Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ОТБОРА ПАЦИЕНТОВ В ГРУППУ РИСКА ПО РАЗВИТИЮ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ АНГИНЫ

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии и оториноларингологии, и может быть использовано для отбора пациентов в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

Фолликулярная ангина острое инфекционное заболевание лимфоидных образований ротоглотки - небных миндалин, одно из наиболее часто встречающихся инфекционных заболеваний, как у детей, так и у взрослых, может стать причиной развития серьёзных осложнений, таких как паратонзиллярный абсцесс, синдром Лемьера, инфекционно-токсический шок, ревматизм, гломерулонефрит (Челенкова И.Н., Утешев Д.Б., Бунятян Н.Д. Острые и хронический воспалительные заболевания верхних дыхательных путей // РМЖ пульмонология, том 18, № 30, 2010, с. 1878-1882). Активация условно-патогенной микрофлоры при острых респираторно-вирусных инфекциях (ОРВИ) может вызвать развитие различных заболеваний верхних-дыхательных путей, в том числе фолликулярной ангины (Шовкун В.А., Васильева Л.И., Лутовина О.В., Брагина Л.Е. Роль дисбиоза ротоглотки в формировании у детей раннего возраста склонности к частым респираторным заболеваниям // Медицинский вестник юга России, 2011, № 4, с. 48-53). При этом этиологически значимыми агентами для развития фолликулярной ангины могут являться различные виды условно-патогенных микроорганизмов, в том числе и недифтерийные коринебактерии, зачастую выделяемые из биологического материала пациентов с заболеваниями верхних дыхательных путей, в том числе фолликулярной ангиной, гнойно-септическими процессами, патологией урогенитального тракта, кожи и др. (Дифтерия: микробиологические и иммунологические аспекты / под ред. Г.Г. Харсеевой. - М.: Практическая медицина. - 2014.- с. 54-59). Роль патогенного потенциала недифтерийных коринебактерий длительное время была недооценена. Недифтерийные коринебактерий могут взаимодействовать с эпителием входных ворот организма, преодолевать клеточные и гуморальные механизмы защиты, обусловливая развитие инфекционных процессов в организме человека. В связи с этим отбор пациентов в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями, является весьма актуальной проблемой в современной медицине.

Проведенным поиском по научно-медицинской и патентной литературе найдены различные способы отбора пациентов в группу риска по развитию ОРВИ.

Так патентом РФ № 2303784 (опубл. 27.07.2007) защищен «Способ прогнозирования частоты острых респираторно-вирусных инфекций по оценке состояния местного иммунитета у детей младшего школьного возраста». Способ предусматривает исследование биологической жидкости пациента - слюны, взятой утром натощак, в которой определяют гаммаглютамилтрансферазу (GGT). При значениях GGT меньше 0,85 Ме/л или больше 3,4 Ме/л диагностируют снижение местного иммунитета у детей и прогнозируют риск перехода здорового ребенка в группу часто болеющих, т.е. отбирают его в группу риска по развитию ОРВИ.

Недостатком данного способа является недостаточная достоверность и ограниченные функциональные возможности, поскольку способ не учитывает влияние условно-патогенных микроорганизмов на развитие заболевания.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является способ отбора пациентов в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с условно-патогенными микроорганизмами - недифтерийными коринебактериями (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 180, 186-187).

Исследуют отделяемое ротоглотки пациента, в котором определяют наличие и концентрацию (К), КОЕ/мл недифтерийных коринебактерий. Значение К≥10⁴ свидетельствует об этиологической значимости выделенных недифтерийных коринебактерий, что может предполагать возможность развития инфекционного заболевания, в частности фолликулярной ангины и служит критерием для отбора пациентов в группу риска по ее развитию.

Недостатком прототипа является недостаточная достоверность способа, поскольку он не учитывает влияние основных факторов патогенности и характеристик недифтерийных коринебактерий на развитие фолликулярной ангины.

