×
27.12.2014
216.013.15ec

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ МЕТРОНИДАЗОЛА В БИОСУБСТРАТАХ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и заключается в проведении хроматографического анализа образца биопробы. Для этого образец наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр наносят радиально стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл. Фильтр обрабатывают реагентом-проявителем, содержащим 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1, и термостатируют при 100°С до появления окрашенных пятен. Интенсивность окраски пятна пробы сравнивают с окраской пятен стандартных калибровочных растворов, по которым и устанавливают концентрацию метронидазола в анализируемом образце. Способ позволяет быстро и достоверно проводить мониторинг содержания метронидазола и, тем самым, своевременно корректировать процесс лечения. 3 пр.
Основные результаты: Способ определения содержания метронидазола в биосубстратах путем хроматографического анализа образца, отличающийся тем, что образец биопробы наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр радиально наносят стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл, после чего фильтр обрабатывают реагентом-проявителем, содержащим 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1, и термостатируют при 100°С до появления окрашенных пятен, интенсивность окраски пятна пробы сравнивают с окраской пятен стандартных калибровочных растворов, по которым и определяют концентрацию метронидазола в анализируемом образце.
Реферат Свернуть Развернуть

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для контроля содержания метронидазола в жидких средах (кровь, слюна, лимфа, ликвор, моча, гнойное отделяемое) и тканях организма.

Метронидазол используют для лечения неклостридиальной анаэробной инфекции. Контроль за уровнем этого препарата необходим, так как при снижении концентрации, ниже минимальной ингибирующей рост анаэробов в гнойном очаге, не подавляется. Превышение концентрации препарата связано с риском появления нежелательных побочных явлений, таких как тошнота, рвота, диарея, крапивница, головная боль, слабость, сонливость (Справочник Видаль Лекарственные препараты в России: Справочник. М.: АстраФарм Сервис, 1998, с.148).

Известен способ определения концентрации метронидазола в крови, включающий экстракцию образца (кровь, ткань и др.) этанолом, выдерживание в течение суток при нулевой температуре, снятие спектра образовавшейся надосадочной жидкости на спектрофотометре при длине волны 320 нм и расчете концентрации метронидазола с использованием калибровочной кривой. (Байсоголов Г.Д., Бердов Б.А., Коноплянников А.Г. и др. Непосредственные результаты лучевого и комбинированного лечения больных со злокачественными опухолями с использованием метронидазола. - Ж. Мед. радиол. - 1983, №2, с. 7-12).

К недостаткам данного способа следует отнести длительность выполнения анализа (24-30 часов).

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому и принятому за прототип является способ определения содержания метронидазола в биосубстратах путем проведения хроматографического анализа.

Для осуществления известного способа берут 1 мл или 1 г образца биосубстрата (кровь, слюна, ликвор, гнойное отделяемое, биоптат ткани), к которому добавляют 1 мл ацетонитрила для осаждения высокомолекулярной фракции. Полученную смесь центрифугируют 20 минут при 3000 об/мин, супернатант упаривают досуха в токе азота при температуре 80-90°С. Сухой остаток полностью растворяют в элюенте ацетонитрил-вода, взятых в соотношении 10:90, после чего центрифугируют в течение 20 минут. Полученную надосадочную жидкость вводят в хроматограф с подвижной фазой: ацетонитрил-вода (10:90), скорость потока 100 мкл/мин. Дегазация элюента гелием в течение 1-2 мин. Количественное определение метронидазола проводят при длине волны 318 нм. Время анализа, включая пробоподготовку, в среднем составляет 2 часа (Кузнецова Э.Э., Горохова В.Г., Андреева Т.А. и др. Высокоэффективная жидкостная хроматография пролонгированного метронидазола - метропола. Хим-фарм. ж-л. 2000, №8, с.46-47).

К недостаткам данного способа следует отнести использование дорогостоящего прибора, токсичных растворителей и многостадийность операций.

Задачей заявляемого технического решения является расширение диагностических возможностей лабораторного контроля за концентрацией метронидазола, содержащегося в крови пациента.

Техническим результатом предлагаемого способа является создание простого, доступного экспресс-метода определения концентрации метронидазола в жидких средах и тканях организма, позволяющего круглосуточно осуществлять его мониторинг.

Технический результат достигается тем, что способ определения содержания метронидазола в биосубстратах проводят путем хроматографического анализа образца.

