Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СУБСТАНЦИЙ ИЗ ЗМЕЕГОЛОВНИКА МОЛДАВСКОГО (Dracocephalum moldavica L.)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности, к способу получения лекарственных субстанций змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.) для создания средства, обладающего активирующим, тонизирующим действием на сердечно-сосудистую и нервную системы, и средства обладающего противовоспалительным действием.

Змееголовник молдавский (Dracocephalum moldavica L.) семейства яснотковых (Lamiaceae), интродуцированного на территории филиалов ФГБНУ ВИЛАР Российской федерации. Его культивируют как эфирномасличное растение на Украине, в Болгарии и Румынии. Кроме того в последнее время культивируют на юге России. Компоненты, входящие в состав змееголовника молдавского, являются биологически активными веществами и обуславливают лечебный эффект. Установлена антибактериальная активность эфирного масла и спиртовых извлечений из травы змееголовника молдавского, а также наличие у спиртовых извлечений отхаркивающего, диуретического и седативного действий. Его используют в парфюмерии, косметологии и кулинарии [1]. В традиционной медицине применяют растение в виде чаев, настоев, а также диэтических добавок в сочетании с другими компонентами [2].

Растения рода змееголовника с древних времен использовали в Китайской народной Уйгурской медицине для лечения болезней сердца (учащенное сердцебиение, ишемическая болезнь сердца), артериальной гипертензии, трахеитов, атеросклероза, невралгии, мигрени, головной и зубной боли.

В мировой литературе широко освещены исследования химического состава экстрактов из надземной части змееголовника молдавского [3-6]. В траве растения содержатся флавоноиды, эфирное масло, фенолокислоты, таннины и другие вещества. Особое значение в литературных данных уделено розмариновой кислоте (эфир кофейной кислоты и 3,4-дигидроксифенилмолочной кислоты), обладающая широким спектром лечебно-профилактических эффектов: антиоксидантной, гепатопротекторной, кардиопротекторной, нефропротекторной, иммуномодулирующей, антиаллергической и противоопухолевой активностями. Кислота ингибирует активность ацетилхолинэстеразы, глутатионредуктазы, снижает генотоксическое и цитотоксическое действие ионизирующей радиации [7].

В качестве прототипа выбран способ получения суммарного экстракта флавоноидов флавоного типа из змееголовника молдавского с выходом 50% от содержания в сырье, который заключается в обработке измельченного сырья этиловым спиртом, разбавления экстракта водой, пропускании через колонку с микропористой смолой или полиамидом, промывании водой и водным спиртом, отбора фракции целевых соединений, фильтровании, упаривании и далее для производства средств лечения атеросклероза, сердечных заболеваний, ангины, а также их содержащих комплексных фармацевтических формах (таблетках, гранулах, порошках, настойках, капсулах и др.), который принят нами за прототип [CN 101537039 A]. Недостатки прототипа длительность процесса и трудоемкость выделения.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка из травы змееголовника молдавского, заготовленной в фазу цветения и бутонизации способа получения сухого очищенного экстракта с содержанием фенольных соединений (флавоноидов флавоного типа и фенилпропаноидов) в пересчете на розмариновую кислоту обеспечивающего нейротропную активность, а также средства из змееголовника молдавского с содержанием полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин, обладающего достоверным противовоспалительным эффектом, угнетая экссудативный и альтернативный компоненты патогенеза острого воспаления.

Технический результат изобретения предлагаемого изобретения является получения из травы змееголовника молдавского, заготовленной в фазу цветения и бутонизации, двух продуктов: а) средства Розматин, обеспечивающего нейротропную активность с содержанием фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту, а также б) средства Люкатил, обладающего достоверным противовоспалительным эффектом и угнетающего экссудативный и альтернативный компоненты патогенеза острого воспаления, с содержанием полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин. Новый способ позволяет получить высокий выход целевого продукта.

