×
20.12.2014
216.013.12d2

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ КЛАССА СТИЛЬБЕНОВ ПИНОСИЛЬВИНА И МЕТИЛПИНОСИЛЬВИНА ИЗ ОТХОДОВ ПЕРЕРАБОТКИ СОСНЫ

Вид РИД

Изобретение

№ охранного документа
0002536241
Дата охранного документа
20.12.2014
Аннотация: Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу выделения пиносильвина и метилпиносильвина из древесины сосны обыкновенной . Способ выделения пиносильвина и метилпиносильвина заключается в экстракции смесью изопропилового спирта с водой измельченных сучковых зон древесины сосны обыкновенной , отделении экстракта и последующего удаления растворителя. Вышеописанный способ выделения повышает выход пиносильвина и метилпиносильвина из древесины сосны обыкновенной 2 з.п. ф-лы, 5 пр., 2 ил.

Изобретение относится к способам переработки растительного сырья, представляющего собой измельченную древесину сосны, с целью выделения из него биологически активных веществ, в частности полифенольных соединений класса стильбенов - пиносильвина и метилпиносильвина. Изобретение может быть использовано при производстве продуктов для химической и фармацевтической промышленности, сельского хозяйства и других областей экономики. Сущность метода заключается в том, что измельченную древесину сучковой зоны сосны экстрагируют водным раствором изопропилового спирта для получения экстракта, из которого затем удаляют растворитель с получением конечной смеси, содержащей пиносильвин и метилпиносильвин.

Указанные соединения являются весьма перспективными лекарственными соединениями, производство которых, несмотря на широкий фармакологический потенциал, пока нигде в мире не освоено. Использование отходов деревоперерабатывающих предприятий в качестве сырья для получения позволит увеличить степень переработки древесины, снизить нагрузку на окружающую среду и улучшить экономические и экологические показатели этой отрасли. Пиносильвины являются близкими структурными аналогами такого широко представленного на мировом рынке препарата, как Ресвератрол. При этом многие из исследованных фармакологических характеристик пиносильвина и метилпиносильвина (противогрибковый эффект, адъювантная активность и др.) оказались не хуже таковых для Ресвератрола. Применительно к соединениям, которые известны на российском рынке, можно отметить, что антиоксидантные свойства пиносильвина не уступают активности дигидрокверцетина, являющегося ключевым компонентом многих коммерческих продуктов. Таким образом, выделение пиносильвина и метилпиносильвина из сучковых зон древесины сосны является перспективным методом утилизации отходов ее переработки.

Известен способ экстракции измельченных сучковых зон хвойных деревьев с помощью полярных растворителей или их смесей (Н.Э. Нифантьев, Д.В. Яшунский, В.М. Меньшов, Ю.Е. Цветков, Д.Е. Цветков. «Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины (варианты)», RU 2359666, 27.06.2009), ориентированный на выделение лигнинасекоизоларицирезинола и флавоноидадигидрокверцетина. Этот способ, однако, не позволяет выделять полифенольные соединения группы стильбенов, а именно пиносильвин и метилпиносильвин.

Известна работа WillforStefanetal. (US 20080124414, 29.05.2008), относящаяся к использованию экстрактов из сучковых зон древесины различных пород деревьев в качестве антиоксидантов, в которой раскрывается способ получения таких экстрактов, содержащих в том числе и соединения из группы стильбенов, путем обработки измельченного материала полярными растворителями или их смесями.

Более подробное описание аналогичного способа, определяемого как способ выделения фенольных соединений и ювабионов, дано теми же авторами в международной заявке WO 02/098830, опубликованной 12.12.2002 (патентные аналоги RU 2004100110, 10.04.2005; US 2004199032, 07.10.2004; EP 1295539 B1, 22.04.2009). Данная работа представляется наиболее близким аналогом (прототипом) настоящего изобретения, поскольку раскрывает, в частности, получение экстрактов, содержащих пиносильвин и метилпиносильвин из сучковых зон древесины сосны. Предлагаемый авторами способ предусматривает двухстадийную экстракцию измельченных сучковых зон древесины сосны, в частности вида Pinus sylvestris, в специальном экстракторе (ASE-apparatus, AcceleratedSolventExtractor), обеспечивающем получение высоких температур и давления, где первая стадия экстракции предназначена для удаления липофильных соединений и осуществляется путем обработки материала гексаном (при температуре 90°C и давлении 13,8 МПа), а вторая обеспечивает извлечение гидрофильных компонентов путем обработки высушенного продукта первого этапа смесью полярных растворителей ацетон:вода (или упоминаемая в описании смесь этиловый спирт:вода) в объемном соотношении компонентов 95:5 (при температуре 100°C и давлении 13,8 МПа) с последующим отделением экстракта.

