Средство, повышающее устойчивость эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом

Изобретение относится к медицине, физиологии, психиатрии, наркологии и фармакологии, а именно к веществам, обладающим гемопротекторной активностью в отношении эритроцитов при действии этанола. Изобретение может быть использовано в медицине, ветеринарии, фармацевтической промышленности.

Проблема поиска гемопротекторных веществ, повышающих устойчивость эритроцитов к гемолизу, является актуальной. Особое значение устойчивость эритроцитов к гемолизу имеет при алкоголизме, поскольку важным фактором патогенеза алкогольной зависимости является структурно-функциональная дезорганизация эритроцитов при хроническом действии этанола и его метаболитов, в частности, ацетальдегида и продуктов ПОЛ. Этанол хорошо растворяется как в гидрофильной, так и в гидрофобной областях биологических мембран и способен непосредственно воздействовать на мембраны эритроцитов, приводя к снижению их гемолитической устойчивости и возможному развитию анемии [1, 2]. Проблема сложности лечения алкоголизма, сопровождающегося нарушениями параметров красной крови, обусловливает необходимость поиска защитных средств биологических мембран эритроцитов от воздействия этанола.

Для защиты эритроцитов от действия этанола применяют различные средства.

Известно применение галавита для защиты эритроцитов от гемолиза, индуцированного этанолом [3].

Известно применение аскорбата лития в качестве средства, обладающего гемато-протекторным действием [4, 5].

Задачей настоящего изобретения является расширение арсенала гемопротекторных средств, повышающих устойчивость эритроцитов к повреждающему действию этанола, и при этом обладающих нормотимическим эффектом при применении в наркологической практике.

Поставленная задача решается путем применения фумарата лития (Li₂H₂C₄O₄) в терапевтической концентрации 1,2 ммоль/л в расчете на ион лития (Li+) в качестве средства, повышающего устойчивость эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом.

Фумарат лития представляет собой белый кристаллический порошок, легко растворимый в воде, является литиевой солью фумаровой кислоты с формулой Li₂H₂C₄O₄ и молекулярной массой 127,9 г/моль, внесен в реестр химических соединений (идентификатор CAS №24820-18-6).

Соли лития обладают нормотимическим действием и широко применяются в медицине, в частности, в психиатрии и наркологии [6]. Препараты фумарата (железа фумарат, бисопролол фумарат) также применяются в медицине. В психиатрии и неврологии широкое применение находит кветиапин в форме фумарата (Quetiapine fumarate), который, являясь атипичным антипсихотиком, обладает также нейропротекторным и антиоксидантным действием [7, 8, 9].

При этом в патентной и научно-медицинской литературе не обнаружено указаний на применение фумарата лития для повышения устойчивости эритроцитов к гемолизу при действии этанола.

Фумарат лития впервые применен в качестве средства, повышающего устойчивость эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом. Новое свойство фумарата лития не вытекает из уровня техники в данной области и не очевидно для специалиста.

Вновь выявленное гемопротекторное действие фумарата лития может быть использовано в лабораторной практике, в экспериментальных исследованиях, при работе с клеточными культурами; сочетание с известным психостабилизирующим эффектом лития делает фумарат лития перспективным при разработке новых лекарственных средств комбинированного нормотимического и гемопротекторного действия для применения в наркологии и психиатрии.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

Применение фумарата лития для повышения устойчивости эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом, осуществляют следующим образом.

Пример 1. Эритроциты гепаринизированной венозной крови трижды отмывают физиологическим раствором методом центрифугирования, супернатант максимально удаляют. Эритроциты вносят в ряд пробирок, содержащих этанол, фумарат лития или препарат сравнения аскорбат лития, разведенных в физиологическом растворе. В инкубационной смеси конечное разведение осадка эритроцитов - 1:10; концентрация этанола - 11%, фумарата лития или препарата сравнения аскорбата лития - 1,2 ммоль/л в расчете на ион лития (Li+). К каждому образцу эритроцитов (опыт) ставят контрольные пробы (контроль), в которые вместо раствора солей лития вносят равный объем физиологического раствора. Смесь инкубируют при 37°С в течение 2,5 час. После инкубации пробы центрифугируют, оптическую плотность супернатанта определяют на спектрофотометре при длине волны 450 нм. Величину гемолиза эритроцитов в опытных пробах выражают в процентах по отношению оптической плотности их супернатанта к оптической плотности супернатанта контрольных проб, принятой за 100%.

