Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 2-АМИНО-2-[2-(4-С3-С21-АЛКИЛФЕНИЛ)ЭТИЛ]ПРОПАН-1, 3-ДИОЛОВ

Настоящее изобретение относится к способам получения 2-амино-2-[2-(4-С_2-20-алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолов и к соединениям, применяемым в данных способах.

2-амино-2-[2-(4-C_2-20-алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолы раскрыты в заявке ЕР-А-1627406, релевантные части которой включены в настоящее описание посредством ссылки. Исходя из наблюдаемой активности, было установлено, что данные соединения пригодны в качестве иммунодепрессантов. Таким образом, данные соединения могут быть использованы для лечения или предотвращения аутоиммунных заболеваний или отторжения ксенотрансплантанта. Конкретным соединением данного типа является FTY720, т.е. 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диол, имеющий следующую структуру:

Было установлено, что FTY720 пригоден для предотвращения аутоиммунных заболеваний, таких как рассеянный склероз. FTY720 является первым в классе модуляторов рецептора сфингозин 1-фосфафата (SP), эффективных при клинических исследованиях рассеянного склероза.

В WO 00/27798 описаны различные способы получения 2-амино-2-[2-(4-C_2-20-алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолов. Некоторые из этих способов, касающиеся получения FTY720, показаны ниже на реакционной схеме, с использованием нумерации позиций, приведенной в публикации:

Вышеуказанные способы включают получение промежуточного соединения 18 посредством ацилирования соединения 16. Однако в результате процесса ацилирования образуется смесь орто-, мета- и пара-замещенных продуктов. Ни один из данных продуктом не является биологически активным. Таким образом, необходимы способы получения 2-амино-2-[2-(4-С_2-20алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолов, в частности FTY720, и их солей, с улучшенной региоселективностью в отношении ядра-положения бензольного кольца.

Кроме того, вышеуказанные способы включают много стадий, т.е. много этапов ректификации или разделения промежуточных продуктов между каждыми стадиями, например, посредством кристаллизации, экстракции, фильтрации и/или осаждения. Таким образом, необходима усовершенствованная схема реакции, требующая меньше стадий очисток или обработок промежуточных продуктов.

В настоящем изобретении предложены способы получения 2-амино-2-[2-(4-С_2-20алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолов, в частности FTY720, в свободной форме или в форме солей.

Новые способы настоящего изобретения могут проводиться в режиме непрерывного потока, например в виде многокомпонентной каскадной реакции. Например, свободная форма FTY720 может накапливаться непрерывно, например, только в течение одной стадии. Такой улучшенный способ может снизить или даже исключить необходимость очистки или разделения различных промежуточных соединений. Способ согласно изобретению позволит сократить или даже исключить очистку и разделение между стадиями.

Настоящее изобретение относится к способам получения 2-амино-2-[2-(4-С_2-20алкилфенил)этил]пропан-1,3-диолов, в частности FTY720, в свободной форме или в виде солей, в непрерывном режиме, например посредством многокомпонентной домино-реакции.

Многокомпонентная каскадная реакция (или многокомпонентные домино-реакции) определяется как последовательность моно- или бимолекулярных элементарных взаимодействий, протекающих без выделения промежуточных соединений или обработки соединений, образовавшихся на предшествующих (-ей) стадях (-ии). В соответствии с изобретением реагенты могут добавляться в четко упорядоченной последовательности, с изменением условий между их добавлением или без таковых изменений. В другом варианте осуществления изобретения все реагенты присутствуют с момента начала процесса, а условия изменяются последовательно. Многокомпонентные домино-реакции известны из уровня техники и описаны, например, в «Domino reactions in organic Synthesis», Angew. Chem. Int.Ed. том 46, 17 стр. 2977-2978.

Первым объектом настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I), например, FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли:

,

где R¹ представляет собой водород или C_1-18алкил, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (III):

,

где R² представляет собой защитную группу и "----" обозначает необязательную тройную связь, с получением соединения формулы (II):

;

(б) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(в) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

Восстановление соединения формулы (III) в соединение формулы (II) может быть осуществлено посредством гидрирования, например, в присутствии катализатора, такого как Pd-C.