Техническая сущность предлагаемого решения заключается в использовании способа получения экстракта флавоноидов змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.), заключающегося в экстракции высушенного и измельченного сырья этиловым спиртом 80-95%, разбавлении полученного экстракта водой, с последующей фильтрацией осадка, промывки водой и водным спиртом, отбора фракций целевых соединений, фильтровании, упаривании и в производстве готового средства. При этом трижды экстрагируют подготовленное сырье 50-ти % водным раствором этиловым спиртом при соотношении сырье : экстрагент равном 1:10 при комнатной температуре при подаче на каждую последующую экстракцию свежий экстрагент, равный слитому извлечению, полученные экстракты упаривают последовательно по мере поступления до объема до 1/20, водные кубовые концентраты объединяют и обрабатывают три раза хлороформом в соотношении хлороформ : водная фаза равном (1:2), а водный кубовый остаток переосаждают спиртом этиловым 96% в соотношении 1:10, выпавший осадок отстаивают, дважды промывают спиртом этиловым 96% и фильтруют с последующим высушиванием на воздухе или в вакуум-сушильном шкафу пр температуре 40°С в течение 4 ч, полученный сухой остаток направляют на получение субстанции Люкатила, а упаренный надосадочный водно-спиртовой раствор из предыдущей стадии растворяют при 65°С в дистиллированной воде с добавлением катеонита Ку-2-8-чс(Н⁺) до pH равного 3 и обрабатывают бутанолом, водный слой отделяют, бутанольный экстракт промывают водой дистиллированной дважды, а затем промытый водой бутанольный экстракт отгоняют в виде азеотропы с водой, получают «Розматин», а сухой остаток, направленный на получение Люкатила растворяют в дистиллированной воде с добавлением ацетона в соотношении 1:4 выдерживают в течении 1 часа, фильтруют, полученный фильтрат упаривают и получают сухой очищенный экстракт для изготовления лекарственного средства Люкатила.

Предложенное техническое решение иллюстрируется следующими примерами 1 и 2 получения субстанции и доклиническими опытами 1 и 2.

ПРИМЕР 1. Способ получения Розматина

Исходное сырье: трава змееголовника молдавского, заготовленная в фазу цветения и фазу бутонизации. Измельченное сырье до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,5-5 мм, с влажностью 8,57%, в количестве 200 г загружают в плоскодонную колбу вместимостью 10 л, трижды экстрагируют 50±5% водным этиловым спиртом в соотношении (сырье-экстрагент, 1:10) при комнатной температуре и при постоянном перемешивании в течение 3 часов. На каждую последующую экстракцию подают свежий экстрагент, равный слитому извлечению. Водно-спиртовые извлечения фильтруют на воронке Бюхнера. Получают от первой экстракции 1,530 л водно-спиртового извлечения, от второй экстракции 1,480 л и от третьей экстракции получают 1,490 л водно-спиртовых извлечений. Полученные экстракты упаривают до 1/20 первоначального объема. Упаривание водно-спиртовых извлечений проводят последовательно по мере поступления. Водные кубовые концентраты объединяют, получают водный кубовый остаток в количестве 240 мл с плотностью 1,113 г/см³ и обрабатывают 3 раза хлороформом в соотношении хлороформ : водная фаза (1:2). Органическую фазу отделяют, а остатки органического растворителя из водной фазы удаляют в вакууме. Водный кубовый остаток переосаждают из спирта этилового 96% в соотношении 1:10 для дальнейшей очистки.

Для этого в колбу плоскодонную вместимостью 5,0 л вливают 2,4 л спирта этилового 96%, туда же при интенсивном перемешивании порциями добавляют водный кубовый остаток из предыдущей стадии в количестве 240 мл (соотношение водный кубовый остаток: спирт этиловый 96% (1:10). Выпавший песочно-бежевый осадок отстаивают в течение 30 минут, затем надосадочный водно-спиртовый раствор фильтруют декантацией через фильтр Шотта №3. Осадок уплотняется и остается на дне колбы. При размешивании добавляют 250 мл спирта этилового 96% и дважды промывают и фильтруют через фильтр Шотта №3. Спирт от промывки осадка присоединяют в основному фильтрату. Надосадочный водно-спиртовый раствор имеет прозрачный коричневый цвет, вес упаренного надосадочного раствора 29,31 г.

