×
10.04.2015
216.013.3ee9

СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КОПЕЕЧНИКА ЧАЙНОГО (HEDYSARUM THEINUM KRASNOB.)

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
№ охранного документа
0002547593
Дата охранного документа
10.04.2015
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения копеечника чайного, где вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга для введения в культуру ткани, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л. Растения-регенеранты размножают, укореняют и адаптируют к нестерильным условиям. Изобретение позволяет повысить эффективность процесса, тиражируемости, адаптации в условиях гидропоники и получить стандартные саженцы копеечника чайного. 4 ил., 1 табл.
Основные результаты: Способ размножения копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.), включающий в себя культуру ткани, отличающийся тем, что используют семена копеечника чайного, которые высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга (MS), не содержащие гормоны, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП, 2,5 мкМ кинетина, 5 мкМ ГК (гибберелловой кислоты), образовавшиеся микропобеги делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л, чередуют среды с высоким и низким содержанием БАП через один пассаж, укореняют побеги на среде MS, дополненной 3 мкМ НУК, адаптируют к нестерильным условиям на гидропонной установке с ¼ минерального состава среды MS.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии и может быть использовано для массового получения качественного посадочного материала лекарственного растения копеечника чайного.

Известны методы культивирования тканей in vitro (аналог) двух видов копеечника - копеечника забытого и копеечника альпийского (Ляпкова Н.С., Хадеева Н.В., Шаин С.С., Майсурян А.Н. Разработка методов культивирования тканей копеечника in vitro. Биотехнология, 1999, 1, С.55-61). Авторам удалось получить каллусные ткани листового, стеблевого и корневого происхождения, а также изолированные корни этих растений.

Культивирование недифференцированно растущих клеток растений не всегда гарантирует сохранение биосинтеза видоспецифичных соединений в условиях in vitro. Кроме того, выращивание клеточных культур, а также культивирование изолированных корней на питательной среде, содержащей фитогормоны, существенно ограничивает вероятность дальнейшего использования получаемой растительной массы и тем самым снижает ценность метода.

Наиболее близким к предлагаемому способу является «Культура корня Hed.th. (Hedysarum theinum Krasnob.) - продуцент изофлавонов» (Патент РФ №2360964 от 10.07.2009, Бюл. №19). Задача изобретения - получение культуры корня Hed.th., интенсивно растущей в условиях in vitro на безгормональных питательных средах, сохраняющей способность к синтезу изофлавонов, характерных для корней целого растения, и обладающей генетической и биохимической стабильностью, для контролируемого выращивания лекарственного сырья в любое время года.

Поставленная задача решалась созданием новой культуры корня Hedysarum theinum Krasnob., депонированной в Коллекции генетически трансформированных корней растений при Институте физиологии растений РАН - под обозначением Hed.th. - продуцента изофлавонов: ононина, гликозида тексазина, малонилононина, формононетина.

Недостатком данного метода является культивирование только корней, а наземная часть при этом отсутствует. Вегетативные органы также представляют лекарственную ценность и могут быть использованы.

Заявляемый способ размножения копеечника чайного методом культуры in vitro позволяет получить активно растущие растения-регенеранты с полноценными вегетативными органами и корневой системой.

Сущность способа размножения копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) заключается в том, что используются вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного, которые высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга (MS), не содержащие гормоны, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП (6-бензиламинопурина), 2,5 мкМ кинетина и 5 мкМ ГК, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л. Микропобеги размножают и укореняют в последующих пассажах. После адаптации к нестерильным условиям получают стандартные саженцы копеечника чайного.

Способ реализуют следующим образом.

Перед стерилизацией семена копеечника чайного промывают под проточной водой в течение 15-25 минут. Стерилизацию проводят в условиях ламинар-бокса 0,1% раствором сулемы 10 минут. Затем трижды промывают стерильной дистиллированной водой. Этот способ стерилизации позволяет получить 70% эксплантов «стерильными» и жизнеспособными. Питательные среды для этапа введения в культуру ткани готовят по прописи Мурасиге-Скуга (MS), они не содержат гормоны, на них высаживают простерилизованные семена (Фиг.1. Побеги копеечника чайного на этапе введения в культуру ткани).

