×
17.02.2020
220.018.033c

Способ определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к методам определения видовой принадлежности мяса с помощью полимеразной цепной реакции. Выделяют ДНК из ткани птиц семейства дятловых (Picidae). Осуществляют постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК птиц семейства дятловых (Picidae) олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей. Для положительного контрольного образца используют смесь, содержащую фрагменты геномов ДНК ткани птиц семейства дятловых и бактериофага Т4 со следующими нуклеотидными последовательностями: T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3-BHQ1 - зонд. Измеряют накопление флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проводят интерпретацию результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции – отрицательный. Способ позволяет повысить точность идентификации видовой принадлежности, упростить процесс подготовки и уменьшить его стоимость. 5 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к методам определения видовой принадлежности мяса с помощью полимеразной цепной реакции.

Известно использование ПЦР в реальном времени для определения ДНК следующих животных - лошади, коровы, свиньи, осла, птицы, кошки, собаки и кролика (https://stylab.ru/netcat_files/userfiles/Files/Articles/Meat/Meat_1_04_2013.pdf.).

Наиболее близким по технической сущности является способ идентификации видовой принадлежности тканей животного в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах (патент РФ №№2694713, кл. C12Q 1/68, 2019 г. ), включающий выделение ДНК из ткани животного сорбционным методом, постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК животного олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей: JOE/Yellow для специфического сигнала для животного и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца в виде суспензии бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, положительного контрольного образца в виде смеси, содержащую фрагменты геномов животного и бактериофага Т4 с нуклеотидной последовательностью:

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд, взятых в соотношении 1:1 и измерение накопления флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проводение интерпретации результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Недостатком известного технического решения является отсутствие возможности идентифицировать ткани дятла в кормах и продуктах, недостаточная точность из-за использования суспензии бактериофага, которая требует предварительную обработку, включая центрифугирование, концентрирование и перевод в определенный буферный раствор, что влечет за собой значительную трудоемкость и финансовые затраты.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей, повышение точности идентификации видовой принадлежности, упрощение процесса подготовки внутреннего контроля и уменьшение его стоимости.

Технический результат достигается тем, что в способе определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах, включающем выделение ДНК из ткани животного сорбционным методом, постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК животного олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей: для специфического сигнала для животного - JOE/Yellow и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца в виде суспензии бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, положительного контрольного образца в виде смеси, содержащую фрагменты геномов животного и бактериофага Т4 с нуклеотидной последовательностью:

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд, взятых в соотношении 1:1 и измерение накопления флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проведение интерпретации результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный, согласно изобретению выделяют ДНК из ткани птиц семейства дятловых (Picidae) и для внутреннего контрольного образца используют фаголизат бактериофага Т4, а для положительного контрольного образца - фрагменты геномов нативного бактериофага Т4 и ткани дятла (Picidae) со следующей нуклеотидной последовательностью:

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3-BHQ1 - зонд.

Новизна заявляемого способа состоит в идентификации видовой принадлежности ткани птиц семейства дятловых с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, что в свою очередь позволяет с высокой точностью определить наличие их ингредиентов в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в специализированных ветеринарных, санитарно-эпидемиологических, животноводческих, сельскохозяйственных предприятиях, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Способ определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах осуществляется следующим образом.

Для исследования сухих кормов и мясных полуфабрикатов на содержание ДНК ткани дятла проводят полимеразную цепную реакцию с флуоресцентной детекцией с применением термоциклера типа Rotor-Gene Q при соответствующих температурно-временных режимах амплификации и измеряют накопление флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей: JOE/Yellow для специфического сигнала для ДНК ткани дятла (Picidae) и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца. Интерпретацию результатов проводят на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Для повышения точности идентификации ткани дятла для внутреннего контрольного образца используют фаголизат бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, если концентрация фаговых частиц отклоняется в большую или меньшую сторону, то наблюдаются повторности сомнительных образцов. Для положительного контрольного образца используют смесь содержащую фрагменты геномов ДНК ткани птиц семейства дятловых (Picidae) и бактериофага Т4 взятых в соотношении 1:1 со следующими нуклеотидными последовательностями:

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3 -BHQ1 - зонд

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд.

