Результат интеллектуальной деятельности: Способ комплектования резерва криоконсервированных эритроцитов на основании иммуногематологических критериев

Изобретение относится к области медицины, конкретно к способу комплектования резерва криоконсервированных эритроцитов на основании иммуногематологических критериев. Способ включает типирование антигенов эритроцитов доноров и выбор определенных фенотипов для создания запасов криоконсервированных эритроцитов. Способ обеспечивает проведение трансфузионной терапии реципиентам с редкой группой крови, имеющим ауто-, алло- или панагглютинирующие антиэритроцитарные антитела.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, основанной на иммуногематологическом и генетическом методах определения критериев отбора эритроцитов для криоконсервирования с целью долгосрочного хранения.

Основной задачей банка криоконсервированных эритроцитов является обеспечение реципиентов фенотипипически совместимыми эритроцитсодержащими компонентами (ЭСК) для профилактики развития аллоиммунизации и предотвращения возникновения посттрансфузионных гемолитических осложнений [2, 5, 6]. Необходимость в использовании замороженных эритроцитов возникает у реципиентов с редкими группами крови, переливание эритроцитов которым без учета совместимости чревато развитием иммунизации; у пациентов с высоким риском развития посттрансфузионных гемолитических осложнений вследствие аллоиммунизации к антигенам эритроцитов; у больных, имеющих панагглютинирующие антитела, антитела с неустановленной специфичностью, а также получающих лекарственные препараты на основе моноклональных антител, реагирующих с эритроцитами [1, 3, 9]. Такие больные нуждаются в расширенном фенотипировании с определением антигенов систем АВО, Резус, Келл, MNS (М, N, S, s), Duffy (Fy^a, Fy^b), Kidd (Jk^a, Jk^b) и в подборе фенотипически совместимых донорских эритроцитов. Так как нативные эритроциты с необходимым фенотипом могут отсутствовать, а заготовка ЭСК от специально приглашенных доноров требует времени, использование криоконсервированных эритроцитов - выход из сложившейся ситуации [4, 7, 8].

Техническим результатом заявляемого изобретения является создание способа формирования банка криоконсервированных эритроцитов, что необходимо для обеспечения реципиентов совместимыми ЭСК, профилактики развития аллоиммунизации и предотвращения возникновения посттрансфузионного гемолитического осложнения.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ создания запасов ЭСК редких групп крови, то есть эритроцитов, не содержащих в фенотипе антигенов с высокой (более 90%) частотой встречаемости [8]. Однако имеющийся алгоритм не предусматривает формирования резерва эритроцитов с «универсальными» фенотипами и фенотипами с высокой востребованностью в клинике.

Для достижения указанного результата в соответствии с прототипом исследуют фенотипы эритроцитов доноров, выбирая те из них, которые не содержат антигенов с высокой частотой встречаемости, и проводят генотипирование доноров с данными фенотипами. Отличительной особенностью предлагаемого способа от уже имеющегося является обязательный отбор фенотипов с «универсальными» качествами, то есть совместимых как с гомозиготными, так и с гетерозиготными реципиентами.

В процессе проведения патентно-информационного поиска не выявлено источников, порочащих новизну предполагаемого изобретения.

Заявляемое изобретение разработано в лаборатории иммуногематологии ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России в соответствии с планом научно-исследовательской работы.

Способ предусматривает следующие этапы:

1. На основании результатов стандартного иммуногематологического типирования антигенов систем Резус и Келл с выявляют доноров с фенотипами: C+c-D-, D-E+e-, K+K+. Затем выполняют их генотипирование. При подтверждении результата осуществляют криоконсервирование дозы эритроцитов. Доноры с O(I) группой крови приглашаются для повторных кроводач для формирования запаса соответствующих эритроцитов.