К числу недостатков способа-прототипа следует отнести, во-первых, низкий выход пиносильвина и метилпиносильвина (для Pinus sylvestris он составляет, соответственно, 1,1 и 1,0% от сухого веса сучковых зон); во-вторых, не оптимальный выбор полярных растворителей и/или их соотношения, следствием чего является необходимость предварительного удаления липофильных соединений, и, в-третьих, использование дорогостоящей аппаратуры и высокую энергоемкость процесса, которые в конечном итоге повышают стоимость целевого продукта.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа выделения пиносильвина и метилпиносильвина из древесины сосны, лишенного указанных недостатков. Решение поставленной задачи достигается за счет проведения экстракции сучковых зон древесины сосны в один этап, предусматривающий применение в качестве экстрагента водного изопропилового спирта (смеси воды и изопропилового спирта) при содержании воды в интервале 25-35%, и осуществление процесса без повышения давления и температуры.

Получение результата в этом случае определяется способностью изопропилового спирта, смешиваясь с водой в указанных соотношениях, образовывать гомогенную смесь, хорошо растворяющую пиносильвин и метилпиносильвин и обеспечивающую набухание древесины и оптимальный массообмен экстрагента и экстракта внутри волокон без дополнительного нагревания материала (при комнатной температуре). Особенностью экстракции в найденных условиях является также то, что при используемом содержании воды в экстрагенте липофильные экстрактивы древесины в нем не растворяются, что позволяет отказаться от описанной в прототипе дополнительной стадии обработки гексаном для удаления липофильных соединений и последующей сушки материала.

При экстрагировании смесями с большим, чем 35%, содержанием воды наблюдается увеличение извлечения из сучковой массы нецелевых водорастворимых компонентов, в особенности производных углеводов, что в дальнейшем усложняет очистку пиносильвина и метилпиносильвина. Кроме того, поскольку растворимость в воде стильбеноидов незначительна, то при увеличении воды в экстрагенте выше указанной верхней границы содержание пиносильвина и метилпиносильвина в экстракте снижается.

В процессе создания изобретения нами было экспериментально установлено, что при экстракции водным изопропанолом с меньшим, чем 25%, содержанием воды или при ее отсутствии, выход экстрагируемых пиносильвина и метилпиносильвина уменьшается. Это следует рассматривать как неожиданный результат, так как очищенные целевые соединения лучше растворимы в чистом изопропиловом спирте, чем в его смеси с водой.

При получении пиносильвина и метилпиносильвина заявляемым методом удается повысить выход смеси названных продуктов (в сравнении с прототипом) примерно в 1,7 раза, а метилпиносильвина в составе указанной смеси более чем в 2,5 раза, что является основным техническим результатом изобретения, а также упростить способ за счет исключения предварительной экстракции липофильных соединений гексаном и удешевить его вследствие отказа от дорогостоящего оборудования и проведения процесса без дополнительного повышения температуры и давления, что следует рассматривать как дополнительные технические результаты.

Ниже приведены примеры, снабженные сопроводительными чертежами (Фиг.1 и Фиг.2), на которых представлены хроматограммы экстрактов, полученных в примерах 1 и 5 соответственно.

Пример 1.

Экстракция измельченной массы сучковых зон сосны 75%-ным водным изопропиловым спиртом.

В качестве сырья для отбора материала (сучковых зон древесины сосны) были использованы отходы лесозаготавливающего предприятия в Ивановской области. Специально определение вида сосны полученных на предприятии промышленных древесных отходов не проводилось, т.к., с одной стороны, корректная классификация, требующая привлечения морфологических признаков целого растения, была невозможной, а с другой, - такое определение представлялось в данном случае не обязательным в силу того, что в европейской части РФ массово произрастает практически только сосна вида Pinus sylvestris (сосна обыкновенная), и, соответственно, материал лесозаготавливающей и деревообрабатывающей промышленности на указанной территории, по существу, полностью представлен этим видом сосны (http://ru.wikipedia.org;http://www.tdecologica.ru/info/porody_derevev). Таким образом, применительно к использованным в изобретении отходам производства, очевидным было, по меньшей мере, полное преобладание в них вида Pinus sylvestris.