Использование для разных видов контроля различные формы материала бактериофага Т4: фаголизата и фрагмента генома нативного бактериофага Т4 со специфическими к нему праймерами и зондом обусловлено тем, что это позволяет контролировать корректное прохождение реакции в каждой пробирки, а также контролируется этап выделения ДНК из образцов. Кроме того, использование фаголизата бактериофага Т4, представляющего собой суспензию бактериофага, полученную после лизиса зараженных фагом клеток ткани, повышает чувствительность и упрощает процесс идентификации ткани птиц семейства дятловых в продуктах. Использование нативного бактериофага, т.е. неповрежденного при исследовании, улучшает синтез ДНК, что также улучшает качество процесса идентификации.

При конструировании праймеров и зонда основными требованиями были: степень гомологии (комплементарность) с выбранным участком гена; отсутствие самокоплементарных участков внутри олигонуклеотидов и комплементарности друг другу, чтобы не допускать возникновения устойчивых вторичных структур (димеров); близость значений температуры отжига праймеров.

Конструирование специфических праймеров и зонда осуществляли с помощью компьютерных программ на основании анализа нуклеотидных последовательностей референтных штаммов и изолятов, опубликованных на ресурсе GenBank и подбора условий для проведения ПЦР в реальном времени с применением разработанных праймеров и зонда, несущего флуорофор и тушитель, и комплементарного части амплифицируемого со специфическими праймерами фрагмента.

Праймеры, специфичные для ДНК птиц семейства дятловых (Picidae) были отобраны на основе нуклеотидной последовательности фибриногена пестрого (Picoides major isolate PMAJ51755 beta fibrinogen (Bfib) gene, intron 7, Length: 868) на уастке между 50 и 250 нуклеотидами. Код доступа нуклеотидной последовательности в GeneBank NCBI: AF394320.1.

Праймеры были спроектированы с использованием Primer Express Software v3.0 (Applied Biosystems) и исследованы на специфичность с использованием программы BLAST на сервере NCBI. Для детекции продуктов амплификации был подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд Pic Р (комплементарный участку нуклеотидной последовательности, фланкированной позициями для праймеров Pic F и Pic R). На 5'-конец зонда Pic Р добавлен флуоресцентный краситель карбоксифлуоресцеин (FAM).

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3'-BHQ1 - зонд.

Используя программу "Oligo 6.0", описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР. Ни одна из выбранных последовательностей не обнаружена в геномах каких либо животных и птиц (исключая представителей семейства Picidae) и любых видов растений, которые потенциально могут быть использованы при производстве кормов и пищевых продуктов.

В качестве внутреннего контроля использовался бактериофаг Т4, имеющий геномную ДНК порядка 170 тысяч пар нуклеотидов (Enterobacteria phage Т4Т, complete genome GenBank: HM137666.1). В результате анализа был выбран участок между 400 и 600 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Праймеры были спроектированы с использованием Primer Express Software v3.0 (Applied Biosystems) и исследованы на специфичность с использованием программы BLAST на сервере NCBI.

T4F: 5'-TACATATAAATCACGCAAAGC-3' - прямой праймер

T4R: 5'-TAGTATGGCTAATCTTATTGG-3' - обратный праймер

Т4Р: НЕХ-5'-ACATTGGCACTGACCGAGTTC-3'-BHQ1 - зонд

Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд Т4Р, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров T4F и T4R. Зонд был помечен красителем HEX. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример конкретного осуществления способа определения ДНК ткани дятла в сухих кормах и мясных продуктах

Для подтверждения эффективности способа были использованы сухие корма в виде рыбной и мясной муки; сырые и термически обработанные мясные продукты, т.е. мясные полуфабрикаты.

От пробы плотной консистенции отбирают на исследование общую пробу весом 10-50 г. Гранулированную или консервированную продукцию перед исследованием (10-20 г) растирают в ступке до гомогенного состояния.