2. Создают ресурс эритроцитов, не содержащих в фенотипах каких-либо из антигенов: М, S, s, Fy^a, Fy^b, Jk^a, Jk^b. Так как подбор доноров по системам MNS, Duffy, Kidd не исключает подбора по АВО, Резус и Келл, то для расширенное типирование выполняют у доноров O(I) группы с фенотипами C+c-D+E-e+C^w-K-, C+c+D+E-e+C^w-K-, C-c+D+E+e-C^w-K-, С-c+D-E-e+C^w-K-. Эритроциты доноров типируют по антигенам MNS, Duffy, Kidd, P1PK, Lewis, Lutheran. На основании полученных результатов проводят селекцию M-N+; S+s-; S-s+; Fy(a+b-); Fy(a-b+); Jk(a+b-); Jk(a-b+) фенотипов. Запас криоконсервированных эритроцитов может использоваться при трансфузиях реципиентам, иммунизированным к указанным антигенам, или при фенотипическом подборе больным с панагглютинирующими антителами и пациентам, получающим лекарственные препараты на основе анти-CD38 моноклональных антител.

3. Эритроциты доноров O(I) группы с фенотипами C+c-D+E-e+C^w-K-, C-c+D+E+e-C^w-K-, C-c+D-E-e+C^w-K-, типированные по антигенам MNS, Duffy, Kidd, P1PK, Lewis, Lutheran, подвергаются криоконсервированию. Такие эритроциты переливаются при необходимости подбора доноров пациентам со специфическими антителами к антигенам систем P1PK, Lewis, Lutheran или при отсутствии нативных эритроцитов, совместимых по резус-фенотипу.

Алгоритм формирования банка криоконсервированных эритроцитов представлен в таблице 1.

Банк долгосрочного хранения эритроцитов создан в ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России в июле 2011 г. Криоконсервированию подвергнуто 1364 терапевтические дозы эритроцитов (O(I) - 455, А(II) - 416, В(III) - 319, AB(IV) - 174); перелито в отделениях клиники - 514. Фенотипическая характеристика запаса криоконсервированных эритроцитов следующая: C+c-D-E-e+ (8 доз), C+c-D+E-e+C^w-K- (107), C-c+D+E+e-C^w-K- (22), C-c+D-E-e+C^w-K- (191), K+k- (6), M-N+ (8), S+s- (12), S-s+(27), Fy(a+b-) (12), Fy(a-b+) (22), Jk(a+b-) (11), Jk(a-b+) (15). Нежелательных реакций при трансфузиях криоконсервированных эритроцитов не зафиксировано. Адекватный прирост уровня эритроцитов наблюдался после 89,0% трансфузий криоконсервированных ЭСК.

Ниже приводятся клинические примеры, подтверждающие возможность использования заявляемого способа при проведении гемокомпонентной терапии пациентам с высоким риском развития посттрансфузионных гемолитических осложнений.

Пример 1.

Больной Ш., 67 лет, диагноз множественная миелома. Результаты иммуногематологического обследования: группа крови системы АВО: А(II); Резус: C+c-D+E-e+; Келл: K-k+; MNS: M+N-S+S+; Kidd: Jk(a-b+); Duffy: Fy(a-b+); выявлены антиэритроцитарные панагглютинирующие антитела; прямая проба Кумбса - положительная (+++). Наблюдаются клинические (одышка, утомляемость) и лабораторные признаки анемии (гемоглобин - 62 г/л), требующие проведения заместительной трансфузионной терапии. Для предотвращения гемолитического посттрансфузионного осложнения необходимо выполнить подбор донорских эритроцитов, совместимых с больным по фенотипу. Нативные эритроциты соответствующего фенотипа не найдены. Проведен поиск в банке криоконсервированных компонентов крови. Выполнены две трансфузии криоконсервированных ЭСК от доноров с фенотипами O(I); C+c-D+E-e+; K-k+; M+N-S+s-; Jk(a-b+); Fy(a-b+); и O(I); C+c-D+E-e+; K-k+; M+N-S-S+; Jk(a-b+); Fy(a-b+). Посттрансфузионный показатель гемоглобина - 87 г/л, неблагоприятных реакций не наблюдалось.

