометрии эзрин выявлялся в апикальной части эпителиальных клеток эндометрия, определялась высокая экспрессия, составляя от 4 до 6 баллов, среднее значение составило 4,33±1,87 [Рис. 4, а]. В ПГЭ преобладала апикальная экспрессия эзрина от 4 до 6 баллов, среднее значение - 4,33±1,87, однако появлялись единичные клетки с продуктами реакции в цитоплазме, экспрессия эзрина колебалась от 0 до 2 баллов и в среднем составила 1,20±1,10 [Рис. 4, б]. При КГЭ без атипии преобладала цитоплазматическая экспрессия эзрина, колеблющаяся от 3 до 5 баллов, среднее значение - 3,5±1,94 [Рис. 4, в], единичные клетки с продуктами реакции сохранились апикально, экспрессия эзрина от 2 до 2 баллов, среднее значение - 1,78±1,20; В случаях КАГЭ и ЭИН преобладала высокая экспрессия эзрина цитоплазматически, от 4 до 6 баллов и среднее значение 4,33±1,8; апикально продукт реакции выявлялся в единичных клетках от 0 до 2 баллов, в среднем экспрессия эзрина составила 1,20±1,10 [Рис. 4, г, Рис. 4, д]. Эзрин в раковых клетках ЭАК экспрессировал преимущественно цитоплазматически, колебался от 5 до 6 баллов, среднее значение - 5,5±0,4 [Рис. 4, е], а в апикальной части клеток ЭАК эзрин не экспрессировал, лишь в одном очаге была обнаружена слабая экспрессия маркера, которая составила от 0 до 1, среднее значение - 0,50±1,0.

Таким образом, особенности экспрессии эзрина связаны с тем, что по мере прогрессии заболевания от ПГЭ до ЭАК происходит потеря его апикальной специфической локализации, отражающей функциональную активность и, напротив, свободное накопление эзрина наблюдается в цитоплазме клеток. Изменение локализации эзрина вероятно связано с нарушением межклеточных контактов, максимальное проявление которого происходит в ЭАК. Резюмируя полученные данные исследования, следует отметить, что по мере прогрессии ГЭ до КАГЭ и ЭИН теряются межклеточные контакты и нарастает метилирование. Максимальное значение метилирования обнаруживается до развития инвазивного рака эндометрия, что вероятно согласуется с данными о значении в канцерогенезе метилирования преимущественно генов супрессоров рака [5]. Снижение метилирования в ЭАК может отражать процессы автономного роста злокачественной опухоли. Нами было установлено, что при ПГЭ, в ЭИН и КАГЭ эзрин может локализоваться как в апикальных клетках, так и в цитоплазматических клетках. Апикальная локализация связана с участием эзрина в формировании межэпителиальных контактов [9]. Именно апикальная локализация эзрина теряется в процессе канцерогенеза. Цитоплазматическая локализация не несет функциональную нагрузку.

Напротив, она может свидетельствовать о нарушении транспорта эзрина в зону межэпителиальных контактов или за счет дефектов транспортных систем, или самого эзрина. Наши данные в целом совпадают с данными литературы [9, 10], однако ни в одной из работ не анализировались особенности локализации эзрина.

Клинический пример

1) Пациентка Н., 48 лет, обратилась в онкологический центр г. Астаны в 2012 году с жалобами на кровянистые выделения из половых путей в течение трех недель. Клинический диагноз: Дисфункциональное маточное кровотечение в перименопаузальном периоде. Гиперплазия эндометрия. Заболевания у ближайших родственников: у бабушки - сахарный диабет. Соматические заболевания: болезнь Боткина в детстве, хронический бронхит, артериальная гипертензия 1 степени, риск 1, ожирение 2 степени, диффузно-кистозная мастопатия. Гинекологические заболевания: хронический аднексит. Гинекологические операции: искусственный аборт (4 раза).

Менструации с 11 лет, установились сразу, регулярные, по 4 дня, через 28 дней, умеренные, безболезненные. Последние менструации точно не помнит, так как в течение 5 мес отмечала нарушение менструального цикла. Репродуктивная функция: общее количество беременностей - 6, из них родов - 2, аборт - 4. Половая жизнь с 19 лет. Гинекологический осмотр: наружные половые органы развиты правильно. Оволосение по женскому типу. Шейка матки цилиндрической формы, чистая. Тело матки не увеличено, плотное, подвижное, безболезненное при пальпации. Придатки матки с обеих сторон не увеличены, безболезненны при пальпации. Своды глубокие, безболезненные при пальпации. Выделения - кровянистые, умеренные.

