ИНДИКАТОР БИОЛОГИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ И СПОСОБ ИЗМЕРЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ

Область техники

Настоящее изобретение относится к индикаторам биологической нагрузки и способам измерения биологических нагрузок. А именно настоящее изобретение относится к применению методов молекулярной биологии для объективной оценки биологических нагрузок, таких как стресс и утомление.

Предпосылки изобретения

Психический и/или физический стресс отрицательно влияет на защитные механизмы организма, включающие нервную, эндокринную и иммунные системы (см. непатентные ссылки 1 и 2). При стрессе повышается уровень различных цитокинов (таких как IL-1β, IL-6 и TNF-α) (см. непатентные ссылки 1 и 3). Эти данные позволяют предположить, что цитокины, возможно, оказывают отрицательное влияние на защиту организма (см. непатентную ссылку 4). Однако до сих пор полностью не известен молекулярный механизм индукции цитокинов, снижающих защиту организма, при стрессе.

Интерлейкин-18 (IL-18) представляет собой цитокин, открытый как фактор индукции интерферона-γ (см. непатентную ссылку 5, патентную ссылку 1). IL-18 имеет различную биологическую активность, такую как индукция Fas-лиганда, повышение цитолитической активности Т-клеток (см. непатентную ссылку 6) и продукция IL-4 и IL-13 (см. непатентную ссылку 7). IL-18 активирует Toll-подобный рецептор 2 (см. непатентную ссылку 9) и миелоидный дифференцирующий белок (Myd)-88 (см. непатентную ссылку 10). Активация этих белков необходима для индукции IL-6 (см. непатентную ссылку 11). Поэтому IL-18 вовлечен в продукцию как Th1-, так и Th2-цитокинов (см. непатентную ссылку 12).

IL-18 экспрессируется в виде белка-предшественника весом 24 кД, процессинг которого до зрелой активной формы весом 18 кД осуществляется IL-1β-конвертирующим ферментом (ICE, также называемым каспаза-1) (см. непатентную ссылку 13). Каспаза-1 синтезируется в виде неактивного белка-предшественника прокаспазы-1, которую активирует каспаза 11 (см. непатентную ссылку 14). Было опубликовано, что экспрессия мРНК каспазы-1 включает трансактивацию NF-κВ (см. непатентную ссылку 15), которая опосредуется МАР-киназой Р38 (см. непатентную ссылку 16). Также было опубликовано, что индукция мРНК каспазы-11 LPS (липополисахаридом) ингибируется SB203580, ингибитором МАР-киназы Р38 в глиомной клеточной линии С6 (см. непатентную ссылку 17).

В недавно опубликованных исследованиях было показано, что мРНК IL-18 экспрессируется в надпочечниках в ответ на стимуляцию адренокортикотропным гормоном (АСТН) и холодовой стресс (смотри непатентную ссылку 18). Также было опубликовано, что для экспрессии мРНК IL-18 в клетках надпочечников и клетках иммунной системы использовали различные промоторы (смотри непатентную ссылку 19). Однако в описанных выше исследованиях не упоминается индукция зрелого IL-18. С другой стороны, было опубликовано, что у психически больных пациентов увеличивается уровень IL-18 в плазме крови (смотри непатентную ссылку 20).

В современном обществе люди живут и работают при различных типах стресса. В общем существуют различия сенсорного восприятия стресса индивидуумами, и нет определенного индикатора присутствия или отсутствия стресса, или интенсивности стресса. В результате проведенных исследований авторы изобретения обнаружили, что стресс вызывает увеличение уровня цитокинов, таких как IL-18, и выявили, что путь сигнальной трансдукции с IL-18 на вершине стрессового каскада, так что можно объективно оценивать стресс (смотри непатентные ссылки 21-23).

патентная ссылка 1: JP-A-8-193098

патентная ссылка 2: WO 2006/003927

непатентная ссылка 1: Dugue, B. et al. Scand. J. Clin. Invest. 53, 555-561 (1993)

непатентная ссылка 2: Kiecolt-Glaser, J.K. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 3043-3047 (1996)

непатентная ссылка 3: Endocrinology 133, 2523-2530 (1993)

непатентная ссылка 4: Schubert, C. et al. Psychosom. Med. 61, 876-882 (1999)

непатентная ссылка 5: Zhou, D. et al. Nature 378, 88-91 (1995)

непатентная ссылка 6: Nakanishi, K. et al. Annu. Rev. Immunol. 19 423-474 (2001)

непатентная ссылка 7: Hoshino, T. et al. J. Immunol. 162, 5070-5077 (1999)

непатентная ссылка 8: Dinarello, C.A. et al. J. Leukoc. Biol. 63, 658-664 (1998)

непатентная ссылка 9: Blease, K. et al. Inflamm. Res. 50, 552-560 (2001)

непатентная ссылка 10: Adachi, O. et al. Immunity 9, 143-150 (1998)

непатентная ссылка 11: Takeuchi, O. et al. J. Immunol. 165, 5392-5396 (2000)

непатентная ссылка 12: Hoshino, T. et al. J. Immunol. 166, 7014-7018 (2001)

непатентная ссылка 13: Gu, Y. et al. Science 275, 206-209 (1997)

непатентная ссылка 14: Wang, S. et al. Cell 92, 501-509 (1998)

непатентная ссылка 15: Schauvliege, R. et al. J. Biol. Chem. 277, 41624-41630 (2002)

непатентная ссылка 16: Vanden Berghe, W. et al. J. Biol. Chem. 273, 3285-3290 (1998)

непатентная ссылка 17: Hur, J. et al. FEBS Lett. 507, 157-162 (2001)

непатентная ссылка 18: Conti, B. et al. J. Biol. Chem. 272, 2035-2037 (1997)

непатентная ссылка 19: Sugama, S. et al. J. Immunol. 165, 6287-6292 (2000)

непатентная ссылка 20: Kokai, M. et al. J. Immunother. 25, 68-71 (2002)

непатентная ссылка 21: Sekiyama, A. et al. Immunity 22(6), 669-677 (2005)

непатентная ссылка 22: Sekiyama, A. et al. J Neuroimmunol. 171(1-2), 38-44 (2006)

непатентная ссылка 23: Sekiyama, A. et al. J Med Invest. 52, 236-239 (2005)

Описание изобретения

Проблемы, которые должно разрешить изобретение

Живой организм имеет механизм для поддержания постоянства своих биологических функций в ответ на нагрузки и стимулы. Такой механизм называется гомеостазом или механизмом защиты организма, а различные заболевания вызваны нарушением гомеостаза или механизма защиты организма. Известно, что психический, физиологический, физический или химический стресс и/или утомление действуют как нагрузка на гомеостаз или механизм защиты организма, и что различные заболевания вызваны нарушением гомеостаза или механизма защиты организма.

Нагрузка на гомеостаз или механизм защиты организма, такая как стресс, утомление и тоска, могут в дальнейшем вызвать психические расстройства, физические расстройства и даже самоубийство, и они представляют собой серьезные проблемы со здоровьем. Однако оценка таких состояний, сопровождаемых, в основном, субъективными симптомами, была возможна только путем самооценки. Также было очень трудно детектировать отклонения при помощи известных биохимических или физиологических тестов, и поэтому было невозможно произвести объективную оценку, понять тяжесть или разработать какие-либо лекарственные средства. Были предложены различные биохимические или физиологические индикаторы. Однако гормоны или амины нестабильны, их трудно количественно определить, и поэтому в качестве индикаторов они не подходят, хотя изменение их уровня может быть связано со стрессом.

