Способ повышения иммунобиологической реактивности телят при специфической профилактике вирусных респираторных заболеваний

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности ветеринарной микробиологии, вирусологии, эпизоотологии, микологии с микоток-сикологией и иммунологии.

Известно использование иммуномодулятора «Имунофан», который вводят одновременно с вакциной (см. патент РФ №2391999, кл. А61K 38/00, 2010).

Известно использование аминокислотно-витаминного комплекса «Битам» для лечения телят (патент РФ №2478373, кл. А61K 38/00, 2013 г.)

Также известно использование для повышения иммунобиологической реактивности у телят иммуностимулирующего препарата с водным раствором серебра содержащего, не более 8 мг ионов серебра на 100-120 мл кипяченой воды на 30-40 кг массы животного (патент РФ №2609869, кл. А61K 38/00, 2017 г. - прототип).

Недостатком известных технических решений является ограниченное его действие и недостаточно эффективная специфическая профилактика вирусных респираторных заболеваний у телят.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей и повышение эффективности специфической профилактики вирусных респираторных заболеваний.

Технический результат достигается тем, что в способе повышения иммунобиологической реактивности телят при специфической профилактике вирусных респираторных заболеваний, включающем использование иммуномодулирующего препарата и водного раствора серебра содержащего, не более 0,8 мг ионов серебра на 100-120 мл кипяченой воды на 30-40 кг массы животного, согласно изобретению в течение 10 дней животному дают водный раствор серебра в количестве 19-20 мл, затем вводят внутримышечно, трехкратно с интервалом в 24 часа в дозе 0,9-1 мл на одно животное иммуностимулирующий препарат в качестве которого, используют «Имунофан», далее осуществляют внутримышечное введение девятивалентной сыворотки против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3, сальмонеллеза, пастереллеза и кишечной палочки у крупного рогатого скота: в первый день в дозе 49-50 мл на одно животное, повторно в той же дозе через 10 дней и вводят витаминно-аминокислотный комплекс «Витам» внутримышечно в дозе 2,9-3 мл на 10 кг массы животного два раза в сутки, в течение пяти дней, затем через 14 дней, после повторного введения девятивалентной сыворотки и витаминно-аминокислотного комплекса «Витам» двукратно с интервалом в 21 день, телятам подкожно вводят вакцину «Кэтлмастер Голд FP5 L5» в дозе 4,9-5 мл на одно животное.

Новизна заявляемого предложения заключается в том, что телятам для подготовки организма животных к специфической профилактике по соответствующей схеме применения дают с первых дней жизни комплекс следующих препаратов: водный раствор серебра, рабочее название которого «Аргерит-40», «Иммунофан», девятивалентную сыворотку и витаминно-аминокислотный комплекс «Витам», для специфической профилактики - двукратно с интервалом в 21 день применяют подкожно вакцину «Кэтлмастер», что предотвращает возникновение инфекций различного рода и поствакцинальных осложнений.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении патентной и научно-технической литературы в данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Способ повышения иммунобиологической реактивности телят при специфической профилактике вирусных респираторных заболеваний осуществляется следующим образом: телятам с первых дней жизни ежедневно

вовнутрь вводят в течение 10 дней водный раствор серебра, содержащий не более 8 мг ионов серебра на 100-120 мл кипяченой воды на 30-40 кг массы животного, рабочее название «Аргерит-40», в связи с тем, что серебро обладает широким спектром действия, как против бактерий, так и вирусов. Затем после применения Аргерита-40 применяют «Имунофан» (https://health.yandex.ru/pills/imunofan-23498) в дозе 0,9-1 мл внутримышечно трехкратно один раз в сутки. Имунофан способствует повышению иммунитета животных, снижает устойчивость к лекарственным препаратам и антигенную нагрузку на организм животных при вакцинации и поствакцинальные осложнения.