Соединение формулы (III) может быть получено посредством взаимодействия соединения формулы (V):

,

где R⁴ представляет собой уходящую группу, с соединением формулы (VI):

Сочетание соединений формул (V) и (VI) может быть осуществлено при помощи известных из уровня техники способов, например посредством металлкатализируемых реакций сочетания. Особенно следует упомянуть сочетание Соногашира (см., например, Synthesis (5), 761, (2007); Catalysis Communications, 7, 377 (2006); Org. Synth. Coll., 9, 117 (1998); Tet. Lett., 50, 4467 (1975); J.O.C, 63, 8551 (1998); Djakovitch et al. Adv. Synth. Catal. 346, 1782-1792 (2004); или Hua et al., Journ. Org. Chem., 71, 2535 (2006)). Таким образом, в частном варианте воплощения изобретения реакцию сочетания соединений формул (V) и (VI) осуществляют в присутствии палладиевого катализатора. Могут также присутствовать как медный сокатализатор, так и амин, или оба одновременно. В качестве примера, палладиевый катализатор может содержать один или более лигандов, выбранных из галогенсодержащих лигандов (например, хлора) и фосфинсодержащих лигандов (например, трифенилфосфина). Медный сокатализатор может представлять собой галогенид меди, например йодид меди. Амин может быть, например, триэтиламином.

Соединение формулы (V) может быть получено восстановлением соединения формулы (VII):

где каждый из R³ независимо представляет собой С_1-4алкил.

В качестве примера восстановление соединения формулы (VII) может быть осуществлено с использованием такого восстановителя, как боргидрид щелочного металла. Частным случаем является боргидрид натрия.

Соединение формулы (VII) может быть получено взаимодействием соединения формулы (VIII):

с соединением формулы (IX):

,

где R⁶ представляет собой уходящую группу.

Взаимодействие соединений формул (VIII) и (IX) обычно проводят в присутствии основания, способного отщеплять протон от углеродного атома, расположенного в α-положении к атому азота соединения формулы (VIII). Примеры оснований включают этанолат натрия (этоксид натрия).

Соединение формулы (III) может также быть получено восстановлением соединения формулы (X):

,

где каждый R³ независимо представляет собой С_1-4алкил.

В качестве примера восстановление соединения формулы (X) может быть осуществлено с использованием такого восстановителя, как боргидрид щелочного металла. Частным случаем является боргидрид натрия.

Соединение формулы (X) может быть получено взаимодействием соединения формулы (VII):

с соединением формулы (VI):

Сочетание соединений формул (VII) и (VI) может быть осуществлено с использованием известных из уровня техники методик, например сочетанием Соногашира и другими металлкатализируемыми реакциями сочетания. В частных вариантах осуществления изобретения взаимодействие соединений формул (VII) и (VI) проводят в присутствии палладиевого катализатора, медного сокатализатора и амина. В качестве примера палладиевый катализатор может содержать один или более лигандов, выбранных из галогенсодержащих лигандов (например, хлора) и фосфинсодержащих лигандов (например, трифенилфосфина). Медный сокатализатор может представлять собой галогенид меди, в частности йодид меди.

Соединение формулы (X) может быть также получено при непосредственном взаимодействии соединений формул (VIII), (IX) и (VI) в непрерывном потоке, например, при многокомпонентной домино-реакции. Необязательно на первой стадии соединения формул (VIII) и (IX) смешивают (с образованием соединения формулы (VII)), а затем на следующей стадии добавляют соединение формулы (VI), что приводит к образованию соединения формулы (X).

В настоящем изобретении также предлагается альтернативный способ получения соединения формулы (I), например FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (X) с образованием соединения формулы (IV) (как описано ниже),

(б) восстановление соединения формулы (IV) с образованием соединения формулы (II),

(в) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(г) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

В качестве примера восстановление соединения формулы (X) до соединения формулы (IV) может быть осуществлено путем гидрирования, например, в присутствии такого катализатора, как Pd-C. Восстановление соединения формулы (IV) может быть осуществлено с использованием такого восстановителя, как боргидрид щелочного металла. Частным случаем является боргидрид натрия.

В другом варианте осуществления изобретения соединение формулы (II) может быть получено в непрерывном потоке, например, посредством домино-реакции, непосредственно из соединения формулы (X), при этом способ включает следующие стадии:

(а) восстановление соединения формулы (X) с образованием соединения формулы (IV) и

(б) восстановление соединения, полученного на стадии (а), с образованием соединения формулы (II).

Реакции восстановления на стадиях (а) и (б) могут осуществляться так, как описано ниже.

В другом способе соединение формулы (X) восстанавливают до соединения формулы (III).

Таким образом, настоящее изобретение также относится к способу получения соединения формулы (I), например FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли, включающему;

(а) восстановление соединения формулы (X) с образованием соединения формулы (III),

(б) восстановление соединения формулы (III) с образованием соединения формулы (II),

(в) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(г) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль,

при этом данный способ необязательно проводят в непрерывном потоке, например, в виде домино-реакции.