Целью настоящего изобретения является предоставление методик объективной и специфичной оценки различных нагрузок на живой организм, таких как утомление, оценка которых на сегодняшний момент возможна только посредством субъективных, зависящих от симптомов способов. Поскольку живые организмы ощущают дискомфорт при нагрузках на биологический гомеостаз и механизм защиты организма, то цель настоящего изобретения обязательно включает в себя предоставление методик, способных объективно и специфично определить ощущение дискомфорта или комфорта у живых организмов.

Средства решения проблем

Для решения вышеописанных проблем авторы изобретения провели интенсивные исследования и обнаружили, что исчерпывающее исследование изменений экспрессии цитокинов или хемокинов, составляющих биологический каскад с IL-18 в центре, позволяет объективно понять различные биологические нагрузки, такие как стресс и утомление, тем самым изобретение было завершено.

Соответственно, настоящее изобретение относится к следующему.

[1] Указывающему на стресс агенту, включающему в себя по крайней мере два вида факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF.

[2] Агенту для тестирования стресса, включающему в себя по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[3] Указывающему на утомление агенту, включающему в себя по крайней мере два вида факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF.

[4] Агенту для тестирования утомления, включающему в себя по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[5] Тестовому агенту по вышеупомянутым пунктам [2] или [4], в котором молекула представляет собой антитело.

[6] Способу измерения стресса, включающему в себя измерение уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента по вышеупомянутым пунктам [2] или [5].

[7] Способу измерения утомления, включающему в себя измерение уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента по вышеупомянутым пунктам [4] или [5].

[8] Способу по вышеупомянутым пунктам [6] или [7], в котором вышеупомянутый биологический образец представляет собой плазму, сыворотку, слюну или мочу.

[9] Индикаторному агенту для оценки психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, физического утомления, стресса, плохого настроения, хорошего настроения, некомфортного настроения, дистимии, навязчивого состояния, паники, тревожности, фобии, антропофобии, социофобии, напряжения, интенсивности работы, интенсивности учебы, депрессии, шизофрении, психических состояний, сходных с депрессией, психических состояний, сходных с шизофренией, и угрозы самоубийства, который содержит по крайней мере два вида факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF, в виде взвешенных структурных коэффициентов.

[10] Индикаторному агенту для оценки интенсивности психических расстройств, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, стресса, депрессии, депрессивного состояния, расстройств настроения, шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства, панического расстройства, тревожного расстройства, фобии, антропофобии, социофобии, излишнего напряжения, неспособности адаптироваться к работе или учебе, самоубийственного настроения, личностного расстройства, алкогольного психоза, бессонницы, расстройств суточного ритма, психоневроза, деменции, нейродегенеративного заболевания ЦНС и попытки самоубийства, который содержит по крайней мере два вида факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF в виде взвешенных структурных коэффициентов.

[11] Агенту для тестирования психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, физического утомления, стресса, плохого настроения, хорошего настроения, некомфортного настроения, дистимии, навязчивого состояния, паники, тревожности, фобии, антропофобии, социофобии, напряжения, интенсивности работы, интенсивности учебы, депрессии, шизофрении, психических состояний, сходных с депрессией, психических состояний, сходных с шизофренией, и угрозы самоубийства, который содержит по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[12] Агенту для тестирования интенсивности психических расстройств, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, стресса, депрессии, депрессивного состояния, расстройств настроения, шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства, панического расстройства, тревожного расстройства, фобии, антропофобии, социофобии, излишнего напряжения, неспособности адаптироваться к работе или учебе, самоубийственного настроения, личностного расстройства, алкогольного психоза, бессонницы, расстройств суточного ритма, психоневроза, деменции, нейродегенеративного заболевания ЦНС и попытки самоубийства, который содержит по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[13] Тестовому агенту по вышеупомянутым пунктам [11] или [12], в котором вышеупомянутая молекула представляет собой антитело.

[14] Способу измерения психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, физического утомления, стресса, плохого настроения, хорошего настроения, некомфортного настроения, дистимии, навязчивого состояния, паники, тревожности, фобии, антропофобии, социофобии, напряжения, интенсивности работы, интенсивности учебы, депрессии, шизофрении, психических состояний, сходных с депрессией, психических состояний, сходных с шизофренией, и угрозы самоубийства, который включает в себя стадию измерения уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента по вышеупомянутым пунктам [11] или [13], и

стадию сравнения количества, полученного в вышеупомянутой стадии измерения, с количеством индикаторного агента по вышеупомянутому пункту [9] посредством пропорционального взвешивания.

[15] Способу измерения интенсивности психических расстройств, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, стресса, депрессии, депрессивного состояния, расстройств настроения, шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства, панического расстройства, тревожного расстройства, фобии, антропофобии, социофобии, излишнего напряжения, неспособности адаптироваться к работе или учебе, самоубийственного настроения, личностного расстройства, алкогольного психоза, бессонницы, расстройств суточного ритма, психоневроза, деменции, нейродегенеративного заболевания ЦНС и попытки самоубийства, который включает в себя стадию измерения уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента по вышеупомянутым пунктам [12] или [13], и

стадию сравнения количества, полученного в вышеупомянутой стадии измерения, с количеством индикаторного агента по вышеупомянутому пункту [10] посредством пропорционального взвешивания.

[16] Способу по вышеупомянутым пунктам [14] иди [15], в котором вышеупомянутый биологический образец представляет собой плазму, сыворотку, слюну или мочу.

[17] Набору для тестирования психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, физического утомления, стресса, плохого настроения, хорошего настроения, некомфортного настроения, дистимии, навязчивого состояния, паники, тревожности, фобии, антропофобии, социофобии, напряжения, интенсивности работы, интенсивности учебы, депрессии, шизофрении, психических состояний, сходных с депрессией, психических состояний, сходных с шизофренией, и угрозы самоубийства, содержащему в отдельных секциях по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[18] Набору для тестирования интенсивности психических расстройств, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, стресса, депрессии, депрессивного состояния, расстройств настроения, шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства, панического расстройства, тревожного расстройства, фобии, антропофобии, социофобии, излишнего напряжения, неспособности адаптироваться к работе или учебе, самоубийственного настроения, личностного расстройства, алкогольного психоза, бессонницы, расстройств суточного ритма, психоневроза, деменции, нейродегенеративного заболевания ЦНС и попытки самоубийства, содержащему в отдельных секциях по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

[19] Набору по вышеупомянутым пунктам [17] или [18], в котором вышеупомянутая молекула представляет собой антитело.

Результаты изобретения

Индикаторный агент стресса или утомления по настоящему изобретению, включающий группу факторов, имеющих различные эффекты in vivo, таких как цитокины, позволяет объективную и молекулярно-биологическую оценку степени стресса или утомления у млекопитающего, например человека. Тестовый агент стресса или утомления по настоящему изобретению, включающий молекулы, способные распознавать факторы, имеющие различные эффекты in vivo, такие как цитокины, позволяет объективно и количественно тестировать степень стресса или утомления у млекопитающего, например человека. Способ измерения стресса или утомления по изобретению, включающий измерение концентрации факторов в биологическом образце с тестовым агентом по изобретению, позволяет объективно и количественно измерять степень стресса или утомления у млекопитающего, например человека. Индикаторный агент по настоящему изобретению, включающий факторы, каждый из которых является взвешенным, позволяет объективную, полную и молекулярно-биологическую оценку интенсивности различных психических состояний или расстройств у млекопитающего, например человека. Агент по настоящему изобретению для тестирования интенсивности психических состояний или расстройств, который включает молекулы, способные распознавать факторы, имеющие различные эффекты in vivo, такие как цитокины, где каждая из молекул является взвешенной, позволяет объективно и количественно тестировать интенсивность различных психических состояний или расстройств у млекопитающего, например человека. Способ по настоящему изобретению для измерения интенсивности психических состояний или расстройств, включающий использование агента по настоящему изобретению для тестирования психических состояний или расстройств и использование индикаторного агента психического состояния или расстройства по настоящему изобретению, позволяет объективно и количественно оценить интенсивность различных психических состояний или расстройств у млекопитающего, например человека. Набор по настоящему изобретению для тестирования интенсивности психических состояний или расстройств, включающий тестовые агенты по настоящему изобретению, помещенные в различные секции, можно, соответственно, использовать для единственного или полного исследования интенсивности психических состояний или расстройств.