Задачей настоящего изобретения является разработка достоверного высокоэффективного способа для отбора пациентов в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

Техническим результатом, проявляющимся при реализации данного способа, является повышение достоверности способа при отборе пациентов в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

Технический результат достигается тем, что исследуют отделяемое ротоглотки пациента, в котором определяют наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл. При значении К≥10⁴ дополнительно определяют характеристики недифтерийных коринебактерий: значение среднего показателя адгезии (СПА) к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение среднего показателя инвазии (СПИ) в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы. Далее определяют коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃) и коэффициент уреазы (К₄). При выполнении условия 0<СПА<100 величине К₁ присваивают числовое значение «0». При выполнении условия 100≤СПА<500 величине К₁ присваивают числовое значение «1». При выполнении условия СПА≥500 величине К₁ присваивают числовое значение «2». При выполнении условия 0≤СПИ<50 величине К₂ присваивают числовое значение «0». При выполнении условия 50≤СПИ<200 - величине К₂ присваивают числовое значение «1». При выполнении условия СПИ≥200 величине К₂ присваивают числовое значение «2». При отсутствии гемолитической активности недифтерийных коринебактерий величине К₃ присваивают числовое значение «0». При наличии гемолитической активности недифтерийных коринебактерий величине К₃ присваивают числовое значение «1». При отсутствии уреазы недифтерийных коринебактерий величине К₄ присваивают числовое значение «0». При наличии уреазы недифтерийных коринебактерий величине К₄ присваивают числовое значение «1». Затем вычисляют коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄. При выполнении условия КР≥4, пациента отбирают в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

Для разработки способа были отобраны две группы пациентов: 49 здоровых человек и 294 находившиеся на лечении в инфекционных отделениях муниципального бюджетного учреждения здравоохранения (МБУЗ) «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону», а также МБУЗ «Городская больница № 1» г. Гуково Ростовской области больные с подтвержденным диагнозом фолликулярная ангина. У всех 353 обследованных было отобрано отделяемое ротоглотки, в котором определяли наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию.

Недифтерийные коринебактерий были выделены у 19 здоровых людей и у 51 больного фолликулярной ангиной.

Концентрация недифтерийных коринебактерий выделенных от здоровых людей была менее 10 КОЕ/мл: отмечались единичные колонии. Такая концентрация недифтерийных коринебактерий не имеет этиологической значимости (приказ Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27). Поэтому дальнейшие исследования с этими штаммами не проводились.

Концентрация недифтерийных коринебактерий (Corinebacterium pseudodiphtheriticum, Corinebacterium xerosis и Corinebacterium amicolatum) выделеных из отделяемого ротоглотки от больных с фолликулярной ангиной сотовляла 10⁴ КОЕ/мл и более. Такая концентрация недифтерийных коринебактерий является этиологически значимой (приказ Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27). Для этих недифтерийных коринебактерий мы определяли различные характеристики: каталазу, образование H₂S из цистина, уреазу, разложение глюкозы, мальтозы, сахарозы, крахмала и декстрина, редукцию нитратов, адгезивные свойства к клеткам макроорганизма, инвазивные свойства в клетки макроорганизма и гемолитическую активность (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013. с. 180-187). В качестве клеток макроорганизма при определении адгезивных и инвазивных свойств недифтерийных коринебактерий использовали тканевые культуры Нер-2 (Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212).

Статистический анализ результатов исследования различных характеристик проводили с помощью программы STATISTICA 7.0 (StatSoft Inc., США) и MedCalc (версия 9.3.5.0) по методам вариационной статистики с оценкой статистической значимости показателей по критерию Стьюдента при уровне значимости р<0,05. После проведения статистического анализа полученных результатов нами были определены характеристики штаммов недифтерийных коринебактерий статистически достоверно (р<0,05) вызывающие развитие фолликулярной ангины. Эти характеристики у различных штаммов имели различные значения, варьировались в различных сочетаниях и принимали различные количественные и качественные значения. Для разработки достоверного критерия риска развития фолликулярной ангины был введен коэффициент адгезии, коэффициент инвазии, коэффициент гемолитической активности и коэффициент уреазы, а так же коэффициент риска (КР) развития фолликулярной ангины, для определения значения которого была предложена формула и определено статистически достоверное значение коэффициента риска.

Подробное описание способа.