Согласно другому способу соединение формулы (X) восстанавливают непосредственно до соединения формулы (II). Таким образом, в настоящем изобретении также предлагается способ получения соединения формулы (I), например FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (X) с образованием соединения формулы (II),

(б) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с образованием соединения формулы (I) и

(в) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль,

при этом данный способ необязательно проводят в непрерывном потоке, например, в виде домино-реакции.

Восстановление соединения формулы (X) до соединения формулы (II) может быть осуществлено, например, гидрированием, обычно в присутствии катализатора, такого как Pd-C. В частном случае соединение формулы (X) восстанавливают гидрированием в присутствии протонного кислотного растворителя, такого как уксусная кислота. Пригодные для этого методики известны специалистам в данной области.

Согласно еще одному способу соединение формулы (X) получают в непрерывном потоке, например, посредством домино-реакции. Например, соединение формулы (X) получают непосредственно из смеси соединения формулы (VIII), соединения формулы (IX) и соединения формулы (VI), т.е. без обработки, например без очистки промежуточного соединения формулы (VII).

Соединения формул (VIII), (IX) и (VI) могут быть смешаны в начале реакции. Как вариант, сначала могут быть смешаны соединения формул (VIII) и (IX), а лишь затем добавлено соединение формулы (VI). Сочетание соединений формул (VIII) и (IX) может проводиться так, как описано выше. Сочетание соединений формул (VII) и (VI) также может проводиться так, как описано выше, например, с использование метода Соногашира.

Таким образом, изобретение также относится к способу получения соединения формулы (X), включающему:

(а) взаимодействие соединений формул (VIII) и (IX) с получением соединения формулы (VII),

(б) взаимодействие соединения формулы (VI) непосредственно с соединением, полученным на стадии (а), с образованием соединения формулы (X),

при этом данный способ проводят в непрерывном потоке, например в виде домино-реакции.

Кроме того, настоящее изобретение относится к непрерывному способу, например многокомпонентной домино-реакции, для получения соединения формулы (I), например FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли, включающему:

(а) взаимодействие соединений формул (VIII) и (IX) с получением соединения формулы (VII),

(б) взаимодействие соединения формулы (VI) непосредственно с соединением, полученным на стадии (а), с образованием соединения формулы (X),

(в) восстановление соединения, непосредственно полученного на стадии (б), с получением соединения формулы (II),

(г) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с образованием соединения формулы (I) и

(д) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

Необязательно стадию (в) проводят следующим образом:

(в1) восстановление соединения, полученного непосредственно на стадии

(б), с получением соединения формулы (IV) и

(в2) восстановление соединения, полученного непосредственно на стадии (в1), с получением соединения формулы (II).

Исключительно в иллюстративных целях на нижеследующей реакционной схеме вкратце показаны различные способы осуществления настоящего изобретения:

Как видно из вышеуказанной схемы, применение соединений формулы (IX), которые являются легкодоступными из коммерческих источников, обеспечивает региоселективный способ с регулируемым образованием пара-замещенных продуктов.

Изобретение включает в себя вышеуказанные способы получения соединения формулы (I), а также каждую их стадию и все сочетания последовательных стадий. Как указывалось ранее, соединение формулы (I), например FTY720, может быть в дальнейшем преобразовано в фармацевтически приемлемую солевую форму.

Ниже в пронумерованных параграфах приведены частные варианты предлагаемых способов:

1. Способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (III) с получением соединения формулы (II),

(б) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(в) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

2. Способ получения по параграфу 1, в котором соединение формулы (III) получают посредством взаимодействия соединения формулы (V) с соединением формулы (VI).

3. Способ получения по параграфу 2, в котором соединение формулы (V) получают путем восстановления соединения формулы (VII).

4. Способ получения по параграфу 3, в котором соединение формулы (VII) получают посредством взаимодействия соединения формулы (VIII) с соединением формулы (IX).

5. Способ получения по параграфу 1, в котором соединение формулы (III) получают путем восстановления соединения формулы (X).

6. Способ получения по параграфу 5, в котором соединение формулы (X) получают посредством взаимодействия соединения формулы (VII) с соединением формулы (VI).

7. Способ получения по параграфу 6, в котором соединение формулы (VII) получают посредством взаимодействия соединений формул (VIII) и (IX) в соответствии с параграфом 4.

8. Способ получения по параграфу 5, в котором соединение формулы (X) получают посредством взаимодействия соединений формул (VIII), (IX) и (VI).

9. Способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (X) с получением соединения формулы (IV),

(б) восстановление соединения формулы (IV) с получением соединения формулы (II),

(в) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(г) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

10. Способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (X) с получением соединения формулы (II),

(б) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(в) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

11. Способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, включающий:

(а) восстановление соединения формулы (X) с получением соединения формулы (III),

(б) восстановление соединения формулы (III) с получением соединения формулы (II),

(в) удаление защитной группы из соединения формулы (II) с получением соединения формулы (I) и

(г) необязательное превращение соединения формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

12. Способ по параграфу 9 или параграфу 10, в котором соединение формулы (X) получают посредством взаимодействия соединений формул (VII) и (VI) в соответствии с параграфом 6.

13 Способ по параграфу 12, в котором соединение формулы (VII) получают посредством взаимодействия соединений формул (VIII) и (IX) в соответствии с параграфом 4.

14. Способ по параграфу 9 или параграфу 10, в котором соединение формулы (X) получают посредством взаимодействия соединений формул (VIII), (IX) и (VI) в соответствии с параграфом 8.

15. Способ по одному из предыдущих параграфов, который включает превращение соединения формулы (I) в соль, например гидрохлорид.

16. Способ по одному из предыдущих параграфов, который осуществляют в непрерывном потоке, например, в виде многокомпонентной домино-реакции.

17. Способ по одному из предыдущих параграфов, в котором соединением формулы (I) является FTY720.

18. Способ получения соединения формулы (II) или его соли, включающий восстановление соединения формулы (III), формулы (VI) или формулы (X).

19. Способ получения соединения формулы (III) или его соли, включающий:

(а) взаимодействие соединения формулы (V) с соединением формулы (VI) или

(б) восстановление соединения формулы (X).

20. Способ получения соединения формулы (IV) или его соли, включающий восстановление соединения формулы (X).

21. Способ получения соединения формулы (V), включающий восстановление соединения формулы (VII).

22. Способ получения соединения формулы (X) или его соли, включающий взаимодействие соединения формулы (VII) с соединением формулы (VI).

23. Способ получения соединения формулы (X) или его соли, включающий взаимодействие соединений формул (VIII), (IX) и (IV).

24. Способ получения соединения формулы (VII) или его соли, включающий взаимодействие соединения формулы (VIII) с соединением формулы (IX).

25. Способ по параграфам 18-24, который осуществляют в непрерывном потоке, например, в виде многокомпонентной домино-реакции.

Кроме того, изобретение относится к следующим соединениям и к их солям, которые могут образовываться при осуществлении стадий восстановления, например при восстановлении соединения формулы (X):

Настоящее изобретение также относится к следующему способу:

1а. Способ получения соединения формулы (ХIа), включающий восстановление соединения формулы (X).

Настоящее изобретение также относится к следующему способу:

1а. Способ получения соединения формулы (XIb), включающий восстановление соединения формулы (X).

Настоящее изобретение также относится к следующему способу:

1а. Способ получения соединения формулы (Х1с), включающий восстановление соединения формулы (X).

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению различных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (ХIа), (XIb) и (ХIс), и их солей, для получения 2-амино-2-[2-(4-С_2-20алкилфенил)этил]пропан-1,3-диола, например FTY720, или его фармацевтически приемлемой соли.

Соединение формулы (I) или промежуточные соединения могут быть очищены и/или выделены традиционными способами, такими как перекристаллизация, колоночная хроматография, дистилляция, разделение центрифугированием, промывка или сушка.

Соединение формулы (I) может быть превращено в фармацевтически приемлемую соль. Примеры солей включают соли с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорид, гидробромид и сульфат, соли с органическими кислотами, такие как ацетат, лактат, сукцинат или тартрат, фумарат, малеат, бензоат, цитрат, малат, метансульфонат и бензолсульфанат. Предпочтительной солью является гидрохлорид. Соединения формулы (I), в частности FTY720, могут быть превращены в гидрохлоридную соль в соответствии с известными методиками, например добавлением НСl на последней реакционной стадии или перед перекристаллизацией.

В отношении различных формул и способов, описанных в настоящей заявке, R² может представлять собой, например, C_1-18алкил, при этом алкильная группа может быть прямолинейной или разветвленной. В одном из воплощений изобретения R² представляет собой н-гексил. В более конкретном воплощении изобретения R² представляет собой н-гексил, т.е. соединение формулы (I) представляет собой FTY720.

Подходящие защитные группы, которыми может быть R, описаны в

"Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, J. Wiley & Sons NY (1981), 219-287. Примеры включают ацил, такой как формил, ацетил, бензоил; алкоксикарбонил, например трет-бутилоксикарбонил; аллилоксикарбонил; тритил; и т.п. В одном из воплощений изобретения R² представляет собой ацил, например ацетил. Ацильные группы могут быть удалены с использованием хорошо известных из уровня техники методик. В одном из воплощений изобретения R², представляющую собой ацильную группу, удаляют при использовании гидроксида щелочного металла, например гидроксида натрия, гидроксида калия или гидроксида лития.