Поэтому настоящее изобретение применимо для перестройки основ профилактической медицины и организации здравоохранения, оценки и контроля уровня жизненной активности и психического здоровья пациентов в середине лечения, оценки и контроля уровня жизненной активности и психического здоровья у выздоравливающих пациентов, определения ряда производственных или профессиональных или связанных с работой травм и заболеваний, оценки производственных условий, оценки интенсивности работы, оценки условий жизни и работы, оценки санитарных условий в школах или условий обучения или интенсивности обучения, оценки окружающей среды, оценки болезней или расстройств, в основном отличающихся стрессом или утомлением (психосоматическое расстройство, депрессия, психоневроз, синдром хронической усталости, расстройство личности, асоциальное поведение, синдром неспособности к адаптации, замкнутость, синдром «сгорания» на работе, апатия, психогенные реакции, посттравматический стресс и почти все другие заболевания), для международной стандартизации критериев оценки стресса и установления международных критериев для оценки каждого из вышеперечисленных заболеваний.

Краткое описание чертежей

[Фиг. 1a] На фиг. 1a представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови всего у 402 здоровых субъектов (с коэффициентами корреляции от 0,50 до 0,6499, выделенными светло-серым, от 0,65 до 0,7999 - темно-серым, от 0,8 до 0,9999 - черным; что касается относительной частоты корреляции, то p<0,001 при коэффициенте корреляции, составляющем 0,50; в таблице более темное закрашивание указывает на более сильную корреляцию, и то же правило применяется к другим таблицам корреляции, описанным ниже).

[Фиг. 1b] На фиг. 1b представлена таблица, показывающая схему корреляции цитокинов или хемокинов перед ночной сменой в плазме крови у 142 субъектов, которые являлись здоровыми, но часто работали в ночную смену.

[Фиг. 1c] На фиг. 1с представлена таблица, показывающая схему корреляции цитокинов или хемокинов после ночной смены в плазме крови субъектов.

[Фиг. 1d] На фиг. 1d представлена классификационная таблица, полученная методом логистической регрессии для того, чтобы определить, возможно ли по настоящему изобретению корректно классифицировать 90 человек, случайным образом отобранных из субъектов в группе перед ночной сменой и в группе после ночной смены, в которой по настоящему изобретению точность составляет 88%.

[Фиг. 2a] На фиг. 2a представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови через 1 час нагрузки Крепелина (с коэффициентами корреляции от 0,50 до 0,6499, выделенными светло-серым, от 0,65 до 0,7999 - темно-серым, от 0,8 до 0,9999 - черным; что касается относительной частоты корреляции, то p<0,001 при коэффициенте корреляции, составляющем 0,50; в таблице более темное закрашивание указывает на более сильную корреляцию, и то же правило применяется к другим таблицам корреляции, описанным ниже).

[Фиг. 2b] На фиг. 2b представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови через 3 часа нагрузки Крепелина.

[Фиг. 2c] На фиг. 2c представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови после 3 часов нагрузки Крепелина и 3 часов отдыха после нагрузки.

[Фиг. 2d] На фиг. 2d представлена классификационная таблица, полученная в результате анализа данных об 1 часе нагрузки Крепелина и 3 часах нагрузки Крепелина методом логистической регрессии.

[Фиг. 2e] На фиг. 2e представлена классификационная таблица, полученная тем же методом анализа данных о 3 часах нагрузки Крепелина и данных после 3 часов отдыха после нагрузки.

[Фиг. 2f] На фиг. 2f представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови через 1 час упражнений на беговой дорожке.

[Фиг. 2g] На фиг. 2g представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови через 3 часа упражнений на беговой дорожке.

[Фиг. 2h] На фиг. 2h представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови после 3 часов упражнений на беговой дорожке и 3 часов отдыха после упражнений.

[Фиг. 2i] На фиг. 2i представлена классификационная таблица, полученная в результате анализа данных перед упражнениями на беговой дорожке и данных после 1 часа упражнений на беговой дорожке методом логистической регрессии.

[Фиг. 2j] На фиг. 2j представлена классификационная таблица, полученная тем же методом анализа данных после упражнений на беговой дорожке и данных на следующий день.

[Фиг. 2k] На фиг. 2k представлена классификационная таблица, полученная тем же методом анализа данных об 1 часе нагрузки Крепелина и данных о 3 часах упражнений на беговой дорожке.

[Фиг. 2l] На фиг. 2l представлена классификационная таблица, полученная тем же методом анализа данных о 3 часах нагрузки Крепелина и данных о 3 часах упражнений на беговой дорожке.

[Фиг. 2m] На фиг. 2m представлена классификационная таблица, полученная тем же методом анализа данных о 3 часах нагрузки Крепелина с последующими 3 часами отдыха и данных о 3 часах упражнений на беговой дорожке с последующими 3 часами отдыха.

[Фиг. 2n] На фиг. 2n представлена классификационная таблица между группой на следующий день после нагрузки Крепелина и группой на следующий день после упражнений на беговой дорожке.

[Фиг. 3а] На фиг. 3а представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови пациентов с депрессией (с коэффициентами корреляции от 0,50 до 0,6499, выделенными светло-серым, от 0,65 до 0,7999 - темно-серым, от 0,8 до 0,9999 - черным; что касается относительной частоты корреляции, то p<0,001 при коэффициенте корреляции, составляющем 0,50; в таблице более темное закрашивание указывает на более сильную корреляцию).

[Фиг. 3b] На фиг. 3b представлена классификационная таблица, полученная методом логистической регрессии для того, чтобы определить, возможно ли по настоящему изобретению корректно классифицировать пациентов в группу здоровых субъектов и группу пациентов с депрессией.

[Фиг. 4а] На фиг. 4а представлена таблица, показывающая схему корреляции уровней цитокинов или хемокинов в плазме крови пациентов с шизофренией (с коэффициентами корреляции от 0,50 до 0,6499, выделенными светло-серым, от 0,65 до 0,7999 - темно-серым, от 0,8 до 0,9999 - черным; что касается относительной частоты корреляции, то p<0,001 при коэффициенте корреляции, составляющем 0,50; в таблице более темное закрашивание указывает на более сильную корреляцию).

[Фиг. 4b] На фиг. 4b представлена классификационная таблица, полученная методом логистической регрессии для того, чтобы определить, возможно ли по настоящему изобретению корректно классифицировать пациентов в группу здоровых субъектов и группу пациентов с шизофренией.

[Фиг. 4с] На фиг. 4с представлена классификационная таблица, полученная методом логистической регрессии для того, чтобы определить, возможно ли по настоящему изобретению корректно классифицировать пациентов в группу пациентов с депрессией и в группу пациентов с шизофренией.

Наилучший вариант осуществления изобретения

В настоящем изобретении оцениваемые характеристики можно классифицировать как характеристики живого организма в состоянии нагрузки и патологического состояния живого организма. В настоящем изобретении оценка или определение уровня представляют собой в случае состояния - само состояние и степень проявления состояния, а в случае патологического состояния - тип и степень выявленного состояния. В отношении патологических состояний, которые проявляют себя, но для которых не найдено объективного критерия оценки традиционными способами, целью настоящего изобретения является также предоставление критерия для оценки таких патологических состояний с помощью мониторинга возможных состояний, конкретно - вариаций уровней цитокинов или хемокинов в живом организме.

