Результат интеллектуальной деятельности: РЕПЕЛЛЕНТНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ОТПУГИВАНИЯ КРОВОСОСУЩИХ ЧЛЕНИСТОНОГИХ

Область техники

Настоящее изобретение относится к репеллентной композиции для отпугивания кровососущих членистоногих и, более конкретно, к репеллентной композиции для отпугивания кровососущих членистоногих, содержащей эфирные масла и ванилин, и, таким образом, улучшается репеллентное действие в отношении кровососущих членистоногих, таких как москиты и т.п., и увеличивается продолжительность репеллентного действия.

Уровень техники

Кровососущие членистоногие включают различных насекомых, таких как москиты, клещи, жигалки, мухи цеце, слепни, постельные клопы и т.п. В частности, москиты, которые представляют собой самых опасных, питающихся кровью членистоногих, являются главными переносчиками лихорадки денге, желтой лихорадки, энцефалита и малярии, включая вирус Западного Нила, и ежегодно поражают от 0,3 до 0,5 миллиарда человек или более. Среди вышеописанных заболеваний ежегодная смертность из-за малярии составляет 1 миллион человек или более от общего количества пораженных (см. Rozendaal, J.A. 1997. Vector control: methods for use by individuals and communities. WHO. Женева, Швейцария: http://www.who.int/water_sanitation_health/resources/vectorcontrol/en/).

Таким образом, разработаны различные репелленты, действующие на кровососущих членистоногих.

Такие репелленты известны как самые эффективные агенты, препятствующие поражению людей и домашнего скота кровососущими вредителями (см. Curtis, C. F., J. D. Lives, L. U. Baolib, and A. Renz. 1990. Natural and synthetic repellents, pp.75-92. В С. F. Curtis [редактор], Appropriate technology in vector control, CRC Press, Бока-Ратон, Флорида; Isman, М. B. 2006. Botanical insecticides, deterrents, and repellents in modern agriculture and increasingly regulated world. Annu. Rev. Entomol. 51: pp.45-66).

Однако наиболее широко применяемый репеллент, DEET (N,N-диэтил-3-метилбензамид), несмотря на свою эффективность, как известно, имеет различные отрицательные эффекты, такие как неприятный запах, повреждение пластмассы или резины, подавление центральной нервной системы, воспаление кожи, повреждения ДНК у млекопитающих и т.п. (см. Katz, T. M., J. H. Miller and A. A. Hebert. 2008. Insect repellents: historical perspectives and new developments. J. Am. Acad. Dermatol. 58: 865-871; Knowles, С. О. 1991. Miscellaneous pesticides, pp.1471-1526. In J. B. Hayes, Jr. and E. R. Laws, Jr. [eds.], Handbook of pesticide toxicology, Academic Press, Сан-Диего, Калифорния). Поэтому существует потребность в разработке более безопасных репеллентов, предотвращающих нападение кровососущих живых организмов.

Тем временем, растительные эфирные масла недавно привлекли к себе внимание как альтернативные ресурсы для применения при разработке природных репеллентов, отпугивающих кровососущих членистоногих (см. Ahn, Y. J., S. I. Kim, H. K. Kim, and J. H. Tak. 2006. Naturally occurring house dust mites control agents: development and commercialization, pp.269-289. In M. Rai and M. С. Carpinella [eds.], Naturally occurring bioactive compounds. Elsevier, London, United Kingdom.; Curtis, С F., J. D. Lives, L. U. Baolib, and A. Renz. 1990. Natural and synthetic repellents, pp.75-92. In C. F. Curtis [ed.], Appropriate technology in vector control. CRC Press, Boca Raton, FL.; Das, N. G., I. Baruah, P. K. Talukdar, and S. С Das. 2003. Evaluation of botanicals as repellents against mosquitoes. J. Vector Borne Dis. 40: 49-53.; Rozendaal, J. A. 1997. Vector control: methods for use by individuals and communities. Всемирная организация здравоохранения, Женева, Швейцария). Такие эфирные масла выгодны тем, что они содержат различные биологически активные вещества и не оказывают негативного влияния на окружающую среду и живые организмы и являются относительно недорогими по сравнению с растительными экстрактами.