Лабораторные пробы (20-40 мг) отбирают на исследование в одноразовые микропробирки вместимостью 1,5 мл в двух повторах. Отобранные лабораторные пробы направляют на выделения ДНК.

Исследование проводят с помощью набора реагентов «ПЦР-ДЯТЕЛ-ФАКТОР». Набор состоит из комплекта реагентов для проведения мультиплексной ПЦР (комплект №1) и комплекта контрольных образцов (комплект №2). Набор выпускается в двух вариантах: 1) Для анализа 55 образцов (включая контрольные образцы)

2) Для анализа 110 образцов (включая контрольные образцы).

Наборы используют в соответствии с инструкцией по применению набора реагентов «ПЦР-ДЯТЕЛ-ФАКТОР» для определения ДНК ткани птиц дятлах (Picidae) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в РВ ТУ 21.10.60-163-51062356-2018, для диагностики in vitro, http://www.vetfaktor.ru/.

Состав набора приведен в Таблицах 1 и 2.

Исследования состоит из трех этапов:

• экстракция нуклеиновая кислота (НК);

• проведение реакции ПЦР РВ;

• учет результатов анализа.

Для экстракции (выделение) НК из исследуемых проб отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Во все пробирки с исследуемыми образцами, включая пробирку для отрицательного контрольного образца (ОКО), вносят по 10 мкл внутреннего контрольного образца (ВКО) для ткани птиц семейства дятловых, в качестве которого, используют фаголизат бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл.

Следующий этап это подготовка образцов к проведению ПЦР.

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем ДНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием положительного контрольного образца (ПКО) ДЯТЕЛ, ВКО ДЯТЕЛ и ДНК буфера. В качестве ПКО используют смесь содержащую фрагменты геномов ткани птиц семейства дятловых и нативного бактериофага Т4 взятых в соотношении 1:1.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

5 мкл ПЦР СМЕСЬ ДЯТЕЛ;

10 мкл ПЦР БУФЕР ДЯТЕЛ;

0,5 мкл TAQ POLYMERASE

Перемешивают смесь на вортексе и сбросывают капли кратковременным центрифугированием.

Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации ДНК исследуемых и контрольных проб. Вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.

Помещают подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора и используют программное обеспечение прибора. Далее проводят ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией.

Параметры температурно-временного режима амплификации на приборе «Rotor-Gene Q» представлены в таблице 3.

Интерпретация результатов анализа.

Полученные данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в соответствии с инструкцией производителя к прибору.

Учет результатов ПЦР РВ проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца).

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции ДНК в соответствии с таблицей 4.

Появление любого значения Ct в таблице 4 результатов для отрицательного контроля этапа экстракции ВК- на канале JOE/Yellow и для отрицательного контроля этапа ПЦР К- на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа для всех проб считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Образцы, для которых значение Ct по каналу Cy5/Red отсутствует или превышает 35 цикл (и при этом не получен положительный результат на канале JOE/Yellow) требуют повторного проведения исследования с этапа экстракции ДНК. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов указывает на присутствие ингибиторов в пробе(ах) или на ошибки при экстракции ДНК или при постановке реакции ПНР РВ.

В образце обнаружена ДНК ткани птиц семейства дятловых (Picidae), если наблюдается экспоненциальный рост сигнала на канале JOE/Yellow, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (Табл. 4).

Если для исследуемого образца по каналам JOE/Yellow значение Ct определяется позднее 37 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей, образец исследуется повторно с этапа экстракция ДНК. Если при повторной постановке Ct более 37 результат считается отрицательным.

Образец считается отрицательным ДНК (Picidae) не обнаружена), если не определяется значение Ct (не наблюдается рост специфического сигнала) на канале JOE/Yellow при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (Табл. 4), а значение Ct по каналу Cy5/Red менее 35.

Для исследуемых образцов (сухой корм и мясные полуфабрикаты) предел точности содержания ткани птиц семейства дятловых представлен в таблице 5.