1000 г измельченной массы сучковых зон сосны экстрагировали 10 л 75%-ного водного изопропилового спирта при 20°C при перемешивании в течение 24 часов. Экстракт отделяли фильтрованием и упаривали досуха. Получали 124 г экстракта, содержащего 36 г смеси пиносильвина и метилпиносильвина в соотношении 1:2.2, которое определялось с помощью ВЭЖХ по методу, опубликованному ранее [Э.Е. Нифантьев и др., ЖОХ, 76 (2006) 161-163]. При этом аликвоты растворов (10 мкл) анализировали посредством ВЭЖХ на колонке Ultrasphere ODS (5 мкм, 4.6 мм×25 см; Beckman) в системе ацетонитрил (20%) - вода, содержащей 1 мл/л трифторуксусной кислоты при скорости потока 0.8 мл/мин с использованием УФ-детектора (254 нм).

На Фиг.1 показан профиль элюции компонентов, полученных описанным выше способом экстрактов. Следует отметить, что «картина» хроматографического разделения стильбенов в данном случае демонстрирует наличие в экстрактах значительных количеств только ПС и МПС, что из 2 «промышленных» видов сосны (sylvestris и sibirica), представленных в РФ, является характерным признаком именно сосны обыкновенной (табл.5 в WO 02/098830; Schanz S. et al., FEBS Lett. 1992 Nov 16; 313(1):71-4, реферат; Lindberg L., Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology, 01.03.2004, реферат). Количественная характеристика содержания пиносильвина и метилпиносильвина в экстрактах проводилась по калибровочным кривым, полученным при хроматографическом анализе аналитически чистых образцов пиносильвина и метилпиносильвина.

Пример 2.

Экстракция измельченной массы сучковых зон сосны 50%-ным водным изопропиловым спиртом.

1000 г измельченной массы сучковых зон сосны экстрагировали 10 л 50%-ного водного изопропилового спирта при 20°C при перемешивании в течение 24 часов. Экстракт отделяли фильтрованием и упаривали досуха. Получали 153 г экстракта, содержащего 34 г смеси пиносильвина и метилпиносильвина в соотношении 1:2.2. Анализ содержания пиносильвина и метилпиносильвина проводился методом ВЭЖХ как описано в примере 1.

Пример 3.

Экстракция измельченной массы сучковых зон сосны 65%-ным водным изопропиловым спиртом.

1000 г измельченной массы сучковых зон сосны экстрагировали 10 л 65%-ного водного изопропилового спирта при 20°C при перемешивании в течение 24 часов. Экстракт отделяли фильтрованием и упаривали досуха. Получали 120 г экстракта, содержащего 35 г смеси пиносильвина и метилпиносильвина в соотношении 1:2.2. Анализ содержания пиносильвина и метилпиносильвина проводился методом ВЭЖХ как описано в примере 1.

Пример 4.

Экстракция измельченной массы сучковых зон сосны изопропиловым спиртом.

1000 г измельченной массы сучковых зон сосны экстрагировали 10 л изопропилового спирта при 20°C при перемешивании в течение 24 часов. Экстракт отделяли фильтрованием и упаривали досуха. Получали 70 г экстракта, содержащего 27 г смеси пиносильвина и метилпиносильвина в соотношении 1:2.2. Анализ содержания пиносильвина и метилпиносильвина проводился методом ВЭЖХ как описано в примере 1.

Пример 5.

Экстракция 75%-ным водным изопропиловым спиртом измельченной массы сучковых зон сосны сибирской (Pinus sibirica).

10 г измельченной массы сучковых зон древесины сосны экстрагировали 100 мл 75%-ного водного раствора изопропилового спирта при 20°C в течение 24 часов при постоянном перемешивании. Экстракт отделяли фильтрованием и упаривали досуха.

Было получено 1,1 г экстракта, содержащего 0,12 г метилпиносильвина по данным анализа ВЭЖХ, выполненного как описано в примере 1. Пиносильвин указанным методом в экстракте не определялся; при этом, как показывает профиль элюции, представленный на фиг.2, основным компонентом, принадлежащим группе стильбенов, был дигидрометилпиносильвин, что соответствует данным, приводимым в прототипе (см. табл.5 в WO 02/098830), и является дополнительным свидетельством того, что промышленные отходы, использованные в примерах 1-4 для препаративного выделения ПС+МПС, не содержат сколько-нибудь значимых примесей сосны кедровой (Pinus sibirica).


СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ КЛАССА СТИЛЬБЕНОВ ПИНОСИЛЬВИНА И МЕТИЛПИНОСИЛЬВИНА ИЗ ОТХОДОВ ПЕРЕРАБОТКИ СОСНЫ
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ КЛАССА СТИЛЬБЕНОВ ПИНОСИЛЬВИНА И МЕТИЛПИНОСИЛЬВИНА ИЗ ОТХОДОВ ПЕРЕРАБОТКИ СОСНЫ
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-8 из 8.
27.02.2013
№216.012.2aa5

Способ получения конъюгата нона-β-(1→3)-глюкозида с бычьим сывороточным альбумином скваратным методом

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ синтеза конъюгата нона-β-(1→3)-глюкозида с бычьим сывороточным альбумином (БСА) скваратным методом. Первоначально осуществляют взаимодействие нона-β-(1→3)-глюкозида с диэтилскваратом. Затем проводят реакцию полученного лиганда -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002476444
Дата охранного документа: 27.02.2013
27.03.2014
№216.012.ae09

Средство для лечения эстрогензависимых опухолей

Предложено лекарственное средство для лечения эстрогензависимых опухолей. Предлагаемое средство содержит (-)-секоизоларицирезинол и вспомогательные вещества: крахмал, тальк и стеарат магния. Показано: заявленное средство вызывает значительное торможение роста аденокарциномы молочной железы, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510268
Дата охранного документа: 27.03.2014
10.11.2014
№216.013.03be

Применение секоизоларицирезинола в качестве гемореологического, антитромбоцитарного и эндотелийпротекторного средства

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии. Предложено применение секоизоларицирезинола в качестве гемореологического, антитромбоцитарного и эндотелийпротекторного средства. Технический результат: показано снижение вязкости крови на 11-30%, снижение АДФ-индуцированной агрегации...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002532356
Дата охранного документа: 10.11.2014
20.12.2014
№216.013.1029

Способ управления процессом получения сыпучей формы холинхлорида на основе сухого свекловичного жома

Изобретение относится к автоматизации процесса получения сыпучей формы холинхлорида на основе сухого свекловичного жома и может быть использовано при производстве кормов. Способ предусматривает смешивание сухого свекловичного жома с предварительно подогретым водным раствором холинхлорида и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002535559
Дата охранного документа: 20.12.2014
27.02.2015
№216.013.2e4f

Иммуноферментная тест-система для количественного определения микополисахаридов и их производных в пыли окружающей среды

Изобретение относится к области биотехнологии и экологии, в частности к тест-системам для определения содержания микополисахаридов и их производных, имеющих в своем составе участки, аналогичные синтетическому линейному нона-β-(1→3)-D-глюкозиду в окружающей среде, в том числе в пыли помещений,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002543323
Дата охранного документа: 27.02.2015
19.01.2018
№218.016.0145

Кардиопротекторная фармацевтическая субстанция и способ ее получения

Настоящее изобретение относится к способу получения неопетрозида А, который может быть использован в медицине в качестве средства, ингибирующего активность в отношении гликогенсинтазы-3β и гликогенсинтазы-3α. Предложенный способ отличается тем, что 2,3-ацетонид-D-рибозу ацилируют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002629772
Дата охранного документа: 04.09.2017
20.01.2018
№218.016.0fbc

Штамм amycolatopsis orientalis - продуцент антибиотика диметилванкомицина и способ получения антибиотика

Заявлена группа изобретений, которая может быть использована при производстве антибактериального антибиотика диметилванкомицина сульфата, эффективного при лечении инфекций, вызываемых грамположительными возбудителями, в том числе метициллинустойчивыми и анаэробами. Предлагается штамм...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633511
Дата охранного документа: 12.10.2017
20.01.2018
№218.016.1414

Способ избирательного удаления о-ацетильных защитных групп в присутствии о-бензоильных

Изобретение относится к способу удаления защитных групп в синтетической химии углеводов, который может быть использован в химической промышленности. Предложенный способ состоит в том, что избирательно удаляют О-ацетильные защитные группы в присутствии О-бензоильных в олигосахаридах, обрабатывая...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002634707
Дата охранного документа: 03.11.2017
Показаны записи 1-10 из 10.
27.02.2013
№216.012.2aa5

