Результат интеллектуальной деятельности: ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ОБЛАДАЮЩАЯ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫМ, ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКИМ, ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИМ И НОРМАЛИЗУЮЩИМ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ ПОЧЕК ДЕЙСТВИЕМ, И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Настоящее изобретение касается твердой фармацевтической композиции, имеющей высокую физическую прочность, которая обладает отличными свойствами высвобождения лекарственного средства и усвояемости при применении и обладает гепатопротекторным, гиполипидемическим, иммуностимулирующим и нормализующим деятельность почек действием. Настоящее изобретение также предоставляет способ изготовления твердой фармацевтической композиции.

Актуальность проблемы связана с возрастанием частоты и тяжести заболеваний печени - основного органа детоксикации экзогенных ядов (причины роста заболеваемости печени заключаются в экологическом неблагополучии в большинстве районов мира), а также с сопутствующими заболеваниями всего организма и необходимостью создания препаратов, обладающих расширенным спектром действия.

Дополнительным и прямо сопряженным с воздействием экологических факторов является снижение иммунитета у населения, приводящее к значительному росту инфекционных поражений печени, и в первую очередь вирусных гепатитов.

Независимо от входных ворот вирус в конечном итоге попадает в печень, где оказывает прямое токсическое действие на клетки печени, которое сочетается с иммунно-опосредованным повреждением их мембран.

Известна фармацевтическая композиция, содержащая -амино-метилтиомасляную кислоту (метионин) или -амино-оксимасляную кислоту (треонин) (Патент RU №2283114).

Наиболее близкой к заявляемой композиции по технической сущности и достигаемому результату является препарат Мориамин Форте (http://www.moriamin-forte.ru/instruction.php).

Область применения продукта ограничена использованием в качестве лекарственного средства.

Целью изобретения является создание композиции, при разработке которой учтены все недостатки ранее описанных продуктов и которая обладает гепатопротекторным, гиполипидемическим, иммуностимулирующим и нормализующим деятельность почек действием у детей и взрослых.

Композиция может использоваться (путем регулирования курса приема и дозировки) в качестве лекарственного средства или биологически активной добавки к пище.

Технической задачей предлагаемого изобретения является создание комбинированной композиции с максимальным сроком хранения, с расширенным спектром фармакологического действия, с улучшенной биодоступностью и терапевтической активностью, что позволяет уменьшить сроки лечения.

Поставленная техническая задача решается за счет того, что фармацевтическая композиция в виде капсулы содержит 7 разноцветных видов гранул:

1. Белая гранула содержит никотинамид, пиридоксин, пантотенат кальция, крахмал, лактозу, целлюлозу, кальция карбоксиметил целлюлозный, оксид титана при следующем соотношении ингредиентов, в мас.%:

2. Белая гранула содержит мононитрат тиамина, крахмал, лактозу, целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозный кальций, метилцеллюлозу, оксид титана при следующим соотношении, в мас.%:

3. Красная гранула содержит L-триптофан, ацетат токоферола, крахмал, лактозу, кристаллическую целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозный кальций, гидроксипропилцеллюлозу, макрогол 6000, синтетический силикатный алюминий при следующем соотношении ингредиентов, в мас.%:

4. Шоколадная гранула содержит аскорбиновую кислоту, крахмал, лактозу, целлюлозу кристаллическую, карбоксиметилцеллюлозный кальций, метилцеллюлозу, макрогол 6000 при следующем соотношении ингредиентов, в мас.%:

5. Оранжевая гранула содержит 5-гидроксиантраниловую кислоту, рибофлавин, фолиевую кислоту, цианокобаломин, крахмал, лактозу, целлюлозу кристаллическую, карбоксиметилцеллюлозный кальций, гидроксипропиленцеллюлозу, макрогол 6000 при следующем соотношении, в мас.%:

6. Желтая гранула содержит изолейцин, лейцин, лизин, фенилаланин, треонин, валин, метионин, крахмал, лактозу, целлюлозу, метилцеллюлозный кальций, гидроксипропилцеллюлозу, краситель при следующем соотношении, в мас.%:

7. Светло-желтая гранула содержит эргокальциферол при следующем соотношении, в мас.%:

Причем существенным отличительным признаком является соотношение гранул в капсуле 1 белая 17%, 2 белая 7%, желтая 36%, оранжевая 12%, красная 8%, шоколадная 13%, светло-желтая 7%.