Для доказательства эффективности использования ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени проводился сравнительный анализ чувствительности заявляемого с прототипом, в котором использовался метод ПЦР с использованием внутреннего контроля в виде суспензии бактериофага, а в заявляемом - использовался фаголизат бактериофага и геном нативного бактериофага. Оказалось чувствительность ПЦР при обнаружении примеси ткани птиц семейства дятловых в кормах и в мясных фаршах примерно в 1,5 раза выше. Трудоемкость и стоимость процесса определения ДНК ткани птиц семейства дятловых в кормах и фаршах снизилась на 3-5%.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 51-60 of 465 items.
04.04.2018
№218.016.323d

Способ обнаружения днк вируса африканской чумы свиней методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики африканской чумы свиней (АЧС). Изобретение позволяет повысить точность обнаружения ДНК вируса африканской чумы свиней методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Способ обнаружения ДНК вируса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002645262
Дата охранного документа: 19.02.2018
04.04.2018
№218.016.349f

Способ приготовления хлеба функционального назначения

Изобретение относится к пищевой промышленности, в частности к производству хлебобулочных изделий, предназначенных для профилактического питания. Способ приготовления хлеба функционального назначения включает замес теста из муки пшеничной 1-го сорта, дрожжей прессованных хлебопекарных, соли...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646089
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34b7

Початкоотделяющий модуль кукурузоуборочного комбайна

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Початкоотделяющий модуль кукурузоуборочного комбайна содержит верхнюю, среднюю и нижнюю пары транспортирующих лент, расположенных в одной вертикальной плоскости и выполненных в виде бесконечных контуров. Верхняя и нижняя пары...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646093
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34b9

Линия для получения белкового корма

Изобретение относится к кормовой промышленности. Линия для получения белкового корма, включающая бункер для хранения продукта переработки масличных культур и бункер для его обогащения питательными микроэлементами, экструдер с бункером, мешалку, емкость для хранения корма. Линия содержит...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646092
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34d3

Устройство для обработки гидропонного питательного раствора

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству. Предложено устройство для обработки гидропонного питательного раствора, состоящее из емкости для размещения питательного раствора, с входными трубопроводами и выходным трубопроводом, подающим раствор растениям, с узлом обработки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646091
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34d4

Способ стимулирования корнеобразовательной способности черенков винограда

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Способ предусматривает предпосадочное замачивание черенков в течение 24 часов в воде. После чего осуществляют их замачивание в 0,001%-ном водном растворе Фармайода в течение суток. Обеспечивается увеличение доли укоренившихся черенков, а также...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646094
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34db

Способ создания моносортного яблоневого насаждения

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к садоводству и плодоводству. Способ включает использование сортов-кребов с учетом сроков цветения и эффективности опыления основного сорта сортом-кребом и его посадку в ряду основного сорта. При этом выявляют единые сроки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646046
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.34e2

Влагозащитное парафиновое покрытие плодовых прививок и черенков яблони

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к плодоводству, и химии. Влагозащитное парафиновое покрытие включает парафин, пластификатор, диспергатор и поверхностно-активное вещество. При этом в качестве пластификатора, диспергатора и поверхностно-активного вещества...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646090
Дата охранного документа: 01.03.2018
04.04.2018
№218.016.354a

Способ получения мясосодержащего суфле для диетического питания людей с гастроэнтерологическими заболеваниями

Изобретение относится к мясной и птицеперерабатывающей промышленности, а именно к приготовлению суфле из мяса птицы для диетического питания людей с гастроэнтерологическими заболеваниями. Способ получения мясосодержащего суфле включает измельчение филе куриной грудки, добавление яйца куриного,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002645924
Дата охранного документа: 28.02.2018
04.04.2018
№218.016.356a

Способ сортирования семян подсолнечника

Изобретение относится к области сельского хозяйства. Предложен способ сортирования семян подсолнечника, согласно которому после первичной очистки осуществляют формирование слоя вороха семян подсолнечника с влажностью не более 16% и с толщиной, не превышающей размеры семян подсолнечника в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002645869
Дата охранного документа: 28.02.2018
Showing 51-60 of 199 items.
25.08.2017
№217.015.bd89