Индикаторный агент стресса или утомления по настоящему изобретению содержит по крайней мере два вида факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF.

Используемый в настоящем описании термин «индикаторный агент» относится к любому маркеру in vivo, служащему для объективного указания на различные психические состояния, которые обычно определяют на основании самооценки. «Индикаторный агент» может также представлять собой маркер in vivo, объективно указывающий на интенсивность психических расстройств.

Используемый в настоящем описании термин «биологическая нагрузка» означает химическую, физическую, психическую, словесную или трудовую нагрузку на психическое или физическое состояние живого организма. Под «биологической нагрузкой» подразумевается любая эндогенная константная нагрузка, вызванная патологическими состояниями или аналогичными состояниями, на живой организм. В настоящем изобретении, например, биологическая нагрузка также включает нарушение биологического гомеостаза, нагрузку в виде нарушения биологического гомеостаза, состояние, предшествующее нарушению биологического гомеостаза, нарушение механизма защиты организма, нагрузку в виде нарушения механизма защиты организма, состояние, предшествующее нарушению механизма защиты организма и т.п.

Используемый в настоящем описании термин «стресс» означает различные биологические ответы, вызванные химической, физической, психической, словесной или трудовой временной нагрузкой на психическое или физическое состояние живого организма. «Стресс» также означает различные биологические ответы, вызванные любой эндогенной постоянной нагрузкой, в живом организме.

Используемый в настоящем описании термин «утомление» означает любой вид утомления, включая физическое утомление и психическое утомление.

Факторами, которые содержит индикаторный агент по настоящему изобретению, являются по крайней мере два вида факторов, выбранных из вышеупомянутой группы. Для того чтобы обеспечить более точный показатель утомления, этих факторов должно быть от 3 до 41 видов, предпочтительно от 3 до 28 видов, более предпочтительно от 5 до 20 видов и еще более предпочтительно от 8 до 12 видов.

В настоящем изобретении «IL-1β» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000576 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-1β» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-1 ra» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номерами доступа NM_173841, NM_173842, NM_173843, NM_000577 в базе данных Genbank или аналогичными номерами, и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-1 ra» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-2» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000586 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-2» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-4» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номерами доступа NM_000589, NM_172348 в базе данных Genbank или аналогичными номерами, и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-4» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-5» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000879 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-5» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-6» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000600 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-6» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-7» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000880 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-7» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-8» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000584 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-8» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-9» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000590 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-9» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-10» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000572 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-10» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-12» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номерами доступа NM_002187, NM_000882 в базе данных Genbank или аналогичными номерами и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-12» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-13» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_002188 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-13» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-15» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номерами доступа NM_000585, NM_172174, NM_172175 в базе данных Genbank или аналогичными номерами и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-15» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-17» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_002190 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-17» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-18» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_001562 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-18» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот. В настоящем изобретении IL-18 предпочтительно находится в зрелой форме.

В настоящем изобретении «эотаксин» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа D49372 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «Эотаксин» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «основный FGF» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_002006 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «Основный FGF» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот. «Основный FGF» также именуется «FGF-2».

В настоящем изобретении «G-CSF» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «G-CSF» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «GM-CSF» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номерами доступа Х03021, М10633 в базе данных Genbank или аналогичными номерами и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «GM-CSF» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IFN-γ» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000619 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IFN-γ» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IР-10» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IР-10» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «МСР-1» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «МСР-1» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «MIP-1α» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «MIP-1α» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «MIP-1β» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «MIP-1β» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «PDGF-BB» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «PDGF-BB» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «RANTES» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «RANTES» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «TNF-α» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «TNF-α» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «VEGF» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «VEGF» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-3» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.694 в базе данных NCBI или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-3» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IL-11» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа NM_000641 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IL-11» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «IFN-α» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «IFN-α» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «CSF-2» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «CSF-2» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «TGF-β» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.645227 в базе данных NCBI или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «TGF-β» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «нейротрофин 5» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.534255 в базе данных NCBI или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «Нейротрофин 5» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «МСР-3» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Х72309 в базе данных Genbank или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «МСР-3» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «β-2-микроглобулин» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.534255 в базе данных NСBI или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «β-2-микроглобулин» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «ангиотензин-II» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека общеизвестны и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «Ангиотензин-II» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «CSF-3» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.2333 в базе данных NCBI или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «CSF-3» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «СХС-хемокиновый лиганд 1» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «СХС-хемокиновый лиганд 1» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «СХС-хемокиновый лиганд 5» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы в базе данных Genbank или аналогичной базе данных и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «СХС-хемокиновый лиганд 5» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении «HGF» представляет собой вещество, аминокислотная последовательность и нуклеотидная последовательность которого из человека опубликованы под номером доступа Hs.396530 в базе данных NCBI или аналогичным номером и которое можно выделить или получить общеизвестными методами. «HGF» также включает любые родственные вещества (такие как гомологи и сплайсинговые варианты), любые варианты, любые производные, любые зрелые формы, любые аналоги с модификациями аминокислот и т.п. Примеры его гомологов включают соответствующие белку человека белки других видов, таких как мыши и крысы. Такие гомологи можно идентифицировать поисковыми методами на основе нуклеотидной последовательности гена, идентифицированного согласно HomoloGene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/HomoloGene/). Его варианты включают природные аллельные варианты, неприродные варианты и варианты с аминокислотными модификациями, полученными искусственным удалением, заменой, добавлением или встраиванием аминокислот. Варианты могут иметь гомологию по крайней мере 70%, предпочтительно 80%, более предпочтительно 95%, еще более предпочтительно 97% с исходным (невариантным) белком или (поли)пептидом. Аминокислотные модификации включают природные аминокислотные модификации и неприродные аминокислотные модификации и, в частности, включают фосфорилирование аминокислот.

В настоящем изобретении предпочтительно поместить составляющие индикаторный агент факторы, такие как цитокины и хемокины, в разные контейнеры. В настоящем изобретении индикаторный агент может содержать любой другой компонент, до тех пор пока индикаторный агент в основном состоит из факторов, таких как цитокины и хемокины. Примеры других компонентов включают, но не ограничены этим, растворитель, такой как буфер и физиологический раствор, стабилизирующий агент, бактериостатик и консервант.

В настоящем изобретении индикаторный агент служит признаком того, что физиологическое состояние животного сопровождается стрессом или утомлением, предпочтительно утомлением, вызванным психическим стрессом. В частности, используя в качестве индикатора описанные выше факторы, можно количественно и быстро определить степень утомления животного из его биологического образца, предпочтительно плазмы крови, сыворотки, слюны или мочи. Например, у мышей перед психическим стрессом содержание IL-18 в сыворотке составляет 100 пг/мл или меньше, и это значение будет составлять от 120 до 200 пг/мл через 5 часов после 1-часового стресса и превышать 1000 пг/мл после 6-часового стресса. Концентрация IL-18 увеличивается по мере увеличения нагрузки. Поскольку время полужизни IL-18 составляет примерно 10 часов, то предпочтительно использовать содержащий IL-18 индикаторный агент в качестве индикатора утомления. Кроме IL-18 на усталость может указывать увеличение количества различных факторов, описанных выше. А именно предпочтительно предоставить по крайней мере два фактора, составляющих индикаторный агент по настоящему изобретению, в количествах, указывающих на нормальное состояние до небольшого утомления, или сильную усталость, таких, чтобы можно осуществить сравнение с образцами.

Агент для тестирования стресса или утомления по настоящему изобретению обычно содержит по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно.

Примеры молекул включают антитела, пептиды (не антитела), нуклеиновые кислоты и низкомолекулярные вещества. Предпочтительными являются антитела, поскольку их относительно легко получить или изготовить.