Отличительные приемы заявляемого способа заключаются в том, что образец биопробы наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр, радиально, наносят стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл. После этого фильтр обрабатывают реагентом-проявителем, содержащим 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1, и термостатируют при 100°С до появления окрашенных пятен. Концентрацию метронидазола в анализируемом образце устанавливают по совпадению интенсивности окрашивания пятна пробы с пятном одного из стандартных калибровочных растворов.

Проведенный сопоставительный анализ с прототипом показал, что предлагаемый способ отличается от известных вышеперечисленными приемами и, следовательно, соответствует критерию изобретения «новизна».

Сравнение заявляемого технического решения не только с прототипом, но и с другими техническими решениями в медицине не позволило выявить в них признаки заявляемого изобретения. В доступной литературе авторами не выявлено способа определения содержания метронидазола в биосубстратах с использованием бумажной хроматографии.

Авторами предлагаемого способа экспериментальным путем установлено, что интенсивность окраски анализируемого образца находится в прямо пропорциональной зависимости при концентрации метронидазола 10-100 мкл.

Особенностью заявляемого способа является и то, что для определения содержания метронидазола в пробах не требуется предварительной пробоподготовки и специальных лабораторных приборов.

Клинические исследования авторов заявляемого способа свидетельствуют о том, что использование предлагаемого технического решения позволяет доступно, просто и быстро осуществлять мониторинг уровня препарата в биосубстратах и вносить соответствующие коррективы в процесс противоанаэробного лечения тяжелой категории больных.

Изложенное позволяет сделать вывод о соответствии технического решения критерию «изобретательский уровень».

Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в медицине, а именно в клинической практике (терапия, гнойная хирургия, проктология, онкология и др.). Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и, следовательно, предлагаемое решение соответствует критерию изобретения «промышленная применимость».

Заявляемый способ осуществляется следующим образом.

На бумажный фильтр микропипеткой наносят образец биопробы (сыворотка крови, слюна, моча, лимфа, ликвор, гнойное отделяемое, экссудат). На этот же фильтр радиально наносят и 10 стандартных калибровочных растворов метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл. После этого на фильтр осторожно распыляют предварительно приготовленный реагент-проявитель, содержащий 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1. Затем этот фильтр помещают в термостат с температурой 100°С и сушат до появления окрашенных пятен. Интенсивность появившихся желтых пятен зависит от концентрации метронидазола. Концентрацию метронидазола в анализируемом образце устанавливают визуально по совпадению интенсивности окрашивания пятна пробы с пятном одного из стандартных калибровочных растворов. Общее время анализа составляет 20-30 минут.

Предложенный способ поясняется примерами конкретного выполнения.

Пример 1. Больной В., история болезни №19140, поступил в реанимационное отделение гнойно-септического центра Областной клинической больницы с диагнозом - распространенный гнойный перитонит. Для подавления роста анаэробной неклостридиальной инфекции, выделенной у больного, был назначен метронидазол в дозе 500 мг внутривенно. Через 3 и 6 часов после введения метронидазола было проведено определение его содержания в сыворотке крови этого больного по заявляемому способу.

Через 3 часа концентрация введенного препарата составила 4,34 мкг/мл, через 6 часов концентрация метронидазола в сыворотке крови этого больного составила 3,24 мкг/мл.

Выявленное количество метронидазола оказалось ниже минимальной бактерицидной концентрации, что вызвало последующую коррекцию его дозы.

Пример 2. Больной Г., история болезни №17390, поступил в гнойно-септическое отделение ОКБ с диагнозом распространенный гнойный перитонит, анаэробная неклостридиальная инфекция. В комплекс лекарственной терапии был включен метронидазол эндолимфатически в дозе 500 мг.

Через 3, 6 и 9 часов после введения метронидазола было определенно его содержание в лимфе этого больного предлагаемым способом: через 3 часа - 35,3 мкг/мл, через 6 часов - 29,7 мкг/мл и через 9 часов - 25,3 мкг/мл.

Полученные данные свидетельствовали о том, что в исследуемый период содержание метронидазола превысило его минимальную бактерицидную концентрацию, что не потребовало внесения изменений в тактику антимикробной терапии.

Пример 3. Больной К., история болезни №21019, поступил в гнойно-септическое отделение ОКБ с диагнозом флегмона бедра. Из раны была выделена анаэробная инфекция (Bac. fragilis).

Пациенту был назначен метронидазол внутривенно в дозе 500 мг. Через 3 и 6 часов после введения было проведено определение содержания метронидазола в гнойном отделяемом из раны. Было определено: через 3 часа - 3,8 мкг/мл, через 6 часов - 2,9 мкг/мл.

Установленная концентрация метронидазола оказалось ниже минимальной бактерицидной, что потребовало увеличение его дозы.