У пациента утром натощак отбирают отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследуют отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:-М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определяют наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187).

В отделяемом ротоглотки с концентрацией недифтерийных коринебактерий К≥10⁴ определяют их характеристики: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности, а так же отсутствие или наличие уреазы. Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определяют согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов. // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. -С. 210-212. Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определяют согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017. с. 161-162. Отсутствие или наличие гемолитической активности определяют по методике, описанной в работе Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Медицина, 2012. - с. 574. Отсутствие или наличие уреазы определяют согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45).

Далее определяют коэффициент адгезии (К₁, коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄). При выполнении условия 0<СПА<100 величине К₁ присваивают числовое значение «0», при выполнении условия 100≤СПА≤500 - величине К₁ присваивают числовое значение «1», при выполнении условия СПА≥500 величине К₁ присваивают числовое значение «2». При выполнении условия 0≤СПИ<50 величине К₂ присваивают числовое значение «0», при выполнении условия 50≤СПИ<200 - величине К₂ присваивают числовое значение «1», при выполнении условия СПИ≥200 величине К₂ присваивают числовое значение «2». При отсутствии гемолитической активности недифтерийных коринебактерий величине К₃ присваивают числовое значение «0», при наличии гемолитической активности недифтерийных коринебактерий величине К₃ числовое значение «1». При отсутствии уреазы недифтерийных коринебактерий величине К₄ присваивают числовое значение «0», при наличии уреазы недифтерийных коринебактерий величине К₄ присваивают числовое значение «1».

Затем вычисляют коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄.

При выполнении условия КР≥4, пациента отбирают в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

Практическая реализуемость предлагаемого способа иллюстрируется примерами из клинической практики.

Пример 1: пациент А., 26 лет поступил в инфекционное отделение МБУЗ «Городская больница № 1» г. Гуково Ростовской области с диагнозом стенозирующий ларинготрахеит.

Пациенту А. было проведено исследование согласно заявленному способу. У пациента А. утром натощак отбирали отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследовали отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определили наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187). Из отделяемого были выделены недифтерийные коринебактерий в концентрации К=10⁵. Поскольку было выполнено условие К=10⁵>10⁴, определили характеристики недифтерийных коринебактерий: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы.

Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определили согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов. // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212. Было получено СПА=527.

Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определили согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017. с. 161-162. Было получено СПИ=164.

Отсутствие или наличие гемолитической активности определили по методике, описанной в работе руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Медицина, 2012. - с. 574. Гемолитическая активность имела место.

Отсутствие или наличие уреазы определили согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45). Уреаза имела место.

Далее определили коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄).

Поскольку было выполнено условие СПА=527>500 величине К₁ присвоили числовое значение «2».

Поскольку было выполнено условие 50≤СПИ=164<200 величине К₂ присвоили числовое значение «1».

Поскольку гемолитическая активность недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₃ присвоили числовое значение «1».

Поскольку уреаза недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₄ присвоили числовое значение «1».

Затем вычислили коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄=2+l+l+l=5

Поскольку было выполнено условие КР=5>4, пациента А. отобрали в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

После выписки из стационара пациент А. был направлен в поликлиническое отделение по месту жительства для наблюдения. В дальнейшем у пациента А. развилась фолликулярная ангина, что подтвердило достоверность предлагаемого способа.

Пример 2: пациент В., 43 года, поступил в инфекционное отделение МБУЗ «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону» с диагнозом ОРВИ.

Пациенту В. было проведено исследование согласно заявленному способу. У пациента В. утром натощак отбирали отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследовали отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определили наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187). Из отделяемого были выделены недифтерийные коринебактерий в концентрации К=10⁴. Поскольку было выполнено условие К=10⁴, определили характеристики недифтерийных коринебактерий: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы.

Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определили согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212. Было получено СПА=672.

Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определили согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017, с. 161-162. Было получено СПИ=364.

Отсутствие или наличие гемолитической активности определили по методике, описанной в работе руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Медицина, 2012. - с. 574. Гемолитическая активность имела место.

Отсутствие или наличие уреазы определили согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45). Уреаза имело место.

