Результат интеллектуальной деятельности: ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДЕПРЕССИВНЫХ СОСТОЯНИЙ

Изобретение относится к области медицины и касается нового комбинированного лекарственного средства для профилактики и лечения депрессивных эпизодов, нарушений сна, а также способа профилактики и лечения депрессивных эпизодов, нарушений сна.

Совершенствование терапии депрессивных расстройств традиционно являлось и продолжает являться одной из ведущих задач современной психиатрии. Несмотря на имеющийся в настоящее время широкий спектр фармакотерапевтических средств, аффективные (прежде всего депрессивные), расстройства занимают одно из ведущих мест в общей структуре психической заболеваемости. До 4,1% всего мирового населения страдают этими расстройствами [Лебедев М.А., Кинкулькина М.А. Опыт терапии адинамичсских депрессий различного генеза препаратом профлузак. // Психиатрия и психофармакотераиия, Том 3/№ 4/2001].

Установлено, что сезонность обострений у больных депрессиями в определенной степени обусловлена нарушением уровня и ритмики (суточной и сезонной) продукции мелатонина [Арушанян Э.Б. Эпифиз и депрессия. // Журн. невропатол. и психиат. 1991; 91:6:108-112.; Кочетков Я.А. Мелатонин и депрессия. // Журн. невропатол. и психиат., 6, 2007; 107:6:79-83].

Для профилактики и лечения депрессивных состояний широко используют селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (СИОЗС) - это современная, наиболее часто назначаемая в настоящее время и сравнительно легко переносимая группа антидепрессантов. Препараты из группы СИОЗС обладают выраженной эффективностью при легких и средней тяжести депрессиях [Кеннеди С.Ограничения современной терапии антидепрессантами. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - М.: Медиа Сфера, 2007. - №12].

Флуоксетин - один из наиболее распространенных представителей СИОЗС, обладающий минимальным воздействием на другие нейротрансмиттеры (D.H.Guze, M.Gilin, 1994; L.J.Cohen, C.L.Devane, 1996). Препарат эффективен при депрессивных эпизодах вне зависимости «от психомоторной активности в исходном состоянии» (C.M.Beasley, 1991).

Однако установлено, что флуоксетин редуцирует концентрации мелатонина в крови, что может быть связано со снижением содержания в цитоплазме предшественника мелатонина - серотонина.

Несмотря на современные достижения в терапии за счет клинических особенностей проявления и динамики депрессивных синдромов, а также формирования резистентных к терапии состояний и тенденции к хроническому течению, актуальна необходимость поиска новых подходов терапии пациентов с депрессиями [Лебедев М.А., Кинкулькина М.А. Опыт терапии адинамических депрессий различного генеза препаратом профлузак. // Псифиатрия и психофармакотерапия, Том 3/№ 4/2001].

Общеизвестно, что при депрессии возникают нарушения сна, которые проявляются в трудности засыпания, частых пробуждениях, особенно ранним утром. В дневные часы больные испытывают ощущения вялости, разбитости вследствие недосыпания; у них резко снижается работоспособность. Нарушения сна, естественно, не являются специфическими для депрессивных расстройств, однако, для депрессий они являются одним из наиболее частых симптомов. [Тиганов А.С. Эндогенные психические заболевания. // Журнал "Самиздат", 2003, №3.; Арушанян Э.Б. Эпифиз и депрессия. // Журн. невропатологии и психиатрии 1991; 91:6:108-112].

Нарушения длительности и структуры сна могут также играть важную роль в патогенезе аффективных расстройств. Показано, что у здоровых людей недостаток сна или нарушения его периодичности (связанные, например, со сменной работой или трансмеридианальными перелетами) могут вызвать развитие депрессивной симптоматики [Ашофф Ю., 1984].