Причем все виды гранул могут содержать дополнительно один или несколько витаминов, одну или несколько аминокислот, один или несколько макро- или микроэлементов или иной фармацевтический препарат из группы флавоноидов, иммуномодуляторов, гепатопротекторов, растительных экстрактов. Допускается использование дополнительно консерванта (например, калия сорбата).

Предлагаемый способ получения позволяет продлить срок годности препарата, а также уменьшает площадь соприкосновения активных веществ между собой, ведущих к снижению активности препарата. Состав научно обоснован и подобран исходя из целевой направленности фармакологической активности композиции.

Белки являются основным веществом проявления жизни, составляя клетки, ткани, органы, и управляют функциями организма.

Выделяют восемь аминокислот, которые не синтезируются в организме, и их называют незаменимыми.

Аминокислоты требуются для соединения протеинов крови и тканей, для перемещения уже существующих аминокислот, восстановления разрушенных тканей и формирования новых протеинов.

Аскорбиновая кислота. Витамин С необходим для нормального развития плаценты, а также повышения сопротивляемости организма инфекциям. Витамин С обеспечивает синтез коллагена, способствует поддержанию здоровья кожи. Влияет на образование гемоглобина и созревание эритроцитов.

Эргокальциферол регулирует обмен Са²⁺ и фосфора, процесс построения структуры костей; повышает абсорбцию Са²⁺ в кишечнике, синтез белка в тонком кишечнике, печени и костях; выведение фосфатов почками. Витамин D3 необходим для формирования костной ткани плода.

Никотинамид стабилизирует процессы тканевого дыхания, жирового и углеводного обмена, систему метаболизма ксенобиотиков. Никотинамид нормализует микроциркуляцию. Участвует в процессах тканевого дыхания, жирового и углеводного обмена.

Пиридоксина гидрохлорид в качестве коэнзима принимает участие в метаболизме аминокислот и белков, в синтезе нейромедиаторов.

Ретинола пальмитат. Ретинол является необходимым компонентом для нормальной функции сетчатой оболочки глаза: он связывается с опсином (красным пигментом сетчатой оболочки), образуя зрительный пурпур родопсин, необходимый для зрительной адаптации в темноте. Витамин А необходим для роста костей, нормальной репродуктивной функции, эмбрионального развития, для регуляции деления и дифференцировки эпителия (усиливает размножение эпителиальных клеток кожи, омолаживает клеточную популяцию, тормозит процессы кератинизации). Витамин А принимает участие в качестве кофактора в различных биохимических процессах.

Рибофлавин катализатор процессов клеточного дыхания и перекисного окисления эндогенных веществ и ксенобиотиков, глюкуронирования.

Тиамина мононитрат играет важную роль в процессах метаболизма углеводов и жиров. Вещество необходимо для нормального протекания процессов роста и развития и помогает поддерживать надлежащую работу сердца, нервной и пищеварительной систем. Тиамин, являясь водорастворимым соединением, не запасается в организме и не обладает токсическими свойствами.

Витамин Е обладает антиоксидантными свойствами, обеспечивает защиту ненасыщенных жирных кислот в мембранах от липопероксидации; участвует в формировании межклеточного вещества, коллагеновых и эластических волокон соединительной ткани, гладкой мускулатуры сосудов, пищеварительного тракта. Благоприятно влияет на периферическое кровообращение.

Кальция пантотенат, составная часть коэнзима А, участвует в процессах ацетилирования и окисления углеводов и жиров, синтеза жирных кислот и стероидов из углеводов, в реализации связей гликолиза, цикла Кребса и окисления жиров. Кальция пантотенат участвует в регенерации эпителия и эндотелия, способствует заживлению ран, снижает побочные и токсические эффекты антибиотиков и антибактериальных препаратов.

Цианокобаламин вместе с фолиевой кислотой участвует в синтезе нуклеотидов, в формировании эритроцитов и клеток нервных оболочек, необходим для роста организма.