Сущность настоящего изобретения

Техническая проблема

Задачей настоящего изобретения, предназначенного для решения проблемы, является репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих, которая решает проблемы существующих синтетических репеллентов, более безопасна, улучшает репеллентное действие в отношении кровососущих членистоногих и увеличивает продолжительность репеллентного действия.

Другой задачей настоящего изобретения является предоставление носителя, включающего репеллентную композицию, и устройство для распространения репеллентной композиции.

Техническое решение

Цель настоящего изобретения может быть достигнута путем предоставления репеллентной композиции для отпугивания кровососущих членистоногих, содержащей эфирные масла и ванилин.

В другом приведенном в данном описании аспекте настоящего изобретения пористый носитель включает описанную выше репеллентную композицию.

В другом, приведенном в данном описании аспекте настоящего изобретения предоставлено устройство для распределения репеллентной композиции.

Полезные эффекты

Согласно настоящему изобретению репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих, носитель, включающий такую композицию, и устройство для распределения репеллента улучшают репеллентное действие в отношении кровососущих членистоногих и увеличивают продолжительность репеллентного действия. Кроме того, репеллентная композиция является более безопасной, чем существующие репелленты.

Описание фигур

На фиг.1 представлен вид, иллюстрирующий испытательную клетку, используемую в способе клеточного испытания согласно настоящему изобретению, в котором испытательная клетка включает стальной каркас, секцию 1 обработки материала и секцию 3 высвобождения, которые расположены с противоположных сторон испытательной клетки, и каждая из них покрыта полиэфирной сеткой, и необрабатываемую секцию 2, расположенную в центральной части испытательной клетки и окруженную акриловой пластиной, причем отверстия в полиэфирной сетке представлены только с целью иллюстрации и поэтому не пропорциональны чертежу, но отверстия слишком малы, чтобы сквозь них могли проникать москиты; и

на фиг.2 проиллюстрирован модуль, включающий репеллент шарикового типа, полученный согласно настоящему изобретению.

Наилучший вариант осуществления

Репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению содержит эфирные масла и ванилин.

К кровососущим членистоногим, против которых может быть применена репеллентная композиция согласно настоящему изобретению, относятся все живые организмы, сосущие кровь или жидкость организма через кожу млекопитающих или птиц. Примеры кровососущих членистоногих включают, но не ограничиваются ими, москитов, кровососущих мух, таких как жигалки, мухи цеце, слепни и т.п., клопов, площиц и тлей.

Эфирное масло, как использовано в настоящем описании, может быть любым без ограничения эфирным маслом, известным в качестве репеллента для кровососущих членистоногих. Предпочтительно, эфирное масло может быть получено из Cinnamomum cassia, Rosmarinus officinalis, Eucaliptus citriodora, Cymbopogon cilratus, Xanthoxylum armatum, Cymbopogon nardus и т.п. Эфирное масло может быть получено из вышеописанных растений с использованием стандартного растворителя, например, воды, этилового спирта, ацетона, метанола, пропанола, простого эфира, гексана, этилацетата, хлороформа или их смеси, с применением одного из способов, таких как анфлераж, настаивание, метод экстракции горячей водой (электромагнитный метод), ферментативная экстракция, перколяция, сверхкритическая флюидная экстракция и т.п. Более предпочтительно, эфирное масло может быть получено путем перегонки с водяным паром. Кроме того, эфирное масло может быть частично получено из растения, например, корней, стеблей, листьев, древесной пульпы, цветков, плодов, семян и/или кожицы или может быть получено из цельного растения.