Связь между депрессией и нарушениями сна известна давно (Reynolds, 1987; Armitage, 2000; Brunello и соавт., 2000; Mayers, Baldwin, 2006). Нарушения сна входят во все основные диагностические критерии и рейтинговые шкалы депрессии. По данным опроса 2500 врачей общемедицинской практики (Krupinski, Tiller, 2001), расстройства сна являются наиболее частыми симптомами для распознавания депрессии. Нарушения сна выявляются у 50-90% больных депрессией. В опубликованном недавно обзоре данных по депрессии в общемедицинской сети (Almeida, Pfaff, 2005) 85% пациентов старше 60 лет жалуются на нарушения сна, чаще всего на беспокойство/частые пробуждения в течение ночи. Большинство отмечают инсомнию, реже (до 20%) встречается гиперсомния (Tsuno и соавт., 2005; Kaneita и соавт,, 2006). Инсомния является предиктором последующего развития депрессии (Riemann, Voderholzer, 2003) и часто возникает одновременно или до манифестации симптомов аффективного расстройства (Ohayon, Roth, 2003), а резидуальная инсомния может быть связана с повышенным риском обострения депрессии (Ohayon, Roth, 2003). Плохой сон связан с ухудшением качества жизни (Mayers и соавт., 2003).

Мелатонин - это гормон эпифиза, представляет собой N-ацетил-5-метокситриитамин, который синтезируется из триптофана через промежуточный синтез серотонина [Кочетков Я.А. Мелатонин и депрессия. // Журнал невропатологии и психиатрии, 6, 2007; 107:6:79-83]. Мелатонин вовлечен в контроль множества физиологических функций, таких как репродукция, регуляция сна, иммунные процессы, подавление роста опухолей, регуляция кровяного давления, контроль настроения и поведения.

В последние десятилетия проводились многочисленные исследования, в которых были выявлены нарушения секреции эпифизарного мелатонина при депрессии. В большинстве из них было установлено, что у пациентов с депрессией отмечается понижение содержания мелатонина в плазме крови в ночные часы с соответствующим снижением экскреции его метаболитов, или же нарушение ритмичности его выработки, что приводит к рассогласованию циркадных ритмов [Arendt J. Melatonin: a new probe in psychiatric investigation? // Br. J. Psychiat 1989; 155: 585-590.; Rubin R.T, Heist R.K., McGeoy S.S. et al. Neuroendocrine aspects of primary endogenous depression. XI. Serum melatonin measures in patients and matched control subjects. // Arch Gen Psychiat 1992; 49, 558-569; Sack R.L, Lewy A.J., Rittenbaum M., Hughes R.J. Chronobiology and melatonin. // Psychoneuroendocrinology.; 2003; 83-107;

Srinivasan V., Smits M., Spence W. et al. Melatonin in mood disorders. // World J Biol Psychiat 2006; 7:3:138-152].

Целью настоящего изобретения является разработка фармацевтической композиции для лечения и профилактики депрессивных состояний, обладающей дополнительными терапевтическими качествами: способностью облегчить засыпание и устранить нарушения сна, характерные для депрессий, восстанавливать нормальное циркадианные и сезонные ритмы, нарушенные при депрессиях и проявляющиеся сезонностью обострений.

Поставленная цель решается тем, что фармацевтическая композиция для лечения и профилактики депрессивных состояний содержит селективный ингибитор обратного захвата серотонина (СИОЗС), выбранный из группы флуоксетин, пароксетин, циталопрам, эсциталопрам, сертралин, флувоксамин и фармацевтически приемлемые носители, дополнительно содержит терапевтически эффективное количество с N-ацетил-5-метокситриптамипа (мелатонина) в соотношении:

Селективный ингибитор обратного захвата серотонина (СИОЗС) 10-30 мг Мелатонин 3-8 мг

Фармацевтически приемлемые носители

В качестве ингибиторов обратного захвата серотонина используются следующие соединения, выбранные из группы флуоксетин, пароксетин, циталопрам, эсциталопрам, сертралин, флувоксамин.

Фармацевтическая композиция может быть выполнена в виде твердой лекарственной формы - таблетки, таблетки покрытой оболочкой, капсуле, в виде мягкой лекарственной формы - суппозитории ректальном.

Примеры получения твердых лекарственных форм фармацевтической композиции.

1. Таблетки.

2. Состав на одну таблетку:

Действующие вещества:

Вспомогательные вещества:

Описание. Круглые двояковыпуклые таблетки белого цвета.

Таблетку получают методом прямого прессования. Действующие вещества смешиваются в сухом виде и сразу поступают в таблеточный пресс.

Составы таблеток пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичны составу таблетки флуоксетина.

При разработке составов о таблеток препаратов флуоксетин+мелатонин, пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин основным наполнителем была выбрана лактоза моногидрат. В качестве связующего вещества и дезинтегратора была использована микрокристаллическая целлюлоза. Для улучшения сыпучести таблеточной массы был применен кремния диоксид коллоидный. В качестве смазывающего вещества был использован магния стеарат.

