Результат интеллектуальной деятельности: Способ профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.

Известен способ профилактики и лечения нодулярного дерматита (Кривонос Р.А., Джаилиди Г.А., Мищенко А.В., Мищенко В.А., Черных О.Ю., Шевкопляс В.Н., Дресвянникова С.Г., Коломиец Д.В., Тихонов С.В. Проблема профилактики и ликвидации очагов нодулярного дерматита крупного рогатого скота // Ветеринария сегодня. - №1(20). - 2017. - С. 38-44.), включающий обработку кожного покрова животных, на котором были выявлены нодулы, препаратом АСД (фракция 3); инъекции всем животным внутримышечно «Бициллин-5» в дозе 10000 ЕД/кг массы тела; витаминизация всех животных препаратом «Тривитамин А, Д, Е», обработку животных инсектицидами и репелентами, а также дезинфекцию помещений, иммунизация вакциной против оспы овец всех животных после снятия карантина.

Недостатком описанного способа является использование антибиотика «Бициллин-5», который может быть обнаружен в готовой продукции - мясе и молоке.

Известен способ профилактики нодулярного дерматита при помощи использования вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак» (Инструкция по ветеринарному применению вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Номер регистрационного удостоверения 12-1-10.17-3883 № ПВР-1-1.9/00012).. Вакцина вызывает формирование иммунного ответа против заразного узелкового дерматита крупного рогатого скота не менее чем у 70% привитого поголовья, через 21 сутки после однократного применения в одной прививной дозе (не менее 4 lg ТЦД₅₀/см³ вируса оспы овец штамм «ВНИИЗЖ») продолжительностью не менее 12 месяцев. При плановой вакцинации для профилактики прививают животных с 3-месячного возраста, телят от не вакцинированных коров возможно прививать с 7 дневного возраста. Ревакцинацию животных проводят каждые 12 месяцев. В неблагополучном пункте и в угрожаемой зоне вакцинируют животных всех возрастных групп не зависимо от сроков предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Молодняк ревакцинируют через 6 месяцев. Взрослых животных ревакцинируют через 12 месяцев. Вакцину вводят подкожно, с соблюдением правил антисептики, в дозе 1 см³.

Недостатком указанного способа является то, что вакцина не обладает лечебными свойствами, что делает невозможным применение ее в очаге инфекции во время массового заболевания животных нодулярным дерматитом.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является «Способ профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота» (Патент на изобретение РФ №2705571 от 08.11.2019, МПК A61K 35/14, А61Р 37/02), включающий применение вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой "ШипПокс-ЛСД вак", при этом дополнительно одновременно с вакциной подкожно или внутримышечно применяют трансфер-фактор в дозе 1,4-1,6 мл на голову для животных до 12-месячного возраста и в дозе 5,9-6,1 мл для животных старше 12 месяцев.

Достоинством данного способа профилактики нодулярного дерматита (заразного узелкового дерматита) является отсутствие реактогенности у вакцины и осложнений после вакцинации в виде сыпей, снижение продуктивности и рецидивов заболевания, а также возможность стимуляции клеточного звена иммунитета за счет использования траснфер-фактора при применении вакцины.

Недостатком прототипа является отсутствие гепатопротекторного эффекта при профилактике нодулярного дерматита у крупного рогатого скота, поскольку печень участвует в формировании полноценного иммунитета при использовании вакцины, проводит обеззараживание и утилизацию продуктов обмена веществ, образующихся при выработке иммунитета у животных.

Целью изобретения является создание гепатопротекторного эффекта при профилактике нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.

Поставленная цель достигается тем, что для профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота животным вводят вирусвакцину против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак», в дозе, согласно инструкции по применению, с одновременным введением с вирусвакциной подкожно или внутримышечно трансфер-фактора в дозе 1,4-1,6 мл на голову для животных до 12 месячного возраста, для животных старше 12 месяцев объем трансфер-фактора составляет 5,9-6,1 мл на голову, и препарата Айсидивит внутримышечно в дозе 5-6 мл для животных до 12 месяцев и 10-15 мл для животных старше 12 месяцев.

Айсидивит в 1 мл в качестве действующих веществ содержит АСД-2Ф субстанцию - 0,04 г, янтарную кислоту - 0,05 г, витамин А (ретинола ацетат) -15000 ЕД, витамин Е (альфа-токоферола ацетат) - 10 мг, а в качестве вспомогательного вещества воду для инъекций - до 1 мл.

Ретинол (витамин А) регулирует функцию и регенерацию эпителиальных тканей, тем самым повышая защитную функцию организма животных.

Токоферол (витамин Е), являясь сильным антиоксидантом, регулирует окислительно-восстановительные процессы, усиливает действие витамина А. Витамин Е в составе препарата выполняет основную гепатопротекторную функцию, повышая прочность клеточной мембраны, защищая ее от воздействия активных форм кислорода.

Янтарная кислота обладает свойством нормализовывать окислительно-восстановительные процессы в организме. В результате применения янтарной кислоты восстанавливается кислотно-щелочной баланс в организме.

АСД 2-Ф субстанция обладает широким спектром биологической активности, повышает активность тканевых и пищеварительных ферментов, обладает антисептическим действием, стимулирует активность ретикуло-эндотелиальной и эндокринной систем, нормализует трофику, ускоряет регенерацию поврежденных тканей, участвует в процессах фосфорилирования и синтеза белков.