Способ получения белково-витаминной кормовой добавки из семян люпина

Изобретение относится к области сельского хозяйства - кормопроизводству, в частности к способу получения белково-витаминной кормовой добавки из семян люпина. Способ получения кормовой добавки включает промывку семян люпина водопроводной водой в течение 4-8 мин. Затем промытые семена замачивают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616408
Дата охранного документа: 14.04.2017
25.08.2017
№217.015.be3d

Способ изготовления биологически активной кормовой добавки

Изобретение относится к области сельского хозяйства, к кормопроизводству, в частности к способу изготовления биологически активной кормовой добавки. Способ включает промывку зерна чины водопроводной водой в течение 4-8 мин. Затем промытое зерно замачивают анолитом с pH 3,0-11,2 ед. и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616832
Дата охранного документа: 18.04.2017
25.08.2017
№217.015.be51

Способ изготовления витаминного зеленого корма

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к кормопроизводству. Способ изготовления витаминного зеленого корма включает промывку зерна чины водопроводной водой в течение 4-8 мин. После чего промытое зерно замачивают анолитом с pH 2,4-7,8 ед. и окислительно-восстановительным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616828
Дата охранного документа: 18.04.2017
25.08.2017
№217.015.be8f

Способ производства витаминной кормовой добавки

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к кормопроизводству. Способ производства витаминной кормовой добавки включает промывку зерна чины водопроводной водой в течение 4-8 мин. После чего промытое зерно замачивают анолитом с pH 3,0-10,5 и окислительно-восстановительным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616826
Дата охранного документа: 18.04.2017
25.08.2017
№217.015.be96

Способ приготовления белковой биологически активной кормовой добавки

Изобретение относится к области сельского хозяйства - кормопроизводству, в частности к способу приготовления белковой биологически активной кормовой добавки. Способ включает промывку семян амаранта водопроводной водой в течение 4-8 мин. Затем промытое зерно замачивают анолитом с pH 3,0-11,2 ед....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616824
Дата охранного документа: 18.04.2017
25.08.2017
№217.015.bedd

Способ изготовления белковой биологически активной кормовой добавки

Изобретение относится к области сельского хозяйства. Предложен способ изготовления белковой биологически активной кормовой добавки, включающий замачивание семян в электроактивированной воде, проращивание и выгон проростков. В качестве исходных семян используют семена сои, промывку которых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616833
Дата охранного документа: 18.04.2017
25.08.2017
№217.015.c2ea

Способ получения белково-витаминной кормовой добавки из семян нута

Изобретение относится к области сельского хозяйства кормопроизводства, в частности к способу получения белково-витаминной кормовой добавки из нута. Способ включает замачивание семян в электроактивированной воде, проращивание и выгон проростков. В качестве исходных семян используют семена нута....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618110
Дата охранного документа: 02.05.2017
25.08.2017
№217.015.c2ff

Способ получения витаминной кормовой добавки из зерна тритикале

Изобретение относится к кормопроизводству, в частности к способу получения витаминной кормовой добавки из тритикале. Способ включает замачивание зерна в электроактивированной воде, проращивание и выгон проростков. В качестве исходного зерна используют зерно тритикале. Промывку зерна тритикале...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618105
Дата охранного документа: 02.05.2017
25.08.2017
№217.015.c300

Способ производства белкового витаминного зеленого корма

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к способу производства белково-витаминного зеленого корма. Способ включает замачивание семян в электроактивированной воде, проращивание и выгон проростков. В качестве исходных семян используют семена нута, промывку семян нута...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618098
Дата охранного документа: 02.05.2017
25.08.2017
№217.015.c304

Способ производства витаминного зеленого корма

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к кормопроизводству. Способ производства витаминного зеленого корма включает промывку зерна овса водопроводной водой в течение 4-8 мин. После чего промытое зерно замачивают анолитом с рН 2,4-7,8 ед. и окислительно-восстановительным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618117
Дата охранного документа: 02.05.2017
+ добавить свой РИД