Данные УЗИ органов малого таза (от 24.12.2012): тело матки размерами 3,8*4,0*3,8 см. Придатки матки без патологии. М-ЭХО - 13 см. 24.12.12 Операция: Раздельное диагностическое выскабливание эндоцервикса и слизистой полости матки.

Результаты патоморфологического исследования №4167/38760-38761 - атипическая железистая гиперплазия эндометрия.

Через 4 дня после выявленной атипической гиперплазии эндометрия произведено оперативное лечение в объеме: экстирпация матки с обоими придатками, дренирование брюшной полости.

Гистологическое заключение №354/2644-2665: высокодифференцированная эндометриоидная аденокарцинома, локализуется в пределах базального слоя эндометрия, не врастает в миометрий.

Иммуногистохимическое исследование экспрессии эзрина и MGMT в соскобе и в операционном материале: При определении профиля процесса метилирования методом исследования MGM выявлено, что продукт реакции определялся в отдельных клетках в следовых количествах, отмечалось резко слабое метилирование, не превышающее 2 баллов вплоть до отсутствия в отдельных комплексах атипичных клеток [см. Рис. 2, е]. Эзрин в раковых клетках ЭАК экспрессировал преимущественно цитоплазматически и составил 5 баллов [см. Рис. 4, е], а в апикальной части клеток ЭАК эзрин не экспрессировался. Следовательно, уже по значительному снижению метилирование генов под действием MGMT и цитоплазматической экспрессии эзрина при отсутствии апикальной можно было заподозрить о прогрессировании КАГ в карциному у данной пациентки.

2) Пациентка М., 51 года, обратилась в городскую больницу №1 г. Астана в 2011 году с жалобами на кровянистые выделения из половых путей в течение 15 дней. Клинический диагноз: Рецедивирующее маточное кровотечение в перименопаузальном периоде. Гиперплазия эндометрия. Заболевания у ближайших родственников: рак яичника у бабушки.

Соматические заболевания: артериальная гипертензия 2 степени, риск 1, ожирение 1 степени, остеохондроз позвоночника. Гинекологические заболевания: эрозия шейки матки (диатермокоагуляция в 1996 г), миома матки с 2005 г. Гинекологические операции: в 2010 г. - гистероскопия, раздельное диагностическое выскабливание эндоцервикса и слизистой полости матки. Результаты патоморфологического исследования: железисто-кистозная гиперплазия эндометрия. Менструации с 13 лет, установились сразу, регулярные, по 5-6 дней, через 30 дней, умеренные, безболезненные. Последние менструации - 6 мес назад. Репродуктивная функция: общее количество беременностей - 3 (родов - 3). Половая жизнь с 20 лет. Гинекологический осмотр: наружные половые органы развиты правильно. Оволосение по женскому типу. Шейка матки цилиндрической формы, чистая. Тело матки увеличено до 5 недель, плотное, подвижное, безболезненное при пальпации. Придатки матки с обеих сторон не увеличены, безболезненны при пальпации. Своды глубокие, безболезненные при пальпации. Выделения - кровянистые, умеренные. Данные УЗИ органов малого таза (от 12.01.2011): тело матки размерами 4,5*5,0*4,8 см. По передней стенке субсерозно определяется узел, д - 1,5×2 см. Придатки матки без патологии. М-ЭХО - 13 см. 12.01.11 Операция: Гистероскопия, раздельное диагностическое выскабливание эндоцервикса и слизистой полости матки. Результаты патоморфологического исследования №315 - комплексная гиперплазия эндометрия с атипией. Через 1 неделю после выявленной атипической гиперплазии эндометрия произведено оперативное лечение в объеме: экстирпация матки с обоими придатками, дренирование брюшной полости. Гистологическое заключение №354/2644-2665: высокодифференцированная эндометриоидная аденокарцинома, локализуется в пределах базального эндометрия, не врастает в миометрий. Иммуногистохимическое исследование экспрессии эзрина и MGMT в соскобе и в операционном материале. При определении профиля процесса метилирования методом исследования MGM выявлено, что продукт реакции определялся в отдельных клетках в следовых количествах, отмечалось резко слабое метилирование, не превышающее 2 балла [см. Рис. 2, е]. Эзрин в раковых клетках ЭАК экспрессировал преимущественно цитоплазматически и составил 6 баллов [см. Рис. 4, е], а в апикальной части клеток ЭАК эзрин не экспрессировал.