Совместимость действующих веществ вещества с вспомогательными веществами лактозой моногидратом, микрокристаллической целлюлозой, кремния диоксид коллоидным и магния стеаратом подтверждается данными методов контроля и указанными ниже данными фармакологической активности.

Совместимость основного действующего вещества с вспомогательными и отсутствие химического взаимодействия между всеми компонентами лекарственного средства также подтверждается данными, полученными в результате физико-химических исследований как на свежеизготовленных таблетках, так и в процессе хранения.

Описание процесса получения таблетки.

Действующие вещества флуоксетин 5 кг, мелатонин 0,75 кг и вспомогательные вещества - лактозы моногидрат 12.25 кг, целлюлоза микрокристаллическая 15 кг, кремния диоксид коллоидный 150 гр. и магния стеарат 150 гр. взвешиваются в количествах, соответствующих заполнению смесителя периодического действия лопастного типа объемом на 50 кг таблетируемой массы. Составляющие таблеточную смесь лекарственного и вспомогательного вещества тщательно смешиваются для равномерного распределения их в общей массе. Далее тщательно перемешанная таблетируемая масса подается на таблетируемый пресс с пуансонами диаметром 5 мм двояковыпуклой формы. Для удаления с поверхности таблеток, выходящих из пресса, пылевых фракций таблетки проходят через вращающийся перфорированный барабан и очищаются от пыли, которая отсасывается пылесосом. Готовые таблетки массой 135,0 мг направляются на упаковку.

Процесс получения методом прямого прессования таблеток пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралир+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичен процессу получения таблетки флуоксетина+мелатонин.

2. Таблетки, покрытые пленочной оболочкой.

Состав на одну таблетку:

Действующие вещества:

Вспомогательные вещества

Вспомогательные вещества для оболочки

Описание. Таблетки, покрытые пленочной оболочкой белого или почти белого цвета, двояковыпуклые, продолговатой формы со скругленными концами. На поперечном разрезе внутренний слой белого или почти белого цвета.

Составы таблеток, покрытые пленочной оболочкой пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичны составу таблетки, покрытой пленочной оболочкой флуоксетина+мелатонина.

Совместимость основного действующего вещества с вспомогательными и отсутствие химического взаимодействия между всеми компонентами лекарственного средства также подтверждается данными, полученными в результате физико-химических исследований как на свежеизготовленных таблетках, так и в процессе хранения.

Описание процесса получения таблетки, покрытой пленочной оболочкой

Для получения массы для таблетирования на медицинских весах отвешивают действующие вещества флуоксетин, мелатонин и вспомогательные вещества - целлюлозу микрокристаллическую, маннитол, кросповидон, кремния диоксид коллоидный и магния стеарат - для получения таблетки-ядра без оболочки, в количествах, соответствующих заполнению смесителя периодического действия лопастного типа объемом па 50 кг таблетируемой массы. Смешивание действующих веществ с наполнителем осуществляют в смесителе тина СГК-200. Гранулирование осуществляют на установке для получения гранулята из сухих смесей через сетку с диаметром отверстий 3 мм. Опудривание гранулята производят в грануляторе во время сухого гранулирования. Опудривающию смесь, состоящую из маннитола, кросповедона и кремния диоксида небольшими порциями добавляют в гранулят. Опудренный гранулят собирают в приемник. Прессование гранулята в таблетки производят на таблеточном прессе пуансонами диаметром 6 мм, двояковыпуклой формы. Масса таблетки-ядра составляет 120,5 мг.

Для приготовления пленочного покрытия на весах отвешивают соответствующее колочество гипромеллозы и макрогола 6000 помещают в емкость; мерной емкостью отмеривают соответствующее колочество очищенной воды и вливают ее в емкость с гипромеллозой и макрогола 6000.

