Результат интеллектуальной деятельности: Способ лечения хронического мастита у коров с помощью медицинских пиявок

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарной медицине, а именно способу лечения хронического мастита у коров, с помощью пиявочного секрета слюнных желез медицинских пиявок.

В настоящее время гирудотерапия все чаще применяется в ветеринарии, как метод коррекции воспалительных процессов, нарушения микроциркуляции и пр. Ферменты слюны пиявки оказывают противовоспалительное, анальгезирующее действие, активизируют иммунную систему. Пиявочный секрет обладает регенерирующим и антиоксидантным действием, выраженным антикоагулянтными (противосвертывающими и разжижающими кровь) свойствами, улучшает микроциркуляцию крови.

Известен способ (Патент РФ №2157696) лечения скрытого мастита у коров путем введения в пораженную долю вымени биологически активных веществ - секрет слюнных желез медицинских пиявок, введение осуществляют в течении 3х дней с интервалом 24 ч в любое время суток путем подсаживания на кожу пораженной доли вымени трех медицинских пиявок, которые через 25-30 мин самопроизвольно отпадают. Способ реализуется следующим образом:

При подтверждении диагноза на скрытый мастит волос на пораженной доле вымени выбривался, кожа промывалась теплой водой, а затем дезинфицировалась 70° спиртом. В случае низкой температуры в животноводческом помещении кожа пораженной скрытым маститом доли вымени в течение нескольких минут согревалась грелкой с теплой водой. Затем для скорейшего присасывания к коже вымени пиявки помещались в специальные пробирки длиной 12 см и диаметром 5 см. Пробирка на три четверти заполнялась стерильной гигроскопической ватой. Затем открытый конец пробирки прижимали к коже пораженной доли вымени. После присасывания пиявки к коже пробирку осторожно убирали. На один сеанс лечения использовали 3 пиявки. После насыщения кровью (25-30 мин) пиявки самопроизвольно отпадали. (Глазунова Л.А., Анодина М.М. ГИРУДОТЕРАПИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ СУБКЛИНИЧЕСКИХ МАСТИТОВ У КОРОВ // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - №6.; Патент РФ №2157696)

Метод использовался в качестве прототипа.

Недостатком этого способа является то, что при применении в лечении хронического мастита у коров, в отличии от скрытого мастита не достигается терапевтического эффекта.

Это связано с тем, что при хроническом течении мастита отклонений в общем состоянии животного не обнаруживают, но вместе с тем альвеолы и молочные протоки пораженной четверти вымени постепенно перерождаются, замещаясь соединительной тканью, что приводит к индурации четверти и агалактии. Пораженная четверть вымени при этом уменьшается в размерах. Ткани ее становятся неравномерно плотными. Часть молочных ходов зарастает, образуя плотные тяжи. В отдельных молочных протоках формируются ретенционные кисты, которые постепенно обрастают соединительной тканью и превращаются в плотные узлы. Секреция молока в пораженной четверти вымени прогрессивно снижается. Таким образом, для лечения хронического мастита необходим более продолжительный курс, чтобы сформировавшаяся в пораженной доли соединительная ткань остановила свое развитие и заместилась железистой тканью, благодаря действию противовоспалительных и литических веществ в секрете пиявок. Также при хроническом течении воспаления дозировка пиявочного секрета должна быть уменьшена, чтобы не обострить процесс, т.о. и количество пиявок на один сеанс должно быть уменьшено. При острых маститах на один сеанс применяется 0,06 мл пиявочного секрета (3 пиявки), при хроническом течении дозировка снижается в 1,5 раза, до 0,04 мл (2 пиявки).

Техническим результатом изобретения является. обеспечение выздоровления коров от хронического мастита, путем купирования воспалительного процесса и стимуляции замещения соединительной ткани железистой.

Технический результат изобретения достигается введением в пораженную долю вымени биологически активных веществ - пиявочного секрета слюнных желез медицинских пиявок, отличающийся тем, что в пораженную долю вводят пиявочный секрет в количестве 0,04 мл, четырехкратно, с интервалом 72 часа.

Для определения эффективности лечения было отобрано в хозяйстве 30 коров с диагнозом хронический мастит. Исследования проводились с 2016 по 2017 год на кафедре патологической физиологии ФГОУ ВО «СПбГАВМ» и на базе хозяйства ЗАО «Красносельское».

Диагноз ставили комплексно на основании анамнеза, клинических признаков, то есть при наличии болезненности, гиперемии, повышении местной температуры, уплотненной консистенции вымени, увеличении и болезненности надвыменных лимфатических узлов, изменений сдаиваемого молока, а также при положительной реакции экспресс теста, на определения количества соматических клеток в молоке.