3) Пациентка С., 47 лет, обратилась в БСМП г. Астаны в 2012 году с жалобами на кровянистые выделения из половых путей в течение 2-х недель. Клинический диагноз: Дисфункциональное маточное кровотечение в перименопаузальном периоде. Гиперплазия эндометрия. Соматические заболевания: хронический гастрит. Гинекологические заболевания: хронический сальпингоофорит. Гинекологические операции: отрицает. Менструации с 12 лет, установились сразу, регулярные, по 3-4 дня, через 28 дней, умеренные, безболезненные. Последние менструации - в течение 3-х месяцев нарушение менструального цикла, дату последней менструации точно не помнит. Репродуктивная функция: общее количество беременностей - 4, из них родов - 2, аборт - 2. Половая жизнь с 21 года. Гинекологический осмотр: наружные половые органы развиты правильно. Оволосение по женскому типу. Шейка матки цилиндрической формы, чистая.

Тело матки не увеличено, плотное, подвижное, безболезненное при пальпации. Придатки матки с обеих сторон не увеличены, безболезненны при пальпации. Своды глубокие, безболезненные при пальпации. Выделения - кровянистые, умеренные. Данные УЗИ органов малого таза (от 25.04.2012): тело матки размерами 3,8*4,0*3,8 см. Придатки матки без патологии. М-ЭХО - 13,5 см. 25.04.12 Операция: Гистероскопия. Раздельное диагностическое выскабливание эндоцервикса и слизистой полости матки. Результаты патоморфологического исследования №5510-4 - атипическая железистая гиперплазия эндометрия. Через 1 неделю после выявленной атипической гиперплазии эндометрия произведено оперативное лечение в объеме: экстирпация матки с обоими придатками, дренирование брюшной полости.

Гистологическое заключение №119-1: Комплексная гиперплазия с атипией эндометрия.

Иммуногистохимическое исследование экспрессии эзрина и MGMT в соскобе и в операционном материале: При КАГЭ MGMT выявлялся в ядрах и цитоплазме во всех эпителиальных и стромальных клетках [см. Рис. 2, г], получены высокие цифры метилирования, которые составили 6 баллов. Экспрессия эзрина преобладала цитоплазматически и составила 4 балла; апикально продукт реакции выявлялся в единичных клетках 2 балла [Рис. 4, г].

4) Пациентка Р., 46 лет, обратилась в АО «Республиканский научный центр неотложной медицинской помощи» г. Астаны в 2011 году с жалобами на кровянистые выделения из половых путей в течение 3-х недель. Клинический диагноз: Дисфункциональное маточное кровотечение в перименопаузальном периоде. Гиперплазия эндометрия. Заболевания у ближайших родственников: рак желудка у дедушки. Соматические заболевания: артериальная гипертензия 2 степень, риск 2. Гинекологические заболевания: хронический эндометрит. Гинекологические операции: отрицает. Менструации с 14 лет, установились сразу, регулярные, по 5-6 дней, через 27 дней, умеренные, безболезненные. Последние менструации - в течение 2-х месяцев нарушение менструального цикла. Репродуктивная функция: общее количество беременностей - 0, из них родов - 0, аборт - 0. Половая жизнь с 22 лет. Гинекологический осмотр: наружные половые органы развиты правильно. Оволосение по женскому типу. Шейка матки цилиндрической формы, чистая. Тело матки не увеличено, плотное, подвижное, безболезненное при пальпации. Придатки матки с обеих сторон не увеличены, безболезненны при пальпации. Своды глубокие, безболезненные при пальпации. Выделения - кровянистые, умеренные. Данные УЗИ органов малого таза (от 25.04.2012): тело матки размерами 3,9*4,0*3,8 см. Придатки матки без патологии. М-ЭХО - 14 см. 25.04.12 Операция: Гистероскопия. Раздельное диагностическое выскабливание эндоцервикса и слизистой полости матки. Результаты патоморфологического исследования №5341-60 - диффузная атипическая гиперплазия эндометрия. Через 1 неделю после выявленной атипической гиперплазии эндометрия произведено оперативное лечение в объеме экстирпации матки с обоими придатками, дренирование брюшной полости.

Гистологическое заключение №115-6: комплексная гиперплазия с атипией эндометрия.

Иммуногистохимическое исследование экспрессии эзрина и MGMT в соскобе и в операционном материале: При КАГЭ MGMT выявлялся в ядрах и цитоплазме во всех эпителиальных и стромальных клетках [см. Рис. 2, д], получены высокие цифры метилирования - 6 баллов. Экспрессия эзрина преобладала цитоплазматически и составила 4 балла; апикально продукт реакции выявлялся в единичных клетках и составил 2 балла [Рис. 4, д].

Источники информации

1. Holinke C.F., Ferenczy A., et al. Estradiol-induced hyperplasia in en dome-trial biopsies from women on hormone replacement therapy. /Am.. Surg. Pathol. 2002. 26: 1269-1275.