Затем на 10-е сутки вводят внутримышечно девятивалентную сыворотку двукратно с интервалом 10 дней в дозе 49-50 мл и витаминно-аминокислотный комплекс «Битам» (https://pets2.me/bok/277-vitam-instrukciya-po-primeneniyu-v-veterinarii.html) внутримышечно в дозе 2,9-3 мл на 10 кг массы животного два раза в сутки, в течение пяти дней. Битам (витаминно-аминокислотный комплекс) регулирует количество аминокислотного состава, витаминов, макро- и микроэлементов и сахара в крови, нивелирует их дефицит, возникающий при вирусных инфекциях, вакцинациях, нормализует обменные процессы, активирует кроветворение.

Перед применением флаконы с сывороткой тщательно взбалтывают и подогревают на водяной бане до температуры 36-37°С, соблюдая правила асептики и антисептики. Девятивалентная сыворотка способствует формированию пассивного иммунитета к возбудителям инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, сальмонеллеза, пастереллеза и кишечной палочки у крупного рогатого скота, напряженность которого составляет 10 дней. Механизм действия сыворотки основан на связывании и нейтрализации патогенных антигенов специфическими антителами биопрепарата. В 10 мл сыворотки содержится эффективных титров специфических антител к штаммам Pasteurella multocida №8683, №656, №Т-80 - не менее 66%, к штаммам Salmonella typhimurium №371, Salmonella dublin №373 - не менее 80%, к штаммам Escherichia coli №115/2 (О115), 320 (O78:К80) - не менее 70%. Титр специфических антител в сыворотке к штамму Pasteurella haemolitica №169 в РHUА - не менее 1:64, к штаммам Escherichia coli ОП5:К88, 0141:К99, О9:К103:987Р, 0141:F41 - продуцентов адгезивных антигенов: К88, К99, 987Р, F41 в РА - не менее 1:400, к вирусу парагриппа-3 в РТГА - не менее 1:128 и к вирусу инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота - не менее 1:32.

Через 14 дней телятам опытных групп после повторного применения девятивалентной сыворотки, двукратно с интервалом в 21 день применяют подкожно вакцину «Кэтлмастер» (https://www.vidal.ru/veterinar/cattlemaster-gold-fp5-15-28063) в дозе 4,9-5 мл на одно животное. Вакцина способствует формированию иммунного ответа у крупного рогатого скота к возбудителям инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной инфекции и лептоспироза, вызываемого L. canicola, L. grippotyphosa, L. hardjo, L. icterohaemorrhagiae и L. pomona, через три недели после двукратной вакцинации, продолжительностью не менее 12 месяцев.

В одной прививной дозе вакцины содержится аттенуированные штаммы возбудителей: инфекционного ринотрахеита (штамм RLB 106) не менее 10^5.6 ТЦД₅₀, парагриппа-3 (штамм RLB 103) не менее 10^5.6 ТЦД₅₀, респираторно-синцитиальной инфекции (штамм BRSV/375) не менее 10^4.2 ТЦД₅₀ и инактивированные возбудители: вирусной диареи тип 1 и 2 (штаммы 5960 и 53637) и лептоспироза серогрупп: L. canicola, L. grippotyphosa, L. hardjo, L. icterohaemorrhagiae и L. pomona.

Применение комплексной системы профилактики обеспечивает защиту организма от возникновения вирусных респираторных заболеваний, тем самым обеспечивает экономическую выгоду.

Пример конкретного осуществления способа повышения иммунитета телят и профилактики вирусных респираторных заболеваний

Для подтверждения эффективности предлагаемой схемы научно-хозяйственный опыт проводили по сравнительной оценке различных методов и средств повышения иммунобиологической реактивности при специфической профилактике инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 телят, были сформированы три группы животных по 10 голов в каждой: первая - контрольная (интактные), вторая - первая опытная группа, третья - вторая опытная группа.

Кровь брали у 120 из 300 животных из яремной вены в серологические и гематологические моноветы с соблюдением правил асептики и антисептики. Диагноз на инфекционный ринотрахеит и парагрипп-3 устанавливали комплексно на основании эпизоотических данных, клинических признаков, серологических исследований и иммуноконверсии парных проб.