Ванилин, как использовано в настоящем описании, относится к одному из ароматических альдегидов с ароматом ванили, т.е. 4-гидрокси-3-метоксибензальдегиду. Любая форма ванилина может быть использована согласно любому способу, известному в данной области техники. Также может быть использован коммерчески доступный ванилин. Одновременно с тем, что различные вещества, известные в качестве репеллентов для кровососущих членистоногих, ванилин не был когда-либо известен в качестве репеллента для насекомых.

Репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению содержит ванилин и одно эфирное масло, выбранное из группы, состоящей из Cinnamomum cassia, Rosmarinus offlcinalis, Eucaliptus citriodora, Cymbopogon citratus, Xanthoxylum armatum и Cymbopogon nardus. При этом соотношение в композиции эфирного масла к ванилину, в частности, не ограничено, и их массовое соотношение может составлять от 1:3 до 3:1 с учетом растворимости в растворителе и взаимной смешиваемости.

Кроме того, репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению может включать два вида описанных выше эфирных масел и ванилин. При этом соотношение в композиции одного из эфирных масел к другому и ванилина, в частности, не ограничено, и соотношение в композиции одного из эфирных масел к другому и ванилина может составлять диапазон 1-3:1-3:1-3 (об./об./масс.), более предпочтительно, диапазон 1:1:1, 3:1:1, 1:3:1, 1:1:3 или 8,5:8,5:3, с учетом растворимости в растворителе, взаимной смешиваемости и максимизации репеллентного действия.

Репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать соответствующую добавку, эксципиент или носитель при составлении в композицию в зависимости от среды предполагаемого применения или внесения. Примеры композиций включают, но не ограничиваются ими, эмульсии, эмульгаторы, смачиваемые порошки, растворимые в воде порошки, аэрозоли, пульверизуемые агенты, суспензии, композиции ультрамалого объема (ULV), душистые воды, гранулы, распыляемые порошки, порошки, тонкие гранулы, капсулы, мази, кремы, шарики, таблетки, экстракты, жидкие экстракты, лосьоны и пластыри. Предпочтительно, репеллентная композиция может быть составлена в композицию в форме крема, пульверизуемых агентов или аэрозоля.

Кроме того, репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению может быть нанесена на пористый носитель для продолжительного высвобождения. Может быть использована любая форма пористого носителя, им может быть, например, древесный уголь, силикагель, диатомовая земля и т.п. Пористый носитель включает гель, образованный таким образом, что он содержит микропоры в результате образования связей между мономерами, составляющими полимер или viscopearl (торговая марка, производства Rengo, Токио, Лаком), и сжатия полимера или полимерного волокна. Viscopearl имеет превосходную пористость и, таким образом, является подходящим для применения в репеллентной композиции по настоящему изобретению для постепенного высвобождения.

Примеры путей применения репеллентной композиции согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются ими, прямое разбрасывание или разбрызгивание в местах, в которых в основном появляются кровососущие членистоногие, прямое нанесение на кожу млекопитающих, включая людей, домашний скот или птиц, и нанесение на бытовые предметы, такие как одежда, сумки, повязки, палатки и т.п., или применение в закрытом помещении.

При применении в местах, где в основном распространены кровососущие членистоногие, репеллентная композиция может быть непосредственно разбросана или разбрызгана в воздухе. В другом варианте осуществления настоящего изобретения, например, при применении к определенному пространству, такому как здание, в помещении может быть установлен пористый носитель, непрерывно высвобождающий репеллентную композицию.

При прямом нанесении на кожу млекопитающих или птиц на их кожу может быть нанесено или разбрызгано соответствующее количество репеллентной композиции. В этом случае репеллентная композиция не должна вызывать раздражения кожи или, в случае раздражения может быть применена в очень небольшом количестве, не вызывающем проблем с кожей.