Далее все животные были разделены на 3 группы по 10 голов, (опытная, 1я-контрольная, 2я - контрольная).

Схема исследования представлена в таблице 1.

Все животные 1й-контрольной группы проходили лечение по традиционной для данного хозяйства схеме, которая применяется ветеринарными специалистами на протяжении нескольких лет и включает в себя ежедневное интрацистернальное введение суспензии «Диеномаст». В 1,0 мл в качестве действующих веществ этот препарат содержит 8,75 мг диоксидин и 17,5 мг гентамицина сульфата, а также вспомогательные вещества: 43,75 мг воска пчелиного и масла вазелинового до 1 мл. Препарат вводили ежедневно один раз в сутки после утренней дойки по 10 мл в каждую пораженную долю, 6 раз. Перед введением препарата, соски пораженной доли обрабатываются тампоном, пропитанным 70% раствором этилового спирта.

Все животные 2й-контрольной группы проходили лечение способом, предложенным в патенте №2157696, где количество пиявочного секрета составляло 0,06 мл трехкратно, с интервалом 24 часа. Волос на пораженной доле вымени выбривался, кожа промывалась теплой водой, а затем дезинфицировалась 70о спиртом. В случае низкой температуры в животноводческом помещении кожа пораженной скрытым маститом доли вымени в течение нескольких минут согревалась грелкой с теплой водой. Затем для скорейшего присасывания к коже вымени пиявки помещались в специальные пробирки длиной 12 см и диаметром 5 см. Пробирка на три четверти заполнялась стерильной гигроскопической ватой. Затем открытый конец пробирки прижимали к коже пораженной доли вымени. После присасывания пиявки к коже пробирку осторожно убирали. На один сеанс лечения использовали 3 пиявки. После насыщения кровью (25-30 мин) пиявки самопроизвольно отпадали. Курс лечения повторяли трижды с интервалом 24 ч. После отпадания пиявок место укусов дезинфицировали 5%-ным раствором йода и заклеивали бактерицидным пластырем.

Животные опытной группы для прохождения лечения получали сеансы гирудотерапии, которые заключается в постановке пиявок на больные доли вымени, в пораженную долю вводили пиявочный секрет в количестве 0,04 мл четырехкратно, с интервалом 72 часа. Перед посадкой пиявок, на пораженной доле вымени, при необходимости, выбривали волосы, обмывали долю теплой водой с хозяйственным мылом, обрабатывали 70% раствором этилового спирта, а затем 40% раствором глюкозы. Пиявок помещали в пробирку. После подготовки вымени, пробирку подставляли к коже на пораженную долю вымени. Местом постановки является область вокруг соска. После того, как пиявка прикрепилась к коже, она ее прокусывала и начинала отсасывать кровь. В момент питания пиявка впрыскивает в кровь свой секрет, который содержит более 100 биологически активных веществ. Благодаря этим веществам обеспечивается мощное противовоспалительное и литическое действие, местный анальгезирующий, противоотечный и бактериостатический эффекты, а также стимуляция местных иммунных реакций. После насыщения, как правило, через 20-30 минут пиявка отпадала сама. Место укуса пиявки дезинфицировали, в дополнительной обработке ранка не нуждалась. Использованную пиявку утилизировали. Сеансы гирудотерапии проводили с кратностью 72 часа 4 раза, на каждую больную долю ставили по 2 пиявки (0,04 мл пиявочного секрета), соблюдая при этом правила техники безопасности при работе с животными.

На первом этапе исследования у всех животных были взяты пробы молока для определения количества соматических клеток.

Для определения количества соматических клеток был использован экспресс-метод с диагностическим препаратом «Кено-тест», в состав которого входят два компонента: комплекс поверхностно-активных веществ и индикатор. Постановку реакции осуществляли следующим образом: первые 2-3 струйки молока, в которых содержится большое количество микроорганизмов и соматических клеток, сдаивали в отдельную емкость, чтобы избежать попадания молока на пол и подстилку, и распространение микроорганизмов во внешнюю среду. Далее из каждой доли вымени сдаивали небольшое количество молока, примерно 2 мл, в соответствующие чаши тест-пластины и вносили по 2 мл реагента. Легкими круговыми движениями перемешивали реагент с молоком. Через несколько секунд производили учет реакции в соответствии с инструкцией по применению.

После работы, исследуемую смесь выливали в емкость с дезинфицирующим раствором, чаши тест пластины промывали теплой водой.