Для повышения иммунобиологической реактивности телятам применяли иммуномодулирующие препараты и комплекс витаминов. Телятам первой опытной группы применяли иммуномодулятор «Риботан» в дозе 0,49-0,5 мл внутримышечно, трехкратно с интервалом три дня, затем внутримышечно вводили девятивалентную сыворотку против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота: в первый день в дозе 49-50 мл на одно животное, повторно через 10 дней в той же дозе и габивит-селен (поливитамин в комбинации с микроэлементом селеном) в дозе 4,9-5 мл внутримышечно на одно животное. Через 14 дней телятам после повторного применения девятивалентной сыворотки и габивит-селена, двукратно с интервалом в 21 день применяли подкожно вакцину «Кэтлмастер» в дозе 4,9-5 мл на одно животное.

Телятам второй опытной группы применяли в течение десяти дней Аргерит-40 (водный раствор серебра, содержащий 0,8 мг ионов серебра) перрорально за 20-25 минут до кормления один раз в сутки утром в течение 10 дней, в дозе 19-20 мл на одно животное, разбавленную со 100-120 мл кипяченой воды. Затем применяли «Иммунофан» в дозе 0,9-1 мл внутримышечно трехкратно один раз в сутки. Затем вводили внутримышечно девятивалентную сыворотку двукратно с интервалом 10 дней в дозе 49-50 мл на одно животное. Перед применением флаконы с сывороткой тщательно взбалтывают и подогревают на водяной бане до температуры 36-37°С, соблюдая правила асептики и антисептики. После повторного введения девятивалентной сыворотки телятам внутримышечно вводили «Битам» (витаминно-аминокислотный комплекс) в дозе 2,9-3 мл на 10 кг массы животного два раза в сутки, в течение пяти дней. Через 14 дней телятам после повторного применения девятивалентной сыворотки и «Витама», двукратно с интервалом в 21 день применяют подкожно вакцину «Кэтлмастер» в дозе 4,9-5 мл на одно животное.

В результате, было установлено, что организм телят первой опытной группы недостаточно был подготовлен для введения девятивалентной сыворотки с лечебно-профилактической целью против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота и даже повторное его введение и габивита-селена не оказали позитивного влияния на гематологические показатели. Тогда как во второй опытной группе последовательное применение высокоэффективных препаратов способствовало регуляции соотношения популяций лейкоцитов, повышению количества эритроцитов и уровня гемоглобина и, следовательно, повышению неспецифического иммунитета телят.

После двукратной вакцинации во второй опытной группе происходило незначительное повышение количества эритроцитов и уровня гемоглобина и, напротив, снижение количества лейкоцитов на 10-15%. Среди популяции лейкоцитов наблюдалось повышение количества сегментоядерных нейтрофилов на 10-22%, за счет снижения количества лимфоцитов на 5-14%), количества палочкоядерных нейтрофилов - в 1,5 раза и моноцитов - в 1,3-3 раза, относительно первой опытной группы.

Применение разработанной системы профилактики способствовало повышению процента активных нейтрофилов (на 7-12%), коэффициента мобилизации и фагоцитарного числа (в 1,2-1,4 раза), переваривающей способности нейтрофилов (на 9-11%), количества Т- и В-клеток (на 3-10%) и снижению количества NK-клеток (в 1,4-1,7 раза), относительно контрольной группы и первой опытной.

Применение телятам второй опытной группы высокоэффективных препаратов иммуномодулятора «Имунофана», водного раствора серебра «Лргерита-40», девятивалентной сыворотки и «Витама», предшествующее вакцинации, способствовало повышению неспецифического иммунитета телят, т.е. адаптогенных свойств организма животных, а также подготовке их к вакцинации. Применение вакцины «Кэтлмастер» против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота способствовало развитию специфического иммунитета.

Кроме того, применение разработанной системы профилактики инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 телят оказало позитивное влияние на гуморальное звено иммунитета, что свидетельствует о повышении бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови (на 3-7%).

В реакции непрямой гемагглютинации при серодиагностике инфекционного ринотрахеита на десятые сутки после первой вакцинации «Кэтлмастер» происходило динамичное повышение титра специфических антител в опытных группах в 3,3 раза и 4,1 раза соответственно, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах повышался на 15% и 11% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 3% и 5% соответственно.