Далее определили коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄).

Поскольку было выполнено условие СПА=672>500 величине К₁ присвоили числовое значение «2».

Поскольку было выполнено условие СПИ=364>200 величине К₂ присвоили числовое значение «2».

Поскольку гемолитическая активность недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₃ присвоили числовое значение «1».

Поскольку уреаза недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₄ присвоили числовое значение «1».

Затем вычислили коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄=2+2+1+1=6

Поскольку было выполнено условие КР=6>4, пациента отобрали в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

После выписки из стационара пациент В. был направлен в поликлиническое отделение по месту жительства для наблюдения. В дальнейшем у пациента В. развилась фолликулярная ангина, что подтверждало достоверность предлагаемого способа.

Пример 3: пациент С., 2 года 3месяца, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону» с диагнозом ларингит.

Пациенту С. было проведено исследование согласно заявленному способу. У пациента С. утром натощак отбирали отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследовали отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»: - М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определили наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187). Из отделяемого были выделены недифтерийные коринебактерий в концентрации К=10⁴. Поскольку было выполнено условие К=10⁴, определили характеристики недифтерийных коринебактерий: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы.

Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определили согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212. Было получено СПА=126.

Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определили согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017. с. 161-162. Было получено СПИ=62.

Отсутствие или наличие гемолитической активности определили по методике, описанной в работе руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Медицина, 2012. - с. 574. Гемолитическая активность имела место.

Отсутствие или наличие уреазы определили согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45). Уреаза имело место.

Далее определили коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄).

Поскольку было выполнено условие 100<СПА=126<500 величине К₁ присвоили числовое значение «1».

Поскольку было выполнено условие 50<СПИ=62<200 величине К₂ присвоили числовое значение «1».

Поскольку гемолитическая активность недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₃ присвоили числовое значение «1».

Поскольку уреаза недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₄ присвоили числовое значение «1».

Затем вычислили коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄=1+1+1+1=4

Поскольку было выполнено условие КР=4, пациента отобрали в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

После выписки из стационара пациент С. был направлен в поликлиническое отделение по месту жительства для наблюдения у педиатра. В дальнейшем у пациента С. развилась фолликулярная ангина, что подтвердило достоверность предлагаемого способа.

Пример 4: пациент Р., 54 года, поступил в инфекционное отделение МБУЗ «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону» с диагнозом ОРВИ.

Пациенту Р. было проведено исследование согласно заявленному способу. У пациента Р. утром натощак отбирали отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследовали отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определили наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187). Из отделяемого были выделены недифтерийные коринебактерий в концентрации К=10⁵. Поскольку было выполнено условие К=10⁵>10⁴, определили характеристики недифтерийных коринебактерий: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы.

Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определили согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А.,

Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212. Было получено СПА=512.

Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определили согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017. с. 161-162. Было получено СПИ=202.

Отсутствие или наличие гемолитической активности определили по методике, описанной в работе руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. - М.: Медицина, 2012. - с. 574. Гемолитическая активность отсутствовала.

Отсутствие или наличие уреазы определили согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45). Уреаза имело место.

Далее определили коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄).

Поскольку было выполнено условие СПА=512>500 величине К₁ присвоили числовое значение «2».

Поскольку было выполнено условие СПИ=202>200 величине К₂ присвоили числовое значение «2».

Поскольку гемолитическая активность недифтерийных коринебактерий отсутствовала, величине К₃ присвоили числовое значение «0».

Поскольку уреаза недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₄ присвоили числовое значение «1».

Затем вычислили коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄=2+2+0+1=5

Поскольку было выполнено условие КР=5>4, пациента отобрали в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

После выписки из стационара пациент Р. был направлен в поликлиническое отделение по месту жительства для наблюдения. В дальнейшем у пациента Р. развилась фолликулярная ангина, что подтвердило достоверность предлагаемого способа.

Пример 5: пациент Д., 5 лет, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону» с диагнозом мононуклеоз.