Каждый R³ может быть независимо выбран из метила, этила, н-пропила, изопропила, н-бутила, втор-бутила, изобутила и трет-бутила.

Примеры уходящих групп, которые могут представлять собой R⁴ или R⁶, включают галоген, например фтор, хлор, бром или йод. В частном воплощении изобретения R⁴ представляет собой бром или хлор.

Примеры уходящих групп, которые может представлять собой R⁵, включают галоген, например фтор, хлор, бром или йод. В частном воплощении изобретения R⁵ представляет собой бром. Другие примеры включают мезилатную, безилатную, тозилатную, нозилатную и брозилатную группы, которые могут быть получены посредством этерификации гидроксильной группы соответствующим сульфонилгалогенидом.

В одних вариантах воплощения изобретения необязательная тройная связь, обозначенная как "----", отсутствует. В других вариантах воплощения изобретения необязательная тройная связь, обозначенная как "----", присутствует.

Различные промежуточные соединения, описанные в настоящей заявке, например соединения формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (ХIс), также могут быть использованы по терапевтическому назначению. В частности, промежуточные соединения, например соединения формул (III), (V), (VII)), (X), (XIa), (XIb) и (ХIс), могут быть пригодны в качестве агонистов или антагонистов рецептора сфингозин-1 фосфата (SP), например, для:

а) лечения или предотвращения отторжения трансплантанта органа или ткани, например для лечения реципиентов транслантантов сердца, легкого, совместно сердца и легкого, печени, почки, поджелудочной кислоты, кожи или роговицы, или для предотвращения реакции «трансплантант против хозяина», такой как иногда возникает после пересадки костного мозга, в частности для лечения острого или хронического отторжения алло- или ксенотрансплантанта или при трансплантации вырабатывающих инсулин клеток, например клеток панкреатических островков, и

б) лечения или предотвращения аутоиммунных заболеваний или воспалительных состояний, например ревматоидного артрита, системной красной волчанки, тиреоидита Хашимото, рассеянного склероза, миастении гравис, диабета I или II или связанных с ним нарушений, васкулита, пернициозной анемии, синдрома Шенгрена, увеита, псориаза, офтальмопатиии Грейвса, очаговой алопеции и др., аллергических заболеваний, например аллергической астмы, атопического дерматита, аллергического ринита/конъюнктивита, аллергического контактного дерматита, воспалительных заболеваний необязательно за счет аномальных реакций, например воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона или язвенного колита, наследственной бронхиальной астмы, воспаления легких, воспаления печени гломерулярного воспаления, атеросклероза, остеоартрита, раздражающего контактного дерматита и других экзематозных дерматитов, себоррейного дерматита, иммунологически опосредованных кожных проявлений, глазных воспалительных заболеваний, кератоконъюктивита, миокардита или гепатита.

Для вышеуказанных применений требуемая дозировка будет в значительной степени зависеть от типа введения, конкретных условий лечения и требуемого эффекта. В основном приемлемые результаты получают при суточных дозах, составляющих от около 0,1 до около 100 мг/кг массы тела. Номинальная суточная доза для большого млекопитающего, например для человека, находится в интервале от около 0,5 мг до 2000 мг при непрерывном введении, например, небольшими дозами до четырех раз в день или в пролонгированной форме.

Соединения могут быть введены любым подходящим путем, например орально, а именно в форме таблетки или капсулы, топически или парентерально, например внутривенно.

Фармацевтические композиции могут быть получены традиционными способами посредством смешения соединения с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Стандартные лекарственные формы для орального введения содержат, например, от около 0,1 мг до около 500 мг активного вещества.

Соединения могут быть введены в свободной форме или в виде фармацевтически приемлемой соли, например, как указаны выше. Такие соли могут быть получены традиционными способами и обладают таким же уровнем активности, что и свободные соединения.