Фолиевая кислота - жизненно важный витамин, необходимый для роста и развития кровеносной и иммунной системы. Биологическое действие фолиевой кислоты: противоанемическое, предотвращающее внутриутробные аномалии плода, повышающее умственную и физическую работоспособность, ноотропное, антидепрессантное, восстанавливающее структуру нервной ткани; антиатеросклеротическое, стимулирующее выработку соляной кислоты, укрепляющее кишечную стенку, антидиарейное, защищающее от кишечных паразитов и патогенной флоры, эстрогеноподобное, лактогенное; дерматропное, онкопротекторное и др. Фолиевая кислота необходима для нормального кроветворения, играет важную роль в делении клеток, участвует в формировании плаценты, обеспечивает рост и развитие плода.

Способ получения гранул заключается во взвешивании ингредиентов, смешивании, гранулировании, сушке гранул, взвешивании и смешивании гранул между собой в определенной пропорции с последующим капсулированием.

Сущность изобретения поясняется нижеприведенными примерами промышленной реализации в условиях производства.

Пример 1

1. Белые гранулы. Отвешивают никотинамид в количестве 1%, смешивают с пиридоксином 0,1% и пантотенатом кальция 0,1%, затем добавляют лактозу 1,0%, карбоксиметилцеллюлозу кальция 1%, оксид титана 0,1%, затем частями добавляют при перемешивании лактозу до 100%, смесь равномерно увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

2. Белые гранулы. Смешивают тиамин 0,10%, крахмал 1%, целлюлозу 1%, карбоксиметилцеллюлозу кальция 1%, оксид титана 0,1% и метилцеллюлозу 0,1%, затем частями добавляют при перемешивании лактозу до 100%, равномерно увлажняют 1% воды. Смесь гранулируют через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

3. Красные гранулы. Смешивают триптофан 1% с токоферолом 0,5%, крахмалом 1%, гидроксипропилцеллюлозой 0,1%, кристаллической целлюлозой 0,5%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 0,5%, макроголом 6000 0,1%, силикатом алюминия 0,1%, красителем 0,001%, прибавляют частями в несколько приемов при постоянном перемешивании лактозу до 100%, увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

4. Шоколадные гранулы. Смешивают аскорбиновую кислоту в количестве 0,1% с крахмалом 0,5%, целлюлозой кристаллической 1%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 1%, метилцеллюлозой 0,1%, макроголом 6000 0,1% и красителем 0,001%. Прибавляют частями в несколько приемов при постоянном перемешивании лактозу до 100%, увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

5. Оранжевые гранулы. Смешивают 5-гидроксиантраниловую кислоту 0,01% с рибофлавином 0,1%, фолиевой кислотой 0,1%, цианокобаломином 0,001%, крахмалом 0,5%, целлюлозой кристаллической 1%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 0,1%, гидроксипропиленцеллюлозой 0,1%, макроголом 6000 0,1% и красителем 0,001%. Прибавляют частями в несколько приемов при постоянном перемешивании лактозу до 100%, увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

6. Желтые гранулы. Смешивают изолейцин в количестве 0,5% с лейцином 0,5%, лизином 0,5%, фенилаланином 0,1%, треонином 0,1%, валином 0,1%, метионином 0,1%, лактозой 1%, целлюлозой 1%, метилцеллюлозой кальция 1%, гидроксипропилцеллюлозой 0,1%, красителем 0,001%, добавляют частями в несколько приемов при постоянном перемешивании крахмал до 100%, увлажняют смесь 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

7. Светло-желтые гранулы. Эргокальциоферол 1% смешивают с крахмалом в количестве 99%. При необходимости увлажняют смесь водой в небольшом количестве. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

Гранулы смешивают между собой в количестве 1 белая 17%, 2 белая 7%, желтая 36%, оранжевая 12%, красная 8%, шоколадная 13%, светло-желтая 7% и заполняют капсулы.

В качестве капсул используются твердые желатиновые капсулы, состоящие из крышечки и корпуса.