Таким образом, после отбора проб и исследования их на количество соматических клеток, определили, что у заболевших коров наблюдается повышение количества соматических клеток в пределах >1000000-5000000, что подтверждает наличие заболевания. Достоверных отличий в группах животных выявлено не было.

Для более полного изучения динамики воспалительного процесса у всех исследуемых животных были взяты пробы крови для общеклинического исследования до лечения и после него. Кровь брали из хвостовой артерии вакуумным шприцом-контейнером. Для этого помощник становился с правой стороны животного, положив правую руку на спину животного, а левой рукой захватывал коленную складку. Хвост животного брали рукой в области средней трети и медленно поднимали вверх. Место взятия крови, область между 2-5 хвостовыми позвонками, обрабатывали 70% раствором этилового спирта, иглу вводили под углом 90° до упора на глубину 5-10 мм. Каждый шприц-контейнер был пронумерован согласно заранее подготовленной описи животных. Пробы для исследования были доставлены в ветеринарную лабораторию «СПбГАВМ».

Весь цифровой материал был подвергнут статистической обработке на персональном компьютере. Достоверность различий приведена в таблицах при значении р<0,05.

В крови животных определяли количество лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, эритроцитов, гранулоцитов, содержание гемоглобина в крови, число тромбоцитов и скорость оседания эритроцитов. Результаты исследования представлены в таблице 2.

По результатам исследования наблюдалось увеличение лейкоцитов на 59,3% в 1й-контрольной группе, во 2й-контрольной 58,9% и на 58,5% в опытной, что также указывает на воспалительный процесс в организме и увеличение эритроцитов на 8%, 5,3% и 5,6% соответственно, что указывает на длительность воспалительного процесса, то есть говорит о наличии хронического течения заболевания. Так как животные болеют хроническим маститом и им длительное время вводят лекарственные препараты, показатели клеток белого ряда в лейкоцитарной формуле находятся в пределах нормы.

Содержание гемоглобина, число тромбоцитов и скорость оседания эритроцитов находятся в пределах физиологической нормы.

Достоверных отличий показателей у контрольной и подопытной группы нами выявлено не было.

Для изучения терапевтической эффективности выбранных методов лечения животные трех групп находились под наблюдением. Ежедневно определяли общее состояние животных, проводили термометрию. Обращали внимание на состояние молочной железы, определяли ее форму, симметричность долей, наличие болезненности, консистенцию, оценивали характер секрета пораженных долей при помощи экспресс теста и пробного сдаивания.

Проводя наблюдение за животными больных хронической формой мастита, можно сказать, что у животных опытной группы выздоровление наступало на одиннадцатый день после введения пиявочного секрета в пораженную долю вымени в дозе 0,04 мл, четырехкратно (после четырех сеансов гирудотерапии). После лечения у них наблюдалась стойкая ремиссия в течение нескольких месяцев. У животных 1й контрольной группы выздоровление наступало только на двадцатый день и через небольшой промежуток времени они заболевали вновь. У животных 2й контрольной группы животных достоверной положительной динамики не обнаруживалось.

После лечения животных больных хроническим маститом, также были взяты пробы крови для общеклинического исследования. Пробы были взяты у 1й и 2й контрольных и опытной групп. Результаты исследования представлены в таблице 3.

Примечание * - статистически достоверно при сравнении показателей животных опытной и контрольных групп. (Р<0,05)

Анализируя полученные данные можно сделать выводы показатели крови животных опытной группы находятся в пределах физиологической нормы, что свидетельствует выздоровлении.

У животных 1й и 2й контрольных групп наблюдается лейкоцитоз и увеличение эритроцитов, а в лейкограмме незначительное увеличение палочкоядерных форм, что свидетельствует о продолжении развития патологического процесса.

Кроме того, по результатам клинического осмотра и определения количества соматических клеток использовали экспресс-метод с диагностическим препаратом «Кено-тест», было выявлено, что в опытной группе выздоровление наступило у 90% коров, а в 1й контрольной только в 60% случаях, а в 2й контрольной только в 10% случаях. Эффективность лечения представлена в таблице 4.

Преимуществом предлагаемого способа лечения, путем введения в пораженную долю вымени пиявочного секрета в количестве 0,04 мл четырехкратно, с интервалом 72 часа, является то, что он является более эффективным по сравнению с общепринятым (ежедневное интрацистернальное введение суспензии «Диеномаст», шестикратно) и предложенным в Патенте РФ №2157696 (количество пиявочного секрета составляло 0,06 мл трехкратно, с интервалом 24 часа).