Промытый осадок весом 63,64 г. высушивают на воздухе в течение двух дней или вакуум-сушильном шкафу при температуре 40°С в течение четырех часов. Полученную массу сухого осадка 34,02 г. передают на производство субстанции «Люкатил». (см. пример 2).

Упаренный надосадочный водно-спиртовый раствор из предыдущей стадии в количестве 29,31 г растворяют в 160 мл дистиллированной воды (на водяной бане при температуре 65°С. В водный раствор добавляют 30 г катионита Ку-2-8-чс (Н⁺) до кислой реакции раствора рН равного 3, фильтруют через фильтр ПОР 40 или ПОР 100.

Полученный кислый маточный раствор экстрагируют н-бутанолом, насыщенным водой, 3 раза в соотношении 1:2. Водно-органическая фаза легко расслаивается. Бутанольную фазу промывают дважды дистиллированной водой в соотношении 1:1. Далее бутанол отгоняют в виде азеотропы с водой в вакууме при 60-70°С, причем на 100 мл экстракта расходуется 50 мл воды. Получают 4.6 г субстанции «Розматин», выход готового продукта 2,51%, что составляет выход субстанции 33,15% от начала процесса с содержанием полифенолов в пересчете на розмариновую кислоту 60,9%.

Применение катионита КУ-2 с последующей обработкой кислого маточного раствора бутиловым спиртом позволяют вывести углеводы, которые сокращают сроки хранения субстанции Розматина.

Полученная субстанция Розматина представляет собой сухой очищенный экстракт, содержащий в качестве доминирующего компонента розмариновую, а также кофейную кислоты флавоноидов флавоного типа: гликозид тилианин, цинарозид, лютеолин, апигенин. Розматин используют для приготовления лекарственной формы (таблеток, спреев, настоек, капсул).

ПРИМЕР 2. Способ получения Люкатила

Высушенный осадок в количестве 34,02 г (33.83 г) из примера 1 передают на производство субстанции Люкатила. Осадок в количестве 34,02 г растворяют в 200 мл воды дистиллированной и вливают в 800 мл ацетона небольшим порциями при энергичном перемешивании. При стоянии в течение 1 ч на дне и на стенках колбы выпадает смолистый темно-коричневый осадок, надосадочный водно-ацетоновый раствор фильтруют через стеклянный фильтр ШОТТА 40, декантируя реакционную смесь со смолистого осадка. Полученный фильтрат упаривают в вакууме. Получают сухой очищенный экстракт Люкатила в количестве 4,86 г с с содержанием суммы фенольных соединений в пересчете на катехин 76,88%. Выход субстанции Люкатила 2,43%, что составляет выход от начала процесса 41,82%. В полученной субстанции Люкатила (сухой очищенный экстракт) преобладают конденсированные дубильные вещества, а также присутствуют кофейная, хлорогеновая кислоты, флавоноиды флавоного типа: апигенин, цинарозид, гиперозид.

Таким образом, предлагаемый способ получения отличается тем, что в одном технологическом процессе совмещен способ получения двух препаратов Розматина и Люкатила из змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.).

Полученная субстанция Розматина представляет собой сухой очищенный экстракт, содержащий доминирующего компонента розмариновую, а также кофейную кислоты флавоноидов флавоного типа, гликозид тилианин, цинарозид, лютеолин, апигенин. Полученная субстанция Люкатил - сухой очищенный экстракт, хорошо растворимый в воде, конденсированные дубильные вещества, а также присутствуют кофейная, хлорогеновая кислоты, флавоноиды флавоного типа: апигенин, цинарозид, гиперозид.

ОПЫТ 1. Изучение нейротропной активности и влияния на показатели сердечно-сосудистой системы Розматина

На исследование был представлен сухой очищенный экстракт Розматина из змееголовника молдавского.