После полного растворения гипромеллозы и макрогола 6000 раствор фильтруют через капроновое сито N 58 в емкость с мешалкой. На весах отвешивают и помещают в емкость просеянный через сито N 58 титана диоксид, затем добавляют раствора гипромеллозы и макрогола 6000, перемешивают, фильтруют, включают мешалку и тщательно перемешивают. Приготовленную суспензию перекачивают в емкость с мешалкой. Перед нанесением покрытия таблетки-ядра загружают в котел в количестве. Нанесение пленочного покрытия на таблетки-ядра осуществляют с помощью форсунок при непрерывном перемешивании и непрерывной сушке. Таблетки накатывают до средней массы 123,5 мг. Таким образом, на таблетках образуется пленочное покрытие из смеси метилцеллюлозы-8, титана двуокиси и тропеолина. Выгрузка готовых таблеток из вращающейся емкости происходит при низкой скорости вращения. Таблетки флуоксетин+мелатонин, покрытые оболочкой направляют на упаковку.

Процесс получения таблеток, покрытых пленочной оболочкой, пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичен процессу получения таблетки, покрытой пленочной оболочкой флуоксетина+мелатонин.

Капсулы

Состав на одну капсулу:

Действующие вещества

Вспомогательные вещества

Капсулы твердые желатиновые (титана диоксид,

краситель синий патентованный, желатин)

Описание. Капсулы №3 с корпусом белого цвета и крышечкой голубого цвета. Содержимое капсул - порошок белого или почти белого цвета.

Составы содержимого капсулы препаратов пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичны содержимого капсулы флуоксетина+мелатонина.

Совместимость основного действующего вещества с вспомогательными и отсутствие химического взаимодействия между всеми компонентами содержимого капсулы, также подтверждается данными, полученными в результате физико-химических исследований, как на свежеизготовленных капсулах, так и в процессе хранения.

Описание процесса получения капсул.

Тщательно просеянные компоненты взвешивают - действующие вещества флуоксетин 20,0 г, мелатонин 30,0 г и вспомогательные вещества кремния диоксид коллоидный 16,2 г, кислоты янтарной 20,0 г, магния стеарата 13,0 г, талька 16,4 г, целлюлозы микрокристаллической 831 г

Составляющие содержимого капсул - смесь действующих и вспомогательных веществ тщательно смешиваются в смесителе типа СГК-200 для равномерного распределения их в общей массе при постоянном контроле однородности массы для капсулирования. Далее, тщательно перемешанная капсулируемая масса подается на капсулирующую машину типа «Zanazi» или другую аналогичную с Q=20-150 тыс/ч и точностью дозирования 2-5%., для заполнения полученной массы в твердые желатиновые капсулы №3 с уплотнением до массы 0,2 г±10% в каждой капсуле. Поучают капсулы со средней массой содержимого капсулы 0,133 г. Капсулы флуоксетан+мелатонин направляют на упаковку.

Процесс получения капсул пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичен процессу получения капсул флуоксетин+мелатонин.

Пример получения мягкой лекарственной формы - ректального суппозитория.

Состав на один суппозитории:

Действующие вещества:

Вспомогательные вещества

Совместимость основного действующего вещества с вспомогательными, как флуоксетин, так и мелатонин хорошо растворимы в воде и отсутствие химического взаимодействия между всеми компонентами содержимого суппозитория, также подтверждается данными, полученными в результате физико-химических исследований, как на свежеизготовленных свечах, так и в процессе хранения.

Составы содержимого суппозиториев пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин по вспомогательным веществам аналогичны составу суппозитория флуоксетина+мелатонина.

Приготовление основы. Взвешивают все компоненты основы. В реактор из нержавеющей стали с паровой рубашкой загружают парафин, включают обогрев. В другой реактор гидрожир и расплавляют подачей пара в рубашку реактора. Разогретый гидрожир с помощью насоса перегружают в реактор с предварительно расплавленным парафином, и смесь нагревают до температуры 60-70°С. Затем добавляют масло какао, но при этом следят, чтобы нагрев не превышал 70°С и не был длительным, во избежание изменения модификации масла какао и повышения на 2-3° температуры его плавления. После полного расплавления основы ее перемешивают в течение 40°C с помощью мешалки. В готовой основе определяют температуру плавления и время полной деформации. Если температура плавления основы больше или меньше заданной, ее исправляют введением парафина или гидрожира, добавляя их в подогретую до 60-70°С основу при тщательном перемешивании. Готовую жировую основу фильтруют через друк-фильтр, в качестве фильтрующего материала - ткань бельтинг или латунная сетка. И с помощью сжатого воздуха передают в реактор, где вводятся действующие вещества флуоксетин и мелатонин.