Пример 2

1. Белые гранулы. Отвешивают никотинамид в количестве 35%, смешивают с пиридоксином 8% и пантотенатом кальция 15%, затем добавляют лактозу 20%, карбоксиметилцеллюлозу кальция 11%, оксид титана 2%, затем лактозу до 100%, смесь равномерно увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

2. Белые гранулы. Смешивают тиамин 30%, крахмал 10%, целлюлозу 15%, карбоксиметилцеллюлозу кальция 15%, оксид титана 5% и метилцеллюлозу 5%, затем добавляют при перемешивании лактозу до 100%, смесь равномерно увлажняют 1% воды. Смесь гранулируют через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

3. Красные гранулы. Смешивают триптофан 30% с токоферолом 5%, крахмалом 25%, гидроксипропилцеллюлозой 6%, кристаллической целлюлозой 6%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 6%, макроголом 6000 2%, силикатом алюминия 15%, красителем 1,0%, прибавляют лактозу до 100%, увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

4. Шоколадные гранулы. Смешивают аскорбиновую кислоту в количестве 50% с крахмалом 10%, целлюлозой кристаллической 9%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 10%, метилцеллюлозой 6%, макроголом 6000 10% и красителем 1,0%. Прибавляют лактозу до 100%, увлажняют 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

5. Оранжевые гранулы. Смешивают 5-гидроксиантраниловую кислоту 10% с рибофлавином 10%, фолиевой кислотой 6%, цианокобаломином 6%, крахмалом 30%, целлюлозой кристаллической 10%, карбоксиметилцеллюлозой кальция 6%, гидроксипропиленцеллюлозой 7%, макроголом 6000 5% и красителем 1%. Прибавляют лактозу до 100%, увлажняют 1% воды.

Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

6. Желтые гранулы. Смешивают изолейцин в количестве 10% с лейцином 15%, лизином 20%, фенилаланином 5%, треонином 5%, валином 8%, метионином 15%, лактозой 4%, целлюлозой 11%, метилцеллюлозой кальция 3%, гидроксипропилцеллюлозой 1%, красителем 1%, добавляют при постоянном перемешивании крахмал до 100%, увлажняют смесь 1% воды. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

7. Светло-желтые гранулы. Эргокальциоферол 5% смешивают с крахмалом в количестве 95%. При необходимости увлажняют смесь водой в небольшом количестве. Затем гранулируют смесь через сито гранулятора, высушивают гранулы до остаточной влажности не более 0,5%. Готовые гранулы ссыпают в контейнер.

Гранулы смешивают между собой в количестве 1 белая 17%, 2 белая 7%, желтая 36%, оранжевая 12%, красная 8%, шоколадная 13%, светло-желтая 7% и заполняют капсулы.

В качестве капсул используются твердые желатиновые капсулы, состоящие из крышечки и корпуса.

На практике можно вносить изменения и модифицировать описанные предпочтительные примеры осуществления настоящего изобретения, не отступая при этом от предмета и целей настоящего изобретения, в рамках заявленной формулы изобретения.

Клиническое исследование, проведенное для композиции, приготовленной по Примеру 2, подтверждает, что лечение предлагаемой композицией может значительно улучшить относительные симптомы и лабораторные параметры.

При лечении заболеваний печени назначение улучшает работу печени, увеличивает образование сыворотки, сокращает количество мертвых клеток и, следовательно, очевидно устраняет такие симптомы, как усталость, апатия, боль в печени, желчность, вздутие печени, а также такие параметры, как ALT, AST и т.д.

Что касается заболеваний почек, особенно у пациентов, которым необходимо ограничивать ввод протеина, постоянное принятие небольшого количества основных аминокислот и витаминов, ведущих к улучшению отрицательного баланса азота, увеличению бионакопления неосновных аминокислот, сокращению производства азота и выполнению основной функции почки. Лечение предлагаемой композицией может сократить обычные симптомы болезней почек, таких как усталость, боли в животе, отеки и т.д., увеличение концентрации плазменного альбумина и основных аминокислот и сокращение концентрации неосновных аминокислот.

Лечение цирроза

Объекты и метод:

1. Выбор пациентов

Пациенты, имеющие диагноз цирроз печени с альбумином в диапазоне 28-35 г/л. Пациентов условно делили на две группы.

2. Метод лечения

Группа для лечения (n=10): 2 капсулы в раз три раза в день в течение 6 недель. Контрольная группа (n=7): средство прототипа

3. Параметры исследования

Фиксировались до и после лечения следующие показатели.

