Результат интеллектуальной деятельности: ТИОФЕНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ

Область техники, к которой относится изобретение

В настоящем изобретении раскрыто тиофеновое соединение, применяемое в качестве ингибитора транспортера мочевой кислоты (URAT1), и применение тиофенового соединения для получения фармацевтического продукта для лечения заболевания, связанного с аномальными уровнями содержания мочевой кислоты, конкретно для получения фармацевтического продукта для лечения гиперурикемии и подагрического артрита. Настоящее изобретение конкретно относится к соединению, представленному формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли.

Уровень техники

Мочевая кислота является метаболитом терпеноидов у животных. Что касается людей, мочевая кислота выделяется в организме человека как конечный продукт метаболизма пурина через желудочно-кишечный тракт или в составе мочи из-за отсутствия уриказ, которые продолжают окислительное разрушение мочевой кислоты в организме человека, и при этом почечное выведение является основным путем выведения мочевой кислоты у людей. Верхний предел нормальной концентрации мочевой кислоты в организме человека составляет 400 мкмоль/л (6,8 мг/дл) для мужчин и 360 мкмоль/л (6 мг/дл) для женщин. Аномальные уровни содержания мочевой кислоты в организме человека часто обусловлены повышенным продуцированием мочевой кислоты или пониженным выведением мочевой кислоты. Симптомы, связанные с аномальными уровнями содержания мочевой кислоты, включают гиперурикемию, подагру и т. д.

Гиперурикемия относится к симптому, при котором в организме человека нарушен метаболизм пуриновых веществ, что приводит к повышению продуцирования или понижению выведения мочевой кислоты и аномально высокому уровню содержания мочевой кислоты в крови. Подагрический артрит означает, что если концентрация мочевой кислоты в крови человека составляет более 7 мг/дл, мочевая кислота откладывается в виде мононатриевой соли в суставах, хрящах и почках, что приводит к чрезмерной реакции (чувствительности) иммунной системы организма и вызывает болезненное воспаление. Основными местами поражения являются сустав большого пальца ноги, голеностопный сустав, коленный сустав и т. д. В месте поражения острой подагрой возникает покраснение, опухлость, жар и сильная боль, что обычно происходит ночью и может заставлять людей просыпаться. На ранней стадии подагры более распространенным является поражение суставов нижних конечностей. Гиперурикемия является основной патологической причиной подагрического артрита, и применение лекарственных средств для понижения концентрации мочевой кислоты в крови является одним из распространенных способов предупреждения подагрического артрита.

В Европе и США растет число случаев поражения гиперурикемией и подагрой. Эпидемиологические исследования показали, что частота возникновения подагрического артрита составляет 1-2% от всего населения, и он является основным типом артрита у взрослых мужчин. По оценкам Bloomberg News в 2021 г. количество больных подагрой будет составлять 17,7 миллионов. В Китае исследование показывает, что 25,3% населения имеет высокую концентрацию мочевой кислоты в крови и 0,36% населения возрастной группы от 20 до 74 страдает подагрой. В настоящее время лекарственные средства для клинического лечения главным образом включают: 1) лекарственные средства, действие которых основывается на ингибировании продуцирования мочевой кислоты, такие как ингибиторы ксантиноксидазы аллопуринол и фебуксостат; 2) лекарственные средства, действие которых основывается на стимуляции выведения мочевой кислоты, такие как пробенецид и бензбромарон; 3) ингибиторы воспаления, такие как колхицин и т. д. Лечение с применением этих препаратов характеризуется определенными недостатками, в том числе низкой эффективностью, сильными побочными эффектами и высокой стоимостью, которые являются некоторыми из основных ограничивающих факторов для их клинического применения. По сообщениям уровни содержания мочевой кислоты в крови 40%-70% пациентов, которые получали стандартное лечение, не соответствовали ожидаемым терапевтическим целям (<6 мг/дл).

Что касается средства, способствующего выведению мочевой кислоты, механизм его действия состоит в уменьшении реабсорбции мочевой кислоты путем ингибирования транспортера URAT1 на мембране щеточной каймы проксимального извитого канальца. Мочевая кислота в организме является метаболитом пурина, который в основном отфильтровывается клубочком в исходной форме, реабсорбируется и повторно секретируется почечными канальцами, и, наконец, выводится в мочу; очень небольшая часть может секретироваться в энтероцель клетками брыжейки. Сегмент S1 проксимального извитого канальца является местом реабсорбции мочевой кислоты, и 98%-100% отфильтрованной мочевой кислоты попадает в эпителиальную клетку посредством транспортера мочевой кислоты URAT1 и транспортера органических анионов OAT4 в мембране щеточной каймы эпителиальных клеток канальцев. Мочевая кислота, поступающая в эпителиальные клетки, реабсорбируется в капилляры вокруг канальцев через почечную канальцевую базолатеральную мембрану. Сегмент S2 проксимального извитого канальца является местом повторной секреции мочевой кислоты, и секретируемое количество составляет приблизительно 50% от количества, образующегося при клубочковой фильтрации. Мочевая кислота в межклеточном пространстве почек сначала поступает в эпителиальные клетки через анионные транспортеры OAT1 и OAT3 на базолатеральной мембране канальцевых эпителиальных клеток. Мочевая кислота, поступающая в эпителиальные клетки, проходит через другой анионный транспортер MRP4 на мембране щеточной каймы и выделяется в небольшую полость. Сегмент S3 проксимального извитого канальца может быть местом реабсорбции после секреции мочевой кислоты, причем количество при реабсорбции составляет приблизительно 40% от количества, образующегося при клубочковой фильтрации и, аналогично первой стадии реабсорбции, URAT1 может являться основным транспортером при реабсорбции. Следовательно, если в значительной степени ингибировать уратный транспортер URAT1, это будет способствовать выведению мочевой кислоты в организме, тем самым снижая уровень содержания мочевой кислоты в крови и уменьшая возможность приступа подагры.

Первый ингибитор URAT1 зурампик (лезинурад) был одобрен FDA в декабре 2015 г. Была одобрена доза 200 мг в комбинации с ингибитором ксантиноксидазы XOI (таким как фебуксостат и т. д.) для лечения гиперурикемии и подагрического артрита, однако аддитивный эффект комбинации был не очень значительным по сравнению с ингибитором ксантиноксидазы отдельно. Доза зурампика 400 мг не была одобрена из-за значительных токсичных побочных эффектов при высоких дозах (частота возникновения побочных явлений, связанных с почками, в частности частота возникновения почечных камней). Следовательно, FDA потребовало чтобы на этикетке зурампика расположили предупреждение в черной рамке для предупреждения медицинского персонала о том, что зурампик может вызывать острую почечную недостаточность, особенно когда его применяют не в комбинации с XOI, а в случае применения дозы зурампика выше одобренной риск почечной недостаточности даже выше. В то же время FDA попросил AstraZeneca продолжать оценку его безопасности для почек и сердечно-сосудистой системы после выпуска зурампика на рынок. Поэтому существует высокий спрос на разработку нового и безопасного лекарственного средства для снижения содержания мочевой кислоты в крови.

В настоящем изобретении представлен синтез класса тиофеновых соединений, стимулирующих выведение мочевой кислоты, в качестве ингибиторов уратных транспортеров (URAT1) и их применение при нарушениях, связанных с уровнями содержания мочевой кислоты, в частности при гиперурикемии и подагрическом артрите.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение предусматривает соединение, представленное формулой (I), его фармацевтически приемлемую соль и таутомер,

,

где

T выбран из N или CH;

R₁ выбран из H или выбран из группы, состоящей из C_1-6алкила и C_1-6гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

каждый из R₂, R₃ независимо выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или независимо выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6гетероалкила, фенила и 5-6-членного гетероарила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

или R₂ и R₃ соединены между собой с образованием C_3-6циклоалкила или 3-6-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

R₄ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

R₅ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂ или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

R₆ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂ или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

или R₅ и R₆ соединены между собой с образованием C_3-6циклоалкила или 3-6-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

L выбран из одинарной связи, -C(=O)O-, -C(=O)NH-;

L₁ выбран из одинарной связи, -NH-;

R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из группы, состоящей из C_1-6алкила, C_1-6гетероалкила, C_3-6циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, фенила и 5-6-членного гетероарила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

или R₆ и R₇ соединены между собой с образованием C_3-6циклоалкила, C_3-6гетероциклоалкила, фенила и 5-6-членного гетероарила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R;

R выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, C(=O)NH₂ или выбран из группы, состоящей из C_1-6алкила, C_1-6гетероалкила, C_3-6циклоалкила и 3-6-членного гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R’;

R’ выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, Me, Et, CF₃, CHF₂, CH₂F, NHCH₃, N(CH₃)₂;

«гетеро» относится к гетероатому или гетероатомной группе, которая выбрана из группы, состоящей из -C(=O)NH-, -NH-, -C(=NH)-, -S(=O)₂NH-, -S(=O)NH-, -O-, -S-, =O, =S, -O-N=, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O)-, -S(=O)₂- и -NHC(=O)NH-;

в любом из вышеуказанных случаев количество гетероатомов или содержащих гетероатом групп независимо выбрано из 1, 2 или 3 соответственно.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, C(=O)NH₂ или выбран из C_1-4алкила, N,N’-ди(C_1-2алкил)амино, C_1-3алкил-NH-, C_1-3алкил-O-, C_1-3алкил-S(=O)₂-, C_1-3алкил-S(=O)-, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R’.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, C(=O)NH₂, Me, CF₃, Et, NH(CH₃), N(CH₃)₂, , , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фрагмент выбран из или .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₁ выбран из H или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₁ выбран из H, Me, Et.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый из R₂, R₃ независимо выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или независимо выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила, C_1-3гетероалкила и фенила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый из R₂, R₃ независимо выбран из H, Me, Et, , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₂ и R₃ соединены между собой с образованием C_4-5циклоалкила, который необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₂ и R₃ соединены между собой и фрагмент выбран из , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₅ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, Me, Et.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, Me, Et.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₅ и R₆ соединены между собой и фрагмент выбран из , , , , , , , , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены и фрагмент выбран из .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила, C(=O)OC_1-3алкила, C(=O)N(C_1-3алкил)C_1-3алкила, C_3-6циклоалкила, фенила, пиразолила, имидазолила, тиазолила, оксазолила, изоксазолила, изотиазолила, пиридила и пиримидила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из , , , , , каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фрагмент -L-R₇ выбран из H, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , .

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₄ выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, Me, Et, н-пропила, изопропила, CF₃, CHF₂, CH₂F, NHCH₃, N(CH₃)₂.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, C(=O)NH₂ или выбран из C_1-4алкила, N,N’-ди(C_1-2алкил)амино, C_1-3алкил-NH-, C_1-3алкил-O-, C_1-3алкил-S(=O)₂-, C_1-3алкил-S(=O)-, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R’, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, C(=O)NH₂, Me, CF₃, Et, NH(CH₃), N(CH₃)₂, , , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фрагмент выбран из или , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₁ выбран из H или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₁ выбран из H, Me, Et, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый из R₂ и R₃ независимо выбраны из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или независимо выбраны из группы, состоящей из C_1-3алкила, C_1-3гетероалкила и фенила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый из R₂ и R₃ независимо выбран из H, Me, Et, , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₂ и R₃ соединены между собой с образованием C_4-5циклоалкила, который необязательно замещен 1, 2 или 3 R, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₂ и R₃ соединены между собой и фрагмент выбран из , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₅ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, Me, Et, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, Me, Et, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₅ и R₆ соединены между собой и фрагмент выбран из , , , , , , , , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₆ и R₇ соединены между собой и фрагмент выбран из , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из группы, состоящей из C_1-3алкила, C(=O)OC_1-3алкила, C(=O)N(C_1-3алкил)C_1-3алкила, C_3-6циклоалкила, фенила, пиразолила, имидазолила, тиазолила, оксазолила, изоксазолила, изотиазолила, пиридила и пиримидила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH или выбран из , , , , , каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 R, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₇ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фрагмент -L-R₇ выбран из H, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R₄ выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH₂, COOH, Me, Et, н-пропила, изопропила, CF₃, CHF₂, CH₂F, NHCH₃, N(CH₃)₂, а другие переменные определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения соединение, его фармацевтически приемлемая соль и таутомер выбраны из

, , , , , ,

где

n выбран из 0, 1, 2 или 3;

R₆’ выбран из H, F, Cl, Br, I, OH, NH₂, Me, Et, н-пропила, изопропила, CF₃, CHF₂, CH₂F, NHCH₃, N(CH₃)₂;

R₁, R₂, R₃, R₄, R₇, T, L, L₁ определены выше.

Настоящее изобретение также предусматривает другие варианты осуществления, которые получают произвольным комбинированием вышеуказанных переменных.

Соединение по настоящему изобретению выбрано из группы, состоящей из

, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .

Определения и объяснения

Если не указано иное, термины и выражения, применяемые в данном документе, имеют значения, определенные в нем. Определенные термины или выражения без конкретного определения не следует считать неопределенными или неясными, а следует понимать в соответствии с их обычными значениями. Торговые наименования, применяемые в данном документе, относятся к соответствующим товарам или к их эффективным компонентам. Термин «фармацевтически приемлемый», применяемый в данном документе, относится к таким соединениям, материалам, композициям и/или дозировкам, которые применяют в контакте с тканями человека и животного без чрезмерной токсичности, раздражения, анафилаксии или других проблем или осложнений и подобраны в соответствии с разумным соотношением пользы и риска в рамках обоснованной медицинской оценки.

Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли соединений по данному изобретению, которые получают из соединений с определенными заместителями и относительно нетоксичных кислот или оснований. Если соединения содержат относительно кислую функциональную группу, соли присоединения оснований получают с помощью приведения в контакт достаточного количества оснований с такими соединениями в нейтральной форме в чистых растворах или подходящих инертных растворителях. Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания включают соли натрия, калия, кальция, аммония или магния или аналогичные соли. Если соединения содержат относительно основную функциональную группу, соли присоединения кислот получают с помощью приведения в контакт достаточного количества кислоты с такими соединениями в нейтральной форме в чистых растворах или подходящих инертных растворителях. Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты включают соли неорганических кислот, при этом указанные неорганические кислоты включают хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, азотную кислоту, угольную кислоту, бикарбонатный радикал, фосфорную кислоту, моногидрофосфат, дигидрофосфат, серную кислоту, бисульфат, йодистоводородную кислоту, фосфористую кислоту и т. д.; и органических кислот, при этом указанные органические кислоты включают уксусную кислоту, пропионовую кислоту, изомасляную кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, бензойную кислоту, янтарную кислоту, октандиовую кислоту, фумаровую кислоту, лактат, миндальную кислоту, ализариновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, п-метилбензолсульфоновую кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, метансульфоновую кислоту и т. д.; также включают соли аминокислот (например аргинина) и соли органических кислот, например глюкуроновой кислоты и т. д. (см. Berge et al., “Pharmaceutical Salts”, Journal of pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Определенные соединения, содержащие основную и кислотную функциональные группы согласно данному изобретению, могут быть превращены в любую из солей присоединения оснований или кислот.

Предпочтительно соль приводят в контакт с основанием или кислотой обычным способом и затем исходные соединения отделяют с восстановлением нейтральной формы соединений. Отличиями между исходными формами и различными солевыми формами соединений являются определенные физические свойства, такие как разная растворимость в полярных растворителях.

Термин «фармацевтически приемлемые соли», применяемый в данном документе, относится к производным соединений по данному изобретению, в том числе к исходным соединениям, модифицированным посредством образования соли с кислотами или основаниями. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают без ограничения соли с основаниями, такие как соли неорганических кислот или соли органических кислот с аминами, кислотные радикалы, такие как соли щелочных металлов или органические соли карбоновых кислот и т. д. Фармацевтически приемлемые соли включают обычные нетоксичные соли или соли четвертичного аммония и исходных соединений, такие как нетоксичные соли, образованные из неорганических или органических кислот. Обычные нетоксичные соли включают без ограничения такие соли, которые получены из неорганических или органических кислот, и вышеупомянутые неорганические или органические кислоты выбраны из 2-ацетоксибензойной кислоты, 2-гидроксилэтансульфоновой кислоты, уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, бензойной кислоты, бикарбонатного радикала, угольной кислоты, лимонной кислоты, эдетовой кислоты, этандисульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, фумаровой кислоты, глюкогептоновой кислоты, глюконовой кислоты, глутаминовой кислоты, гликолевой кислоты, бромистоводородной кислоты, хлористоводородной кислоты, йодгидрата, гидроксила, гидроксинафталина, гидроксиэтилсульфоновой кислоты, молочной кислоты, лактозы, додецилсульфоновой кислоты, малеиновой кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, метансульфоновой кислоты, азотной кислоты, щавелевой кислоты, памовой кислоты, пантотеновой кислоты, фенилуксусной кислоты, фосфорной кислоты, альдегида полигалактозы, пропионовой кислоты, салициловой кислоты, стеариновой кислоты, акриловой кислоты, янтарной кислоты, сульфаминовой кислоты, сульфаниловой кислоты, серной кислоты, танина, винной кислоты и п-метилбензолсульфоновой кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли по данному изобретению можно синтезировать посредством традиционных химических способов с помощью исходных соединений, содержащих кислотный радикал или основный радикал. В целом, способы получения таких солей заключаются в том, что в воде или органических растворителях или в смеси воды и органических растворителей, диссоциированные кислотные или основные формы таких соединений вступают в реакцию со стехиометрическим количеством подходящих кислот или оснований с получением солей. В целом, предпочтительными являются простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил и подобные неводные среды.

