×
17.07.2019
219.017.b5dc

Результат интеллектуальной деятельности: ШТАММ Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм бактерий Pseudomonas deceptionensis ARC 44, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов, депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-13090. Штамм бактерий Pseudomonas deceptionensis ВКПМ В-13090 позволяет повысить степень очистки акваторий водоемов, береговой линии от загрязнений нефтью и нефтепродуктами при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30±10 г/л в условиях, бедных по питательным веществам. 3 пр.

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой новый бактериальный штамм Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30 г/л.

Уровень техники

Известен штамм Rhodococcus sp. - деструктор нефтяных углеводородов (патент РФ №2518349, приоритет 11.04.2013, опубл. 10.06.2014.), который утилизирует нефть, мазут, керосин, нафталин, пентадекан, тетрадекан, гексадецен, фенилдекан, пристан уже на 5 день при 20-30°С. Данный штамм показал высокую степень деструкции углеводородов при температуре +30°С. Однако данный штамм не способен производить утилизацию углеводородов при низких температурах.

Известен штамм Pseudomonas alcaligenes В-1 (патент РФ 2133770, приоритет 25.03.1998, опубл. 27.07.1999), обладающий способностью быстро утилизировать нефть, дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат. Недостатком данного штамма также является то, что он не утилизирует нефтезагрязнения при низких температурах.

Известен штамм Bacillus subtilis «Колыма-7/2к» (патент РФ 2446900, 2010-07-13, опубл. 10.04.2012), который может быть использован в условиях Крайнего Севера. Применение такого микробного препарата позволяет за 3 месяца летнего периода снизить концентрацию нефти до 0,48%. Недостатком данного штамма является то, что он утилизирует углеводороды в условиях почвы.

Известен штамм Exiguobacterium mexicanum ВКПМ В-11011 (патент РФ №2523584, приоритет 2013-03-27, опубл. 20.07.2014). Штамм может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +4 до +37°С. Также исвестен штамм Serratia plymuthica VKM B-2819D (патент РФ №2560272, 2014-09-22, опубл. 2015-08-20), обладающий способностью быстро утилизировать нефть и нефтепродукты (дизельное топливо, масло моторное, масло гидравлическое, газовый конденсат), может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +4 до +30°С. Недостатком штаммов является то, что они не способны утилизировать нефтезагрязнения при высокой солености воды до 30 г/л.

Наиболее близким аналогом является штамм Rhodococcus erythropolis депонирован под регистрационным номером ВКМ Ac-2613D (патент РФ 2553336 20.08.2013 опул. 10.06.2015). Штамм используется для очистки пресноводных, солоноватоводных и морских объектов и донных отложений. Микроорганизм обеспечивает деструкцию нефти в водных объектах при температуре от +2 до +25°С и солености до 2,7%. Недостатком изобретения является то, что штамм утилизирует углеводороды в условиях богатых по питательным веществам (в состав среды входит пептон 5 г/л и сахароза 15 г/л). В реальных условиях утилизации углеводородных загрязнений количество питательных веществ значительно снижены.

Раскрытие изобретения

Задачей настоящего изобретения является получение бактериального штамма, способного осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30 г/л в условиях, бедных по питательным веществам.

Поставленная задача решается тем, что получен штамм Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов, который может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30 г/л в условиях, бедных по питательным веществам.

Штамм выделен из прибрежной зоны западного берега полуострова Ямал в октябре 2015 года. Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика (ВКПМ, Москва, 1-й Дорожный пр., д. 1) под регистрационным номером ВКПМ В-13090.

Идентификация штамма была осуществлена на основании изучения его культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик, а также на основании изучения последовательности гена 16S рРНК.

Полученный штамм характеризуется следующими признаками.

Культурально-морфологические признаки.

Колонии бесцветные, блестящие, гладкие, круглые, каплевидные, размером 1-4 мм, с однородной структурой, ровным краем, мягкой консистенции. Клетки представляют собой небольшие подвижные палочки длинной 0,8-2 мкм. Окраска по Граму отрицательная.

Физиолого-биохимические признаки

Штамм растет при температуре от +20 до -2,5°С, в аэробных условиях. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30±10 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.