«Антитела» включают поликлональные антитела, моноклональные антитела, химерные антитела, одноцепочечные антитела и антиген-связывающую часть вышеописанных антител, такую как F(ab')₂- или Fab'-фрагменты, полученные из Fab-экспрессионных библиотек.

«Пептиды (не антитела)» включают белковые компоненты, способные специфически связывать факторы (определенные белки), и их примеры включают цитокин-связывающие белки, цитокиновые рецепторы, цитокиновые растворимые рецепторы или их связывающие участки.

«Нуклеиновые кислоты» включают любые нуклеиновые кислоты с определенной нуклеотидной последовательностью, способной связывать факторы (определенные белки), и примеры включают ДНК, РНК или аналоги нуклеиновых кислот.

«Низкомолекулярные соединения включают органические или неорганические низкомолекулярные соединения, разработанные на основе трехмерной структуры и электростатических свойств пептида.

Антитела можно получить традиционными способами (Current Protocol in Molecular Biology, Chapter 11.12-11.13(2000)). А именно поликлональные антитела можно получить в результате процесса, включающего стадию иммунизации животных (кроме человека), таких как кролики, любым из факторов, экспрессированных в E. сoli или аналогичным образом и очищенных по стандартным методикам, или иммунизации синтетическим олигопептидом, несущим часть аминокислотной последовательности любого из факторов, и стадию получения поликлональных антител из сыворотки иммунизированных животных по стандартным методикам. В качестве альтернативы, моноклональные антитела можно получить в результате процесса, включающего стадию иммунизации животных (кроме человека), таких как мыши, любым из факторов, экспрессированных в E. сoli или аналогичным образом и очищенных по стандартным методикам, или иммунизации олигопептидом, несущим часть аминокислотной последовательности любого из факторов, стадию получения клеток гибридомы путем слияния полученных из селезенки клеток и клеток миеломы и стадию культивирования клеток гибридомы (Current protocols in Molecular Biology edit. Ausubel et al. (1987) Publish. John Wiley and Sons. Section 11.4-11.11). Химерные антитела можно также получить на основе методик, описанных в Jikken Igaku (Experimental Medicine), Extra Edition, Vol. 6, No. 10, 1988 или в японской патентной публикации (JP-B) No. 03-73280. F(ab')₂-, или Fab'-фрагменты можно получить путем обработки иммуноглобулинов протеолитическим ферментом, таким как пепсин или папаин.

Тестовый агент может содержать антитело в свободном виде, меченное антитело или иммобилизованное антитело. Тестовый агент по настоящему изобретению может также содержать носитель, который обычно содержится в диагностических агентах. Примеры такого носителя включают, но не ограничены этим, консервант, стабилизирующий агент, буфер, растворитель, такой как вода или физиологический раствор, и т.п.

Настоящее изобретение относится к способу измерения стресса или утомления, включающему стадию измерения количества факторов в биологическом образце с помощью тестового агента.

В способе измерения стресса или усталости количество факторов в биологическом образце, предпочтительно в плазме крови, сыворотке, слюне или моче, можно количественно измерить с помощью молекул в тестовом агенте, предпочтительно с помощью антител в тестовом агенте, традиционными способами. Системы, позволяющие простое и одновременное измерение ряда белков, предпочтительно, включают жидкофазные системы определения белков (такие как Bio-Plex (торговое название) Suspension Array System (изготавливается Bio-Rad Laboratories)), в которых микрошарики, несущие сенсор для распознавания белков, используются для проведения реакции связывания в жидкой суспензии микрошариков. При использовании таких систем измерения возможны в широких пределах - от нескольких пг/мл до нескольких десятков нг/мл.

Измеренное в биологическом образце количество каждого фактора можно сравнить с уровнем индикаторного агента стресса или утомления так, что можно объективно качественно или количественно оценить уровень стресса или утомления у животного.

Предпочтительно, животное представляет собой позвоночное, включая человека, и, особенно предпочтительно, домашнее животное или животное-компаньон, такие как крупный рогатый скот, лошади, свиньи, овцы, козы, куры, собаки, кошки и т.п. Метод измерения стресса или утомления по изобретению может применяться к домашнему животному или животному-компаньону. В области животноводства или торговли домашними животными, в которой искусственное выращивание имеет тенденцию вызывать стресс, можно контролировать состояние стресса или утомления у животного объективно, что дает преимущество для понимания и хорошего контроля здоровья животного.

В тестовом агенте изобретения молекулы, предпочтительно антитела, предпочтительно помещают в разные контейнеры. Из молекул, помещенных в разные контейнеры, можно сформировать тестовый набор для определения интенсивности психических состояний или расстройств, как описано ниже. Тестовый набор может включать любой другой реагент, такой как буфер для разведения реагента или биологического образца, флуоресцентный краситель, реакционный сосуд, положительный контроль, отрицательный контроль и инструкции к тестовому протоколу. Интенсивность психических состояний или расстройств можно легко измерить с использованием набора по изобретению.

Настоящее изобретение может относиться к по крайней мере двум видам взвешенных факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF, в качестве индикаторного агента для оценки психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, физического утомления, стресса, плохого настроения, хорошего настроения, некомфортного настроения, дистимии, навязчивого состояния, паники, тревожности, фобии, антропофобии, социофобии, напряжения, интенсивности работы, интенсивности учебы, депрессии, шизофрении, психических состояний, сходных с депрессией, психических состояний, сходных с шизофренией, и угрозы самоубийства.

В настоящем описании сходные с депрессией психические состояния или сходные с шизофренией психические состояния относятся к психическим состояниям, которые могут быть похожими на депрессию или шизофрению, но в действительности не связаны с наличием или развитием таких психических расстройств. Сходные с депрессией или шизофренией состояния также включают психические состояния, подобные психическим расстройствам, такие как расстройства настроения, обсессивно-компульсивное расстройство, паническое расстройство, тревожное расстройство, фобию, антропофобию, социофобию, излишнее напряжение, неспособность адаптироваться к работе или учебе, самоубийственное настроение, личностное расстройство, алкогольный психоз, бессонница, расстройства суточного ритма, психоневроз и попытку самоубийства.

Настоящее изобретение может относиться к по крайней мере двум видам взвешенных факторов, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF, в качестве индикаторного агента для оценки психических состояний, выбранных из группы, состоящей из психического утомления, стресса, депрессии, депрессивного состояния, расстройств настроения, шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства, панического расстройства, тревожного расстройства, фобии, антропофобии, социофобии, излишнего напряжения, неспособности адаптироваться к работе или учебе, самоубийственного настроения, личностного расстройства, алкогольного психоза, бессонницы, расстройств суточного ритма, психоневроза, деменции (сенильной деменции альцгеймеровского типа, болезни Альцгеймера, болезни Пика), нейродегенеративного заболевания ЦНС (ОРСА (оливопонтоцеребеллярной атрофии), болезни Паркинсона, болезни диффузных телец Леви) и попытки самоубийства.

Все индикаторные агенты делают возможным оценку не только состояний, расстройств или развития болезней, но и преклинических состояний (когда врачебный осмотр не может выявить определенные заболевания, но существуют некое патологическое состояние или какой-либо патологический признак, так что можно в значительной степени предсказать риск развития).

В настоящем изобретении «стресс» означает различные биологические ответы, вызванные химической, физической, психической, словесной или трудовой временной нагрузкой на психическое или физическое состояние живого организма. Показатель определенного стресса, вызванного определенной нагрузкой, можно предоставить в виде зависимости от веса факторов. А именно каждый фактор можно умножать на весовой коэффициент, полученный из вычисления распределения так, что можно предоставить показатель стресса для психического состояния или расстройства.

