Результат интеллектуальной деятельности: Способ определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственных средствах

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к способам количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой». Изобретение может быть использовано для контроля качества перечисленных лекарственных средств по показателю качества «Количественное определение».

По данным литературы корневища с корнями валерианы содержат эфирное масло (от 0,5 до 2,4 %), главными компонентами которого являются борнилизовалерианат, борнеол, пинен, терпинеол, сесквитерпеноиды (валереналь, валеренон, валереновая кислота); от 0,8 до 2,5 % валепотриатов (иридоиды: валтрат, изовалтрат, ацевалтрат, дигидровалтрат, валередин, валехлорин и др.); тритерпеновые гликозиды; дубильные вещества; алкалоиды (валерин, хатинин); органические кислоты (валериановая, изовалериановая кислоты) и свободные амины [1].

Фармакологическое действие валерианы обусловлено комплексом действующих веществ, локализованных в корневищах и корнях валерианы. Седативное действие валерианы обусловлено в основном эфирным маслом. Другой группой биологически активных веществ считаются валепотриаты. Валепотриаты являются нестойкими соединениями, в процессе сушки и хранения корневищ они подвергаются ферментативному расщеплению с образованием свободной изовалериановой кислоты и иридоида – балдриналя, придающих сырью специфический запах [1–4].

Для количественной оценки действующих веществ валерианы используется нормирование по индивидуальным веществам, сумме веществ в пересчете на индивидуальное вещество, содержанию эфирных масел или экстрактивных веществ.

Лекарственное растительное сырье и препараты валерианы, а также способы количественной оценки действующих веществ описаны в Государственной фармакопее СССР ХI издания (ГФ ХI), Европейской, Британской, Американской, Японской, Индийской, Украинской и Белорусской фармакопеях.

Аналогом заявляемого изобретения является методика, приведенная в Фармакопейной статье «Валерианы настойка» (ранее ФС 42-3865-99) [5]. Из лекарственного препарата смесью хлороформ-спирт (5:1) экстрагируют сумму сложных эфиров карбоновых кислот. Полученный фильтрат упаривают под вакуумом до сухого остатка. Далее проводят цветную реакцию с гидроксиламином, хлористоводородной кислотой и железа (III) хлоридом. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 512 нм. Недостатками данной методики являются низкие специфичность и селективность, отсутствие четко выраженного максимума поглощения на спектре испытуемого раствора при длине волны 512 нм, оценка по удельному показателю поглощения без использования стандартного образца [5].

Прототипом заявляемого изобретения является способ определения сесквитерпеновых кислот методом ВЭЖХ в пересчете на валереновую кислоту с использованием в качестве стандартного образца валереновой кислоты в лекарственном растительном сырье «Валерианы лекарственной корневища с корнями» [6]. Недостатком прототипа является невозможность использования его для количественного определения действующих веществ в препаратах в лекарственной форме «настойки», лекарственной форме «таблетки, покрытые, пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой», используемой для их приготовления. Лекарственное растительное сырье «Валерианы корневища и корни» представляет собой или цельные корневища и корни, или измельченные кусочки корней и корневищ, или порошок. Для проведения количественного определения действующих веществ в данном лекарственном растительном сырье, действующие вещества необходимо извлечь, для чего в пробоподготовке прототипа предусмотрены стадии взятия навески образца на весах и экстракции при нагревании с обратным холодильником. Настойки – это жидкая лекарственная форма, представляющая собой извлечения из лекарственного растительного сырья. Стадии взятия навески образца и экстракция при нагревании с обратным холодильником из методики пробоподготовки прототипа являются неприменимыми для препаратов в лекарственной форме «настойки». Аналогичным образом в данном случае стадия экстракции при нагревании с обратным холодильником является неприменимой для препаратов в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Задачей изобретения является разработка способа количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Поставленная задача решается благодаря:

- созданию нового способа пробоподготовки для приготовления растворов испытуемого образца заявляемых лекарственных средств, что позволяет проводить в них количественное определение суммы сесквитерпеновых кислот методом ВЭЖХ;

- созданию нового способа пробоподготовки для приготовления рабочих растворов стандартного образца валереновой кислоты так, чтобы их концентрация совпадала с концентрацией растворов испытуемого образца, что позволяет уменьшить погрешность определения;

- использованию исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты длительного хранения, из которого в дальнейшем готовятся рабочие растворы стандартного образца с небольшим сроком годности, что позволяет сократить время пробоподготовки;

- использованию в качестве единого стандартного образца валереновой кислоты для заявляемых лекарственных средств, что позволяет проводить стандартизацию разных лекарственных препаратов и фармацевтической субстанции по одной группе активных веществ.

В заявляемом изобретении способ количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственных средствах реализуется следующим образом.

Пробоподготовка

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты (общее для всех заявляемых лекарственных средств): около 0,005 г (точная навеска) стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают (срок годности раствора 1 мес.).

I. Для лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 5,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: 5,0 мл лекарственного препарата фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

II. Для лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 1,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: около 1 г (точная навеска) лекарственного препарата, предварительно измельченного в ступке, помещают в коническую колбу объемом 25 мл, прибавляют 10 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

III. Для фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 2,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: около 1 г (точная навеска) фармацевтической субстанции помещают в мерную колбу объемом 50 мл, прибавляют 35 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора спиртом этиловым 50 % до метки и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика

Фосфорная кислота концентрированная, раствор 5,0 г/л в воде

Аликвоту фосфорной кислоты концентрированной, взятую по массе или по объему, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят водой для хроматографии до метки и перемешивают. Проводят дегазацию и фильтрацию через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм.