Штамм поддерживается пересевами 1 раз в 14 дней на плотной питательной среде modPCA следующего состава (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; агар - 14; рН 7,0 или жидкой питательной среде №1 следующего состава: K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,1; рН 7,0. В жидкой питательной среде в качестве углеводородного субстрата использовали смесь товарной нефти Возейского месторождения (плотность 37,9° API, сернистость 0,66%, характеризуется как тяжелая, вязкая, с высоким содержанием смол и асфальтенов) и дизельного топлива в соотношении 1:1 по объему.

Также штамм может храниться при +6±2°С в лиофилизированном состоянии с использованием сухого обезжиренного молока в качестве защитной среды.

Для приготовления препарата к культуре микроорганизмов можно добавить питательный премикс на основе различных органических компонентов в различных соотношениях (таких как сухое обезжиренное молоко, мука различных растительных культур, молочная сыворотка, меласса и т.п.), неорганические вещества, стимулирующие микробный рост - в первую очередь содержащие такие макроэлементы как азот и фосфор, железо и пр. (различные копмлексные минеральные удобрения). Кроме того, в сухой форме препарат содержит защитные среды, использующиеся для увеличения выживаемости микроорганизмов при сушке, например растворы сахаров, сложные среды, такие как раствор сухого обезжиренного молока, сухие протеины и другие.

Осуществление изобретения

Настоящее изобретение поясняется конкретными примерами выполнения, которые не являются единственно возможным, но наглядно демонстрирует возможность достижения требуемого технического результата.

Пример 1. Выделение и культивирование штамма Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090.

Штамм выделен из образцов грунта и морской воды береговой линии западного берега полуострова Ямал в октябре 2015 года. Образец массой 5±2 г вносили в 100 мл питательной среды №1. Культивирование проводили при температуре +4°С, на орбитальном шейкере (130 об/мин). Время культивирования 7 суток. Полученную накопительную культуру вносили в количестве 10 мл в 100 мл питательной среды №1. Было проведено не менее 30 пассажей накопительной культуры. Выделение штамма из накопительной культуры проводили на среде modPCA, полученную чистую культуру далее культивировали на среде №1.

Пример 2. Исследование нефтеокисляющей активности штамма Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090.

Штамм, выращенный на жидкой питательной среде №1, вносили в качестве инокулята в 100 мл питательной среды №1. В качестве контроля была использована питательная среда без добавления культуры. После проведения культивирования при температуре -2,5°С, 130 об./мин в течение 30 суток проводилась экстракция углеводородов гексаном согласно ГОСТ 31953-2012, хроматографическая оценка убыли углеводородов проводилась на на хроматографе Кристалл 2000 м (Хроматэк) с капиллярной колонкой DB-1 (Agilent) [длина - 30 м, диаметр - 0,25 мм, толщина слоя - 0,25 мкм] с пламенно-ионизационным детектором (ПИД). Температура детектора - 350°С; температура испарителя - 300°С; газ-носитель - гелий; поток газа - 1,0 мл/мин; расход газа - 20,0 мл/мин; расход водорода - 20 мл/мин; расход воздуха - 200 мл/мин. Измерения проводят в условиях температурного градиента от 100 до 300°С со скоростью градиента 15,0°С/мин.

Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 30% за 7 суток культивирования при -2,5°С и солености среды 30 г/л.

Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 30% за 30 суток культивирования при -2,5°С и солености среды 40 г/л.

Пример 3. Способ производства препарата на основе штамма Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090.

Штамм Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090, выращенный на среде modPCA при температуре +4°С в течение 7 суток, вносят в жидкую питательную среду следующего состава (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; рН 7,0. Далее культивируют при температуре +10°С на орбитальном шейкере в течение 3 суток до конечного титра 109 КОЕ/мл. В полученную суспензию клеток в питательной среде вносят защитную среду (сухое обезжиренное молоко в количестве 10%). Далее полученную жидкую биомассу замораживают и обезвоживают методом лиофилизации. Полученную сухую биомассу штамма Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090 смешивают с питательным премиксом (сухое обезжиренное молоко) в соотношении 1:10.

Таким образом, получен штамм, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре -2,5°С и солености 30±10 г/л в условиях, бедных по питательным веществам.