В настоящем изобретении «утомление» включает физическое утомление и психическое утомление. Можно предоставить любой из взвешенных показателей физического утомления и взвешенных показателей психического утомления в зависимости от веса факторов. А именно каждый фактор можно умножать на весовой коэффициент, полученный из вычисления распределения так, что можно предоставить показатель психического расстройства на основе психического утомления или показатель психического состояния, вызванного физическим утомлением и психическим утомлением.

В настоящем изобретении «плохое настроение» определено в DSM-IV (диагностическое и статистическое руководство по психическим заболеваниям, 4-ое издание).

Используемый в настоящем описании термин «депрессия» относится к содержанию, определенному в DSM-IV, и к группе заболеваний, называемых в психиатрии «глубокая депрессия».

Используемый в настоящем описании термин «дистимия» относится к сменам настроения (повышению и понижению).

В настоящем изобретении «расстройства настроения» определены в DSM-IV.

В настоящем изобретении «шизофрения» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «навязчивое состояние» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «обсессивно-компульсивное расстройство» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «паника» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «паническое расстройство» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «тревожность» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «тревожное расстройство» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «фобия» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «антропофобия» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «социофобия» определена в DSM-IV.

Применяемый в настоящем описании термин «напряжение» относится к ответам на химическую, физическую, психическую, словесную или трудовую нагрузку, которые в основном отличаются психическим перенапряжением или активностью (ответами) парасимпатической нервной системы.

В настоящем изобретении «излишнее напряжение» определено в DSM-IV.

Применяемый в настоящем описании термин «интенсивность труда» относится к степени утомления, которую можно определить в тесте Крепелина, оценкой утомления или аналогичными способами после работы.

В настоящем изобретении «неспособность адаптироваться к работе» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «интенсивность учебы» относится к степени утомления, которую можно определить тестом Крепелина, оценкой утомления или аналогичными способами после учебы.

В настоящем изобретении «неспособность адаптироваться к учебе» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «риск самоубийства» определен в DSM-IV.

В настоящем изобретении «самоубийственное настроение» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «попытка самоубийства» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «личностное расстройство» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «алкогольный психоз» определен в DSM-IV.

В настоящем изобретении «бессонница» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «расстройство суточного ритма» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «психоневроз» определен в DSM-IV.

В настоящем изобретении «хорошее настроение» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «некомфортное настроение» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «депрессивное состояние» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «деменция» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «сенильная деменция альцгеймеровского типа» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «болезнь Альцгеймера» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «болезнь Пика» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «нейродегенеративное заболевание ЦНС» определено в DSM-IV.

В настоящем изобретении «ОРСА (оливопонтоцеребеллярная атрофия)» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «болезнь Паркинсона» определена в DSM-IV.

В настоящем изобретении «болезнь диффузных телец Леви» определена в DSM-IV.

Психические расстройства, помимо определенных выше, также попадают в объем изобретения, если их определение присутствует в DSM-IV. Если DSM-IV будет пересмотрено, то пересмотренная версия тоже попадает в объем изобретения.

В настоящем изобретении индикаторный агент интенсивности психических состояний или расстройств включает по крайней мере два вида факторов, выбранных из вышеописанной группы, причем каждый из них является взвешенным. Для того чтобы сделать индикаторный агент более специфичным к интенсивности каждого психического состояния или расстройства, следует выбирать от 3 до 41 видов факторов, предпочтительно от 3 до 28 видов, более предпочтительно от 5 до 20 видов, еще более предпочтительно от 8 до 12 видов.

В настоящем изобретении факторы, составляющие индикаторный агент интенсивности психических состояний или расстройств, такие как цитокины и хемокины, предпочтительно помещать в разные контейнеры. В настоящем изобретении индикаторный агент психических состояний может содержать любой другой компонент, до тех пор пока он состоит в основном из факторов, таких как цитокины и хемокины. Примеры других компонентов включают, но не ограничены этим, растворитель, такой как буфер и физиологический раствор, стабилизирующий агент, бактериостатик, консервант и т.п.

Индикаторный агент интенсивности психического состояния или расстройства по настоящему изобретению может служить в качестве объективного индикатора психического здоровья животных. В частности, можно определить вес (вклад) каждого из факторов в биологических образцах животных, предпочтительно в плазме крови, сыворотке, слюне или моче, для того, чтобы составить индикаторный агент так, чтобы можно было быстро и количественно определить различные психические состояния.

В настоящем изобретении индикаторный агент утомления или индикаторный агент интенсивности психического состояния или расстройства может содержать комбинацию численных величин взвешенных факторов, а именно базу данных. Если индикаторный агент представляет собой базу данных, то можно быстро и количественно определять различные психические состояния для каждой из величин, измеренных тестовым агентом по изобретению.

Агент для тестирования интенсивности психических состояний или психических расстройств по настоящему изобретению обычно содержит по крайней мере два вида молекул, выбранных из группы, состоящей из молекул, специфически распознающих вышеупомянутые факторы (IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксин, основный FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофин 5, MCP-3, β-2-микроглобулин, ангиотензин II, CSF-3, CXC-хемокиновый лиганд 1, CXC-хемокиновый лиганд 5 и HGF, соответственно).

Молекулы и другие компоненты, содержащиеся в агенте для тестирования психических состояний или расстройств по настоящему изобретению, могут быть теми же самыми молекулами, которые содержатся в агенте для тестирования стресса или утомления.

Настоящее изобретение также относится к способу измерения интенсивности психического состояния или расстройства, включающему стадии: измерения количества факторов в биологическом образе с помощью агента для тестирования интенсивности психического состояния или расстройства; пропорционального взвешивания каждого количества, полученного на стадии измерения, и сравнения взвешенных количеств с индикаторным агентом интенсивности психического состояния или расстройства.

В способе измерения интенсивности психического состояния или расстройства, концентрации факторов в биологическом образце, предпочтительно в плазме крови, сыворотке, слюне или моче, можно измерить стандартными способами, используя молекулы, предпочтительно антитела, находящиеся в агенте для тестирования интенсивности психического состояния или расстройства. Например, системой, позволяющей простое и одновременное измерение ряда белков, предпочтительно, является Bio-Plex Suspension Array System (производится Bio-Rad Laboratories).

Величина, полученная умножением измеренного количества каждого фактора в биологическом образце на коэффициент, сравнивается с индикаторным агентом психического состояния таким образом, что можно объективно и количественно оценить психическое состояние животного.

Предпочтительно, чтобы животные были позвоночными животными, включая человека, и особенно предпочтительно домашними животными или животными-компаньонами, такими как крупный рогатый скот, лошади, свиньи, овцы, козы, куры, собаки, кошки и т.п. Способ измерения интенсивности психического состояния или расстройства по настоящему изобретению можно применять для домашних животных или животных-компаньонов. В области животноводства или торговли домашними животными, в которой искусственное выращивание имеет тенденцию вызывать стресс, возможность объективного контроля состояния стресса или утомления у животного дает преимущество для понимания психического здоровья животного.

Набор для тестирования интенсивности психического состояния или расстройства по настоящему изобретению включает молекулы, предпочтительно по крайней мере два вида антител, помещенных в различные секции. Тестовый набор может включать любой другой реагент, такой как буфер, для разведения реагента или биологического образца, флуоресцентный краситель, реакционный сосуд, положительный контроль, отрицательный контроль, инструкции к протоколу теста и т.п. Психические состояния можно легко измерить с использованием тестового набора по изобретению.

По настоящему изобретению уровни факторов при различных психических состояниях или расстройствах можно проанализировать высокопроизводительными методами. Индивидуальные различия можно также легко обнаружить на основе данных, полученных при помощи настоящего изобретения. Поэтому настоящее изобретение можно применять для обнаружения новых генов, основываясь на индивидуальных различиях в ответе уровня цитокина на стресс, или можно применять для скринирования на стрессоустойчивость. Настоящее изобретение можно также использовать для определения антистрессового эффекта антистрессовых лекарственных соединений. Настоящее изобретение может обеспечить следующие преимущества.