Биологически активные вещества, входящие в состав препарата, оказывают активизирующее действие на центральную, вегетативную нервную систему и обменные процессы, обладают антиоксидантными и мембранопротекторными свойствами. Способствуя улучшению всех форм иммунной реактивности, обеспечивают повышение сопротивляемости организма животного к неблагоприятным факторам внешней среды и заболеваниям различной этиологии, стимулируют моторную деятельность желудочно-кишечного тракта, секрецию пищеварительных желез, повышают активность тканевых ферментов, способствуют ускорению роста и развития молодняка и повышению продуктивности сельскохозяйственных животных.

Трансфер-фактор получают по методике, предложенной Г. Фримелем (Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля, Пер. с нем. А.П. Тарасова. - М.: Медицина, 1987. - С. 451-457).

Кровь отбирают в стерильных условиях и разделяют на порции по 20 мл (на каждые 100 мл крови добавляют 500 ME гепарина). Кровь разливают в стерильные пробирки (25×155 мм), добавляют 2 мл раствора декстрана 250 (60 г/л) в 0,15 М NaCl или раствор инфуколла. Пробирки закрывают, несколько раз встряхивают и инкубируют при 37°С. Эритроциты осаждаются в течение 30-45 мин. Желтоватый или слегка красноватый слой надосадочной жидкости переносят при помощи пастеровской пипетки в конические центрифужные пробирки. Закрытые пробирки центрифугируют в течение 10 мин при 1500g. Плазму осторожно сливают. Осевшие лейкоциты образуют слой над осадкой эритроцитов.

Осадок состоит из 70% из лимфоцитов. Самая нижняя часть конуса пробирки заполнена эритроцитами. На слой лейкоцитов наслаивают 0,1 мл стерильного апирогенного 0,15 М раствора NaCl. Кончик пастеровской пипетки осторожно проводят сквозь слой раствора соли и осторожно отсасывают лейкоциты в виде суспензии в изотоническом растворе NaCl. Можно объединять полученные суспензии лейкоцитов. Для получения диализата необходимо полное разрушение лейкоцитов. Оно достигается 10-кратным замораживанием и оттаиванием суспензии. Пробирки с суспензией клеток замораживают смесью сухого льда с этанолом, а размораживают на водяной бане при 37°С. Процесс повторяют до тех пор, пока жидкость не станет вязкой. При полном разрушении лейкоцитов высвобождается ДНК, делающая раствор чрезвычайно вязким и затрудняющая его дальнейшую обработку. Для деполимеризации ДНК в раствор вносят несколько кристаллов ДНКазы и небольшое количество ионов Mg²⁺ (несколько кристаллов MgSO₄). Гидролиз протекает в течение 30 мин при 37°С.

Если ДНКазу, которая отличается чрезвычайной стабильностью, добавлять прямо к суспензии лейкоцитов, то деполимеризация ДНК происходит в процессе замораживания и оттаивания и не требует дополнительной инкубации. Для удаления высокомолекулярных компонентов проводят диализ. Обработанный ДНКазой экстракт лейкоцитов осторожно переносят в завязанный с одного конца диализный мешок, стараясь не испачкать экстрактом наружный слой мешка, после чего его завязывают, ополаскивают стерильным апирогенным изотоническим раствором NaCl и переносят мешок в стерильный сосуд с дистиллированной водой. На 0,1 мл экстракта используют 5 мл дистиллированной воды. Диализ проходит в течение 24 ч при 4°С. Полученный диализат растворяют в стерильной физиологическом растворе, консервированном фенолом до 0,5%-ной концентрации.

Пример выполнения способа профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота:

В неблагополучном пункте телят разделили на 2 группы по 40 голов в каждой - опытную и контрольную. Всех животных привили вирусвакциной против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Вакцину применяли согласно наставлению. Телятам опытной группы дополнительно провели инъекцию трансфер-фактора в дозе 1,5 мл на голову и препарата Айсидивит в дозе 5 мл на голову. При наблюдении за животными в опытной группе заболевания телят нодулярным дерматитом не наблюдалось. В контрольной группе заболело 3 теленка.

Для изучения гепатопротекторного эффекта предлагаемого способа профилактики нодулярного дерматита крупного рогатого скота у животных контрольной и опытной групп до начала опыта и по истечении 5 недель был произведен забор крови для изучения количества холестерина и биллирубина. Результаты отражены в таблице.

Динамика изменения содержания холестерина и биллирубина в сыворотке крови телят

Согласно данным таблицы вакцинация животных против нодулярного дерматита оказывает неблагоприятное воздействие на печень животных. Так, у телят контрольной группы произошло увеличение содержания биллирубина на 39,3%, холестерина на 20,5%. У телят опытной группы также произошло увеличение содержания биллирубина в сыворотке крови, но лишь на 8,4%, а содержание холестерина, напротив снизилось на 5,5%.

Таким образом, применение вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак», трансфер-фактора и препарата Айсидивит позволяет профилактировать нодулярный дерматит у крупного рогатого скота с выраженным гепатопротекторным эффектом.

Экономическая эффективность заявляемого способа на 1 рубль затрат составляет 170 рублей.