Помимо форм солей, соединения, представленные в данном изобретении, также находятся в форме пролекарств. Пролекарства на основе соединений, описанных в данном документе, легко превращают в соединения по данному изобретению посредством химической реакции в физиологических условиях. Кроме того, пролекарства можно легко превращать в соединения по данному изобретению посредством химических или биохимических способов в среде in vivo.

Определенные соединения по данному изобретению могут находиться в несольватированной и сольватированной формах, в том числе в гидратных формах. В целом, сольватированные формы эквиваленты несольватированным формам, которые включены в объем данного изобретения.

Определенные соединения согласно данному изобретению могут содержать асимметричный углерод (оптический центр) или двойную связь. Рацемические смеси, диастереоизомеры, геометрические изомеры и отдельные изомеры включены в объем данного изобретения.

Графическое представление для рацематов, амбискалемических и скалемических или энантиомерно чистых соединений приведен из Maehr, J.Chem.Ed.1985, 62: 114-120. 1985,62: 114-120. Если не указано иное, клиновидное обозначение и пунктирное обозначение указывают на абсолютную конфигурацию стереоцентра. Если вышеупомянутые соединения в данном документе содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, если не указано иное, они включают геометрические E-, Z-изомеры. Подобным образом, все таутомерные формы включены в объем данного изобретения.

Соединения по данному изобретению могут находиться в конкретных геометрических или стереоизомерных формах. В данном изобретении рассматриваются все такие соединения, которые включают цис- и транс-изомеры, (-)- и (+)-энантиомеры, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереомеры, (D)-изомеры, (L)-изомеры, их рацемические смеси и другие смеси, такие как энантиомерно и диастериомерно обогащенная смесь, и все такие смеси включены в объем данного изобретения. Заместители, такие как алкил, могут содержать другой асимметричный углерод. И все такие изомеры и их смесь включены в данное изобретение.

Оптически активные (R)- и (S)-энантиомеры и (D)- и (L)-изомеры можно получать посредством хирального синтеза, или с помощью хиральных реагентов, или других традиционных методик. Если такие энантиомеры необходимы в данном изобретении, они могут быть получены посредством асимметричного синтеза или дериватизации с помощью хирального вспомогательного вещества, при которой полученные смеси диастереомеров разделяют и затем вспомогательные группы отщепляют с получением необходимых чистых энантиомеров. Или, когда соединения содержат основные группы (такие как амино) или кислотные группы (такие как карбоксил), они образуют соли диастереомеров с подходящими оптически активными кислотами или основаниями, которые разделяют посредством традиционных способов, известных в данной области техники, с получением чистых энантиомеров. Кроме того, разделение энантиомеров и диастереомеров осуществляют посредством хроматографии, и в вышеупомянутой хроматографии применяют хиральные неподвижные фазы, и ее необязательно объединяют с химической дериватизацией (такой как образование карбамата из амина).

Соединения по данному изобретению могут содержать не встречающиеся в природе соотношения атомных изотопов в одном или нескольких атомах, образующих соединения. Например, соединения могут быть мечеными радиоактивными изотопами, такими как тритий (³H), йод-125 (¹²⁵I) или углерод-14 (¹⁴C). Все изменения изотопного состава соединений по данному изобретению, независимо от того, являются они радиоактивными или нет, включены в объем данного изобретения.

Термин «фармацевтически приемлемый носитель» означает любой препарат или любую поддерживаемую среду, которые могут осуществлять доставку эффективного количества активного вещества по данному изобретению, которые не препятствует биологической активности активного вещества и являются нетоксичными для реципиентов или пациентов, и при этом иллюстративные примеры носителей включают воду, масло, растительное и минеральное масла, основу для крема, основу для лосьона, основу для мази и т. д. Такие основы включают суспендирующее средство, вещество для повышения клейкости и вещество, способствующее проникновению, и т. д. Их получение известно специалистам в областях косметических препаратов и лекарственных средств для местного применения.

Термин «наполнитель» обычно означает носитель, разбавитель и/или среду, которые необходимы для получения эффективных фармацевтических композиций.

В отношении лекарственного препарата или фармакологически активного вещества термин «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» означает достаточное количество лекарственного препарата или средства, с помощью которого можно получать необходимый эффект, и которые не являются токсичными. Для препарата для перорального применения по данному изобретению «эффективное количество» такого активного вещества в композициях означает количество, необходимое для получения необходимого эффекта при использовании с другим активным веществом в композициях. Эффективное количество изменяется в зависимости от каждого индивидуума, и зависит от возраста реципиентов и их общего состояния, а также конкретных активных веществ. В конкретных случаях подходящее эффективное количество может определяться специалистами в данной области техники в соответствии со стандартными тестами.

Термин «активный компонент», «терапевтические средства», «активное вещество» или «активное средство» означают такие химические соединения, с помощью которых осуществляют лечение целевых нарушений, заболеваний или симптомов.

Термин «замещенный», применяемый в данном документе, означает, что любые один или более атомов водорода при конкретном атоме заменены выбранным вариантом из указанной группы, включающей атом дейтерия «D», вариант водорода, при условии, что нормальная валентность указанного атома не превышена, и что замещение приводит к получению устойчивого соединения. Если заместитель представляет собой кетогруппу (т. е. =O), то заменяются два водорода при атоме. Заместители, представляющие собой кетогруппу, не присутствуют на ароматических фрагментах. Термин «необязательно замещенный», применяемый в данном документе, означает, что указанный атом может быть замещен или не замещен заместителями, и, если не указано иное, виды и количество заместителей не определены, при условии, что их можно получить с помощью химических способов.

Если какая-либо переменная (например R) встречается более одного раза в любой из составных частей или формуле соединения, ее определение в каждом случае является независимым от ее определения в каждом другом случае. Таким образом, например, если показано, что группа замещена 0-2 R, то указанная группа необязательно может быть замещена не более чем двумя группами R, и при этом R в каждом случае выбирают независимо от определения R. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных являются допустимыми, только если такие комбинации приводят к получению устойчивых соединений.

Если количество связывающих групп равно нулю, например, -(CRR)₀-, то данная связывающая группа представляет собой одинарную связь.

Если одна из переменных выбрана из одинарной связи, то две группы, связанные с помощью данной переменной, связаны непосредственно, например если «L» в «A-L-Z» представляет собой одинарную связь, данная формула фактически представляет собой «A-Z».

Если заместитель не указан, то данный заместитель отсутствует, например, если «X» в «A-X» не указан, данная формула фактически представляет собой «A».

Если показано, что связь с заместителем пересекает связь, соединяющую более чем один атом на кольце, то такой заместитель может быть связан с любым атомом на кольце. Например, структурные единицы или означают, что циклогексил или циклогексадиен может быть замещен по любому положению. Если заместитель указан без указания атома, посредством которого такой заместитель связывается с остальной частью соединения данной формулы, то такой заместитель может быть связан посредством любого атома в данном заместителе. Например, пиридил может быть присоединен к замещаемой группе в качестве заместителя посредством любого атома углерода на пиридиле. Если связанная группа указана без указания направления соединения, направление соединения является любым. Например, соединяющая связь L в представляет собой -M-W-, тогда -M-W- можно рассматривать как , связанную с кольцом A и кольцом B, которая читается слева направо, или -M-W- можно рассматривать как , связанную с кольцом A и кольцом B, которая читается справа налево. Комбинации заместителей и/или переменных являются допустимыми, только если такие комбинации приводят к получению устойчивых соединений.