Изучено влияния курсового введения Розматина в дозах 10 и 100 мг/кг на показатели деятельности сердечно-сосудистой системы (частоту сердечных сокращений, систолическое и диастолическое артериальное давление) и нервной системы (в тестах по изучению спонтанной двигательной активности и влиянию на параметры хлоралгидратного сна) мышей.

Методы исследования

Опыты проводили на белых нелинейных мышах массой 18-22 г в количестве 32 особей. Мышей содержали в условиях вивария ФГБНУ ВИЛАР на стандартном рационе. Лабораторные животные были разделены на четыре группы по 8 особей: первая - контрольные животные, вторая, третья и четвертая группы - опытные. Вторая и третья опытные группы мышей получали исследуемое вещество Розматин, четвертая группа получала препарат сравнения валерианы экстракт (таблетки, содержащие 20 мг густого экстракта валерианы) в дозе 100 мг/кг. Все вещества растворяли в 1% крахмальной взвеси и вводили внутрижелудочно в течение 4-5 дней, контрольные животные получали эквивалентный объем 1% крахмального клейстера.

На 4-й день эксперимента через 30 минут после внутрижелудочного введения веществ и 1% крахмальной взвеси проводили изучение в динамике спонтанной двигательной активности мышей по стандартной методике, используя актометр фирмы Ugo Basile (Италия) с автоматической регистрацией. В ходе опыта мышей помещали по четыре особи в каждую из двух камер прибора на пять минут для изучения спонтанной двигательной активности в динамике в течение двух часов: через 30, 60, 90 и 120 минут.

В этот же день у животных измеряли частоту сердечных сокращений, систолическое и диастолическое артериальное давление с использованием аппаратно-программных комплексов «Систола» и «Флогистон» (производитель ООО «Нейроботикс», г. Москва). Перед измерением артериального давления мышей помещали в контейнеры-ограничители на 30 минут, подогревая до 37°С на нагревательной платформе «Флогистон». Система неинвазивного измерения кровяного давления у лабораторных животных «Систола» с помощью встроенной электрической воздушной помпы автоматически нагнетает под давлением воздух в хвостовую манжету до прекращения пульсаций кровотока, а затем, медленно снижая в манжете давление, автоматически измеряет систолическое и рассчитывает диастолическое давление на основе показаний инфракрасного датчика пульса, одеваемого на хвост животного после манжеты. Система «Флогистон» предназначена для поддержания заданной температуры при подогреве мелких лабораторных животных. Подогрев мышей необходим для корректного проведения измерения давления, так как нагревание обеспечивает стабильную, с достаточным объемом, циркуляцию крови в хвосте.

На 5-й день эксперимента проводили изучение влияния Розматина на параметры сна, вызванного «корковым снотворным анализатором» хлоралгидратом. Раствор хлоралгидрата готовили непосредственно перед употреблением на физиологическом растворе хлорида натрия 0,9%. Вводили хлоралгидрат внутрибрюшинно в дозе 350 мг/кг контрольным и опытным группам мышей через 30 минут после внутрижелудочного введения 1% крахмальной взвеси и изучаемого образца Розматина и препарата сравнения экстракта валерианы в дозе 100 мг/кг, соответственно. Время засыпания отмечали по боковому положению животных, время пробуждения фиксировали по принятию животными обычной позы при открытых глазах и груминге. Период наблюдения продолжительности сна составлял 4 часа.

Результаты изучения влияния курсового введения Розматина на спонтанную двигательную активность мышей в динамике представлены в таблице 1.

1. Как видно из таблицы 1, исследуемый образец Розматина в дозе 10 мг/кг достоверно усиливает спонтанную двигательную активность мышей - в 1,72 раза по сравнению с группой контроля - через 2 часа после начала тестирования.

Действие препарата сравнения - таблеток экстракта валерианы в дозе 100 мг/кг характеризовалось достоверным (на 60-й минуте) снижением спонтанной двигательной активности мышей на 44% по сравнению с контрольными животными.