Способ получения конъюгата нона-β-(1→3)-глюкозида с бычьим сывороточным альбумином скваратным методом

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ синтеза конъюгата нона-β-(1→3)-глюкозида с бычьим сывороточным альбумином (БСА) скваратным методом. Первоначально осуществляют взаимодействие нона-β-(1→3)-глюкозида с диэтилскваратом. Затем проводят реакцию полученного лиганда -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002476444
Дата охранного документа: 27.02.2013
27.03.2014
№216.012.ae09

Средство для лечения эстрогензависимых опухолей

Предложено лекарственное средство для лечения эстрогензависимых опухолей. Предлагаемое средство содержит (-)-секоизоларицирезинол и вспомогательные вещества: крахмал, тальк и стеарат магния. Показано: заявленное средство вызывает значительное торможение роста аденокарциномы молочной железы, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510268
Дата охранного документа: 27.03.2014
10.11.2014
№216.013.03be

Применение секоизоларицирезинола в качестве гемореологического, антитромбоцитарного и эндотелийпротекторного средства

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии. Предложено применение секоизоларицирезинола в качестве гемореологического, антитромбоцитарного и эндотелийпротекторного средства. Технический результат: показано снижение вязкости крови на 11-30%, снижение АДФ-индуцированной агрегации...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002532356
Дата охранного документа: 10.11.2014
20.12.2014
№216.013.1029

Способ управления процессом получения сыпучей формы холинхлорида на основе сухого свекловичного жома

Изобретение относится к автоматизации процесса получения сыпучей формы холинхлорида на основе сухого свекловичного жома и может быть использовано при производстве кормов. Способ предусматривает смешивание сухого свекловичного жома с предварительно подогретым водным раствором холинхлорида и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002535559
Дата охранного документа: 20.12.2014
27.02.2015
№216.013.2e4f

Иммуноферментная тест-система для количественного определения микополисахаридов и их производных в пыли окружающей среды

Изобретение относится к области биотехнологии и экологии, в частности к тест-системам для определения содержания микополисахаридов и их производных, имеющих в своем составе участки, аналогичные синтетическому линейному нона-β-(1→3)-D-глюкозиду в окружающей среде, в том числе в пыли помещений,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002543323
Дата охранного документа: 27.02.2015
19.01.2018
№218.016.0145

Кардиопротекторная фармацевтическая субстанция и способ ее получения

Настоящее изобретение относится к способу получения неопетрозида А, который может быть использован в медицине в качестве средства, ингибирующего активность в отношении гликогенсинтазы-3β и гликогенсинтазы-3α. Предложенный способ отличается тем, что 2,3-ацетонид-D-рибозу ацилируют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002629772
Дата охранного документа: 04.09.2017
20.01.2018
№218.016.0fbc

Штамм amycolatopsis orientalis - продуцент антибиотика диметилванкомицина и способ получения антибиотика

Заявлена группа изобретений, которая может быть использована при производстве антибактериального антибиотика диметилванкомицина сульфата, эффективного при лечении инфекций, вызываемых грамположительными возбудителями, в том числе метициллинустойчивыми и анаэробами. Предлагается штамм...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633511
Дата охранного документа: 12.10.2017
20.01.2018
№218.016.1414

Способ избирательного удаления о-ацетильных защитных групп в присутствии о-бензоильных

Изобретение относится к способу удаления защитных групп в синтетической химии углеводов, который может быть использован в химической промышленности. Предложенный способ состоит в том, что избирательно удаляют О-ацетильные защитные группы в присутствии О-бензоильных в олигосахаридах, обрабатывая...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002634707
Дата охранного документа: 03.11.2017
23.02.2019
№219.016.c7ab

Регулятор роста и развития сельскохозяйственных культур

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для регулирования роста и развития сельскохозяйственных культур с использованием биологически активных веществ. Применение композиции, содержащей биологически активную сумму тритерпеновых кислот и биологически активный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002321197
Дата охранного документа: 10.04.2008
10.04.2019
№219.017.03e8

Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины (варианты)

Изобретение относится к способу переработки древесины, в частности к способу выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины сучковой зоны лиственницы или пихты. Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины, в котором измельченную древесину сучковой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002359666
Дата охранного документа: 27.06.2009
+ добавить свой РИД