Термин «гетеро» означает, если не указано иное, «гетероатом» или «гетерорадикал» (то есть радикал, содержащий гетероатом), которые включают атомы, отличные от атомов углерода (C) и водорода (H), включая также радикалы, содержащие такие вышеупомянутые гетероатомы. Примеры включают кислород (O), азот (N), серу (S), кремний (Si), германий (Ge), алюминий (Al) и бор (B), также включают необязательно замещенные –C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)₂N(H)- или –S(=O)N(H)-.

Термин «кольцо», применяемый в данном документе, означает замещенный или незамещенный циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, циклоалкинил, гетероциклоалкинил, арил или гетероарил. Кольцо включает моно-, би-, спиро-, конденсированные кольцевые фрагменты и кольцевые фрагменты с мостиковой связью. Число атомов в кольце как правило определяется числом членов в кольце. Например, выражение «5-7-членное кольцо» означает, что в кольцо содержит 5-7 атомов. Если не указано иное, кольцо необязательно включает от одного до трех гетероатомов. Таким образом, термин «5-7-членное кольцо» включает, например, фенил, пиридинил и пиперидинил. Термин «5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо», с другой стороны, будет включать пиридинил и пиперидинил, но не фенил. Термин «кольцо» дополнительно включает кольцевую систему, содержащую более одного «кольца», где каждое «кольцо» независимо определено выше.

Предполагается, что применяемый в данном документе термин «гетероцикл» или «гетероциклическая группа» означает устойчивое моноциклическое, бициклическое или трициклическое кольцо, содержащее гетероатом или гетерорадикал, которое является насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным (ароматическим), и которое состоит из атомов углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатомов в кольце, независимо выбранных из группы, состоящей из N, O и S, и включая при этом любые бициклические группы, в которых любые определенные выше гетероциклические кольца конденсированы с бензольным кольцом. Гетероатомы, представляющие собой азот и серу, необязательно могут быть окислены (т. е. NO и S (O)p, p равняется 1 или 2). Атом азота может быть замещенным или незамещенным (т. е. N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, если определено). Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к боковой группе при любом гетероатоме или атоме углерода, что приводит к получению устойчивой структуры. Гетероциклические кольца, описанные в данном документе, могут быть замещены по атому углерода или по атому азота, если полученное соединение является устойчивым. Азот в гетероцикле необязательно может быть кватернизирован. Является предпочтительным, что если общее количество атомов S и O в гетероцикле превышает 1, то такие гетероатомы не расположены рядом с друг другом. Применяемый в данном документе термин «ароматическая гетероциклическая группа» или «гетероарил» обычно означает устойчивое 5-, 6- или 7-членное моноциклическое или бициклическое, или 7-, 8-, 9- или 10-членное бициклическое гетероциклическое ароматическое кольцо, которое состоит из атомов углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, состоящей из N, O и S. Атом азота может быть замещенным или незамещенным (т. е. N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, если определено). Гетероатомы, представляющие собой азот и серу, необязательно могут быть окислены (т. е. NO и S (O)p, p равняется 1 или 2). Следует отметить, что общее количество атомов S и O в ароматическом гетероцикле составляет не более 1. Кольца с мостиковой связью также включены в определение гетероцикла. Кольцо с мостиковой связью образуется, когда один или более атомов (т. е, C, O, N или S) соединяют два несмежных атома углерода или азота. Предпочтительные мостиковые связи включают без ограничения один атом углерода, два атома углерода, один атом азота, два атома азота и группу углерод-азот. Следует отметить, что мостиковая связь всегда обеспечивает превращение моноциклического кольца в трициклическое кольцо. Если кольцо содержит мостиковую связь, заместители, перечисленные для кольца, также могут находиться при мостиковой связи.

Примеры гетероциклов включают без ограничения акридинил, азоцинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензотиофуранил, бензотиофенил, бензоксазолил, бензоксазолинил, бензтиазолил, бензтриазолил, бензтетразолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолинил, карбазолил, 4aH-карбазолил, карболинил, дигидробензофуран, хроменил, декагидрохинолинил, 2H,6H-1,5-2-дитиазинил, дигидрофуро[2,3-b]тетрагидрофуран, фуранил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, 1H-индазолил, индоленил, индолинил, индолизинил, индолил, 3H-индолил, изобензофуранил, изоиндолинил, изоиндолил, изохинолинил, изотиазолил, изоксазолил, метилендиоксифенил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, гидроксиндолил, пиримидинил, фенантридинил, фенантролинил, феназинил, фенотиазинил, бензодиазепинил, фенолоксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, пиперидонил, 4-пиперидонил, пиперонил, птеридинил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиродазинил, пиразолил, пиридазинил, пиридооксазол, пиридоимидазол, пиридотиазол, пиридинил, пирролидинил, пирролинил, 2H-пирролил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, 4H-хинолизинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетразолил, 6H-1,2,5-тиадиазинил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, тиантренил, тиазолил, изотиазолилтиофенил, тиенооксазолил, тиенотиазолил, тиеноимидазол, тиенил, триазинил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,5-триазолил, 1,3,4-триазолил и ксантенил. Также включены конденсированные кольцевые и спиросоединения.

Термин «гидрокарбил» или его производное понятие (такое как алкил, алкенил, алкинил и фенил и т. д.), сами по себе или в качестве части другого заместителя, означает, если не указано иное, прямую или разветвленную цепь или циклический углеводородный радикал или их комбинацию, причем таковые могут быть полностью насыщенными (как например алкил), моно- или полиненасыщенными (как например алкенил, алкинил, фенил), могут быть монозамещенными, двузамещенными или полизамещенными, и могут быть одновалентными (как например метил), двухвалентными (как например метилен) или многовалентными (как например метин), могут включать двухвалентные или многовалентные радикалы, и имеют указанное число атомов углерода (например C₁-C₁₂ означает содержание от 1 до 12 атомов углерода, C₁-C₁₂ выбирают из группы, состоящей из C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, C₆, C₇, C₈, C₉, C₁₀, C₁₁ и C₁₂; C_3-12 выбирают из группы, состоящей из C₃, C₄, C₅, C₆, C₇, C₈, C₉, C₁₀, C₁₁ и C₁₂). «Гидрокарбил» включает без ограничения алифатический гидрокарбил и ароматический гидрокарбил, и алифатический гидрокарбил включает линейный и циклический гидрокарбилы, конкретно включающий без ограничения алкил, алкенил и алкинил, и при этом ароматический гидрокарбил включает без ограничения 6-12-членный ароматический гидрокарбил, например бензол и нафталин. В некоторых вариантах осуществления термин «алкил» означает прямую или разветвленную цепь или их комбинации, которые могут быть полностью насыщенными, моно- или полиненасыщенными и могут включать ди- и многовалентные радикалы. Примеры насыщенных углеводородных радикалов включают без ограничения такие группы, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, изобутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил, гомологи и изомеры, например, н-пентила, н-гексила, н-октила и т. п. Ненасыщенная алкильная группа представляет собой группу, содержащую одну или более двойных связей или тройных связей. Примеры ненасыщенных алкильных групп включают без ограничения винил, 2-пропенил, бутенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 3-(1,4-пентадиенил), этинил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил и высшие гомологи и изомеры.

Термин «гетерогидрокарбил» или его производное понятие (такое как гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил и гетероарил и т. д.), применяемые сами по себе или в комбинации с другим термином, означает, если не указано иное, устойчивый углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, или циклический углеводородный радикал, или их комбинации, содержащие указанное количество атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом. В некоторых вариантах осуществления термин «гетероалкил», применяемый сам по себе или в комбинации с другим термином, означает устойчивый углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью или их комбинациями, содержащий указанное количество атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом. В иллюстративном варианте осуществления гетероатомы могут быть выбраны из группы, состоящей из B, O, N и S, и причем атомы азота и серы необязательно могут быть окислены, и гетероатом, представляющий собой азот, необязательно может быть кватернизирован. Гетероатом или гетероатомная группа могут располагаться в любом внутреннем положении гетерогидрокарбила (в том числе в положении, где гидрокарбил присоединен к остальной части молекулы), однако термин «алкокси», «алкиламино», «алкилсера» (тиоксил) представляют собой идиоматические выражения, которые означают, что эти алкильные группы присоединены к остальной части молекулы посредством атомов O, NH или S. Примеры включают без ограничения -CH₂-CH₂-O-CH₃, -CH₂-CH₂-NH-CH₃, -CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃, -CH₂-S-CH₂-CH₃, -CH₂-CH₂, -S(O)-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃, -CH=CH-O-CH₃, -CH₂-CH=N-OCH₃ и –CH=CH-N(CH₃)-CH₃. Не более двух гетероатомов могут следовать друг за другом, например, -CH₂-NH-OCH₃.