2. Kurosawa H. Kiyoshi I. Hitoshi N. et all Hysteroscopic inspection and total curettage are insufficient for discrimination endometrial cancer from atypical endometrial hyperplasia / Tonocu J. Exp. Med, 2012 г., 228, 365-370 c.).

Trimble C.L., Kauderer J., Zaino R. et al. / Gynecologic Oncology Group study. Cancer 2006; 106:4, 812-819).

3. Власов P.С, Карпов Д.В., Залетаев Д.В., Коган Е.А, Демура Т.А., Макарова И.И., Гуриев Т.Д., Идрисова Э.А., Богуш О.С., Бадгоева О.Х., Сидорова И.С., Унанян А.Л. / Метилирование генов-супрессоров опухолевого роста при патологических процессах эндометрия // IV международный конгресс по репродуктивной медицине, 2010 «Проблемы репродукции» (Специальный выпуск). - С. 285-286.

4. Ikeda S1, Imura J2, Suzuki К1 / Protein expression, mRNA expression and gene amplification of DNA methyltransferase 1 in endometrial tumor tissues / Mol Clin Oncol. 2013 May; 1(3):423-429.

5. Patra S.K., Bettuzzi S. / Epigenetic DNA-methylation regulation of coding for lipid raft-associated components: A role for raft proteins in cell transformation and cancer progression (review). / Oncol Reports 2007; 17: 1279-1290.

6. Slater M, Cooper M, Murphy CR. / Appl Immunohistochem Mol Morphol. / 2007 Jun; 15(2):170-4.

7. Mutter C.L. Endometrial intraepithelial neoplasia (EIN): Will it bring order to chaos? The Endometrial Collaborative Group. Gynecol. Oncol. 2000. 76:287-290].

8. Yutaka S., Okada Т., Anno K. et al. Aneuploidy Predicts Outcome in Patients with Endometrial Carcinoma and Is Related to Lack of CDH13 Hypermethylation // Clinical Cancer Research. 2008; 14; 3354.

9. Tan O, Ornek T, Fadiel A, Carrick KS, Arici A, Doody K, Carr BR / Expression and activation of the membrane-cytoskeleton protein ezrin during the normal endometrial / Naftolin F/G/Steril. 2012 Jan; 97(1):192-194.

10. Otanik. Sakomoto H. Rutherford T et all/| cancer let/ 2002u/ may 8; 179(1):79-86.

Подписи к рисункам

Рис. 1 - Морфология гиперплазии эндометрия и ЭИН

а) Простая гиперплазия эндометрия (ПГЭ) × 400 мкн

б) Комплексная гиперплазия эндометрия без атипии (КГЭ) × 400 мкн

в) Комплексная гиперплазия эндометрия с атипией (КАГЭ) × 400 мкн

г) Эндометриальная интраэпителиальная неоплазия (ЭИН) × 100 мкн

д) ЭИН Ki67 в эпителиальных клетках × 400 мкн

е) ЭИН, потеря белка PTEN × 400 мкн

а, б, в, г - окраска гематоксилин-эозином

д, е - имуннопероксидазная реакция с ДАБ

Рис. 2 - Экспрессия MGMT при различных формах гиперплазии эндометрия, ЭИН, эндометриоидной аденокарциноме по данным имунногистохимического исследования (имуннопероксидазная реакция с ДАБ).

а) Пролиферативный эндометрий в поздней стадии × 400 мкн

б) Простая гиперплазия эндометрия × 400 мкн

в) Комплексная гиперплазия эндометрия без атипии × 400 мкн

г) Комплексная гиперплазия эндометрия с атипией × 400 мкн

д) ЭИН × 400 мкн

е) Эндометриоидная высокодифференцированная аденокарцинома × 400 мкн

Рис. 3 - Экспрессия MGMT и эзрина в эпителиальных клетках при различных формах гиперплазии эндометрия, ЭИН и эндометриоидной аденокарциноме.

а) Экспрессия MGMT

б) Апикальная локализацияя эзрина

в) Цитоплазматическая локализация эзрина

Рис. 4 - Экспрессия эзрина при различных формах гиперплазии эндометрия, ЭИН и эндометриоидной аденокарциноме (имуннопероксидазная реакция с ДАБ).

а) Пролиферативный эндометрий в поздней стадии × 600 мкн

б) Простая гиперплазия эндометрия × 400 мкн

в) Комплексная гиперплазия эндометрия × 600 мкн

г) Комплексная атипическая гиперплазия эндометрия × 600 мкн

д) ЭИН × 600 мкн

е) Эндометриоидная высокодифференцированная аденокарцинома × 600 мкн.