Кроме того, при применении к бытовым предметам могут быть получены капсулы с репеллентной композицией на подложке, и готовые капсулы могут быть непосредственно вмешаны в ткани, повязки или пластмассы, используемые для изготовления бытовых предметов, и затем обработаны так, чтобы репеллентная композиция, содержащаяся в капсуле, выделялась в воздух при разломе капсулы в результате трения для проявления репеллентных свойств или медленно высвобождалась в воздух в непосредственно смешанном состоянии. В одном варианте осуществления настоящего изобретения может быть применен пористый носитель, в котором содержится репеллентная композиция согласно настоящему изобретению. В этом случае устройство для постепенного высвобождения репеллентной композиции может включать индикатор указания расхода репеллентной композиции с применением способа, основанного, например, на изменении цвета при полном улетучивании репеллентной композиции, которая представляет собой активный ингредиент.

Репеллентная композиция для отпугивания кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению также может быть применена к бытовым приборам, таким как воздухоочиститель, элемент вентиляционной системы, кондиционер и т.п. Применение их к таким бытовым приборам может быть соответственно модифицировано традиционными способами. При применении к кондиционеру, элементу вентиляционной системы, кондиционеру и т.п., которые осуществляют конвекцию воздуха в доме, репеллентная композиция может высвобождаться в очищенный воздух и поэтому их применение к таким бытовым приборам является особенно полезным.

Далее в настоящем описании будут описаны конкретные примеры для понимания настоящего изобретения. Однако эти примеры приведены только с целью иллюстрации и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

Вариант осуществления настоящего изобретения

Пример

1. Получение исходных материалов

Cinnamomum cassia, Rosmarinus offwinalis, Eucaliptus citriodora, Cymbopogon citratus, Cymbopogon nardus и ванилин покупали у компании Berje, Блумфилд, Нью-Джерси и Xanthoxylum armatum покупали у компании Seema International, Дели, Индия. Кроме того, DEET покупали у компании Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури).

Каждое из эфирных масел, полученных из описанных выше растений, и ванилин растворяли в этиловом спирте с получением композиции. Каждое растительное эфирное масло и ванилин смешивали в отношении 5%:5% (об./масс.) и 5%:15% (об./масс.), и каждую смесь растворяли в этиловом спирте с получением 100 мкл каждой конечной композиции.

Тем временем, в качестве контролей получали 5% (по объему) и 15% (по объему) растворы этилового спирта, содержащие DEET вместо эфирного масла и ванилина.

Кроме того, для получения композиций, содержащих два вида эфирных масел и ванилин, два различных вида эфирного масла выбирали из Eucaliptus citriodora, Cymbopogon citratus и Xanthoxylum armatum и растворяли в этиловом спирте вместе с ванилином с получением 100 мкл каждой композиции. Соотношения в смеси двух видов эфирного масла к ванилину в каждой композиции составляли 1:1:1, 3:1:1, 1:3:1 и 1:1:3, и эти соотношения в смеси соответствовали 5%:5%:5%, 15%:5%:5%, 5%:15%:5% и 5%:5%:15% (об./об./масс.), соответственно. Кроме того, соотношения в смеси Cymbopogon nardus, Xanthoxylum armatum и ванилина составляли 8,5:8,5:3 (об./об./масс.) и соотношение в смеси Eucaliptus citriodora, Xanthoxylum armatum и ванилина составляли 8,5:8,5:3 (об./об./масс.).

2. Получение экспериментальных насекомых

Для использования в тесте имаго москита Ae. Aegypti, последовательно выращенные в закрытом помещении в течение нескольких лет без экспонирования к инсектицидам, стимулировали к размножению после всасывания крови напрямую из мыши, и их снабжали 10% (масс./об.) водным раствором сахара для восполнения дефицита в углеводах. Личинки Ae. aegypti помещали в лоток (24×35×5 см) и вскармливали 0,5 г стерильного искусственного корма (кормовой порошок для мальков с размером частиц 40-меш/дрожжи, 4:1 масс./масс.). Личинки выдерживали при температуре 26±2°C, относительной влажности 70±5% и режиме день:ночь 16:8 часов.