В таблице 2 приведены результаты влияния курсового введения образца Розматина в дозах 10 и 100 мг/кг на показатели сердечно-сосудистой системы мышей: на систолическое, диастолическое и пульсовое артериальное давление (АД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС).

Как видно из таблицы 2, после курсового введения Розматина в дозах 10 и 100 мг/кг наблюдалось достоверное повышение систолического (на 13% и 11%, соответственно) и пульсового (на 36% и 31%, соответственно) артериального давления у опытных мышей по сравнению с группой контроля, а также регистрировался достоверный положительный хронотропный эффект - учащение сердечных сокращений на 24% и 20%, соответственно, по сравнению с контрольными животными. Препарат сравнения не вызывал каких-либо значимых изменений артериального давления и частоты сокращений сердца у мышей по сравнению с контрольными животными.

В таблице 3 приведены данные о влиянии 5-ти дневного курсового введения Розматина в дозах 10 и 100 мг/кг на параметры сна, вызванного «снотворным анализатором» хлоралгидратом.

Как видно из таблицы 3, курсовое 5-ти дневное введение исследуемого образца Розматина приводило к увеличению продолжительности сна, вызванного «корковым снотворным анализатором» хлоралгидратом, то есть потенцировало корковое торможение и снотворный эффект хлоралгидрата, причем в дозе 100 мг/кг усиление снотворного действия носило достоверный характер (длительность сна увеличилась на 36% по сравнению с контрольными животными). Курсовое введение препарата сравнения - экстракта валерианы в дозе 100 мг/кг в нашем эксперименте сопровождалось менее значительным (на 13% по сравнению с группой контроля) увеличением продолжительности хлоралгидратного сна.

Исследуемый образец Розматина в дозе 100 мг/кг оказывает достоверное фазовое действие на параметры сна, вызванного «корковым снотворным анализатором» хлоралгидратом: после фазы активирующего влияния на центральную нервную систему, характеризующегося увеличением времени засыпания (латентного периода сна) в 1,4 раза по сравнению с группой контроля, затем наблюдалось потенцирование коркового торможения, вызываемого хлоралгидратом, и увеличение общей продолжительности сна в 1,36 раза по сравнению с контрольными животными.

Таким образом, в данном эксперименте был выявлен фазовый характер нейропсихотропной активности исследуемого образца Розматин в дозе 100 мг/кг - после фазы активирующего влияния на центральную нервную систему наблюдалось потенцирование коркового торможения, вызванного хлоралгидратом.

Таким образом, исследуемый образец Розматина обладает активирующим, тонизирующим действием на сердечно-сосудистую и нервную системы.

ОПЫТ 2. Изучение противовоспалительной активности Люкатила

Исследуемый объект: Люкатил из змееголовника молдавского травы экстракта сухого очищенного в дозе 100 мг/кг, 200 мг/кг.

Препараты сравнения. В качестве препаратов сравнения были использованы: нестероидное противовоспалительное средство - индометацин, в дозе 5 мг/кг; Ротокан -известное растительное комплексное противовоспалительное средство, в составе которого экстракты цветков календулы, цветков аптечной ромашки, травы тысячелистника, в дозе 1 мл/кг; лекарственный растительный препарат плантаглюцид, в дозе 250 мг/кг.

Методы исследования

Проведено изучение противовоспалительной активности образца Люкатила на модели острого асептического экссудативного воспаления - модели формалинового отека лап мышей. В эксперименте задействованы белые нелинейные мыши самцы массой 20 г. в количестве 30 особей. Эксперимент проведен в соответствии с правилами лабораторной практики (GLP), приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики». Федеральным законом «О лекарственных средствах» (статья 36), «Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств» (Москва, 2012). Производитель животных - Филиал «Андреевка» ФГБУН «НЦБТ» ФМБА России (Московская область). Животные содержались в виварии ФГБНУ ВИЛАР на стандартном рационе.