1. Набор, единственный раз разработанный для указания на стресс, можно использовать для измерения.

2. Все факторы можно измерить, используя 50 мкл образца плазмы крови или сыворотки.

3. Весь процесс может быть выполнен в течение 6 часов; и

4. Все полученные данные можно собрать в базу данных, которую легко статистически обработать.

При применении эффектов изобретения для измерения стресса и т.п. стресс или другие психические состояния можно обнаружить весьма недорогим и быстрым способом по сравнению с традиционными способами, в которых данные собирают в результате беседы с лечащим врачом или психологом и с помощью опросника, а затем собирают в течение нескольких дней для оценки (так что результат может варьировать между лечебными учреждениями).

ПРИМЕРЫ

Более конкретно изобретение описано ниже на нескольких примерах, которые не подразумевают ограничения объема изобретения. В описанных ниже примерах заранее получали разрешение комитета по этике данного лечебного учреждения и информированное согласие на обследование перед тем, как волонтеры проходили различные тесты, и у них проводили забор крови.

Пример 1: Шкала психического состояния и состояния утомления

Чтобы подтвердить здоровье добровольцев, с 402 добровольными субъектами провели психологические тесты с помощью опроса SDS (шкала депрессии на основе самооценки), MAS (шкала выраженности тревожного состояния), GHQ (опросник по общему состоянию здоровья), STAI (опросник состояния и свойств тревожности) и CMI (медицинский индекс Корнелла), провели обследование субъективных симптомов (получено Институтом профессиональной гигиены) и обследование по шкале социофобии, шкале антропофобии и с помощью уникального разработанного опросника по жизненным ситуациям. После проверки здоровья у каждого субъекта проводили забор 1 мл крови утром праздничного дня и в то же самое время после ночной смены, соответственно, и помещали в содержащие антикоагулянт пробирки. Затем отделяли плазму от крови охлаждением при 4°С. Плазму крови замораживали для хранения или оставляли на льду, и затем цитокины, показанные отдельно, измеряли одновременно с помощью системы определения белков на микрошариках (системы Bio-Plex Suspension Array System, изготовленной компанией Bio-Rad Laboratories и модифицированной авторами изобретения). Цитокины также определяли традиционным методом твердофазного иммуносорбентного анализа (ELISA), и определяли концентрацию в крови каждого цитокина.

Пример результатов показан на фиг. 1а. Данные были получены в результате процесса, включающего определение концентрации каждого цитокина в крови, затем вычисления коэффициента корреляции для концентрации каждого цитокина в крови и выделения цветом значений, имеющих высокую степень корреляции (с коэффициентами корреляции от 0,50 до 0,6499, выделенными светло-серым, от 0,65 до 0,7999 - темно-серым, от 0,8 до 0,9999 - черным; что касается относительной частоты корреляции, то p<0,001 при коэффициенте корреляции, составляющем 0,50). В результате было показано, что у здоровых субъектов некоторые цитокины имеют высокую корреляцию. Затем провели исследования 142 субъектов, которые были здоровы, но часто работали в ночные смены, для того чтобы определить, может ли корреляция уровня цитокинов отражать присутствие или отсутствие ночных смен, и будет ли она полезной для того, чтобы отличить состояние человека до и после ночной смены. Очевидно, что корреляция концентраций каждого цитокина в крови изменялась между фиг. 1b (перед ночной сменой) и фиг. 1с (после ночной смены). Было найдено, что концентрации в одной и той же временной точке после ночной смены значительно отличались от нормальных величин. На основе корреляции уровней цитокинов методом логистической регрессии был проведен анализ данных от 90 человек, случайно отобранных из субъектов исследования, для того, чтобы определить, возможно ли по настоящему изобретению различить состояние людей до и после ночной смены. Результат показан на фиг. 1d. В этом примере точность составляла 88%. Величину каждого цитокина умножали на определенный коэффициент для каждого элемента депрессии, тревожности, страха и стресса в психологическом тесте, таким образом получая оценки. Полученные оценки согласовывались с результатами беседы с психиатром лучше, чем психологический тест, и поэтому возможно детектировать тенденцию к депрессии, тревожности и стрессу. Эти результаты показывают, что можно понимать и оценивать различные психические состояния (такие как депрессия, возбуждение, напряжение, тревожность и т.п.) с помощью способа измерения по настоящему изобретению.

Пример 2: Шкала психической усталости или физической усталости и шкала стресса

От двадцати восьми до 30 здоровых добровольцев проходили тест Крепелина, в котором они в качестве нагрузки на психическое утомление продолжали простые вычисления в течение 3 часов, или тест, в котором в качестве нагрузки на физическое утомление применяли упражнение на беговой дорожке до увеличения частоты пульса до 180 уд./мин в течение 3 часов. Отбирали образцы крови до и после каждого теста и измеряли в них уровень цитокинов так же как и в примере 1. Цитокины также измеряли таким же способом через 24 часа после начала нагрузки (21 час после окончания нагрузки). Результат получали, вычисляя коэффициент корреляции для концентрации каждого цитокина в крови и выделяя цветом значения, имеющие высокую степень корреляции.

В результате было показано, что корреляция общего уровня цитокинов изменялась до и после каждого теста и в течение периода восстановления. В результате сравнения между вычислениями для психической нагрузки и вычислениями для нагрузки на беговой дорожке в качестве физической нагрузки было показано, что определенная комбинация цитокинов создает различие в силе корреляции, и то, что с помощью способа измерения по настоящему изобретению можно понимать и оценивать состояния усталости и стресса.

На основе корреляции уровней цитокинов был проведен анализ логистической регрессии данных от всех субъектов для того, чтобы определить, возможно ли отличить тест Крепелина в качестве психической нагрузки от упражнения на беговой дорожке в качестве физической нагрузки. Результаты приведены на чертежах. В результате было показано то, что: возможно провести различие между нагрузкой в течение длительного времени и кратковременной нагрузкой как в отношении теста Крепелина, так и в отношении теста на беговой дорожке (в примере точность составляла 100% для теста Крепелина и 81% для теста на беговой дорожке); также оказалось возможным показать разницу во времени восстановления между субъектами (в примере точность составляла 81% для теста Крепелина и 100% для теста на беговой дорожке); и также оказалось возможным определить приложенную нагрузку (нагрузку Крепелина или нагрузку на беговой дорожке) (в примере точность составляла 100%). Эти данные позволяют предположить, что по настоящему изобретению можно классифицировать, идентифицировать или оценивать не только присутствие или отсутствие утомления, но также и тип, и уровень утомления. Также было высказано предположение, что можно ясно продемонстрировать лечебное действие или эффект факторов, таких как лекарственные соединения, продукты питания и жизненные привычки, на психическую усталость или физическую усталость, используя показатели достоверности, приведенные в классификационных таблицах, полученных по настоящему изобретению, и принимая во внимание то, что степень восстановления в стандартных условиях может зависеть от лекарственных соединений, продуктов питания, жизненных привычек и т.д.

Пример 3: Шкала диагностики и оценки психических расстройств

С 160 добровольцами, имеющими диагнозы психических расстройств по международному диагностическому критерию DSM-IV, насколько возможно, были проведены психологические тесты с помощью опроса SDS (шкала депрессии на основе самооценки), MAS (шкала выраженности тревожного состояния), GHQ (опросник по общему состоянию здоровья), STAI (опросник состояния и свойств тревожности) и CMI (медицинский индекс Корнелла), обследования субъективных симптомов (получено Институтом профессиональной гигиены) и обследований по шкале социофобии, шкале антропофобии и с помощью уникального разработанного опросника по жизненным ситуациям.