3. Эксперимент

A. Способ испытания на коже

Для оценки репеллентных свойств композиции по настоящему изобретению в отношении имаго москита испытание на коже проводили путем однородной обработки тыльной стороны рук участников эксперимента, которые носили резиновые перчатки, в каждой из которых было отверстие диаметром 5 см, через которую обнажалась поверхность руки, композициями, полученными на стадии получения исходных веществ выше. Участниками эксперимента являлись здоровые мужчины в возрасте от 21 до 40 лет. В качестве контроля применяли только 100 мкл этилового спирта.

5-8-дневных женских имаго aegypti (250-260 имаго) получали в клетке (25×25×25 см³) для выращивания имаго москита в течение 12-24 часов до начала эксперимента. Предплечье участника эксперимента выставляли в качестве контроля в течение 1 минуты и, когда, по меньшей мере, шесть женских имаго Ae. aegypti садились на предплечье или проявляли кровососущее поведение, давление укуса считалось достаточным и проводили тест на репеллентное действие. Предплечья участников эксперимента обрабатывали композициями, экспонировали в течение 3 минут с интервалом в 30 минут и, когда, по меньшей мере, две женские имаго Ae. aegypti непрерывно проявляли кровососущее поведение, такое как посадка на предплечье в течение 2 секунд или дольше, введение хобота москита в кожу, поиск положения для укуса и т.п., эксперимент останавливали. Интервал времени между исходным моментом нанесения композиции и моментом времени, в который, по меньшей мере, два имаго непрерывно сидели на обработанном участке или непрерывно проявляли такое кровососущее поведение, считали продолжительностью полной защиты (CPT).

CPT указывает на период времени между временем обработки и временем начала всасывания крови, и для сравнения между средними значениями CPT при каждой обработке проводили анализ на общей линейной модели (GLM). Для сравнения между средними значениями CPT применяли тест Бонферони (P=0,05).

Результаты показаны в таблицах 1 и 2 ниже. В таблице 1 показаны значения CPT для каждого эфирного масла, ванилина и композиций каждого эфирного масла и ванилина в отношении имаго Ae. Aegypti, а также показаны значения CPT в отношении имаго Ae. aegypti, при применении DEET в отдельности. В таблице 2 показаны результаты CPT для композиций двух видов эфирных масел и ванилина в отношении имаго Ae. aegypti.

Как можно видеть из таблицы 1 выше, группа, которую обрабатывали только 5% Cinnamomum cassia, продемонстрировала CPT, равное 75 минутам, группы, которые обрабатывали 5% Cymbopogon citratus, Xanthoxylum armatum, Eucaliptus citriodora и ванилином, соответственно, продемонстрировали значения CPT 30 минут, 30 минут, 22,5 минуты и 15 минут и группа, которую обрабатывали 5% Rosmarinus offwinalis, не продемонстрировала какого-либо действия. Вопреки результатам группа, которую обрабатывали 5% DEET, продемонстрировала самое сильное репеллентное действие, т.е. CPT составило 127,5 минут и CPT увеличилось до 247,5 минут при обработке 15%-ым DEET. С другой стороны, как можно убедиться из таблицы 1 выше, композиции, содержащие эфирное масло и ванилин, обладали усиленным репеллентным действием благодаря синергическому эффекту между ними, по сравнению с группами, которые обрабатывали каждым веществом в отдельности. Такое усиление репеллентного действия подтверждалось тем фактом, что, когда ванилин смешивали с каждым эфирным маслом в количестве 5% и 15%, CPT резко увеличивался (F=71,75, P<0,0001). Результаты подтверждают, что два фактора, т.е. концентрация эфирного масла и добавление к нему ванилина, являются значимо существенными (F=5,61, P<0,0001).

Параллельно два вида эфирного масла и ванилин смешивали с получением репеллентных композиций согласно настоящему изобретению и затем проводили такой же эксперимент. Результаты эксперимента показаны в таблице 2 ниже.