Пациенту Д. было проведено исследование согласно заявленному способу У пациента Д. утром натощак отбирали отделяемое ротоглотки сухим стерильным ватным тампоном. Исследовали отделяемое ротоглотки пациента по методике, описанной в приказе Министерства Здравоохранения СССР от 22 апреля 1985 г. № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лаборатория лечебно-профилактических учреждений»:- М., 1985. - с. 21-27. В отделяемом ротоглотки определили наличие недифтерийных коринебактерий и их концентрацию (К), КОЕ/мл (Руководство по медицинской микробиологии. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика // под ред. А.С. Лабинская, Н.Н. Костюкова М.: Издательство БИНОМ. 2013, с. 187). Из отделяемого были выделены недифтерийные коринебактерий в концентрации К=10⁴. Поскольку было выполнено условие К=10⁴, определили характеристики не дифтерийных коринебактерий: значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2, значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, отсутствие или наличие гемолитической активности а так же отсутствие или наличие уреазы.

Значение СПА к клеткам фарингеального эпителия Нер-2 определили согласно методике, описанной в статье Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер Х.П. и др. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212. Было получено СПА=432.

Значение СПИ в клетки фарингеального эпителия Нер-2, определили согласно методике, описанной в статье Харсеева Г.Г., Алиева А.А., Воронина Н.А. Методология исследования процесса инвазии недифтерийных коринебактерий // Актуальные вопросы эпидемиологии, микробиологии и диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний в Ростовской области: материалы региональной научно-практической конференции, посвященные 95-летию со дня образования государственной санитарно-эпидемиологической службы России / под ред. Е.В. Ковалева, С.В. Титовой - Ростов-на-Дону, 2017. с. 161-162. Было получено СПИ=186.

Отсутствие или наличие гемолитической активности определили по методике, описанной в работе руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. -М.: Медицина, 2012. - с. 574. Гемолитическая активность имела место.

Отсутствие или наличие уреазы определили согласно методическим рекомендациям MP 4.2.00.20-11 (Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Фенотипическая идентификация бактерий рода Corynebacterium. Методические рекомендации; утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 11.05.2011. - М., 2011. - с 44-45). Уреаза отсутствовала.

Далее определили коэффициент адгезии (К₁), коэффициент инвазии (К₂), коэффициент гемолитической активности (К₃), и коэффициент уреазы (К₄).

Поскольку было выполнено условие 100<СПА=432<500 величине К₁ присвоили числовое значение «1».

Поскольку было выполнено условие СПИ=215>200 величине К₂ присвоили числовое значение «2».

Поскольку гемолитическая активность недифтерийных коринебактерий имела место, величине К₃ присвоили числовое значение «1».

Поскольку уреаза недифтерийных коринебактерий отсутствовала, величине К₄ присвоили числовое значение «0».

Затем вычислили коэффициент риска развития фолликулярной ангины (КР) по формуле: КР=К₁+К₂+К₃+К₄=1+2+1+0=4

Поскольку было выполнено условие КР=4, пациента отобрали в группу риска по развитию фолликулярной ангины, ассоциированной с недифтерийными коринебактериями.

После выписки из стационара пациент Д. был направлен в поликлиническое отделение по месту жительства для наблюдения у педиатра. В дальнейшем у пациента Д. развилась фолликулярная ангина, что подтвердило достоверность предлагаемого способа.

С помощью предлагаемого способа в отоларингологическом и инфекционном отделениях МБУЗ «Городская больница № 1 им. Н.А. Семашко города Ростова-на-Дону» нами было обследовано 137 человек в возрасте от 19 до 65 лет, в том числе 58 мужчин и 79 женщин. У 49 человек значение КР составляло от 4 и более, в том числе у 17 человек КР=4, у 18 человек КР=5, у 14 - КР=6. Все 49 обследованных у которых величина КР была от 4 и более были отнесены в группу риска по развитию фолликулярной ангины. После выписки, из отоларингологического и инфекционного отделений эти 49 человек обследуемых были направлены в поликлинические отделения по месту жительства для наблюдения участкового врача, в дальнейшем у всех 49 человек развилась фолликулярная ангина, что подтвердило высокую достоверность заявленного способа.