Клинические исследования заявляемого способа проведены на базе клиники ФБГУ «НЦРВХ» СО РАМН в Областной клинической больнице. Было обследовано 39 больных, из них: с распространенным гнойным перитонитом - 20, панкреонекрозом - 9, флегмоной бедра - 5, язвенным колитом - 5.

Для сравнения концентрация метронидазола в сыворотке крови у этих больных так же была определена и методом спектрофотометрии. При сравнении полученных результатов ошибка определения не превысила 3,2%. При этом чувствительность предлагаемого способа составляет 89,8%, специфичность - 87,8%.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет просто, быстро и достоверно определить содержание метронидазола в биосубстратах, что обеспечивает возможность проведения экспресс-анализа и, тем самым, позволяет своевременно внести коррективы в процесс лечения. Способ не предусматривает предварительной пробоподготовки и не требует специальной приборной техники.

Способ определения содержания метронидазола в биосубстратах путем хроматографического анализа образца, отличающийся тем, что образец биопробы наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр радиально наносят стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл, после чего фильтр обрабатывают реагентом-проявителем, содержащим 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1, и термостатируют при 100°С до появления окрашенных пятен, интенсивность окраски пятна пробы сравнивают с окраской пятен стандартных калибровочных растворов, по которым и определяют концентрацию метронидазола в анализируемом образце.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 24.
20.05.2013
№216.012.3f64

Способ оперативного лечения застарелого заднего вывиха плеча

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для лечения застарелого заднего вывиха плеча. При осуществлении костно-пластического доступа к плечевому суставу отсекают акромиальный отросток лопатки с прикрепляющейся к нему средней...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481798
Дата охранного документа: 20.05.2013
20.07.2013
№216.012.5660

Средство для регулирования обменных процессов в клетке

Изобретение относится к медицине, а именно к применению препарата Инфликсимаб в качестве средства, регулирующего метаболизм эритроцитов у больных с воспалительными заболеваниями кишечника. Заявленное изобретение обеспечивает нормализацию метаболических процессов в клетке. 1 табл., 3 пр.
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002487720
Дата охранного документа: 20.07.2013
10.09.2013
№216.012.68d7

Способ оценки сорбционной способности клетки

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и описывает способ оценки сорбционной способности клетки, включающий взятие пробы крови, смешивание и инкубирование взвеси эритроцитов с раствором красителя, центрифугирование смеси, определение оптической плотности надосадочной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492486
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.09.2013
№216.012.6dec

Способ лечения перелома или последствий травм диафиза кости(ей) предплечья

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при лечении перелома или последствий травм диафиза кости(ей) предплечья. Проводят осевую компрессирующую спицу (ОКС) через костные фрагменты или последовательно через один костный фрагмент,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493791
Дата охранного документа: 27.09.2013
10.12.2013
№216.012.8676

Способ приготовления препарата костной ткани и набор для его осуществления

Изобретение относится к медицине, ветеринарии и биологии. Проводят фиксацию образца, декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин. Фиксацию образца проводят в течение 24-х часов в молекулярном фиксаторе FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500104
Дата охранного документа: 10.12.2013
10.03.2014
№216.012.a8ba

Способ доступа к позвоночному каналу при стенозирующем поражении пояснично-крестцового отдела позвоночника

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии. Производят одностороннее скелетирование межостистого промежутка в проекции стенозирующего процесса в зависимости от его латерализации. Осуществляют трансспинозный доступ к позвоночному каналу путем спила основания остистого отростка...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508909
Дата охранного документа: 10.03.2014
20.07.2014
№216.012.e004

Способ остеотомии акромиального отростка лопатки и устройство для его осуществления

Группа изобретений относится к травматологии и ортопедии и может быть применима для остеотомии акромиального отростка лопатки. После выделения акромиального отростка лопатки его располагают между корпусом устройства и защитным элементом. Затем в акромиальный отросток лопатки вводят спицы через...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002523134
Дата охранного документа: 20.07.2014
20.07.2014
№216.012.e1ec

Способ моделирования ложного сустава при переломе костей голени и устройство для его осуществления

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, травматологии и ортопедии. На голень кролика накладывают аппарат внешней фиксации (АВФ), затем между II-м и IV-м его уровнями проводят остеоперфорацию и остеоклазию. Отломки костей голени разводят на расстояние 1 см и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002523622
Дата охранного документа: 20.07.2014
27.07.2014
№216.012.e3e2