Группа A обозначает Eucaliptus citriodora:Cymbopogon citratus:ванилин

Группа В обозначает Eucaliptus citriodora:Xanthoxylum armatum:ванилин

Группа С обозначает Cymbopogon citratus: Xanthoxylum armatum:ванилин

Группа D обозначает Cymbopogon nardus:Xanthoxylum armatum:ванилин

Как можно видеть из таблицы 2, композиции, содержащие два вида эфирного масла и ванилин, продемонстрировали значимое увеличение репеллентного действия (CPT) по сравнению с композициями, содержащими каждое эфирное масло и ванилин. Результаты подтверждают, что такое действие получается в результате синергического эффекта между ними, который больше, чем увеличение CPT в результате простого смешивания каждого эфирного масла с ванилином. Таким образом, в группе А, включающей компоненты композиции в соотношении 1:1:1, арифметическое CPT для группы А составляет только 67,5 минут, которое получается сложением индивидуальных CPT для Cymbopogon citratus, Eucaliptus citriodora и ванилина т.е. 30 минут, 22,5 минуты и 15 минут, соответственно. Однако, как показано в таблице 2, можно убедиться, что экспериментальное значение CPT для группы A составляет 105 минут, что приблизительно в два раза больше, чем ожидаемое значение CPT. Таким образом, результаты подтверждают, что репеллентные композиции для кровососущих членистоногих согласно настоящему изобретению, содержащие два вида эфирного масла и ванилин, обладают синергическим эффектом.

B. Способ испытательной клетки

Настоящее испытание проводили, чтобы проверить, проникают ли москиты в секцию обработки через плотную картонную пластину (окно модуля), расположенную в центре испытательной системы в виде стенки и содержащую в своей центральной части отверстие диаметром 10 см. Кроме того, тест проводили, чтобы проверить среднее репеллентное действие шариковой композиции во времени.

В испытании композицию по настоящему изобретению применяли в форме фильтровальной бумаги, обработанной 5 мкл композиции, или составленную в композицию в виде шариков. Шариковую композицию получали путем пропитывания пористых целлюлозных шариков (Viscopearl®, размер: 3,8-4,2 мм, производства компании Rengo Co. Ltd, Токио, Лаком) репеллентной композицией по настоящему изобретению. Количество композиции в 1 г готовой композиции с шариками viscopearl составляла 0,465 г, и масса viscopearl составляла приблизительно 0,535 г. Соотношения компонентов в каждой примененной композиции показаны в таблице 3 ниже.

Для осуществления клеточного испытания потребовалось 100 5-10-дневных имаго Ae. Aegypti, которые были получены за 2 часа до начала клеточного испытания. Клетка для клеточного испытания проиллюстрирована на фиг.1. Клетка включала секцию 1 с обработанным материалом, секцию 2 без обработки и секцию высвобождения 3, в которой секцию 1 с обработанным материалом и секцию высвобождения 3 покрывали полиэфирной сеткой и секцию 2 без обработки окружали акриловой пластиной. Секцию 2 без обработки устанавливали в центре клетки с плотной картонной пластиной с отверстием диаметром 10 см. Мышь как привлечение для москитов помещали в секцию 1 с обработанным материалом за 10 минут до начала эксперимента таким образом, чтобы мышь была неподвижно зафиксирована на железной сетке, и фильтровальную бумагу, обработанную репеллентной композицией по настоящему изобретению, и репеллентную композицию в форме шариков помещали в секцию 1 с обработанным материалом. Фильтровальную бумагу обрабатывали репеллентной композицией, естественным образом сушили в течение 1 минуты, подвешивали к верхней части секции 1 с обработанным материалом на нити, и веществу давали возможность улетучиваться в течение 3 минут. После этого полученных женских имаго Ae. aegypti запускали в секцию высвобождения 3. В испытании естественным направлением перемещения москитов было от секции высвобождения 3 к секции 1 с обработанным материалом.