Симптомы: усталость, апатия, тошнота, рвота, боль печени, небольшая температура и т.д.

У всех пациентов до лечения наблюдались: асцит, небольшой отек легких и т.д.

Изучались лабораторные показатели: альбумин, глобин, протромбиновое время, билирубин, титрование в газовой фазе, правильное течение крови, тромбоцит и т.д.

4. Статистические данные

Тесты X², Н используются для сравнения лечебной и контрольной групп соответственно.

Результат

Результаты клинического исследования пациентов с циррозом печени после лечения предлагаемым составом отображены в таблицах 1, 2, 3, которые обозначают:

1. Предлагаемая композиция показала значительную эффективность при устранении симптомов цирроза печени, таких как усталость и апатия;

2. Композиция показала значительную эффективность при асците и снятии нижнего отека легких у пациентов с циррозом печени.

3. Композиция очевидно способна увеличить количество протеинов и сокращать протромбиновое время, значительно сокращать уровень глобина, большое количество красных клеток и тромбоцитов, но не улучшает такие лабораторные параметры, как титрование в газовой форме, билирубин и т.д.

4. Композиция не оказывает отрицательных реакции в процессе лечения.

5. Положительный эффект от лечения предлагаемой композицией достигался в более короткие сроки, чем от лечения состава прототипа.

Предлагаемая композиция может обеспечивать питание клеткам ткани, ускорить синтез протеинов в ткани и улучшить метаболизм ткани. Настоящие результаты исследования показывают, что лечение пациентов с циррозом печени предлагаемой композицией может значительно улучшить клеточную функцию печени, так же как и обеспечить питание клеток печени, особенно при лечении гипоальбуминии, предлагаемая композиция - препарат с высокой эффективностью, безопасностью и удобством в применении

Лечение хронической почечной недостаточности

1. Пациенты: 22 случая с хроническими заболеваниями печени, среди которых 12 мужчин и 10 женщин в возрасте 9-56 лет (в среднем 2.6±8.2). Среди стандартных заболеваний есть 7 случаев хронического нефрита, 3 случая пиелита, 2 случая диабетического нефрита, 2 случая подагры печени. В дополнение была набрана контрольная группа, состоящая из 10 человек.

Препараты и дозировка: Предлагаемая композиция 2 капсулы три раза в день течение 31-54 дня.

Все пациенты с хроническими заболеваниями печени, сопровождаемые инфекцией, лечились после обнаружения инфекции, а пациенты с гипертензией получали лечение для восстановления давления.

В каждой группе фиксировались основные лабораторные параметры до лечения и после лечения, тестировались: показатели крови и мочи, содержание веществ: азот мочевины (BUN), кретинин (Scr), скорость очищения внутреннего креатинина (Ccr), общее количество протеинов в плазме (ТР), альбумин плазмы (Alb), кальций, фосфор, глицерид (TG), холестерол (Ch) и глюкоза (Glu).

Аминокислоты определялись точным построением хроматограммы и анализировались с помощью флурометрии, аппарат Millipore-Wates Cop. Sigma Cop., который фиксирует стандартные образцы 16 аминокислот.

1. Функция печени и результаты биохимического теста представлены в таблице 1. Показано снижение азота и фосфора в крови, увеличение кальция в крови (Р<0.005). Другие параметры ничем не отличаются от представленных выше.

2. Показатели крови SIL-2R, мочи SIL-2R в экспериментальной группе были выше, чем аналогичные показатели контрольной группы (Р<0.01).

3. Различия показателей в сравниваемых группах представлены в таблице 2.

4. Определяли количество аминокислот в плазме. До лечения обнаруживалось 4 аминокислоты, в меньшей концентрации, чем после лечения (См. таблицу 3).

Данное исследование показывает, что применение предлагаемого состава, комбинированное с низкопротеиновой диетой, уменьшает количество азота в мочевине при хроническом заболевании печени и улучшает симптомы высокой концентрации фосфора и низкой концентрации кальция в крови, так же как и влияние на количество сахара в крови и креатина в крови. В дополнение вышеуказанное изменение не увеличивается при окончании периода лечения, который должен соответствовать каждому пациенту с заболеванием печени, и только диета не может изменить диализ крови. В вышеуказанной группе получали лечение - диализ крови.