Ведение в основу действующих веществ. Их растворяют в воде и готовят растворы-концентраты при перемешивании в равном количестве воды температура 45-48°С. Растворы-концентраты лекарственных веществ фильтруют через бязь и подают в реактор. Готовую суппозиторную массу перемешивают течение 45 мин, анализируют и подают на фасовку.

Формирование и упаковка свечей. Дозирование осуществляется насосом. Формируются свечи №2 (масса 2,3-2,5 г, длина 35 мм ⌀10 мм). Время полной деформации не более 3-4'. Выливание суппозиториев производят на автоматах с разделенными операциями отливки и упаковки в алюминиевую фольгу, поступающую с двух рулонов, в который формируются чашеобразные половины, которые соединяются и термосвариваются. Наверху каждой формы остается открытым наполнительное отверстие, через которое иглой подается суппозиторная масса. Таким образом упаковка одновременно служит формой для выливания суппозиториев.

Процесс получения суппозиториев пароксетин+мелатонин, циталопрам+мелатонин, эсциталопрам+мелатонин, сертралин+мелатонин, флувоксамин+мелатонин но вспомогательным веществам аналогичен процессу получения суппозитория флуоксетин+мелатонин.

При введении действующих веществ пароксетина, циталопрама, эсциталопрама сертралина, флувоксамин в суппозиторную основу необходимо учитывать показатели растворимости этих веществ и использовать для подготовки раствора для введения в основу соответствующие веществу растворитель.

Для достижения цели проведены исследования по определению терапевтически эффективного количественного сочетания действующих веществ ингибитора обратного захвата серотонина (СИОЗС) - флуоксетина, пароксетин, циталопрам, эсциталопрам, сертралин, флувоксамин и N-ацетил-5-метокситринтамина (мелатонина).

На базе ГОУ ВПО НижГМА Росздрава в 2009 г. было проведено доклиническое исследование специфической антидепрессивной активности комбинации препаратов «Флуоксетин+Мелатонин», «Пароксетин+Мелатонин», «Циталопрам+Мелатонин», «Эсциталопрам+Мелатонин», «Сертралин+Мелатонин», «Флувоксамин+Мелатонин». Исследование препаратов проводилось с целью изучения специфического фармакологического действия композиции препаратов при внутрижелудочном применении в условиях моделирования условного рефлекса пассивного избегания у крыс и при моделировании стрессорного состояния «отчаяния» у мышей в сравнении с препаратом флуоксетин, пароксетин, циталопрам, эсциталопрам, сертралин, флувоксамин.

В экспериментах было использовано по 10 половозрелых крыс самцов и самок линии Wistar на каждую комбинацию и на каждый выбранный уровень доз СИОЗС и мелатонина и по 15 половозрелых белых беспородных мышей самцов на каждую комбинацию и на каждый выбранный уровень доз СИОЗС и мелатонина, прошедших 14-дневный карантин. Животных распределяли по группам случайным образом, используя в качестве критерия массу тела так, чтобы индивидуальная масса животных не отличалась более чем на 10% от средней массы. Основные правила содержания и ухода соответствовали нормативам, данным в руководстве GLP.

Выбор рекомендуемой эквитерапевтической дозы ингибитора обратного захвата серотонина (СИОЗС) - флуоксетина, пароксетина, циталопрама, эсциталопрама, сертралина, флувоксамина определили следующими исследованиями: специфическое фармакологическое действие препаратов и их комбинаций с Мелатонином 3 мг изучено при моделировании стрессовых депрессивных состояний у крыс.

Тест «выученной беспомощности» (влияние на эмоционально-стрессовое состояние). Неизбегаемое электроболевое раздражение вызывает у крыс длительно сохраняющийся дефицит поведения, проявляющийся затруднением обучения условно-рефлекторным реакциям избегания. Крыс помещали в клетки с полом из металлических прутьев и подвергали повторным электроболевым воздействиям (50 ударов/15 с, 0.4 мЛ, интервалом 10 с). На следующий день у животных вырабатывают условную реакцию пассивного избегания (УРПИ).

Применение антидепрессивных средств в течение 7-14 дней должно препятствовать развитию торможения выработки условной реакции (профилактическое действие).