Термины «циклогидрокарбил», «гетероциклогидрокарбил» или их производное понятие (такое как арил, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, циклоалкинил и гетероциклоалкинил и т. д.), применяемые сами по себе или в комбинации с другими терминами, означают циклизированные гидрокарбил и гетерогидрокарбил соответственно. Кроме того, в случае гетерогидрокарбила или гетероциклогидрокарбила (таких как гетероалкил и гетероциклоалкил) гетероатом может занимать положение, при котором гетероцикл присоединен к остальной части молекулы. Примеры циклоалкила включают без ограничения циклопентил, циклогексил, 1-циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил, и т. п. Неограничивающие примеры гетероциклоалкильных фрагментов включают 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридил), 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 4-морфолинил, 3-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил, 1-пиперазинил и 2-пиперазинил.

Если не указано иное, термин «алкил» означает линейный или разветвленный насыщенный гидрокарбил, который может быть монозамещенным (как например -CH₂F) или полизамещенным (как например -CF₃) и может быть одновалентным (как например метил), двухвалентным (как например метилен) или многовалентным (как например метин). Примеры алкила включают метил (Me), этил (Et), пропил (такой как н-пропил и изопропил), бутил (такой как н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил), пентил (такой как н-пентил, изопентил, неопентил) и т. д.

Если не указано иное, термин «алкенил» означает алкил, содержащий одну или более углерод-углеродных двойных связей в любом положении цепи, который может быть монозамещенным, двузамещенным или полизамещенным, и может быть одновалентным, двухвалентным или многовалентным. Примеры алкенила включают винил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил, бутадиенил, пиперилен, гексадиенил и т. д.

Если не указано иное, термин «алкинил» означает алкил, содержащий одну или более углерод-углеродных тройных связей в любом положении цепи, который может быть монозамещенным, двузамещенным или полизамещенным, и может быть одновалентным, двухвалентным или многовалентным. Примеры алкинила включают этинил, пропинил, бутинил, пентинил и т. д.

Если не указано иное, циклоалкил включает любую устойчивую циклическую или полициклическую углеводородную группу, и при этом любой атом углерода является насыщенным, которая может быть монозамещенной или полизамещенной, и может быть одновалентной, двухвалентной или многовалентной. Примеры циклоалкила включают без ограничения циклопропил, норборнил, [2.2.2]бициклооктан, [4.4.0]бициклононан и т. д.

Если не указано иное, циклоалкенил включает любую устойчивую циклическую или полициклическую углеводородную группу, содержащую одну или более ненасыщенных углерод-углеродных двойных связей в любом положении кольца, которая может быть монозамещенной или полизамещенной, и может быть одновалентной, двухвалентной или многовалентной. Примеры циклоалкенила включают без ограничения циклопентенил, циклогексенил и т. д.

Если не указано иное, циклоалкинил включает любую устойчивую циклическую или полициклическую углеводородную группу, содержащую одну или более ненасыщенных углерод-углеродных тройных связей в любом положении кольца, которая может быть монозамещенной или полизамещенной, и может быть одновалентной, двухвалентной или многовалентной.

Если не указано иное, термин «галогено» или «галоген», сами по себе или как часть другого заместителя, обозначает, если не указано иное, атом фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, подразумевается, что термин «галогеналкил» включает моногалогеналкил и полигалогеналкил. Например, подразумевается, что термин «галоген(C₁-C₄)алкил» включают без ограничения трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и т. п. Если не указано иное, примеры галогеналкила включают без ограничения трифторметил, трихлорметил, пентафторэтил и пентахлорэтил.

«Алкокси» означает вышеуказанный алкил, содержащий указанное число атомов углерода, присоединенный посредством кислородного мостика, и, если не указано иное, C_1-6алкокси включает алкокси с C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ и C₆. Примеры алкокси включают без ограничения метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентилокси и S-пентилокси. Если не указано иное, термин «арил» относится к полиненасыщенному ароматическому углеводородному заместителю, который может быть моно- или полизамещенным, и может быть одновалентным, двухвалентным или многовалентным, и может характеризоваться моноциклической или полициклической структурой колец (как например содержать от 1 до 3 колец, по меньшей мере одно из которых является ароматическим), кольца в которой конденсированы вместе или ковалентно связаны. Термин «гетероарил» относится к арильной группе (или кольцу), содержащей от одного до четырех гетероатомов. В одном иллюстративном примере гетероатом выбран из группы, состоящей из B, N, O и S, где атомы азота и серы необязательно окислены, а атом азота необязательно кватернизирован. Гетероарил может быть присоединен к остальной части молекулы посредством гетероатома. Неограничивающие примеры арильных или гетероарильных групп включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 4-бифенил, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 2-фенил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидил, 4-пиримидил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензимидазолил, 5-индолил, 1-изохинолинил, 5-изохинолинил, 2-хиноксалинил, 5-хиноксалинил, 3-хинолинил и 6-хинолинил. Заместители для любой из вышеуказанных арильных и гетероарильных кольцевых систем выбраны из приемлемых заместителей, описанных ниже.

Если не указано иное, термин «арил», в случае применения в комбинации с другими терминами (например, арилокси, арилтио, аралкил), включает как арильные, так и гетероарильные кольца, определенные выше. Таким образом, подразумевается, что термин «аралкил» включает такие радикалы, в которых арильная группа присоединена к алкильной группе (например, бензилу, фенилэтилу, пиридилметилу и т. п.), в том числе к такой алкильной группе, в которой атом углерода (например метиленовая группа) был заменен, например, атомом кислорода, например феноксиметил, 2-пиридилоксиметил, 3-(1-нафтилокси)пропил и т. п.

Термин «уходящая группа» означает функциональную группу или атом, которые могут быть замещены другой функциональной группой или атомом в ходе реакции замещения (такой как реакция нуклеофильного замещения). В качестве примера иллюстративные уходящие группы включают группы, представляющие собой трифлат, хлор, бром и йод; группы на основе сложного эфира сульфоновой кислоты, такие как мезилат, тозилат, брозилат, нозилат и т. п.; и ацилоксигруппы, такие как ацетокси, трифторацетокси и т. п.

Термин «защитная группа» включает без ограничения «защитную группу для аминогруппы», «защитную группу для гидроксильной группы» и «защитную группу для тиола». Термин «защитная группа для аминогруппы» означает защитную группу, подходящую для предотвращения нежелательных реакций по азоту аминогруппы. Иллюстративные защитные группы для аминогруппы включают без ограничения формил; ацильную группу, например алканоильные группы, такие как ацетил, трихлорацетил или трифторацетил; алкоксикарбонильные группы, такие как трет-бутоксикарбонил (Boc); арилметоксикарбонильные группы, такие как бензилоксикарбонил (Cbz) и 9-флуоренилметоксикарбонил (Fmoc); арилметильные группы, такие как бензил (Bn), тритил (Tr) и 1,1-ди-(4’-метоксифенил)метил; силильные группы, такие как триметилсилил (TMS) и трет-бутилдиметилсилил (TBS); и т. п. Термин «защитная группа для гидроксильной группы» означает защитную группу, подходящую для предотвращения нежелательных реакций в положении гидроксильной группы. Иллюстративные защитные группы для гидроксильной группы включают без ограничения алкильные группы, такие как метил, этил и трет-бутил; ацильные группы, например, алканоильные группы, такие как ацетил; арилметильные группы, такие как бензил (Bn), п-метоксибензил (PMB), 9-флуоренилметил (Fm), и дифенилметил (бензгидрил, DPM); силильные группы, такие как триметилсилил (TMS) и трет-бутилдиметилсилил (TBS); и т. п.

Соединения по данному изобретению можно получать несколькими способами, известными специалисту в области органического синтеза. Примеры по данному изобретению можно синтезировать с применением способов, описанных ниже, вместе со способами синтеза, известными из уровня техники в области органического химического синтеза, или их вариаций, понятных специалисту в данной области техники. Конкретные способы включают без ограничения те, что описаны ниже.