При сравнении с контрольной группой в опытных группах на десятые сутки после первой вакцинации титр специфических антител к возбудителю инфекционного ринотрахеита был ниже в 1,4 раза и 1,2 раза соответственно, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах был ниже в 1,3 раза и 1,2 раза соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 31% и 20% соответственно.

В реакции торможения гемагглютинации при серодиагностике парагриппа-3 на десятые сутки после первой вакцинации «Кэтлмастер» происходило динамичное повышение титра специфических антител в опытных группах в 2,5 раза и 3 раза соответственно, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах повышался на 13% и 11% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 11% и 3% соответственно. При сравнении с контрольной группой в опытных группах на десятые сутки после первой вакцинации титр специфических антител к возбудителю парагриппа-3 был ниже на 23% и 11% соответственно, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах был ниже на 21% и 10% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 23% и 19% соответственно.

В связи с тем, что механизм действия вакцины «Кэтлмастер» направлен на формирование иммунного ответа у крупного рогатого скота не только к возбудителям инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3, но и вирусной диареи и респираторно-синцитиальной инфекции, нами были определены титры антител при проведении профилактических мероприятий.

В реакции непрямой гемагглютинации при серодиагностике респираторно-синцитиальной инфекции на десятые сутки после первой вакцинации «Кэтлмастер» происходило динамичное повышение в 2 раза титра специфических антител в опытных группах, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах незначительно повышался на 8% и 6% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 23% и 18% соответственно. При сравнении с контрольной группой в опытных группах на десятые сутки после первой вакцинации титр специфических антител к возбудителю респираторно-синцитиальной инфекции был ниже на 32% и 19% соответственно, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах был ниже на 31% и 19% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 18% и 7% соответственно.

В реакции непрямой гемагглютинации при серодиагностике вирусной диареи на десятые сутки после первой вакцинации «Кэтлмастер» происходило динамичное повышение титра специфических антител к возбудителю вирусной диареи в опытных группах в 2,4 раза и 3 раза, на десятые сутки после ревакцинации титр специфических антител в опытных группах повышался на 9% и 8% соответственно, на двадцать восьмые сутки - на 6% и 4% соответственно. При сравнении с контрольной группой в опытных группах на десятые сутки после первой вакцинации титр специфических антител к возбудителю вирусной диареи был выше в 1,3 раза и 1,5 раза соответственно, на десятые сутки и на двадцать восьмые после ревакцинации - в 1,4 раза и 1,6 раза соответственно.

Необходимо отметить, что у интактных (контрольные) животных было выявлено повышение титров специфических антител в реакции непрямой гемагглютинации при серодиагностике инфекционного ринотрахеита (от 1:16 до 1:4096), респираторно-синцитиальной инфекции (от 1:16 до 1:512), вирусной диареи (от 1:2 до 1:128), в реакции торможения гемагглютинации при серодиагностике специфических антител к вирусу парагриппа-3 (от 1:16 до 1;2048), что свидетельствовало о вспышке выше перечисленных заболеваний.

В контрольной группе из 100 голов пало 20 голов, в первой опытной группе у одного животного наблюдалась легкая форма острой респираторной вирусной инфекции, признаки которой исчезали в течение пяти суток, во второй опытной группе у телят не наблюдалось признаков заболеваний.

Кроме того, необходимо отметить, что у животных второй опытной группы уровень титра специфических антител был выше, чем в первой опытной группе, что напрямую связано с предварительным использованием высокоэффективных биопрепаратов для обеспечения адаптационно-приспособительных механизмов защиты организма, что позволило подготовить организм к предстоящей вакцинации и предотвратить возникновение инфекций различного рода и поствакцинальные осложнения.

Экономически целесообразно применение биопрепаратов, медикаментов телятам с целью повышения иммунобиологической реактивности и специфического иммунитета против вирусных респираторных заболеваний. Наиболее высокая эффективность достигнута при применении разработанной системы профилактики инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 телят. Окупаемость ветеринарных профилактических мероприятий составила 14,60 рублей на один рубль затрат.