Проверка пригодности хроматографической системы

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются следующие условия:

- значение асимметрии пиков валереновой кислоты на хроматограммах раствора испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты должно быть не более 2,0;

- эффективность колонки по пику валереновой кислоты на хроматограммах раствора испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты должно быть не менее 2000 теоретических тарелок;

- относительное стандартное отклонение площади пика валереновой кислоты на хроматограммах рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты для 6 определений должно быть не более 5,0 %.

Испытание проводят в условиях градиентного элюирования.

Условия хроматографирования:

Время удерживания пика валереновой кислоты – около 13 мин.

Относительное время удерживания пика ацетоксивалереновой кислоты – 0,45.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты, получая не менее 6 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» в процентах (Х) вычисляют по формуле (1):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а _о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

5 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

S_о – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г;

100 – коэффициент, переводящий результат расчета в %.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» в мг/таб (Х) вычисляют по формуле (2):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а _о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

10 – разведение испытуемого раствора;

1 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

G – средняя масса таблетки, г;

1000 – коэффициент пересчета г в мг;

S_о – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

a – навеска испытуемого образца, г;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» в процентах (Х) вычисляют по формуле (3):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а _о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

50 – разведение испытуемого раствора;

2 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

S_о – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

a – навеска испытуемого образца, г;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г;

100 – коэффициент, переводящий результат расчета в %.

Существенные отличительные признаки заявляемого изобретения:

1. Обеспечение возможности применения метода ВЭЖХ для количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту и стандартизации заявляемых лекарственных препаратов и фармацевтической субстанции, для которых раньше он не применялся, за счет создания уникальной пробоподготовки.

2. Сокращение времени пробоподготовки за счет возможности длительного хранения исходного раствора стандартного образца (тем самым минуя стадии взятия навески и разведения), из которого в дальнейшем готовятся рабочие растворы стандартного образца с небольшим сроком годности.

3. Обеспечение возможности сравнения разных лекарственных средств по количественному содержанию суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту за счет использования одной методики для их стандартизации.

4. Уменьшение погрешности определения благодаря одинаковым концентрациям растворов испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца.

Краткое описание чертежей и иных материалов:

Фиг. 1. Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты (для лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки»).

Фиг. 2. Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты (для фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой»).

Фиг. 3. Хроматограмма раствора испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Фиг. 4. Хроматограмма раствора испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Фиг. 5. Хроматограмма раствора испытуемого образца фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

На Фиг. 3–5 сравнение с хроматограммами рабочих растворов стандартного образца валереновой кислоты показывает, что присутствие сопутствующих веществ не влияет на время удерживания пика валереновой кислоты, а также пики ацетоксивалереновой кислоты и валереновой кислоты, учитываемые в расчетах, обладают удовлетворительными показателями асимметрии и разрешения. Следовательно, предлагаемые способы приготовления растворов в предлагаемых условиях хроматографирования являются пригодными для определения суммы сесквитерпеновых кислот в заявляемых лекарственных средствах.

Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами:

Пример 1. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00509 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: 3 раза по 5,0 мл испытуемого образца лекарственного препарата фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты представлена на Фиг. 1.

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 3.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту вычисляют по формуле (1).

Расчеты:

где Х₁, Х₂, Х₃ – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» приведены в Таблице 1.

Таблица 1

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата составило 0,017 % (RSD = 0,20 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Пример 2. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00500 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: три навески (1,01302 г, 1,00900 г, 1,00872 г) испытуемого образца лекарственного препарата, предварительно измельченного в ступке, помещают в три конические колбы объемом 25 мл, прибавляют по 10 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученные растворы охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 4.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в мг/таб (Х) вычисляют по формуле (2).

Расчеты:

где Х₁, Х₂, Х₃ – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» приведены в Таблице 2.

Таблица 2

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата составило 0,021 мг/таб (RSD = 0,58 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Пример 3. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00500 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: три навески (1,01615 г, 1,02956 г, 1,02305 г) испытуемого образца фармацевтической субстанции помещают в три мерные колбы объемом 50 мл, прибавляют по 35 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученные растворы охлаждают до комнатной температуры, доводят объем растворов спиртом этиловым 50 % до метки и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты представлена на Фиг. 2.

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 5.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в процентах (Х) вычисляют по формуле (3).

Расчеты:

где Х₁, Х₂, Х₃ – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» приведены в Таблице 3.

Таблица 3

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции составило 0,224 % (RSD = 0,55 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Представленные примеры не ограничивают объем притязаний настоящего изобретения и служат только для цели иллюстрации.

Список литературы

1. Атлас лекарственных растений России. Быков В.А., ред. ВИЛАР, 2006. 345 с.

2. Талашова С.В. Фармакогностическое изучение, стандартизация и комплексная переработка валерианы лекарственной: автореф. дис. … канд. фарм. наук. М., 1996. 24 с.

3. Коновалова О.А., Рыбалко К.С. Биологически активные вещества подземных органов Valeriana officinalis L.s.l. Растительные ресурсы. 1991. Т. 27. Вып. 1. С. 146–169.

4. Коновалова О.А., Шейченко В.И., Рыбалко К.С. О химическом составе корневищ с корнями Valeriana wolgensis из цикла Valeriana officinalis L. Химия природных соединений. 1991. № 1. С. 141–143.

5. Фармакопейная статья «Валерианы настойка», на 07.05.2020 доступна по адресу:

6. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издания. Фармакопейная статья ФС.2.5.0009.15 «Валерианы лекарственной корневища с корнями» на 07.05.2020 доступна по адресу: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php