Соединения могут быть введены в виде индивидуального активного вещества или вместе с другими лекарственными средствами по иммуномодулирующим схемам или с другими противовоспалительными агентами, например, для лечения или предотвращения острого или хронического отторжения аллотрансплантанта, воспалительного или аутоиммунного расстройства. Например, они могут быть использованы в комбинации с ингибиторами кальциневрина, например циклоспорином А, циклоспорином G, FK-506, ABT-281, ASM 981; ингибитором mTOR, например рапамицином, 40-O-(2-гидрокси)этилрапамицином, CCI779, АВТ578 или АР23573 и т.д.;

кортикостереоидами; циклофосфамидом; азатиопреном; метотрексатом; другими агонистами рецептора S1P, например FTY 720 или его аналогами; лефлуномидом или его аналогами; мизорибином; микофенольной кислотой; микофенолатом мофетила; 15-деоксиспергуалином или его аналогом; иммуносупрессивными моноклональными антителами, например с моноклональными антителами к лейкоцитарным рецепторам, например МНС, CD2, CD3, CD4, CD11a/CD18, CD7, CD25, CD27, B7, CD40, CD45, CD58, CD137, ICOS, CD150 (SLAM), OХ40, 4-1BB или их лигандам, например CD154; или с другими иммуномодуляторными соединениями, например с рекомбинантной связывающей молекулой, содержащей, по крайней мере, фрагмент внеклеточного домена CTLA4 или его мутанта, например, по крайней мере, внеклеточный фрагмент CTLA4 или его мутанта, связанный с последовательностью белка non-CTLA4, например CTLA4Ig (например, обозначаемого как АТСС 68629) или его мутанта, например, LEA29Y, или с другими ингибиторами адгезионных молекул, например mAbs или низкомолекулярными ингибиторами, включающими антагонисты LFA-1, антагонисты селектина и антагонисты VLA-4.

В случае введения соединения в сочетании с другим иммуномодулирующим или противовоспалительным агентом дозировка совместно вводимого иммуномодулирующего или противовоспалительного агента в значительной степени будет зависеть от типа совместно используемого лекарственного средства, условий лечения и т.д.

Настоящее изобретение также относится к:

1. Способу лечения или предотвращения отторжения трансплантанта органа или ткани, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или нескольких промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (ХIс), или их фармацевтически приемлемой соли.

2. Способу лечения или предотвращения аутоиммунного заболевания или воспалительного состояния, например рассеянного склероза, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или нескольких промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их фармацевтически приемлемой соли.

3. Промежуточному соединению, например, выбранному из соединения формулы (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или его фармацевтически приемлемой соли, для применения в качестве фармацевтического препарата.

4. Фармацевтической композиции, содержащей одно или несколько промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.

5. Применению одного или нескольких промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их фармацевтически приемлемой соли, для получения лекарственного средства, например, для вышеописанных способов.

6. Фармацевтической комбинации, содержащей (а) одно или несколько промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их фармацевтически приемлемой соли; и (б) второе лекарственное вещество, при этом второе лекарственное вещество пригодно для предотвращения или лечения вышеописанных состояний.

7. Способу, описанному выше, включающему совместное введение, например одновременно или последовательно, (а) одного или нескольких промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их фармацевтически приемлемой соли и (б) второго лекарственного вещества, при этом второе лекарственное вещество пригодно для предотвращения или лечения вышеописанных состояний.

Кроме того, настоящее изобретение относится к композиции, содержащей соединение формулы (I), например FTY720, или его фармацевтически приемлемую соль, в комбинации с относительно небольшим количеством одного или нескольких промежуточных соединений, например, выбранных из соединений формул (III), (V), (VII), (X), (XIa), (XIb) и (XIc), или их солей.

Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

Пример 1:

В сухую колбу помещают 1,17 г раствора (21% содерж.) этанолата натрия (0,24 г=3,62 ммоля) в этаноле. Затем раствор разбавляют 2 мл абс. этанола. После этого порциями добавляют диэтилацетамидомалонат и раствор нагревают до 60°С в течение 30 мин. Полученный прозрачный желтый раствор охлаждают до комнатной температуры. После этого при комнатной температуре через капельную воронку в течение 10 мин добавляют 0,51 г (1,81 ммоля) 4-бромфенилацилбромида, растворенного в 5 мл сухого этанола и 2 мл сухого ТГФ. Данные ВЭЖХ указывают на полное превращение 4-бромфенилацилбромида непосредственно после завершения добавления. Затем к реакционной смеси при перемешивании добавляют 10% лимонную кислоту (25 мл) при 0°С. После этого добавляют 50 мл этилацетата и разделяют фазы. Водную фазу три раза экстрагируют 20 мл этилацетата. Объединенные органические фазы три раза экстрагируют раствором КНСО₃, а затем сушат над MgSO₄. После фильтрования при пониженном давлении выпаривают растворители, а затем в высоком вакууме, получая сырой продукт в виде желтого масла. Избыток ацетамидомалоната, содержащийся в сыром продукте, отделяют колоночной хроматографией на силикагеле (толуол: этилацетат=1:1).