Все применяемые растворители являются коммерчески доступными. В данном настоящем изобретении используются следующие аббревиатуры: водн. означает водный; HATU означает гексафторфосфат 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония; EDC означает гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N’-этилкарбодиимида; m-CPBA означает 3-хлорпероксибензойную кислоту; экв. означает эквивалент; CDI означает карбонилдиимидазол; DCM означает дихлорметан; PE означает петролейный эфир; DIAD означает диизопропилазодикарбоксилат; DMF означает N,N-диметилформамид; DMSO означает диметилсульфоксид; EtOAc означает этилацетат; EtOH означает этанол; MeOH означает метанол; CBz означает карбобензилокси, тип защитной группы для амина; BOC означает трет-бутилоксикарбонил, тип защитной группы для амина; HOAc означает уксусную кислоту; NaCNBH₃ означает цианоборгидрид натрия; к. т. означает комнатную температуру; O/N означает в течение ночи; THF означает тетрагидрофуран; Boc₂O означает ди-трет-бутилдикарбонат; TFA означает трифторуксусную кислоту; DIPEA означает этилдиизопропиламин; SOCl₂ означает тионилхлорид; CS₂ означает сероуглерод; TsOH означает п-толуолсульфоновую кислоту; NFSI означает N-фторбензолсульфонимид; NCS означает N-хлорсукцинимид; n-Bu₄NF означает фторид тетрабутиламмония; iPrOH означает 2-пропанол; т. пл. означает точку плавления; LDA означает диизопропиламид лития.

Соединения называли либо вручную, либо с применением ChemDraw^®, либо с применением каталога названий поставщика в случае, если они являются коммерчески доступными.

Технический эффект

По сравнению с лезинурадом, соединение по настоящему изобретению продемонстрировало более значительную ингибирующую активность in vitro в отношении опосредованной URAT1 транспортировки ¹⁴C-мочевой кислоты в клеточной линии HEK293, стабильно трансфицированной геном URAT1 (транспортер мочевой кислоты).

Подробное описание предпочтительного варианта осуществления

Настоящее изобретение будет конкретно описано ниже с помощью вариантов осуществления, но объем настоящего изобретения не ограничивается ими. Настоящее изобретение было подробно описано и также раскрыты варианты осуществления, любую модификацию варианта осуществления без отклонения от сущности настоящего изобретения следует рассматривать как очевидную.

Иллюстративный вариант осуществления 1. Фрагмент BB-1

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения BB-1-2

К раствору соединения BB-1-1 (50,00 мг, 274,36 мкмоль, 1,00 экв.) в метаноле (5,00 мл) добавляли концентрированную серную кислоту (1,84 г, 18,76 ммоль, 1,00 мл, 68,38 экв.), и затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. на масляной бане при 80°C. После завершения реакции смесь охлаждали до 15°C и затем экстрагировали с помощью PE (3 мл×7). Органические фазы объединяли, высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали и фильтрат концентрировали с получением соединения BB-1-2 в виде бесцветной прозрачной жидкости (51,20 мг, 260,87 мкмоль, неочищенный продукт). Данные ядерно-магнитного резонанса представлены ниже: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 7,08 (s, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,04 (m, 2H), 2,71 (m, 2H), 1,80-1,71 (m, 4H).

Стадия 2. Синтез соединения BB-1

К раствору соединения BB-1-2 (50,00 мг, 254,75 мкмоль, 1,00 экв.) в уксусной кислоте (5,00 мл) добавляли жидкий бром (48,85 мг, 305,70 мкмоль, 15,76 мкл, 1,20 экв.), и обеспечивали протекание реакции в реакционной смеси в течение 2 ч. при 20°C. После завершения реакции смесь концентрировали для того, чтобы удалить жидкий бром и уксусную кислоту с получением соединения BB-1 в виде желтого твердого вещества (70,10 мг, 254,76 мкмоль, выход 100,00%). Данные ядерно-магнитного резонанса твердого вещества представлены ниже: ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 3,86 (s, 3H), 3,03 (m, 2H), 2,56 (m, 2H), 1,82-1,70 (m, 4H).

Иллюстративный вариант осуществления 2. Фрагмент BB-2

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения BB-2

К раствору соединения BB-2-1 (5,0 г, 17,49 ммоль) в метаноле (20 мл) медленно добавляли концентрированную серную кислоту (3,00 мл), а затем реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя, и к остатку добавляли воду (50 мл), и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл x 3). Органические фазы объединяли и промывали с помощью насыщ. водн. NaCl (20 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE (2-10%) с получением соединения BB-2 (4,8 г, 16,00 ммоль, выход 91,49%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 7,59 (s, 1H), 3,89 (s, 3H).

Иллюстративный вариант осуществления 3. Фрагмент BB-3

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения BB-3-2

К раствору 3-метилтиофена BB-3-1 (25,00 г, 254,66 ммоль, 1,00 экв.) в уксусной кислоте (250 мл) добавляли N-бромсукцинимид (113,31 г, 636,65 ммоль, 2,50 экв.) при комнатной температуре и затем перемешивали в течение 3 ч. при комнатной температуре. После завершения реакции смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя, и к остатку добавляли воду (100 мл), и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл x 3). Органические фазы объединяли и последовательно промывали водой (100 мл) и насыщ. водн. NaCl (20 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения BB-3-2 (50,00 г, 195,34 ммоль, выход 76,71%) в виде желтого масла, которое можно было применять для следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 MГц, DMSO-d₆) δ: 2,12 (s, 3H) 7,12 (s, 1H).

Стадия 2. Синтез соединения BB-3-3

К раствору соединения BB-3-2 (27,00 г, 105,49 ммоль, 1,00 экв.) в THF (400 мл) добавляли н-BuLi (46,4 мл, 2,5 M, 116,03 ммоль, 1,10 экв.) в н-гексане при -78°C, и после добавления смесь перемешивали в течение еще 1 ч. при -78°C. Смесь барботировали избыточным количеством сухого диоксида углерода до завершения реакции (приблизительно 3 ч.). Реакционную систему гасили водой (100 мл), доводили pH до 3-4 с помощью 1 M раствора хлористоводородной кислоты, и в осадок выпадало большое количество коричневого твердого вещества. Твердое вещество отфильтровывали, и осадок на фильтре промывали с помощью метил-трет-бутилового эфира (100 мл), и высушивали in vacuo с получением соединения BB-3-3 (16,00 г, 72,38 ммоль, выход 68,61%) в виде коричневого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, DMSO-d₆) δ: 2,17 (s, 3H) 7,54 (s, 1H).

Стадия 3. Синтез соединения BB-3

К раствору соединения BB-3-3 (6,80 г, 30,76 ммоль, 1,00 экв.) в метаноле (100 мл) по каплям добавляли концентрированную серную кислоту (6,03 г, 61,52 ммоль, 2,00 экв.), и затем реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч. при 80°C. После завершения реакции смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя, и к остатку добавляли воду (40 мл), и экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл x 2). Органические фазы объединяли и последовательно промывали водой (30 мл) и насыщ. водн. NaCl (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения в виде желтого масла. Желтое масло очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE (5-10%) с получением соединения BB-3 (7,00 г, 29,77 ммоль, выход 96,78%) в виде желтого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 2,22 (s, 3H) 3,88 (s, 3H) 7,49 (s, 1H).

Иллюстративный вариант осуществления 4. Фрагмент BB-4

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения BB-4-2

3-Хлортиофен-BB-4-1 (50,00 г, 421,66 ммоль, 1,00 экв.) растворяли в CHCl₃ (200,00 мл) и уксусной кислоте (200,00 мл), и в смесь добавляли N-бромсукцинимид (75,05 г, 421,66 ммоль, 1,00 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. при 20°C, нагревали до 100°C и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч., и смесь превращалась из желтой мутной в прозрачную коричневую жидкость. Затем смесь выливали в воду (200 мл), и экстрагировали с помощью DCM (150 мл × 3). Фазы на основе DCM объединяли, промывали с помощью насыщ. водн. Na₂CO₃ (150 мл) и затем с помощью насыщ. водн. NaCl (100 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и получали неочищенный продукт, представляющий собой соединение BB-4-2 (80,00 г, 405,10 ммоль, выход 96,07%), в виде желтого масла, которое можно было применять для следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 7,28 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6,89 (d, J=2,0 Гц, 1H).

Стадия 2. Синтез соединения BB-4-3

К раствору соединения BB-4-2 (80,00 г, 405,10 ммоль, 1,00 экв.) и ацетилхлорида (47,70 г, 607,65 ммоль, 1,50 экв.) в безводном DCM (500,00 мл) частями добавляли безводный хлорид алюминия (64,82 г, 486,12 ммоль, 1,20 экв.), и затем реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч. при 15°C. После обнаружения завершения реакции при помощи TLC смесь выливали в ледяную воду (500 мл) и экстрагировали с помощью DCM (200 мл × 2). Органические фазы объединяли, высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и раствор концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и получали продукт, представляющий собой BB-4-3 (90,00 г, 375,75 ммоль, выход 92,76%), в виде грязно-белого твердого вещества, которое можно было применять для следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 MГц, DMSO-d₆) δ: 8,07 (s, 1H), 2,53 (s, 3H).