Среднее репеллентное отношение, указывающее на степень, до которой перемещение москитов в секцию 1 с обработанным материалом ограничено, вычисляли с применением следующего уравнения:

Среднее репеллентное отношение (%)={(30-количество москитов, введенных в секцию с обработанным материалом)/30}×100

Результаты показаны в таблице 3 ниже.

A = Eucaliptus citriodora

B = Cymbopogon citratus

С = Xanlhoxylum armatum

D = Ванилин

Как может быть подтверждено из таблицы 3 выше, из оценки того, насколько проникновение москитов в секцию с обработанным материалом ограничивалось фильтровальной бумагой, непосредственно обработанной каждой из композиций, полученных в соответствии с отношениями в композициях, показанными в таблице 3, все композиции, исключая случай, в котором применяли фильтровальную бумагу, обработанную композицией, полученной путем смешивания Eucaliptus citriodora, Xanthoxylum armatum и ванилина в соотношении 3:1:1, продемонстрировали репеллентное отношение для москитов равное 80% или более даже спустя 120 минут после эксперимента.

Кроме того, сходным образом, когда применяли 1 г шариковых композиций, полученных путем пропитывания Viscopearl® (размер: 3,8-4,2 мм, производства компании Rengo Co. Ltd, Токио, Лаком) каждой из композиций, полученных согласно соотношениям в композициях, показанным в таблице 3, почти все шариковые композиции продемонстрировали репеллентное отношение, равное 80% или более для москитов. Таким образом, от результатов, можно убедиться, что, когда активные ингредиенты композиции по настоящему изобретению диспергируют в пространстве в определенной концентрации или выше, москиты узнают репеллентную композицию и не желают попадать в пространство, в котором распространен аромат репеллентной композиции.

С. Камерное испытание

Камерное испытание проводили для проверки репеллентного действия композиции по настоящему изобретению в большом пространстве. Камера (размер: 1,2×1,2×1,2 м), использованная в испытании, имела стальной каркас и была покрыта акриловой пленкой, в передней нижней части которой имелось квадратное отверстие (20×20 см). Квадратное отверстие закрывали черной картонной пластиной с 10 отверстиями (размер отверстия: 1,5×1,5 см). Москитная клетка высвобождения (размер: 25×25×25 см) была присоединена к квадратному отверстию. Другую клетку для сбора помещали в камеру. Клетку высвобождения и клетку для сбора соединяли друг с другом картонной пластиной и обе покрывали полиэфирной сеткой. Вентилятор (название модели: EFB-2-3, производства компании Hanil, Корея) включали для ускорения диффузии ингредиентов, содержащихся в композиции. Человек-доброволец заходил в камеру в качестве аттрактора для москитов. В качестве контроля подсчитывали количество москитов, переместившихся в камеру в течение 2 часов, когда доброволец находился в камере без репеллентной композиции. В качестве репеллента использовали модуль, содержащий репеллент шарикового типа, который будет описан ниже. Обработку материала аттрактора проводили в течение 30 минут до испытания и обработку репеллента проводили за 1 час до испытания. Эксперименты повторяли и получали результаты путем статистической обработки.

Репеллент шарикового типа был таким же, как использованный в способе испытания в клетке. Композицию, которой пропитывали репеллент шарикового типа, получали путем смешивания Cymbopogon citratus, Xanthoxylum armatum и ванилина в соотношении 8,5:8,5:3 (об./об./масс.) в этиловом спирте в качестве растворителя.

Кроме того, для настоящего эксперимента создавали модуль с такой формой, которая проиллюстрирована на фиг.2. Модуль имел 10 отверстий с контролем открытия или закрытия, и в каждом отверстии содержалось одинаковое количество репеллента шарикового типа, таким образом, модуль содержал в общей сложности приблизительно 10-11 г репеллента шарикового типа и приблизительно реппелент шарикового типа пропитывали 4,7-5,4 г композиции.