Пример 2.

Больной П., 58 лет, диагноз острый миелоцитарный лейкоз. Результаты иммуногематологического обследования: группа крови системы АВО: А(II); Резус: C+c+D+E-e+; Келл: K-k+; MNS: M-N+S+S+; Kidd: Jk(a-b+); Duffy: Fy(a-b+); выявлены антиэритроцитарные анти-М аллоантитела; прямая проба Кумбса - отрицательная. Наблюдающийся у больного анемический синдром (одышка, утомляемость, уровень гемоглобина - 68 г/л) требовал выполнения трансфузий ЭСК. Так как нативных ЭСК, не имеющих в фенотипе антигена М, не найдено, подбор проведен в банке криоконсервированных компонентов крови. Осуществлена трансфузия криоконсервированных ЭСК от донора с фенотипом O(I); C+c-D+E-e+; K-k+; M-N+S+s-; Jk(a-b+); Fy(a-b+). Достигнут клинико-лабораторный ответ на трансфузию, посттрансфузионные реакции и осложнения отсутствовали.

Список литературы

1. Бутина Е.В., Зайцева Г.А, Коряковцева Т.А., Максимов О.Д., Шерстнев Ф.С. Результаты скрининга и идентификации антиэритроцитарных антител у пациентов гематологической клиники // Трансфузиология. - 2018. - №1ю - С. 56-64.

2. Каландаров Р.С., Головкина Л.Л., Васильева М.Н., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д., Атрощенко Г.В. и др. Генотипирование групп крови систем АВО и резус у пациентов после множественных гемотрансфузий // Онкогематология. - 2017. - Т. 12 (2). С. 70-79.

3. Минеева Н.В., Гавровская С.В., Бодрова Н.Н., Сысоева Е.А., Кробинец И.И., Поединенко И.В. Анализ сложнодиагноструемых вариантов антигена D при определении резус-принадлежности крови // Трансфузиология. - 2017. - Т. 18 (S1). С. 31-32.

4. Минеева Н.В., Пашкова И.А., Кробинец И.И., Гавровская С.В., Сысоева Е.А., Бодрова Н.Н. Оптимизация подбора совместимых пар «донор-реципиент»: роль скрининга антител и фенотипирования антигенов эритроцитов реципиентов при гемотрансфузиях // Трансфузиология. - 2015. - Т. 16 (2). С. 52-59.

5. Минеева Н.В., Гавровская С.В., Кробинец И.И., Бодрова Н.Н., Сысоева Е.А., Поединенко И.В. и др. Оценка вероятности подбора пар «донор-реципиент» с учетом фенотипа антигенов эритроцитов // Трансфузиология. - 2017. - Т. 18 (4). - С. 53-62.

6. Минеева Н.В., Пашкова И.А., Кробинец И.И., Сысоева Е.А. Аллосенсибилизация к антигенам эритроцитов (обзор литературы) // Онкогематология. - 2015. - Т. 10 (4). - С. 60-65.

7. Уйба В.В., Эйхлер О.В., Чечеткин А.В., Данильченко В.В. Развитие безвозмездного добровольного донорства крови и ее компонентов в Российской Федерации // Медицина Экстремальных ситуаций. - 2017. Т. 59(1). З. 8-13.

8. Shaz В.H., Hillyer C.D., Roshal M., Abrams C.S. Transfusion Medicine and Hemostasis: Clinical and Laboratory Aspects, 2rd ed. - Philadelphia, PA: Elsevier, 2013. - 986 pp.

9. Von Zabern I., F.F. Wagner, W.A. Flegel. Ten years Rhesus Immunization Registry // Vox Sanguinis. - 2010. - Vol. 99. - P. 1-55.