Через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП (6-бензиламинопурина), 2,5 мкМ кинетина и 5 мкМ ГК (гибберелловой кислоты) (табл.1) для микроразмножения (Фиг.2. Микроразмножение копеечника чайного). Образовавшиеся конгломераты микропобегов легко делятся на одиночные, которые пересаживают на среды, содержащие 1,0 мкМ БАП+L-глютамин и аденин сульфат (100 мг/л). Для длительного получения активно пролиферирующей культуры необходимо использовать схему чередования сред с высоким и низким содержанием БАП через один пассаж. В результате чего получают стерильную культуру копеечника со стабильным коэффициентом размножения 3,3±0,4. Число побегов на один эксплант за один пассаж составляет от 2 до 15 штук. Укореняют побеги на среде Мурасиге-Скуга дополненной 3 мкМ НУК (α-нафтилуксусная кислота). Адаптацию растений-регенерантов копеечника чайного к нестерильным условиям проводят на гидропонной установке, используя ¼ минерального состава среды MS (Фиг.3.) Через 25-30 суток адаптации получают стандартные саженцы (Фиг.4. Растение-регенерант копеечника чайного после адаптации на гидропонной установке).

На основании теоретического расчета по формуле Bn=B1×G(n-1) (где n - количество месяцев культивирования, B1 - количество микропобегов, G - коэффициент размножения) от одного растения при данном способе культивирования можно получить за 12 месяцев до 159432 саженцев копеечника чайного, если коэффициент размножения равен 3,0.

Высокая эффективность процесса, тиражируемость, адаптация в условиях гидропоники определяют промышленную применимость предлагаемого способа.

Таблица 1.
Влияние гормонального состава питательных сред и схемы культивирования на побегообразование у копеечника чайного
Гормональный состав питательной среды, мкМ, (№ среды) Высота растений, мм Коэффициент размножения Примечание
1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л (78) 30,1±0,1 1,0 рост в длину, гибель побегов 40%
2,5 БАП (98) 20,3±0,2 1,8±0,1 гибель побегов 20%
5 БАП+2,5 кинетина +5 ГК (204) 30,7±0,2 2,5±0,5 гибель побегов 20%
5 БАП+1 НУК 30±0,7 2,0±0,2 гибели побегов 30%
Чередование сред 204 и 78 40,5±0,1 3,3±0,4. стабильный рост и размножение

Способ размножения копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.), включающий в себя культуру ткани, отличающийся тем, что используют семена копеечника чайного, которые высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга (MS), не содержащие гормоны, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП, 2,5 мкМ кинетина, 5 мкМ ГК (гибберелловой кислоты), образовавшиеся микропобеги делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л, чередуют среды с высоким и низким содержанием БАП через один пассаж, укореняют побеги на среде MS, дополненной 3 мкМ НУК, адаптируют к нестерильным условиям на гидропонной установке с ¼ минерального состава среды MS.
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КОПЕЕЧНИКА ЧАЙНОГО (HEDYSARUM THEINUM KRASNOB.)
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КОПЕЕЧНИКА ЧАЙНОГО (HEDYSARUM THEINUM KRASNOB.)
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КОПЕЕЧНИКА ЧАЙНОГО (HEDYSARUM THEINUM KRASNOB.)
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КОПЕЕЧНИКА ЧАЙНОГО (HEDYSARUM THEINUM KRASNOB.)
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 21-25 из 25.
27.04.2015
№216.013.461d

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (calluna vulgaris (l.) hull.)