Два набора модулей, 10 отверстий у которых были полностью открыты, помещали в камеру и количество 5-10-дневных женских имаго aegypti составляло 120. Количество женских имаго москитов, попадающих в камеру, подсчитывали через 5, 10, 20 и 30 минут после включения вентилятора. Репеллентное действие вычисляли в виде репеллентного отношения для каждого момента времени, которое представляет собой отношение количества москитов, попадающих в камеру без применения репеллента, к количеству москитов, попадающих в камеру при применении композиции по настоящему изобретению, и вычисляли среднее из полученных репеллентных отношений и принимали его за итоговое репеллентное отношение (%).

Вычисление репеллентных отношений для каждого определенного момента времени повторяли три раза для получения среднего репеллентного отношения. Результаты вычислений показаны в таблице 4 ниже.

1. Cymbopogon nardus:Xanthoxylum armatum:ванилин=8,5:8,5:3 (об./об./масс.)

2. Cymbopogon citratus:Xanthoxylum armatum:ванилин=8,5:8,5:3 (об./об./масс.)

3. Cymbopogon nardus:Xanthoxylum armatum:ванилин=1:1:1 (об./об./масс.)

4. Cymbopogon citratus:Xanthoxylum armatum:ванилин=1:1:1 (об./об./масс.)

Результаты, показанные в таблице 4 выше, подтверждают, что репеллент москитов по настоящему изобретению обладает превосходным репеллентным действием даже в большом пространстве и, в частности, репеллентная композиция, содержащая Cymbopogon citratus:Xanthoxylum armatum:ванилин в отношении 8,5:8,5:3 (об./об./масс.) продемонстрировала превосходное репеллентное действие.

Параллельно, для оценки репеллентного отношения и продолжительности действия композиции, содержащей Cymbopogon citratus:Xanthoxylum armatum:ванилин в соотношении 8,5:8,5:3 (об./об./масс.), наблюдали за изменением репеллентного действия во времени путем проведения камерного испытания. Результаты показаны в таблице 5 ниже.

Как видно из таблицы 5 выше, можно убедиться, что композиция продемонстрировала общее среднее репеллентное отношение 83% или более и имела репеллентное отношение 70% или более спустя не менее 60 минут.

D. Испытание на ускорение

Время продолжительности репеллентного действия репеллентной композиции для отпугивания кровососущих членистоногих по настоящему изобретению измеряли при помощи испытания на ускорение. Репеллентную композицию применяли в среднем в течение приблизительно 8 часов в сутки. Несмотря на то что количество отверстий в стенке камеры, задействованных в камерном испытании, через которые могут перемещаться москиты, составляло 10, количество отверстий в стенке внутри камеры в тесте на ускорение составляло 40, и испытание непрерывно выполняли в течение 24 часов. Чтобы оценить, длится ли репеллентное действие композиции для отпугивания кровососущих членистоногих по настоящему изобретению в течение 90 дней, измеряли репеллентое действие в определенные моменты времени после того, как испытание проводили в течение 8 дней в описанных выше условиях.

Испытание на ускорение проводили в той же самой камере, которую использовали в камерном испытании и таким же образом, как в камерном испытании, за исключением того, что количество отверстий составляло 40. В качестве контроля выступала группа, которую обрабатывали только этиловым спиртом, и группу, которую обрабатывали композицией, полученной путем смешивания Cymbopogon citratus:Xanthoxylum armatum:ванилина в соотношении 8,5:8,5:3 (об./об./масс.) в этиловом спирте в качестве растворителя, использовали в качестве экспериментальной группы. Результаты показаны в таблице 6 ниже.

Из результатов, показанных в таблице 6 выше, можно убедиться, что, когда проводили обработку композицией шарикового типа, полученной путем пропитывания шариков репеллентной композицией по настоящему изобретению, репеллентное действие шарикового репеллента сохранялось в среднем на 60% или более в течение 90 дней или дольше.