После применения предлагаемой композиции пациенты данной группы имеют значительное повышение количества аминокислот в плазме и уменьшение количества неосновных аминокислот. Таким образом, очевидно, что композиция модулирует уровень различных аминокислот в их общем количестве, между тем, концентрация фосфора в крови очевидно уменьшается. При продолжении времени лечения существует необходимость дальнейшего исследования для определения эффективности лечения для улучшения состояния печени.

Иммуностимулирующее действие предлагаемого средства определялась по следующим показателям IgA (г/л), IgM (г/л), IgG (г/л), С3 (г/л), тест передачи клетки лимфы (LTT, %), на 2-х группах контрольной и лечебной. Лечебная группа принимала предлагаемый состав по 2 капсулы 2 раза в день в течение 10 дней.

Полученные данные свидетельствуют о том, что заявляемое средство повышает защитные силы организма к воздействию канцерогена и других факторов среды, (таблица 4).

Изучение гиполипидемического действия предлагаемой композиции на уровень липидов и ЛП у животных с экспериментальной ДЛП атерогенного характера проводили на крысах и кроликах, используя модели патологического состояния.

Для определения липидов использовали унифицированные биохимические методики в соответствии с рекомендациями Всероссийского научного общества кардиологов (ВНОК, 2004). Уровень ХС в сыворотке крови крыс и кроликов определяли колориметрическим ферментативным методом (CHOD-PAP) с применением набора реагентов фирмы "Vital Diagnostics". Определение холестерина ЛПВП в сыворотке крови крыс и кроликов проводилось указанным выше методом с применением реактивов той же фирмы после предварительного осаждения атерогенных ЛП. Для определения ТГ в сыворотке крови крыс и кроликов применялся набор реактивов фирмы "Vital Diagnostics" [Wahlfeld A.W. In: Methods of enzymatic analysis. Acad. Press, NY; 1974: 1831]. Содержание ХС в печени определяли, используя общепринятую цветную реакцию Либермана-Бурхарда, после экстракции навески печени смесью хлороформа с карбинолом [Bragdon G.H. In: Lipids and steroid hormons in clinical medicine. Ph. 1960: 6-10]. Содержание ТГ в печени определяли по методу Нэри и Фрингс (1973), модифицированному авторами, состоящему в замене сорбента - цеолитной смеси окисью алюминия [Окуневич И.В., Сапронов Н.С., Инденбом М.Л. Хим.-фарм. ж. 1999; 11: 14-16]. Содержание общего ХС в аорте кроликов осуществляли колориметрически, используя реакцию Либермана-Бурхарда, после экстракции навески. Для приготовления хлороформного экстракта аорту растирали с кварцевым песком [Рыженков В.Е., Хромов-Борисов Н.В., Мосина И.В., Инденбом М.Л. Фармакол. токсикол. 1979; 6: 632-635]. Содержание ХС в надпочечниках определяли экстракционным методом, как указано выше, после гомогенизации навески ткани, экстракции ее хлороформом и применяя последующую реакцию Либермана-Бурхарда [Окуневич И.В., Рыженков В.Е. Пат. физиол. экспер. тер. 2002; 2: 14-18].

Результаты исследований

Гиполипидемическая активность на моделях ДЛП.

Опыт 1. Модель тритоновой дислипопротеинемии (ДЛП) у крыс.

Гиполипидемическую активность изучали на 60 крысах-самцах на скрининговой модели ДЛП, вызванной детергентом тритоном WR-1339 (225 мг/кг однократно, внутрибрюшинно). Эта модель характеризуется развитием стойкой гиперлипидемии - значительным увеличением уровня ХС и ТГ в крови у крыс (массой 250-300 г) по сравнению с содержанием этих показателей у интактных животных [Shurr P.E., Shultz Y.R. Lipids 1972; 7(1): 68-74].

Заявляемый препарат вводили крысам в дозе 100 мг/кг перорально двукратно (до введения и одновременно с введением тритона WR-1339). Спустя 10 часов степень развития гиперлипидемии определяли по уровню ХС и ТГ в сыворотке крови, что при терапии заявляемым препаратом наблюдается достоверное снижение повышенных в условиях тритоновой ДЛП уровней ХС и ТГ: на 25% и 50% соответственно.