Предлагаемый способ применили для повышения устойчивости к гемолизу эритроцитов, взятых у 19 мужчин, поступивших в клинику НИИ психического здоровья Томского НИМЦ с диагнозом «Психические и поведенческие расстройства в результате употребления алкоголя», синдром зависимости (F10.21) и синдром отмены (F10.30). Результаты представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы, фумарат лития, как и препарат сравнения аскорбат лития, значительно повышает устойчивость эритроцитов к действию этанола, снижая уровень гемолиза по отношению к контрольным пробам (инкубация с физиологическим раствором), величина гемолиза в которых принята за 100%. При этом, различие между средними значениями показателей гемолиза в пробах с солями лития статистически недостоверно.

Таким образом, фумарат лития в концентрации 1,2 ммоль/л в расчете на ион лития (что соответствует терапевтической дозе при применении солей лития в медицинской практике), обладает выраженной способностью к повышению гемолитической устойчивости эритроцитов крови больных алкоголизмом, сопоставимой с препаратом сравнения аскорбатом лития, и снижает гемолиз, индуцированный этанолом, в 1,5 раза. Фумарат лития расширяет арсенал гемопротекторных средств, а сочетание с нормотимическим действием лития повышает перспективы его применения в наркологии и психиатрии.

Литература.

1. Бохан Н. А., Прокопьева В. Д. Молекулярные механизмы влияния этанола и его метаболитов на эритроциты in vitro и in vivo / Н.А. Бохан, В.Д. Прокопьева - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2004.- 166 с.https://elibrary.ru/item.asp?id=19226655

2. Maturu P., Vaddi D.R., Pannuru P., Nallanchakravarthula V. Modification of erythrocyte membrane proteins, enzymes and transport mechanisms in chronic alcoholics: an in vivo and in vitro study. Alcohol Alcohol, 2013, Vol. 48 (6), pp. 679-86. doi: 10.1177/0960327111432504

3. Ветлугина Т. П., Жилов В. X. Способ повышения устойчивости эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом. Патент (ru) №2315605 С2.

4. Балашов П. П. Плотников В. М. Расташанский В. В. Средство, обладающее гематопротекторным действием. Патент (ru) №2351326 С2.

5. Ветлугина Т. П., Плотников Е. В., Никитина В. Б., Лобачева О. А., Савочкина Д.Н., Радионова Т. С, Плотников В. М., Бохан Н. А. Исследование гемопротекторной активности аскорбата лития // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2016. - №4 (часть 2) - С. 368-370. https://elibrary.ru/item.asp?id=25724414

6. Машковский М. Д. Лекарственные средства.- 15-е изд.- М.: Новая Волна, 2005. - С. 109-111, 763. - 1200 с. - ISBN 5-7864-0203-7.

7. Мосолов С.Н. Новый атипичный антипсихотик сероквель (кветиапина фумарат). Москва, 2000. 48 с. https://elibrary.ru/item.asp?id=26518876

8. Bauer М, L, Kasper S, Pitchot W, Dencker Vansvik E, J, L, Montgomery SA. Extended-release quetiapine fumarate (quetiapine XR) monotherapy and quetiapine XR or lithium as add-on to antidepressants in patients with treatment-resistant major depressive disorder. J Affect Disord. 2013 Oct; 151 (l): 209-19. doi: 10.1016/j.jad.2013.05.079. Epub 2013 Jun 27.

9. Zhornitsky S, Wee Yong V, Koch MW, Mackie A, Potvin S, Patten SB, Metz LM. Quetiapine fumarate for the treatment of multiple sclerosis: focus on myelin repair. CNS Neurosci Ther. 2013 Oct; 19 (10): 737-44. doi: 10.1111/cns.12154. Epub 2013 Jul 22.