Стадия 3. Синтез соединения BB-4-4

Раствор NaOH (327,66 г, 4,10 моль, 10,90 экв.) в воде (500,00 мл) охлаждали до 0°C при перемешивании, и затем в смесь по каплям добавляли жидкий бром (198,16 г, 1,24 моль, 3,30 экв.) с последующим добавлением по каплям соединения BB-4-3 (90,00 г, 375,75 ммоль, 1,00 экв.) в диоксане (500,00 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 ч. при 15°C и затем охлаждали до 0°C, доводили pH до 2-3 с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты, и экстрагировали с помощью EtOAc (300 мл × 3). Органические фазы объединяли и высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и раствор концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и получали бежевое твердое вещество. Бежевое твердое вещество суспендировали с применением PE (300 мл), и затем смесь фильтровали, и осадок на фильтре высушивали in vacuo с получением продукта, представляющего собой BB-4-4 (65,00 г, 269,16 ммоль, выход 71,63%), в виде бледно-желтого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, DMSO-d₆) δ: 7,72 (s, 1 H).

Стадия 4. Синтез соединения BB-4

К раствору соединения BB-4-4 (40,00 г, 165,64 ммоль, 1,00 экв.) в метаноле (300,00 мл) при перемешивании добавляли по каплям концентрированную серную кислоту (1,62 г, 16,56 ммоль, 0,10 экв.). И затем реакционную смесь нагревали до 100°C, и обеспечивали протекание реакции в течение 15 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и к остатку добавляли воду (150 мл). Смесь перемешивали для диспергирования продукта и затем фильтровали, осадок на фильтре высушивали с получением продукта, представляющего собой BB-4 (38,00 г, 148,72 ммоль, выход 89,78%), в виде твердого вещества цвета хаки. ¹H-ЯМР(400 MГц, DMSO-d₆) δ: 7,84 (s, 1H), 3,89-3,81 (m, 3H).

Иллюстративные варианты осуществления 5-9. Фрагменты BB-5-BB-9

Иллюстративные варианты осуществления, перечисленные в таблице ниже, синтезировали в соответствии со стадиями 1-2, приведенными в иллюстративном варианте осуществления 1.

Вариант осуществления 1. WX001, WX001A, WX001B

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения WX001-1

К раствору соединения BB-1 (5,00 г, 18,17 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (2,03 г, 23,62 ммоль), трициклогексилфосфина (1,53 г, 5,45 ммоль) и ортофосфата калия (13,89 г, 65,41 ммоль) в толуоле (60 мл) и воде (3 мл) добавляли ацетат палладия (407,93 мг, 1,82 ммоль), и затем нагревали до 80-100°C в атмосфере N₂, и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали, и осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (10 мл). Фильтрат концентрировали до сухого состояния при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE(0-20%) с получением целевого соединения WX001-1 (коричневое масло, 3,20 г, выход 74,5%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 3,82 (s, 3H), 3,03-3,01 (m, 2H), 2,70-2,68 (m, 2H), 1,98-1,78 (m, 1H), 1,78-1,76 (m, 4H), 1,08-1,04 (m, 2H), 0,77-0,75 (m, 2H).

Стадия 2. Синтез соединения WX001-2

Раствор соединения WX001-1 (3,20 г, 13,54 ммоль) и NaOH (1,08 г, 27,08 ммоль) в метаноле (40 мл) и воде (40 мл) нагревали до 70-80°C и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Остаток растворяли в воде (50 мл), доводили pH до 3-4 с помощью разбавленной хлористоводородной кислоты (1 M), и в осадок выпадало белое твердое вещество. Затем смесь экстрагировали с помощью EtOAc (150 мл × 3). Три органические фазы объединяли и высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей и получали целевое соединение WX001-2 (белое твердое вещество, 3,00 г, выход 99,67%). ¹H ЯМР (400 MГц, DMSO-d₆) δ: 2,89-2,88 (m, 2H), 2,64-2,63 (m, 2H), 2,06-2,03 (m, 1H), 1,73-1,62 (m, 4H), 1,07-1,02 (m, 2H), 0,66-0,63 (m, 2H).

Стадия 3. Синтез соединения WX001-3

Раствор соединения WX001-2 (3,00 г, 13,50 ммоль), дифенилфосфорилазида (5,57 г, 20,25 ммоль) и триметиламина (4,10 г, 40,50 ммоль) в трет-бутаноле (50 мл) нагревали до 80-100°C в атмосфере N₂ и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Масляный остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE (0-20%) с получением целевого соединения WX001-3 (зеленое твердое вещество, 2,50 г, выход 63,11%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 6,29 (brs, 1H), 2,68-2,60 (m, 2H), 2,49-2,36 (m, 2H), 1,87-1,84 (m, 1H), 1,82-1,57 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 0,90-0,86 (m, 2H), 0,66-0,73 (m, 2H).

Стадия 4. Синтез соединения WX001-4

К раствору соединения WX001-3 в EtOAc (20,0 мл) добавляли HCl в EtOAc (4 M, 40,0 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. при комнатной температуре. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и получали соединение WX001-4 (коричневое твердое вещество, 1,90 г, выход 97,06%), которое можно было применять для следующей стадии без дополнительной очистки. MS-ESI масса/заряд: 193,9 [M+H]⁺.

Стадия 5. Синтез соединения WX001-6

К раствору соединения WX001-4 (690,00 мг, 3,00 ммоль) в DCM (20,00 мл) добавляли изопропилэтиламин (1,16 г, 9,01 ммоль), и смесь охлаждали до 0°C на ледяной бане, и затем добавляли соединение WX001-5 (517,93 мг, 4,50 ммоль), и перемешивали в течение 15 мин. при 0°C. После завершения реакции смесь нагревали до комнатной температуры, гасили с помощью разбавленной хлористоводородной кислоты (1 M, 5 мл). Органическую фазу отделяли, высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей, и получали остаток, представляющий собой целевое соединение WX001-6 (коричневое масло, 700 мг, выход 99,13%), которое можно было применять для следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 6. Синтез соединения WX001-7

Раствор соединения WX001-6 (700,00 мг, 2,97 ммоль) и гидразингидрата (446,64 мг, 8,92 ммоль) в DMF (10,00 мл) нагревали до 80-100°C и перемешивали в течение 2 ч., и затем добавляли N,N-диметилформамиддиметилацеталь (49,99 мг, 2,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80-100°C в течение ночи. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, и выливали в воду (5 мл), и экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл × 2). Две органические фазы объединяли, высушивали над безводным Na₂SO₄, высушивающее средство отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE (0-50%) с получением целевого соединения WX001-7 (оранжевое масло, 90,00 мг, выход 10,92%). MS-ESI масса/заряд: 277,9 [M+H]⁺.

Стадия 7. Синтез соединения WX001-9

Раствор соединения WX001-7 (10,00 мг, 36,05 мкмоль), сложного метилового эфира бромуксусной кислоты и WX001-8 (6,62 мг, 39,65 мкмоль) и карбоната калия (5,48 мг, 39,65 мкмоль) в DMF (3,00 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После завершения реакции смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Остаток разделяли с помощью препаративной HPLC с получением целевого соединения WX001-9 (соединение, представляющее собой сложный метиловый эфир, являющийся продуктом переэтерификации) (5,00 мг, выход 38,16%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ: 8,15 (s, 1H), 4,12 (s, 1H), 3,77 (s, 3H), 2,72-2,69 (m, 2H), 2,38-2,37 (m, 2H), 1,98-1,94 (m, 1H), 1,79-1,67 (m, 4H), 1,04-1,01 (m, 2H), 0,71-0,67 (m, 2H). MS-ESI масса/заряд: 349,9 [M+H]⁺.