Таким образом, на модели тритоновой дислипопротеинемии было обнаружено выраженное гиполипидемическое действие.

Опыт 2. Гиполипидемическое действие предлагаемой композиции на модели хронической алиментарной ДЛП у крыс.

Эксперименты проведены на 72 крысах-самцах (массой 230-250 г) в условиях алиментарной ДЛП, характеризующейся повышенным уровнем липидов и ЛП в сыворотке крови и печени и одновременно сниженным содержанием ХС антиатерогенных ЛПВП в крови. Эти нарушения были вызваны с помощью диеты, содержащей 7,5% ХС, 30% смеси животных жиров и прогретого подсолнечного масла (2:1) и 500.000 МИ витамина Д2. Длительность проведения опыта составляла 21 день.

Предлагаемую композицию в дозе 100 мг/кг перорально вводили крысам в течение 21 дня на фоне специальной гиперхолестеринемической диеты (ГХС диеты). В сыворотке крови определяли уровни общего ХС, ТГ и ХС ЛПВП. На основе этих показателей по общепринятой формуле Фридвальда расчитывали ХС атерогенных ЛПНП. По формуле Климова (ХС - ХС ЛПВП)/ХС ЛПВП определяли величину холестеринового индекса атерогенности (ИА). В печени определяли содержание ХС и ТГ, скармливание крысам ГХС диеты приводит к развитию ДЛП: повышению уровня ХС в 2,6 раза, ТГ - 2,9 раза, снижению концентрации ХС антиатерогенных ЛПВП в 2,3 раза. Кроме того, значительно увеличиваются расчетные величины содержания ХС атерогенных ЛПНП и холестеринового ИА, отражающие развитие Ат. В этих условиях применение заявляемого препарата вызывает значительный гиполипидемический эффект: снижаются уровни ХС и ТТ сыворотки крови - на 31,7% соответственно. Эти факты указывают на положительный прогноз в предупреждении развития Ат у экспериментальных животных при терапии.

Гиполипидемия

Препарат испытан на 25 больных с гиполипидемией (в возрасте 56-70 лет) в стационарных условиях).

Результаты проведенного исследования показывают, что препарат обладает выраженным гиполипидемическим действием, проявляющимся уже на 10-е сутки лечения с прогрессивным нарастанием эффекта в последующие его сроки. Так, уровень общего холестерина снижался на 15,6% (10 день), 21,0% (25 день) и 24,4% (3 мес), триглицеридов соответственно на 32,9, 40,6, 44,7%, - липопротеидов на 15,0, 26,7, 24,3%. При этом содержание холестерина в липопротеидах низкой плотности (ХС-ЛПНП - высокоатерогенные липопротеиды) снижалось более существенно - на 25,6, 36,9, 41,4% (соответственно 10, 25 и 90 дни лечения), а концентрация холестерина в липопротеидах высокой плотности (- холестерин - ЛПВП - антиатерогенные липопротеиды) нарастала соответственно по срокам лечения на 20,6, 32,7, 32,7%.

Стабильность предлагаемого состава композиции определялась с помощью разработанных аналитических методик анализа по каждому активному веществу, входящему в состав.

Рибофлавин, аскорбиновая кислота, пиридоксина гидрохлорид, никотинамид, тиамина мононитрат, фолиевая кислота, ретинола пальмитат, эргокальциферол, альфа-токоферола ацетат, лейцин, изолейцин, лизина гидрохлорид, фенилаланин, треонин, валин, триптофан, метионин. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Согласно полученным данным (таблица 5 - результаты изучения стабильности композиции), срок годности составляет 3 года.

Полученные результаты фармакологических испытаний показали, что выбранные составы гранул, соотношение гранул обеспечивает эффективность препарата: гепатопротекторный, гиполипидемический, иммуностимулирующий и нормализующий деятельность почек эффекты.

На основании вышеизложенного можно сделать выводы, что предлагаемая композиция обладает рядом преимуществ в сравнении с прототипом.

Примеры исполнения настоящего изобретения позволяют расширить номенклатуру эффективных препаратов.