¹H-ЯМР: (400 МГц, CDCl₃); н (ppm), δ=1,25 (6Н, т, -СН₃), 2,00 (3Н, с, -СН₃ (Ас), 4,22 (2Н, с, -СН₃-), 4,28 (4Н, кв, O-CH₂-), 7,12 (1Н, с, -NHCO), 7,62 (2H, д, arH), 7,84 (2H, д, arH). MC: [M+H]⁺=415

Пример 2:

В сухую колбу под атмосферой сухого азота помещают 0,83 г (2 ммоля) соединения примера 1, а затем - 9 мл смеси NMP (N-метилпирролидона) и триэтиламина (2:1). После этого к раствору в атмосфере азота добавляют 0,33 г (3 ммоля) 1-октина, 8 мг Cul (~2 мол.%) и 21 мг (1,5 мол.%) бис(трифенилфосфин) палладий(II) хлорида. Полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи (15 ч). Данные ВЭЖХ указывают на полное превращение. Затем к оранжевой реакционной смеси (суспензии) добавляют 30 мл воды и 30 мл трет-бутилметилового эфира. Полученную бифазную смесь перемешивают в течение 10 мин и затем фазы разделяют. Органическую фазу три раза промывают 20 мл раствора лимонной кислоты (10%), а затем три раза - 20 мл рассола. После этого органическую фазу сушат над MgSCO₄, фильтруют и выпаривают под вакуумом, получая темноокрашенное масло. Сырое масло дегазируют в высоком вакууме.

¹Н-ЯМР: (400 МГц, СDСl₃); δ_H (ррт) δ=0,85 (3Н, т, -СН₃), 1,18 (6Н, т, -СН₃), 1,20-1,30 (4Н, ушир. м., 2 x -СН₃-), 1,30-1,46 (2Н, ушир. м, -СН₃), 1,50-1,58 (2Н, м, -СН₂), 1,90 (3Н, с, -СН₃ (Ас), 2,35 (3Н, т, 2Н, _{пропарг.}), 4,16 (2Н, с, -СН₂-), 4,20 (4Н, кв, 2 x -О-СН₃-), 7,04 (1Н, с, -NH-CO), 7,38 (2Н, д, аrН), 7,80 (2Н, д, аrН). МС: [M+H]⁺=444,3

Пример 3:

В 50 мл трехгорлую колбу, предварительно высушенную в атмосфере азота, помещают 4,5 г (14 ммоля) этоксида натрия (21% раствор в этаноле) и дополнительно 7,5 мл сухого этанола. После этого при комнатной температуре в течение 10 мин при перемешивании малыми порциями добавляют 4,5 г (21 ммоля) диэтилового эфира ацетамидомалоновой кислоты. Полученный прозрачный желтый раствор перемешивают еще 30 мин при 25°С. Затем через капельную воронку в течение 30 мин при 25°С добавляют 1,9 г (7 ммоля) 4-бромфенацилбромида, растворенного в 7 мл тетрагидрофурана и 23 мл этанола. По данным ВЭЖХ непосредственно после завершения добавления наблюдается полное превращение фенацилбромида.

К раствору алкилированного малоната добавляют 7 мл сухого NMP и 1,54 г (14 ммоля) 1-октина. После этого добавляют катализаторный коктейль 0,047 г (0,25 ммоля) йодида меди и 0,197 г (0,28 ммоля) бис(трифенилфосфин)палладий(II) хлорида, и полученную суспензию нагревают до 80°С. Данные ВЭЖХ по истечении 30 мин указывают на превращение промежуточного арилбромида. Реакционную смесь выпаривают под вакуумом. Остаток растворяют в 60 мл ТБМЭ и экстрагируют 30 мл воды. Водную фазу дважды экстрагируют 30 мл ТБМЭ, а объединенные органические фазы четыре раза промывают 20 мл воды. После этого органическую фазу сушат над Na₂SО₄ и фильтруют. Фильтрат выпаривают под вакуумом, получая сырой продукт. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией над силикагелем с использованием элюентов (этилацетат:гептан, 1:2). Данные ¹Н-ЯМР соответствуют данным примера 2.

Пример 4:

В сухую колбу под атмосферой N₂ помещают 3,25 г раствора 21% этоксида натрия в этаноле (соответствует 10 ммоля этоксида натрия) и 7,5 мл сухого NMP (N-метилпирролидинона). Затем порционно в течение 10 мин добавляют 3,26 г (15 ммоля) твердого диэтилового эфира 2-ацетамидомалоновой кислоты с получением коричневой суспензии. После этого дополнительно добавляют 3,0 мл этанола и нагревают до 43°С, получая коричнево-красный раствор. К депротонированному малонату через капельную воронку в течение 25 мин медленно добавляют 1,39 г (5 ммоля) 4-бромфенацилбромида, непосредственно растворенного в 14 мл NMP. По данным ВЭЖХ непосредственно после завершения добавления наблюдается превращение 4-бромфенацилбромида в требуемый продукт.