1. Флуоксетин 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

1.а. Флуоксетин 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

1.б. Флуоксетин 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

1.в. Флуоксетин 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

1.г. Флуоксетин 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

1.д. Флуоксетин 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2. Пароксетин 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2а. Пароксетин 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2.6. Пароксетин 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2.в. Пароксетин 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2.г. Пароксетин 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

2.д. Пароксетин 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3. Циталопрам 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3а. Циталопрам 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3.б. Циталопрам 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3.в. Циталопрам 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3.г. Циталопрам 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

3.д. Циталопрам 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4. Эсциталопрам 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4а. Эсциталопрам 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4.б. Эсциталопрам 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4.в. Эсциталопрам 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4.д. Эсциталопрам 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

4.г. Эсциталопрам 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

5. Сертралин 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

5.а. Сертралин 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

5.б. Сертралин 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

5.в. Сертралин 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

5.г. Сертралин 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

5.д. Сертралин 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

6. Флувоксамин 10 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

6.а. Флувоксамин 10 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

6.б. Флувоксамин 20 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

6.в. Флувоксамин 20 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

6.г. Флувоксамин 30 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 5 дней, n=10

6.д. Флувоксамин 30 мг + Мелатонин 3 мг превентивно до электроболевого воздействия в течение 7 дней, n=10

Исходя из полученных данных выявлены следующие эффекты: применение комбинации препаратов Мелатонин 3 мг + СИОЗС 20 мг (флуоксетин, пароксетин, циталопрам, эсциталопрам, сертралин, флувоксамин) улучшало показатели формирования памятного следа при обучении УРПИ по сравнению с СИОЗС 20 мг. Латентное время перехода крыс из светлого отсека в темный было в 8-9 раз больше при превентивном введении. Не было выявлено статистически значимых различий между группами Мелатонин 3 мг + СИОЗС 20 мг и СИОЗС 30 мг и Мелатонин 3 мг + СИОЗС 30 мг. При анализе групп Мелатонин 3 мг + СИОЗС 10 мг и СИОЗС 10 мг увеличения латентного времени перехода крыс из темного отсека в светлый не происходило, таким образом, данные дозы СИОЗС не проявляли значимой антидепрессантной активности.

Таким образом, рекомендуемой заявителем эквитерапевтической дозой ингибитора обратного захвата серотонина (СИОЗС) является 20 мг в сутки. Исходя из рекомендуемой заявителем схемы лечения мелатонином (3 мг в сутки) и одним из СИОЗС (20 мг в сут), эквитерапевтическая доза мелатонина для крыс составила 0,25 мг/кг/сут, эквитерапевтическая доза СИОЗС-1,7 мг/кг/сут.

Специфическое фармакологическое действие комбинированного препарата (Мелатонин+СИОЗС) при различном содержании Мелатонина изучено при моделировании стрессовых депрессивных состояний у мышей в «тесте отчаяния».

Тест отчаяния (исследование превентивного воздействия).

Стрессовое состояние вызывали у мышей форсированным плаванием. Животных помещали в цилиндр диаметром 10 см, высотой 25 см, наполняли водой на 1/3 27°С. После неудачных попыток выбраться из воды животные принимают характерную неподвижную позу, которую расценивают как проявление подавленности, «отчаяния». Под влиянием антидепрессантов активность животных возрастает и время до наступления неподвижности (иммобилизации) увеличивается. Наиболее эффективное суточное терапевтическое соотношение компонентов нового лекарственного средства получено в примерах путем доклинического изучения на лабораторных животных и представлены в соответствующих таблицах.

В эксперименте были сформированы следующие группы:

1. Контроль (физиологический раствор), n=10

2. Препарат СИОЗС 20 мг превентивно до тестирования в течение 7 дней, n=10

3. Мелатонин 1 мг + Препарат СИОЗС 20 мг превентивно до тестирования в течение 7 дней, n=10

4. Мелатонин 3 мг + Препарат СИОЗС 20 мг превентивно до тестирования в течение 7 дней, n=10

5. Мелатонин 6 мг + Препарат СИОЗС 20 мг превентивно до тестирования в течение 7 дней, n=10

6. Мелатонин 9 мг + Препарат СИОЗС 20 мг превентивно до тестирования в течение 7 дней, n=10

В качестве СИОЗС были взяты следующие препараты: Флуоксетин, Пароксетин, Циталопрам, Эсциталопрам, Сертралин, Флувоксамин.