Фармакологические свойства экстракта изучены при внутрижелудочном введении в течение 3 дней. Животным на третий день в апоневроз вводилось 0,05 мл 1% формалина. Исследование противовоспалительной активности экстракта проведены в дозе 100 мг/кг при получении его внутрижелудочно в течение трех дней до введения формалина и через 1 час после. Животные разделены на 3 группы по 10 особей. Первая - контрольная группа, со второй по третью - группы опытные. Вторая группа получала экстракт в дозе 100 мг/кг, третья - препарат сравнения ротокан в дозе 1 мл/кг. Контрольным животным вводили в эквивалентном объеме дистиллированную воду. Через три часа на пике воспаления мышей подвергали эвтаназии с помощью углекислого газа и регистрировали прирост объема экссудата ампутированных конечностей (мг).

Проведено также изучение противовоспалительной активности образца Люкатила на модели формалинового отека лап мышей в дозе 200 мг/кг. В эксперименте использовались белые нелинейные мыши в количестве 30 особей, массой 19-20 г. Животным в апоневроз вводили 0,05 мл 1% формалина. Вводили экстракт внутрижелудочно в течение трех дней до введения формалина и через 1 час после. Препаратом референтом являлся индометацин в дозе 5 мг/кг, который так же вводили внутрижелудочно в течение трех дней до введения формалина и через 1 час после. Контрольным животным вводили в эквивалентном объеме дистиллированную воду. Экстракт растворялся в дистиллированной воде, а индометацин - в 1% крахмальном клейстере. Через три часа на пике воспаления животных забивали с помощью углекислого газа и регистрировали прирост объема экссудата ампутированных конечностей мышей (мг).

О развитии отека судили по разнице в массе у контрольных и опытных животных и рассчитывали противоэкссудативный эффект по формуле: % угнетения отека = Рк - Ро/Рк × 100%, где Рк - разность масс лапок с отеком и без отека у животных контрольной группы; Ро - разность масс лапок с отеком и без отека у животных опытной группы.

Исследование противовоспалительной активности Люкатила проводилось также на модели острого альтеративного воспаления слизистой оболочки желудка под действием этанола и формирования острых экспериментальных этаноловых язв желудка. В качестве препарата сравнения использовался лекарственный препарат плантаглюцид в дозе 250 мг/кг. Экспериментальная работа выполнялась на 24 нелинейных белых крысах-самцах. Фармакологические свойства экстракта изучались при его внутрижелудочном введении крысам в течение трех дней в дозах 100 мг/кг и 200 мг/кг. Плантаглюцид вводился также в течение трех дней. Все препараты растворялись в дистиллированной воде. Для воспроизведения патологического состояния - повреждения слизистой оболочки желудка использовалось однократное введение крысам этанола 95-96% в дозе 1,0 мл/крысу с последующим забоем крыс через 1 час после введения этанола.

После эвтаназии крыс в CO₂ камере желудок и двенадцатиперстную кишку извлекали, разрезали и промывали в физиологическом растворе. Затем при помощи микроскопа бинокулярного стереоскопического МБС-10 (увеличение ×8, с миллиметровой шкалой) производили подсчет количества и площади язвенных поражений слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки, вычисляли Индекс Паулса (ИП) и терапевтический эффект (ТЭ). Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ статистического анализа, достоверность различий между группами оценивали по критерию Манна-Уитни.

Результаты эксперимента представлены в таблице 4 (Влияние образца Люкатила на течение экссудативной фазы воспаления у мышей при трехдневном введении), в таблице 5 (изучение противовоспалительного эффекта), в таблице 6 (Влияние ротокана на течение экссудативной фазы воспаления у мышей при трехдневном введении), в таблице 7 (Влияние Люкатила и плантаглюцида на процесс формирования экспериментальных язв желудка крыс, вызванных введением этанола).