Пример 5:

Реакционный раствор, содержащий 2 ммоля продукта VII, получают так, как описано в примере 3. Полученный раствор нагревают до 65°С в атмосфере аргона. Затем добавляют раствор 0,44 г (4 ммоля) 1-октана, 16 мг (0,07 ммоля) йодида меди(1) и 56 мг (0,05 ммоля) тетракис(трифенилфосфин)-Pd(0) в 2 мл NMP. Полученную смесь нагревают при 70°С. По истечении 30 мин данные ВЭЖХ указывают на полное превращение уже после 25 мин.

Пример 6:

В сухую трехгорлую колбу в атмосфере азота помещают 3,9 г (12 ммоля) раствора этоксида натрия (21% в этаноле), 15 мл этанола и 3,9 г (18 ммоля) диэтилового эфира 2-ацетамидомалоновой кислоты. К полученному раствору затем добавляют 1,32 г (12 ммоля) 1-октина, 0,04 г (0,2 ммоля) йодида меди(1) и 0,17 г (0,24 ммоля) бис(трифенилфосфин)Pd(II)-хлорида, полученного в суспензии. К данной суспензии через капельную воронку в течение 30 мин при комнатной температуре добавляют 1,7 г (6 ммоля) 4-бромфенацилбромида, растворенного в 8,5 мл NMP и 10 мл этанола. После завершения добавления реакционную смесь нагревают при перемешивании до внешней температуры 88°С (кипение). По истечении 30 мин по данным ВЭЖХ наблюдается превращение в алкилированный продукт (8,45 мин). Реакционную смесь выпаривают под вакуумом, обрабатывают и очищают так, как описано в примере 3.

Пример 7:

В автоклав помещают 0,91 г (2 ммоля) исходного вещества из примера 5, 40 мл этанола и 200 мг катализатора Pd-C (5%) (Degussa E-101). Реакционную смесь гидрируют при температуре 55°С и 10 бар. По истечении 18 ч давление уменьшают до 4 бар. Данные ВЭЖХ-анализа указывают на превращение исходного вещества в новое промежуточное соединение и требуемый продукт (IV). Добавляют еще 200 мг катализатора и гидрирование продолжают при 4 бар и 55°С.

По истечении 45 часов данные ВЭЖХ указывают на полное превращение в требуемый продукт (IV). Реакционную смесь фильтруют и промывают этанолом для удаления катализатора. Фильтрат выпаривают под вакуумом, получая белое масло (0,75 г), которое при хранении при комнатной температуре кристаллизуется. ¹Н-ЯМР- и МС-анализы, также как сравнение с эталонным образцом, подтверждают следующую структуру:

¹Н ЯМР: (400 МГц, CDCl₃); δ_H (м.д.) δ=0,85 (3Н, т, СН₂- ), 1,2-1,35 (16Н, м, 6Н: О-СН₂- , 10Н, - - - - -СН3), 1,55 (2Н, м, -CH₂-Ar), 1,95 (3Н, с, -СО), 2,42 (2Н, т, C- -CH₂-Ar), 2,5 (2Н, т, С-СН₂- -Аr), 2,68 (2Н, т, -Аr), 4,21 (4Н, м, O- -СН₃), 6,75 (1Н, с.NH-CO) 7,55 (4Н, дд, СН_Ar).

МС: [M+H]⁺=434

Пример 8:

В соответствии с первой стадией примера 3 получают 206 г реакционного раствора продукта VII, с концентрацией 0,17 ммоля/г. Затем получают второй раствор 0,23 г (1,2 ммоля) йодида меди (I), 0,98 г (1,4 ммоля) бис(трифенилфосфин)палладий (II) хлорида и 7,71 г (69,9 ммоля) 1-октина в 46,01 г NMP. Полученный раствор имеет концентрацию 1,26 ммоля/г (1-октин/раствор). Оба раствора выдерживают в атмосфере азота. Микрореактор Эрфельда ополаскивают безводным этанолом и нагревают до 110°С. Затем в реактор добавляют раствор, содержащий продукт VII, со скоростью 0,678 г/мин, и раствор 1-октина со скоростью 0,192 г/мин, и поддерживают систему в устойчивом состоянии при давлении 3,5 бар в течение 45 мин, собирая получаемый реакционный раствор. Отделенный реакционный раствор обрабатывают и очищают так, как описано в примере 3.