Штамм Pseudomonas deceptionensis ARC 44 ВКПМ В-13090 для деструкции нефти и нефтепродуктов в водной среде при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30±10 г/л в условиях, бедных по питательным веществам.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 31-38 of 38 items.
13.09.2019
№219.017.ca97

Штамм pseudoalteromonas prydzensis arc 46 вкпм в-13104 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Pseudoalteromonas prydzensis ARC 46, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Pseudoalteromonas prydzensis депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699987
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.ca9f

Штамм marinomonas rhizoma arc 45 вкпм в-13091 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Marinomonas rhizoma ARC 45, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-13091. Штамм...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699988
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.caa5

Штамм psychrobacter cryohalolentis arc 36 вкпм в-13082 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Psychrobacter cryohalolentis ARC 36, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Psychrobacter cryohalolentis депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699962
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.cab5

Штамм psychrobacter cibarius arc 35 вкпм в-13081 деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Psychrobacter cibarius ARC 35, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Psychrobacter cibarius депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699977
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.cab8

Штамм arthrobacter psychrochitiniphilus arc 42 вкпм ас-2076 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Arthrobacter psychrochitiniphilus ARC 42, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов и депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699990
Дата охранного документа: 11.09.2019
02.10.2019
№219.017.cfc8

Штамм yarrowia lipolytica arc 49 вкпм y-4348 деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм Yarrowia lipolytica ARC 49, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм Yarrowia lipolytica депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ Y-4348 и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700078
Дата охранного документа: 12.09.2019
17.10.2019
№219.017.d622

Штамм pseudoalteromonas arctica для деструкции нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов штамм Pseudoalteromonas arctica. Штамм депонирован под регистрационным номером ВКПМ В-13085. Изобретение обеспечивает очистку акваторий водоемов, береговой линии от нефти и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002703142
Дата охранного документа: 15.10.2019
14.12.2019
№219.017.ed94

Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды. Предложен микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30±10 г/л. Препарат содержит биомассу психроактивных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002708959
Дата охранного документа: 12.12.2019
Showing 31-40 of 44 items.
16.08.2019
№219.017.c042

Штамм pseudoalteromonas nigrifaciens для деструкции нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен штамм Pseudoalteromonas nigrifaciens, депонированный под номером ВКПМ В-13087 и обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов в водной среде. Изобретение обеспечивает очистку водной среды от нефти и нефтепродуктов при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002697380
Дата охранного документа: 13.08.2019
16.08.2019
№219.017.c09a

Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде при температуре от +20 до -2,5°С, солености 30±10 г/л. Препарат содержит не менее 10 КОЕ на 1 мл суспензии или 1 г сухого порошка биомассы психроактивных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002697317
Дата охранного документа: 13.08.2019
16.08.2019
№219.017.c0c5

Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде при температуре от +20 до -2,5°С, солености 30±10 г/л. Препарат содержит не менее 10 КОЕ на 1 мл суспензии или 1 г сухого порошка биомассы психроактивных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002697381
Дата охранного документа: 13.08.2019
13.09.2019
№219.017.ca96

Штамм yarrowia lipolytica arc 48 вкпм y-4347 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм Yarrowia lipolytica ARC 48, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм Yarrowia lipolytica депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699984
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.ca97

Штамм pseudoalteromonas prydzensis arc 46 вкпм в-13104 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Pseudoalteromonas prydzensis ARC 46, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Pseudoalteromonas prydzensis депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699987
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.ca9f

Штамм marinomonas rhizoma arc 45 вкпм в-13091 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Marinomonas rhizoma ARC 45, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-13091. Штамм...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699988
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.caa5

Штамм psychrobacter cryohalolentis arc 36 вкпм в-13082 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Psychrobacter cryohalolentis ARC 36, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Psychrobacter cryohalolentis депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699962
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.cab5

Штамм psychrobacter cibarius arc 35 вкпм в-13081 деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Psychrobacter cibarius ARC 35, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий Psychrobacter cibarius депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699977
Дата охранного документа: 12.09.2019
13.09.2019
№219.017.cab8

Штамм arthrobacter psychrochitiniphilus arc 42 вкпм ас-2076 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм бактерий Arthrobacter psychrochitiniphilus ARC 42, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов и депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699990
Дата охранного документа: 11.09.2019
02.10.2019
№219.017.cfc8

Штамм yarrowia lipolytica arc 49 вкпм y-4348 деструктор нефти и нефтепродуктов

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Предложен штамм Yarrowia lipolytica ARC 49, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм Yarrowia lipolytica депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ Y-4348 и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700078
Дата охранного документа: 12.09.2019
+ добавить свой РИД