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (Calluna vulgaris (L.) Hull.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549453
Дата охранного документа: 27.04.2015
10.06.2015
№216.013.521f

Способ получения высших сульфидов титана

Изобретение может быть использовано в неорганической химии при получении высших сульфидов титана TiS, TiS и TiS. Синтез высших сульфидов титана проводят в режиме самораспространяющегося высокотемпературного синтеза (СВС) в вакууме 10 атм. В качестве исходных веществ используют порошкообразный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002552544
Дата охранного документа: 10.06.2015
10.06.2015
№216.013.547b

Способ получения монофазной интерметаллической тонкой пленки

Изобретение относится к области физики низкоразмерных структур, а именно к способу получения монофазной интерметаллической тонкой пленки с наноразмерной структурой на стеклянной подложке, и может быть использовано в различных высокотехнологичных областях промышленности и науки для создания...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553148
Дата охранного документа: 10.06.2015
10.12.2015
№216.013.985b

Способ получения лекарственного растительного сырья лапчатки белой (potentilla alba l.) в условиях гидропоники

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения растений-регенерантов лапчатки белой (Potentilla alba L.) в условиях гидропоники, включающий использование черенков материнских растений, размножение и выращивание, где в качестве эксплантов используются...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002570623
Дата охранного документа: 10.12.2015
13.01.2017
№217.015.83c3

Способ получения коллоидных полупроводниковых квантовых точек селенида цинка

Изобретение относится к области нанотехнологии, а именно нанотехнологии интерактивного взаимодействия, датчиков или приведения в действие, например квантовых точек в качестве биомаркеров. Описан способ получения коллоидных полупроводниковых квантовых точек селенида цинка, основанный на...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601451
Дата охранного документа: 10.11.2016
Показаны записи 21-27 из 27.
27.04.2015
№216.013.461d

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (calluna vulgaris (l.) hull.)

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (Calluna vulgaris (L.) Hull.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549453
Дата охранного документа: 27.04.2015
10.06.2015
№216.013.521f

Способ получения высших сульфидов титана

Изобретение может быть использовано в неорганической химии при получении высших сульфидов титана TiS, TiS и TiS. Синтез высших сульфидов титана проводят в режиме самораспространяющегося высокотемпературного синтеза (СВС) в вакууме 10 атм. В качестве исходных веществ используют порошкообразный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002552544
Дата охранного документа: 10.06.2015
10.06.2015
№216.013.547b

Способ получения монофазной интерметаллической тонкой пленки

Изобретение относится к области физики низкоразмерных структур, а именно к способу получения монофазной интерметаллической тонкой пленки с наноразмерной структурой на стеклянной подложке, и может быть использовано в различных высокотехнологичных областях промышленности и науки для создания...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553148
Дата охранного документа: 10.06.2015
10.12.2015
№216.013.985b

Способ получения лекарственного растительного сырья лапчатки белой (potentilla alba l.) в условиях гидропоники

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения растений-регенерантов лапчатки белой (Potentilla alba L.) в условиях гидропоники, включающий использование черенков материнских растений, размножение и выращивание, где в качестве эксплантов используются...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002570623
Дата охранного документа: 10.12.2015
13.01.2017
№217.015.83c3

Способ получения коллоидных полупроводниковых квантовых точек селенида цинка

Изобретение относится к области нанотехнологии, а именно нанотехнологии интерактивного взаимодействия, датчиков или приведения в действие, например квантовых точек в качестве биомаркеров. Описан способ получения коллоидных полупроводниковых квантовых точек селенида цинка, основанный на...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601451
Дата охранного документа: 10.11.2016
24.01.2019
№219.016.b31e

Способ получения растительного сырья ириса сибирского (iris sibirica l.) методами биотехнологии

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения растительного сырья ириса сибирского (Iris sibirica L.) клональным микроразмножением и выращиванием в условиях гидропоники, включающий введение эксплантов в культуру in vitro, культивирование на...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002677921
Дата охранного документа: 22.01.2019
27.05.2023
№223.018.7112

Способ выращивания растительного сырья ириса сибирского (iris sibirica l.) с заданным содержанием экстрактивных веществ

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для индустриального производства высокоценного сырья с целью получения лекарств, биологически активных добавок, функциональных пищевых продуктов, лечебно-профилактической косметики и индивидуальных биологически активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002773523
Дата охранного документа: 06.06.2022
+ добавить свой РИД