Как видно из таблицы 4, образец Люкатила в дозе 100 мг/кг при трехдневном введении обладает достоверным противовоспалительным эффектом. Он подавляет развитие экссудативной фазы воспаления, вызванной формалином на 28,6%, по сравнению с контрольной группой животных. Ротокан подавляет развитие экссудативной фазы воспаления на 15% (таблица 6).

Образец Люкатила в дозе 200 мг/кг при трехдневном введении обладает достоверным противовоспалительным эффектом. Он подавляет развитие экссудативной фазы воспаления, вызванной формалином, на 33,7%, по сравнению с контрольной группой животных, но уступает противовоспалительному эффекту индометацина (таблица №5). В условиях моделирования экспериментальных этаноловых язв желудка при введении Люкатила в дозе 100 мг/кг выявлено уменьшение тяжести альтеративного воспаления слизистой оболочки желудка, вызванного этанолом, проявляющееся в виде сокращения площади язвенных дефектов на 23,5%, ТЭ=1,3 (p<0,05 по сравнению с контролем). При увеличении дозы экстракта до 200 мг/кг площадь язвенных дефектов сокращается на 86,16%, ТЭ=7,2 (p<0,05 по сравнению с контролем), т.е. проявляется выраженный дозозависимый эффект экстракта змееголовника молдавского. При введении препарата референта плантаглюцида в дозе 250 мг/кг площадь язвенных дефектов сокращалась на 36,51%, ТЭ=1,57 (таблица №7).

Проведенные фармакологические исследования показали, что образец «Люкатил» из змееголовника молдавского травы экстракта сухого очищенного обладает достоверным противовоспалительным эффектом, угнетая экссудативный и альтеративный компоненты патогенеза острого воспаления.

Список литературы

1 Никитина А.С.«Фармакогностическое изучение змееголовника молдавского {Dracocephalum moldavica L.) и иссопа лекарственного (Hissopus officinalis L.) с целью обоснования применения в медицине» // Автореферат диссертации, к.ф.н., 2005.

2 (Попова О.И., Никитина А.С. «Змееголовник Молдавский и иссоп лекарственный, Взгляд на растения // змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.)», Монография. Волгоград. ВолгГМУ, 2014, 117 стр.).

3 К Dastmalchi, H.J.D Dorman, , R Hiltunena. Chemical composition and in vitro antioxidant evaluation of a water-soluble Moldavian balm (Dracocephalum moldavica L.) extract/LWT - Food Science and TechnologyVolume 40, Issue 2, March 2007, Pages 239-248

4 K Dastmalchi, H.J.D Dorman, I Laakso, R Hiltunen. Chemical composition and antioxidative activity of Moldavian balm (Dracocephalum moldavica L.) extracts/LWT - Food Science and Technology, Volume 40, Issue 9, November 2007, Pages 1655-1663

5 A. Sultan, Bahang, H.A. Aisa, K.A. Eshbakova. Flavonoids from Dracocephalum moldavica/Chemistry of Natural Compounds, May 2008, Volume 44, Issue 3, pp 366-367

6 Gu HF, Chen RY, Sun YH, Liu F. Studies on chemical constituents from herb of Dracocephalum moldavica/Zhongguo zhongyao zazhi, 2014

7 , R.Estrada-Reyes, , Rubalcava, G.Heinze. Neuropharmacological study of Dracocephalum moldavica L. (Lamiaceae) in mice: Sedative effect and chemical analysis of an aqueous extract/Journal of Ethnopharmacology, Volume 141, Issue 3, 14 June 2012, Pages 908-917

* - достоверность опытных показателей по критерию Манна-Уитни p≤0,05

* - достоверность опытных показателей по критерию Манна-Уитни p≤0,05

* - достоверность опытных показателей по критерию Манна-Уитни p≤0,05

Примечание: *- различия статистически достоверны по сравнению с контролем при p≤0,5.

Примечание: *- различия статистически достоверны по сравнению с контролем при p≤0,5.

Примечание: * - различия статистически достоверны по сравнению с контролем при p≤0,5

Примечание: * - различия статистически достоверны по сравнению с контролем при p≤0,5.