Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ ПОДОРОЖНИКА БОЛЬШОГО

Изобретение относится к фармации и медицинской промышленности, а именно к способу получения биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья, и касается получения водорастворимых полисахаридов из листьев подорожника большого. Полисахариды, выделенные из листьев подорожника большого, обладают отхаркивающим, гастропротекторным и противовоспалительным действием [Олейников Д.Н., Samuelsen А.В., Танахаева Л.М. Подорожник большой (Plantago major L.), химический состав и применение // Химия растительного сырья. - 2007. - №2. - с.37-50].

Известен способ получения суммы полисахаридов [RU 2177793, A61K 35/78, A61K 31/715, A61P 29/00, C08B 37/00, 10.01.2002 г.]. В качестве сырья используют траву или шрот травы мальвы низкой. Сырье экстрагируют водой при нагревании до 95°C при соотношении сырье:экстрагент 1:10 в течение 30 минут. Повторное извлечение и отделение сырья проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. Полисахариды осаждают четырехкратным количеством 96%-ного этанола при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом и высушивают. Причем выход порошка суммы полисахаридов 13,6% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса и невысокий выход целевого продукта.

Наиболее близким к заявленному способу является способ получения водорастворимых полисахаридов, осуществляемый путем экстрагирования растительного сырья горячей водой, упаривания экстракта, осаждения целевого продукта, его промывки и осушки [RU 2232774, C08B 37/00, A61K 35/78, 20.07.2004 г.]. В качестве исходного сырья используют шрот травы фиалки душистой (Viola odorata L.) после экстракции полифенольных соединений 70%-ным этанолом. Затем шрот экстрагируют водой при нагревании до 95°C при соотношении сырье-экстрагент 1:10 в течение 30 минут, повторное извлечение проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. После этого полисахариды осаждают трехкратным количеством 96%-ного этилового спирта при комнатной температуре. Плотный осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом, ацетоном и затем сушат. Причем выход порошка суммы полисахаридов 10,5% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса и невысокий выход целевого продукта.

Задачей настоящего изобретение является устранение недостатков ранее известных способов.

Технический результат изобретения заключается в увеличении выхода целевого продукта и сокращении длительности процесса извлечения водорастворимых полисахаридов.

Технический результат достигается тем, что в способе получения водорастворимых полисахаридов из листьев подорожника большого, включающем экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, нагретой до температуры кипения, осаждение водорастворимых полисахаридов, его промывку, сушку, двукратное проведение повторного экстрагирования, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов, фильтрование осадка, промывание и высушивание, согласно изобретению в качестве растительного сырья используют листья подорожника большого, измельченные до линейного размера в 1 мм; экстрагирование проводят при соотношении сырье:экстрагент 1:20 при обработке в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 20 мин при температуре 80°C; повторные экстрагирования проводят при соотношении сырье:экстрагент 1:20 и 1:10; растительный материал отделяют путем фильтрации; водорастворимые полисахариды осаждают троекратным количеством 95%-ного этанола при перемешивании, нагревая на водяной бане до 30°C в течение 5 мин; фильтрование осадка проводят через 30 мин через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре проводят последовательно 15 мл раствора 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1) в соотношении сырье: раствор 1:15 и 10 мл смеси этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1) в соотношении сырье:раствор 1:10, высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°C до постоянной массы.

На фиг.1 представлена таблица 1 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях подорожника большого при варьировании степени измельчения сырья и температуры ультразвуковой бани.

На фиг.2 представлена таблица 2 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях подорожника большого при варьировании степени кратности и длительности экстрагирования.

Пример 1. Для получения водорастворимых полисахаридов аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром 1 мм. Около 10 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды очищенной, нагретой до температуры кипения, помещают в ультразвуковую ванну с частотой 35 КГц при температуре 80°C, экстрагируют 20 мин. Экстракцию повторяют еще 2 раза, прибавляя сначала 200 мл, а затем 100 мл воды.

Водные извлечения объединяют и фильтруют через 10 слоев марли, вложенной в стеклянную воронку диаметром 5 см и предварительно промытой водой очищенной. Осаждение проводят троекратным количеством 95%-ного этилового спирта, перемешивают, подогревают на водяной бане до 30°C в течение 5 мин. Через 30 минут содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°C до постоянной массы.

Пример 2. Для количественного определения содержания полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье проводят экстрагирование согласно примеру 1, все водные извлечения объединяют в колбе на 500 мл, фильтруют и доводят объем раствора до метки (раствор А).

25 мл раствора А помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавляют 75 мл 95% этилового спирта, перемешивают, подогревают на водяной бане до 30°C в течение 5 мин. Через 30 минут содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95% этилового спирта в воде очищенной (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95% этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°C до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по стандартной формуле:

,

где m₁ - масса высушенного фильтра, г; m₂ - масса высушенного фильтра с осадком, г; m - навеска сырья, г; W- потеря в массе сырья при высушивании, %.

Предлагаемый способ позволяет интенсифицировать процесс получения водорастворимых полисахаридов и снизить время, расходуемое на него до 2 часов, а также увеличить выход продукта до 24,05% в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Данные по количественному определению водорастворимых полисахаридов (%) в листьях подорожника большого в зависимости от степени измельчения сырья и температуры ультразвуковой бани, а также от степени кратности и длительности экстрагирования приведены на фигурах 1 и 2.