Пример 1. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие антидепрессантного действия препарата Флуоксетин и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в табл.2.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг) + Флуоксетин 20 мг и монопрепарата Флуоксетин 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы по сравнению с контролем при р<0.05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+Флуоксетин с использованием мелатонина в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 1,45 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Флуоксетин 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг + Флуоксетин 20 мг. Различия между группами не достигали 2% (время активной попытки животных выбраться из воды было, в среднем, в 1,39 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий по времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг + Флуоксетин 20 мг, таким образом, данные комбинации можно считать равноэффсктивными по антидепрессантной активности.

Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг+Флуоксетин 20 мг над эффективностью моноиреиарата Флуоксетин 20 мг представлена в табл.3. Эффективность Флуоксетина 20 мг принималась за 100%

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных). Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Флуоксетин 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 2. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие антидепрессантного действия препарата Пароксетин и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в табл.4.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг) + Пароксетин 20 мг и монопрепарата Пароксстина 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы но сравнению с контролем при р<0.05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+Пароксетин с использованием мелатонина в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 1,9 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Пароксетин 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг + Пароксетин 20 мг. Различия между группами не достигали 2% (время активной попытки животных выбраться из воды было в среднем в 1,3 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий по времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг + Пароксетин 20 мг, таким образом, данные комбинации можно считать равноэффективными по антидепрессантной активности.

Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг + Пароксетин 20 мг над эффективностью монопрепарата Пароксетин 20 мг представлена в табл.5. Эффективность Пароксетина 20 мг принималась за 100%

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных). Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Пароксетин 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 3. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие аптидепрессантного действия препарата Циталопрам и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в таблице 6.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг) + Циталопрам 20 мг и монопрепарата Циталопрама 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы но сравнению с контролем при р<0.05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+Циталопрам с использованием мелатонина в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 1,9 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Циталопрам 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг + Циталопрам 20 мг. Различия между группами не достигали 2% (время активной попытки животных выбраться из воды было в среднем в 1,3 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий по времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг + Циталопрам 20 мг, таким образом, данные комбинации можно считать равноэффективными по антидепрессантной активности.

Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг + Циталопрам 20 мг над эффективностью монопрепарата Циталопрам 20 мг представлена в табл.7. Эффективность Циталопрама 20 мг принималась за 100%

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных).

Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Циталопрам 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 4. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие антидепрессантного действия препарата Эсциталопрам и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в табл.8.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг) + Эсциталопрам 20 мг и монопрепарата Эсциталопрама 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы по сравнению с контролем при р<0.05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+Эсциталопрам с использованием мелатонина в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 2,15 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Эсциталопрам 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг + Эсциталопрам 20 мг. Различия между группами не достигали 10% (время активной попытки животных выбраться из воды было в среднем в 1,4 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий но времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг + Эсциталопрам 20 мг, таим образом, данные комбинации можно считать равноэффективными по антидепрессантной активности.

Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг+Эсциталопрам 20 мг над эффективностью монопрепарата Эсциталопрам 20 мг представлена в таблице 9. Эффективность Эсциталопрама 20 мг принималась за 100%.

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных). Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Эсциталопрам 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 5. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие антидепрессантного действия препарата Сертралин и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в таблице 10.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг) + Сертралин 20 мг и монопрепарата Сертралина 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы по сравнению с контролем при р<0.05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+Сертралин с использованием мелатонипа в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 1,7 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Сертралин 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг+Сертралин 20 мг. Различия между группами не достигали 1% (время активной попытки животных выбраться из воды было в среднем в 1,4 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий по времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг+Сертралин 20 мг, таким образом, данные комбинации можно считать равноэффективными по антидепрессантной активности. Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг+Сертралин 20 мг над эффективностью монопрепарата Сертралин 20 мг представлена в таблице 11. Эффективность Сертралина 20 мг принималась за 100%

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных). Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Сертралин 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 6. В тесте «отчаяния» на основании оценки времени неподвижности мышей при плавании в цилиндре с водой было выявлено наличие антидепрессантного действия препарата Флувоксамин и его комбинации с различными дозами Мелатонина. Результаты представлены в таблице 12.

При превентивном введении комбинаций препаратов Мелатонин (от 1 до 9 мг)+Флувоксамин 20 мг и монопрепарата Флувоксамина 20 мг (в эквитерапевтических для мышей дозировках) статистически значимо проявляется защитное антидепрессантное действие при моделировании подавленности как эмоционально-стрессового состояния организма (отличия статистически значимы по сравнению с контролем при р<0,05).