Параллельно с обследованиями у каждого добровольца проводили забор 1 мл крови и помещали в содержащие антикоагулянт пробирки. Затем отделяли плазму от крови охлаждением при 4°С. Плазму крови замораживали для хранения или оставляли на льду, а затем количество цитокинов, показанных отдельно, измеряли одновременно с помощью системы определения белков на микрошариках (системы Bio-Plex Suspension Array System, изготовленной компанией Bio-Rad Laboratories и модифицированной авторами изобретения). Количество цитокинов также определяли традиционным методом твердофазного иммуносорбентного анализа (ELISA) и определяли концентрацию в крови каждого цитокина. В то же время каждый из добровольцев проходил психиатрический систематизированный опрос для понимания психологических тенденций и состояния добровольцев.

Для того чтобы получить оценки, величину уровня каждого цитокина умножали на определенный коэффициент. Полученные оценки согласовывались с результатами беседы с психиатром лучше, чем психологический тест, и поэтому тенденцию к психическим состояниям (депрессии, тревожности, стрессу, напряжению и возбуждению) возможно обнаружить. Хотя оценки психологического теста не раскрываются по соображениям конфиденциальности персональной информации каждого пациента, на фиг. 3 приведены корреляционные коэффициенты цитокинов для пациентов с депрессией, а на фиг. 4 приведены корреляционные коэффициенты цитокинов для пациентов с шизофренией. Результаты были получены вычислением коэффициента корреляции для концентрации каждого цитокина в крови и выделения цветом величин корреляции. Очевидно, что каждый результат отличается от результатов в таблице корреляционных коэффициентов здоровых субъектов, приведенной на фиг. 1. Проводили анализ методом логистической регрессии для определения возможности правильной диагностики депрессии по настоящему изобретению. В результате точность составляла 91%.

Проводили анализ методом логистической регрессии, чтобы определить возможность правильной диагностики шизофрении по настоящему изобретению. В результате точность составляла 96%.

Эти результаты демонстрируют, что можно понимать и оценивать различные психические расстройства (такие как депрессия, шизофрения, возбуждение, напряжение, тревожность и т.п.) с помощью способа измерения цитокинов по настоящему изобретению. Результаты также демонстрируют, что используя измерение цитокинов, можно точно определить психиатрический диагноз или подтвердить проводимую терапию, которые традиционно сильно зависят от эмпирического определения или обычно бывают неоднозначными, и что измерение цитокинов может быть полезно для оценки эффективности схемы лечения. Часто психические состояния не проявляются внешне, даже если это уже патологическое состояние, и это усугубляет проблемы современного общества. Однако было обнаружено, что на основе приведенной выше корреляции, найденной по настоящему изобретению, можно по настоящему изобретению успешно осуществлять диагностику или оценку депрессии и шизофрении - двух основных заболеваний в психиатрии.

Прогнозы в отношении деменции (сенильной деменции альцгеймеровского типа, болезни Альцгеймера и болезни Пика) и нейродегенеративных заболеваний ЦНС (ОРСА (оливопонтоцеребеллярной атрофии), болезни Паркинсона, болезни диффузных телец Леви) по возможности должны вносить большой вклад в качество жизни пациентов. По настоящему изобретению возможно различить депрессию, легкую деменцию и нейродегенеративное заболевание ЦНС на стадии, когда деменция или нейродегенеративное заболевание ЦНС еще не проявляются внешне. Поэтому ожидается, что можно провести предлагаемую в психиатрии классификацию легкой деменции или легкого дегенеративного заболевания.

По настоящему изобретению применение корреляции, найденной между уровнем психического состояния, утомления или стресса и уровнями факторов в крови, моче или слюне, позволяет просто, недорого и объективно оценить риск или степень стресса, утомления или дистимии (особенно тоски). Распределение оценки по каждому из выбранных цитокинов можно модифицировать таким образом, что можно оценить по оптимальной шкале стресс, утомление и дистимию (особенно тоску) в единой процедуре измерения, и эта методика имеет широкий спектр применения.

Поэтому стресс, утомление или дистимию (тоску) можно объективно оценить и понять их степень. Поскольку цитокины являются причиной или усугубляющими факторами при различных заболеваниях, можно обеспечить наблюдение и профилактические меры с точки зрения единства души и тела.

Промышленное применение

По изобретению можно оценить или предсказать интенсивность внешних нагрузок или эффект нагрузок, когда происходят временные биологические реакции. А именно можно оценить вызванное внешней нагрузкой утомление и восстановление после утомления для того, чтобы можно было оценить склонность индивидуума к утомлению или устойчивость индивидуума к внешним воздействиям. В дополнение, также можно оценить степень воздействия определенного фактора на наклонность индивидуума к утомлению или устойчивость индивидуума к внешним воздействиям. Поэтому применение настоящего изобретения в области профессиональной гигиены может предотвратить несчастные случаи на работе. В дополнение, настоящее изобретение можно использовать при разработке снимающих стресс лекарственных препаратов, продуктов питания, ежедневных потребностей, дизайнов, рисунков, звуков, зданий, жилых районов и т.д.

По настоящему изобретению оценка состояния болезни, распознавание потенциальных патологических состояний и выявление заболеваний до внешнего проявления субъективных симптомов возможны у живых организмов с постоянными патологическими состояниями. Поэтому настоящее изобретение позволяет раннее обнаружение и раннее лечение патологических состояний, оценку эффектов лечения, определение, является ли терапия эффективной или неэффективной, и унифицированную детекцию и терапию многих патологических состояний (таких как кожные заболевания, вызванные ультрафиолетом, и т.д., атопический дерматит, псориаз, обыкновенные угри, пемфигоид, ихтиоз, зрительная гиперестезия, ожоги, включая воспалительные изменения кожи в качестве патологических состояний, радиационный дерматоз, болезнь Альцгеймера, сенильная деменция альцгеймеровского типа, болезнь диффузных телец Леви, болезнь Пика, болезнь Бинсвангера, болезнь Паркинсона, синдром Паркинсона, церебральная ишемия, церебральное ишемическое/реперфузионное повреждение, отравление угарным газом, отравление лакокрасочными растворителями, геморрагическая энцефалопатия новорожденных, гипоксическая энцефалопатия, гипертоническая энцефалопатия, эпилепсия, множественный склероз, ВИЧ-энцефалопатия, расстройство мозгового кровообращения, острое церебрально-сосудистое расстройство, нарушение сердечного ритма, нарушение аппетита, питуитаризм, такой как болезнь Аддисона, акромегалия и гипогонадизм, дисфункция щитовидной железы, ожирение, аномальный уровень сахара в крови, первичный альдостеронизм, дисфункция надпочечников, такая как болезнь Кушинга, остеодистрофия, воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания, нарушение регуляции систем защиты организма, заболевания с суставным воспалением в качестве основного патологического состояния, такие как ревматоидный артрит, подагра и артрит, почечная недостаточность, нарушение жидкостного баланса, нарушение баланса ионов калия, натрия и хлора, эдема, нарушенная глюкозотолерантность, такая как диабет, истощение, судороги, сердечная недостаточность, легочная эдема, гипопротеинемия, кровоточивость, слущивание эпителия почечных канальцев, болезни с воспалением в качестве основного патологического состояния, нарушение менструаций, эндометриоз и вызванные питуитарной дисфункцией заболевания, такие как потеря сексуального желания). Настоящее изобретение может внести вклад не только в улучшение эффективности лечения патологических состояний, но также в улучшение эффективности профилактической медицины. По настоящему изобретению облегчается выбор тестовых групп при разработке лекарственных соединений или продуктов питания.

Эта заявка основана на патентной заявке № 2006-041633, поданной в Японии (дата подачи: 17 февраля 2006 года), содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством этой ссылки.