Стадия 8. Синтез соединения WX001-10

К раствору соединения WX001-9 (25,00 мг, 68,78 мкмоль) в ацетонитриле (5,00 мл) при комнатной температуре добавляли пиридин (6,53 мг, 82,54 мкмоль), смесь охлаждали до 0°C на ледяной бане, и затем по каплям добавляли жидкий бром (32,98 мг, 206,34 мкмоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч. при 20°C. После нагревания реакционной смеси до комнатной температуры смесь гасили с помощью насыщ. водн. бисульфита натрия (1 мл) и концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюировали с помощью EtOAc/PE (0%-75%) с получением целевого соединения WX001-10 (бесцветное масло, 10,00 мг, выход 32,86%). MS-ESI масса/заряд: 442,0 [M+H]⁺, 444,0 [M+H+2]⁺.

Стадия 9. Синтез соединения WX001

Раствор соединения WX001-10 (10,00 мг, 22,60 мкмоль) в этаноле (1,00 мл), THF (1,00 мл) и воде (1,00 мл) охлаждали до 0°C на ледяной бане, и затем добавляли LiOH (649,52 мкг, 27,12 мкмоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. при 0°C. После завершения реакции pH смеси доводили до 3-4 с помощью разбавленной хлористоводородной кислоты (1 M) при 0°C, и затем концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей. Остаток разделяли с помощью препаративной HPLC с получением целевого соединения WX001 (1,40 мг, выход 14,95%). ¹H ЯМР (400 MГц, метанол-d₄) δ: 4,12-4,01 (m, 2H), 2,77-2,75 (m, 2H), 2,33-2,09 (m, 2H), 2,07-2,06 (m, 1H), 1,84-1,75 (m, 4H), 1,10-1,08 (m, 2H), 0,73-0,70 (m, 2H). MS-ESI масса/заряд: 413,9 [M+H]⁺, 415,9 [M+H+2]⁺.

Стадия 10. Синтез соединений WX001A и WX001B

Соединение WX001 отделяли с помощью сверхкритической жидкостной хроматографии с получением ротамеров WX001A и WX001B, время удерживания которых составляло 4,409 мин. и 4,599 мин. соответственно, и соотношение составляло 1:1 (условия разделения: колонка: Chiralpak AD-3 150 × 4,6 мм, I.D. 3 мкм; подвижная фаза: A: CO₂ B: этанол (0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% B за 5,0 мин. и удержание 40% в течение 2,5 мин, затем 5% B в течение 2,5 мин.; расход: 2,5 мл/мин.; температура колонки: 35°C; длина волны: 220 нм).

Вариант осуществления 2. WX002

Путь синтеза:

Стадия 1. Синтез соединения WX002

Раствор соединения WX001-9 (14,00 мг, 38,51 мкмоль) в этаноле (1,00 мл), THF (1,00 мл) и воде (1,00 мл) охлаждали до 0°C на ледяной бане, и затем добавляли LiOH·H₂O (1,11 мг, 46,21 мкмоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. при 0°C. После завершения реакции pH смеси доводили до 6-7 с помощью разбавленной хлористоводородной кислоты (1 M) при 0°C, и затем концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителей. Остаток разделяли с помощью препаративной HPLC с получением целевого соединения WX002 (2,90 мг, выход 22,45%). ¹H ЯМР (400 MГц, метанол-d₄) δ: 9,04 (s, 1H) 4,15-4,09 (m, 2H), 2,78-2,75 (m, 2H), 2,46-2,45 (m, 2H), 2,08-2,04 (m, 1H), 1,83-1,75 (m, 4H), 1,09-1,06 (m, 2H), 0,72-0,68 (m, 2H). MS-ESI масса/заряд: 335,9 [M+H]⁺.

Варианты осуществления, перечисленные в таблице ниже, синтезировали в соответствии со стадиями 1-10, приведенными в варианте осуществления 1. Структуры в таблице представляют собой их возможные ротамеры и хиральные изомеры.

Таблица 1

Варианты осуществления, перечисленные в таблице ниже, синтезировали в соответствии со стадиями 1-7, представленными в варианте осуществления 1, и стадией 1, представленной в варианте осуществления 2. Структуры в таблице представляют собой их возможные ротамеры и хиральные изомеры.

Таблица 2

Варианты осуществления, перечисленные в таблице ниже, синтезировали в соответствии со стадиями 1-7, представленными в варианте осуществления 1. Структуры в таблице представляют собой их возможные ротамеры и хиральные изомеры.

Таблица 3

Обобщенные данные ЯМР и MS по всем вариантам осуществления

Таблица 4

Испытания варианта осуществления 1: оценка in vitro

Цель эксперимента

Определение значения IC₅₀ ингибирующей активности соединения в отношении реабсорбции мочевой кислоты клеточной линией HEK293, стабильно трансфицированной геном URAT-1 (транспортер мочевой кислоты).

Введение

Подагра представляет собой прогрессирующее заболевание, индуцируемое аномальным повышением уровня содержания мочевой кислоты в крови. Ген URAT-1 кодирует транспортер мочевой кислоты, присутствующий в почечных канальцах. Низкомолекулярные соединения могут способствовать выведению мочевой кислоты путем ингибирования функции данного белка, тем самым предотвращая приступы подагры.

Материалы, применяемые для осуществления эксперимента

Клеточная линия URAT-1 (HEK293): клеточная линия HEK293, стабильно трансфицированная геном URAT-1.

Среда для культивирования клеток: культуральная среда DMEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% пирувата натрия и 300 мкл/мл G418.

Буферный раствор HBSS.

0,1 M раствор NaOH.

Раствор мочевой кислоты, меченой ¹⁴C.

CO₂-инкубатор.

Жидкостной сцинтилляционный счетчик Tri-Carb.

Экспериментальная процедура и методика

Посев клеток:

1) из культуры клеток отсасывали супернатант, и клетки промывали с помощью 10 мл PBS;

2) в промытую колбу с культурой клеток добавляли предварительно нагретый трипсин, и колбу с культурой клеток поворачивали, чтобы трипсин равномерно покрыл дно колбы;

3) в каждой колбе T150 клетки суспендировали с помощью 10-15 мл культуральной среды, отбирали 0,1 мл клеточной суспензии, и разбавляли ее двумя объемами раствора трипанового синего для подсчета клеток;

4) клетки разбавляли культуральной средой до 2,5×10⁵/мл, и разбавленные клетки вносили в 24-луночный планшет, покрытый коллагеном из сухожилий крысиного хвоста (800 мкл/лунка, 2×10⁵ клеток/лунка). Планшет инкубировали в течение ночи при 37°C в CO₂-инкубаторе при 5% CO₂.

Получение клеток:

1) клетки высевали в 24-луночный планшет, и супернатант удаляли через 16-18 ч. Клетки промывали дважды с применением 600 мкл буфера HBSS;

2) буфер HBSS удаляли, и в каждую лунку снова добавляли по 180 мкл буфера HBSS.

Получение, разбавление и отбор образцов раствора соединения:

1) соединения растворяли в 100% DMSO и разбавляли путем 3-кратного разведения с получением 6 точек концентрации или путем 10-кратного разведения с получением 2 точек концентрации, при этом наивысшая исходная концентрация составляла 50 мМ;

2) для получения 25-кратного разведения 5 мкл раствора на основе DMSO со стадии 1) переносили в 120 мкл буфера HBSS;

3) 10 мкл разбавленного раствора со стадии 2) вносили в 24-луночный планшет, и планшет инкубировали в течение 15 мин. при 37°C в CO₂-инкубаторе при 5 % CO₂. Конечная концентрация DMSO составила 0,2%. Контрольная лунка содержала 0,2% DMSO без соединения.

Проведение испытания:

Меченую ¹⁴C мочевую кислоту разбавляли и добавляли в планшет, и конечная концентрация составляла 50 мкм. Планшет инкубировали в течение 10 мин при 37°C в CO₂-инкубаторе при 5% CO₂. После удаления супернатанта клетки дважды промывали буфером HBSS. Клетки лизировали с помощью 0,1 M NaOH. И затем раствор клеточного лизата собирали в пробирку для измерения сцинтилляции в жидкости и добавляли раствор для измерения сцинтилляции в жидкости. Сигнал считывали с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика Tri-Carb.

e) Анализ данных:

Ингибирование URAT-1 в результате обработки соединениями анализировали путем расчета процента ингибирования. Для получения значений IC50 осуществляли нелинейный регрессионный анализ данных процента ингибирования (inh%) с применением программного обеспечения GraphPad Prism. Результаты эксперимента приведены в таблице 5.

Таблица 5. Результаты испытаний всех вариантов осуществления в отношении ингибирования URAT-1

A<2 мкМ; 2 мкМ≤B≤20 мкМ; C>20 мкМ.

Заключение: соединения по настоящему изобретению продемонстрировали значительную ингибирующую активность в отношении URAT-1.