1. Время активной попытки животных выбраться из воды в случае применения препаратов Мелатонин+флувоксамин с использованием мелатонина в дозировках, эквитерапевтических для человека 3-9 мг, было в среднем в 1,7 раза больше, чем в контроле.

2. Не обнаружено статистически значимых различий между серией животных с монотерапией препаратом Флувоксамин 20 мг и в случае применения комбинации препаратов Мелатонин 1 мг+Флувоксамин 20 мг. Различия между группами не достигали 1% (время активной попытки животных выбраться из воды было в среднем в 1,4 раза больше, чем в контроле).

3. Не было выявлено статистически значимых различий но времени до иммобилизации между группами Мелатонин 3 мг, 6 мг, 9 мг+Флувоксамин 20 мг, таким образом, данные комбинации можно считать равноэффективными по антидепрессантной активности. Превышающая эффективность комбинаций Мелатонин 1, 3, 6, 9 мг+Флувоксамин 20 мг над эффективностью монопрепарата Флувоксамин 20 мг представлена в таблице 13. Эффективность Флувоксамина 20 мг принималась за 100%

Использование в комбинации дозировки мелатонина, эквитерапевтической 9 мг для человека, сопровождалось большим риском возникновения нежелательных явлений (наблюдалась преходящая тахикардия в течение 1 часа после использования комбинации у 10% подопытных животных).

Таким образом, экспериментальные данные показали, что наиболее эффективным суточным терапевтическим соотношением компонентов нового лекарственного средства одной единице твердой лекарственной форме (таблетка, капсула) является:

Флувоксамин 10-30 мг

Мелатонин 3-8 мг

Пример 7. С целью подтверждения и оценки эффективности комбинаций «Мелатонин 3 мг+Флуоксетин 20 мг», «Мелатонин 3 мг+Пароксетин 20 мг», «Мелатонин 3 мг+Циталопрам 20 мг», «Мелатонин 3 мг+Эсциталопрама 20 мг», «Мелатонин 3 мг+Сертралин 20 мг», «Мелатонин 3 мг+Флувоксамин 20 мг» был проведен опыт применения у больных с депрессией и сопутствующей инсомнией/нарушениями сна.

В каждую исследуемую группу были включены по 20 пациентов. В каждой контрольной группе добровольцев (20 человек) назначались мопопрепараты: Флуоксетин, Пароксетин, Циталопрам, Эсциталопрам, Сертралин, Флувоксамин в необходимой суточной дозе, соответствующей тяжести основного заболевания. Другие седативные препараты не назначались дополнительно ни в одной группе пациентов.

Добровольцев наблюдали в течение 3-х недель.

Контроль терапевтического действия комбинированного препарата «Мелатонин+СИОЗС» препарата предусматривал заполнение па каждого пациента в динамике следующих форм:

- Карта оценки текущего психического расстройства.

- Анкета балльной оценки субъективных характеристик сна.

Клиническая оценка выраженности инсомнии до и после лечения комбинированным препаратом «Мелатонин+СИОЗС» и СИОЗС осуществлялась по следующим признакам: «время засыпания», «продолжительность сна», «количество ночных пробуждений», «качество сна», «количество сновидений», «качество утреннего пробуждения», ранжированным от 1 до 5 баллов. Диапазон выраженности инсомнии на момент начала лечения варьировал от 7 до 17 баллов [согласно шкале, чем ниже показатели (в частности ниже 19 баллов), тем более выражены нарушения сна].

Анализ полученных данных показал, что результаты, достигнутые после 3-недельного лечения пациентов с депрессией и сопутствующей инсомнией, достоверно различаются по выраженности инсомнии до и после терапии между каждой группой

Данное наблюдение показало, что при лечении нарушений сна у больных с депрессивными состояния комбинацией «Мелатонин 3 мг+СИОЗС», наблюдалась высокая эффективность препарата (к концу наблюдения - выше 23 баллов по Шкале клинической оценки выраженности инсомнии) при отсутствующих или кратковременных, преходящих, незначительных побочных явлениях.

В контрольной группе пациентов, принимавших только один из СИОЗС при оценке выраженности инсомнии до и после 3-х недельного периода наблюдения различия в каждой группе были статистически незначимы (сравнение групп при помощи теста Уилкоксона, р>0,05).