Способ моделирования остеорезорбции в условиях репаративного остеогенеза

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и патофизиологии и касается моделирования остеорезорбции в условиях репаративного остеогенеза. Для этого экспериментальному животному внутрибрюшинно однократно вводят раствор селенометионина в концентрации 2 мкг/мл в дозе 10 мкг/кг веса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002524128
Дата охранного документа: 27.07.2014
27.07.2014
№216.012.e5da

Способ оценки чувствительности сосудистого эндотелия к напряжению сдвига

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано для оценки чувствительности сосудистого эндотелия к напряжению сдвига. Способ заключается в следующем: до и после окклюзионной пробы определяют уровень нитритов и эндотелина в крови. Чувствительность сосудистого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002524632
Дата охранного документа: 27.07.2014
Показаны записи 1-10 из 30.
20.05.2013
№216.012.3f64

Способ оперативного лечения застарелого заднего вывиха плеча

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для лечения застарелого заднего вывиха плеча. При осуществлении костно-пластического доступа к плечевому суставу отсекают акромиальный отросток лопатки с прикрепляющейся к нему средней...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481798
Дата охранного документа: 20.05.2013
27.07.2013
№216.012.58cf

Способ коррекции иммунных нарушений

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и может быть использовано для коррекции иммунных нарушений. Для моделирования иммунных нарушений крысам линии Вистар проводят полную аспленизацию. В раннем послеоперационном периоде вводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488356
Дата охранного документа: 27.07.2013
10.09.2013
№216.012.68d7

Способ оценки сорбционной способности клетки

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и описывает способ оценки сорбционной способности клетки, включающий взятие пробы крови, смешивание и инкубирование взвеси эритроцитов с раствором красителя, центрифугирование смеси, определение оптической плотности надосадочной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492486
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.09.2013
№216.012.6dec

Способ лечения перелома или последствий травм диафиза кости(ей) предплечья

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при лечении перелома или последствий травм диафиза кости(ей) предплечья. Проводят осевую компрессирующую спицу (ОКС) через костные фрагменты или последовательно через один костный фрагмент,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493791
Дата охранного документа: 27.09.2013
10.12.2013
№216.012.8676

Способ приготовления препарата костной ткани и набор для его осуществления

Изобретение относится к медицине, ветеринарии и биологии. Проводят фиксацию образца, декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин. Фиксацию образца проводят в течение 24-х часов в молекулярном фиксаторе FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500104
Дата охранного документа: 10.12.2013
10.12.2013
№216.012.8774

Способ резекции пищевода

Изобретение относится к хирургии и может быть применимо для резекции пищевода. Выполняют частичную диафрагмотомию с частичным рассечением левого купола диафрагмы и сохранением зоны пищеводного отверстия диафрагмы, для этого диафрагму надсекают на 4-5 см от реберной дуги по направлению к...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500358
Дата охранного документа: 10.12.2013
10.03.2014
№216.012.a8ba

Способ доступа к позвоночному каналу при стенозирующем поражении пояснично-крестцового отдела позвоночника

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии. Производят одностороннее скелетирование межостистого промежутка в проекции стенозирующего процесса в зависимости от его латерализации. Осуществляют трансспинозный доступ к позвоночному каналу путем спила основания остистого отростка...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508909
Дата охранного документа: 10.03.2014
10.04.2014
№216.012.b379

Способ этапного хирургического лечения протяженных и/или мультифокальных стенозов гортани и/или трахеи

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии. Выполняют формирование ларинготрахеостомы, эндопротезирование трахеи Т-образной трубкой, резекцию стенозированного участка грудного отдела трахеи, наложение межтрахеального анастомоза, пластическое закрытие дефекта передней стенки гортани...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002511661
Дата охранного документа: 10.04.2014
10.06.2014
№216.012.cd52

Способ патоморфологического определения давности наступления инфаркта миокарда

Изобретение относится к области медицины. Для патоморфологического определения давности наступления инфаркта миокарда фиксируют образец ткани и помещают его в парафин. Получают срезы, проводят их депарафинизацию и прогревание, отмывание в буферном растворе, инкубирование во влажной камере с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518333
Дата охранного документа: 10.06.2014
20.07.2014
№216.012.e004

Способ остеотомии акромиального отростка лопатки и устройство для его осуществления

Группа изобретений относится к травматологии и ортопедии и может быть применима для остеотомии акромиального отростка лопатки. После выделения акромиального отростка лопатки его располагают между корпусом устройства и защитным элементом. Затем в акромиальный отросток лопатки вводят спицы через...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002523134
Дата охранного документа: 20.07.2014
+ добавить свой РИД