×
14.09.2018
218.016.87a1

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ С3-КОНВЕРТАЗЫ АЛЬТЕРНАТИВНОГО ПУТИ АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА ЧЕЛОВЕКА

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к клинической иммунологии и касается способа определения функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути активации системы комплемента (АПАК). Сущность способа: проводят реакцию лизиса эритроцитов кролика сывороткой крови человека в условиях VBS-Mg-EGTA при температуре 37,0±0,5°C с последующим определением степени лизиса эритроцитов спектрофотометрически при длине волны 405 нм. При этом лизис эритроцитов кролика проводят 3,5% сывороткой крови человека в течение 10 мин, реакцию активации комплемента останавливают добавлением 100 мкл вероналового буфера, содержащего 10 мМ ЭДТА, в контрольную пробу сразу добавляют 2,4 мл охлажденного раствора 0,15 М NaCl, центрифугируют и определяют степень лизиса эритроцитов [У(контроль), %], опытную пробу повторно инкубируют в течение 30 мин при 37°С, определяют степень лизиса эритроцитов [У(опыт), %]. Затем рассчитывают функциональную активность С3-конвертазы АПАК как разность между степенью лизиса эритроцитов в опытной и контрольной пробах и при разнице степени лизиса между опытной и контрольной пробами до 15% принимают функциональную активность С3-конвертазы альтернативного пути комплемента в сыворотке крови обследуемого за нормальную величину. 1 ил., 4 табл., 1 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для определения функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути активации комплемента человека.

Проблема оценки состояния иммунной системы организма человека остается в настоящее время актуальной в связи с тем, что многие соматические заболевания характеризуются иммунодефицитом, и соответствующая иммунокорригирующая терапия позволит более рационально и эффективно проводить терапию этих состояний.

Система комплемента является частью иммунной системы и состоит из более чем 40 компонентов, которые действуют посредством каскадной активации. Эта система играет ключевую роль как в клиренсе ИК, так и в иммунном ответе на инфекционные агенты, чужеродные антигены, опухолевые и вирус-инфицированные клетки [Rittirsch D., Redl H., and Huber-Lang M. Roleof Complementin Multiorgan Failure // Clinical and Developmental Immunology. - 2012; 2012:962927. doi: 10.1155/2012/962927.].

Известны три пути активации системы комплемента: классический, альтернативный и лектиновый, отличающиеся способом образования С3-конвертаз. Субстратом С3-конвертаз всех трех путей активации системы комплемента является компонент С3, при расщеплении которого образуются С3а и C3b. Присоединение дополнительных молекул C3b к С3-конвертазам приводит к образованию С5-конвертаз, которые запускают реакцию формирования мембрано-атакующего комплекса (МАК).

Альтернативный путь активации системы комплемента инициируется при спонтанном гидролизе компонента С3, который происходит при расщеплении тиоэфирной связи с образованием С3(Н2О) и формировании первоначальных жидкофазных С3-конвертаз после связывания фактора В и активации его фактором D (С3(H2O)Bb. Эта С3-конвертаза расщепляет молекулы С3 на С3а и C3b. C3b молекулы связываются ковалентно с патогенами или с любой поверхностью. Далее иммобилизованный C3b на поверхности взаимодействует с фактором В с образованием мембрано-связанной С3-конвертазы (C3bBb) альтернативного пути. Фактор В несет каталитический участок С3-конвертазы, C3bBb, которая является высокоспецифичной и эффективно регулируемой сериновой протеазой. С3-конвертаза стабилизируется при связывании пропердина, который также служит платформой для сборки С3-конвертазы на поверхности микроорганизмов, апоптозных или злокачественных клеток [Hourcade D.Е. Therole of properdinin the assembly of the alternative pathway C3 convertase of complement // J.Biol.Chem. - 2006. - V. 28, №4. - Р. 2128-2132]. Отрицательными регуляторами (ингибиторами) данного ферментного комплекса являются - фактор Н, мембранный кофакторный белок (МСР, CD46) и фактор ускоряющий распад (DAF, CD55). Все они, с одной стороны, поддерживают время функционирования С3-конвертазы альтернативного пути в пределах нескольких минут, с другой стороны, они предотвращают отложение С3 и формирование С3-конвертазы на здоровых клетках хозяина.

Избыточная (неконтролируемая) активация системы комплемента является частью патогенеза большого числа воспалительных заболеваний. Патологические эффекты могут быть обусловлены повышенной продолжительной активацией, например, вызванной присутствием иммунных комплексов (такой как системная красная волчанка и связанные с ней заболевания), а также или сниженной экспрессией или функция различных ингибиторов комплемента, или комбинацией этих двух факторов [Carroll M.V., R.В. Sim R.B. Complement in health and disease // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2011. - V. 63, №12. - P. 965-975].

Ишемия и последующая реперфузия органов и тканей наблюдается при таких состояниях как инфаркт миокарда или инсульт. Активация комплемента и недостаточная регуляция играет важную роль при реперфузионном повреждении и активация всех трех путей комплемента участвует в данном процессе. Результатом является мультифункциональный воспалительный процесс, вовлекающий генерацию анафилатоксинов, повышенную экспрессию адгезивных белков и тканевых факторов на эндотелиальных клетках и выход из сосудов полиморфно-ядерных лейкоцитов [Banz Y., Rieben R. Role of complement and perspectives for intervention in ischemia-reperfusion damage // Annals of Medicine. - 2012. - V. 44, №3. - P. 205-217].

Мембрано-пролиферативный гломерулонефрит (МГТГН) тип II связан с С3 нефритическим фактором (С3НФ) [Sethi S., Nester С.М., Smith R.J. Membranoproliferative glomerulonephritis and С3 glomerulopathy: resolving the confusion // Kidney International. - 2012. - V. 81, №5. - P. 434-141.]. С3НФ является аутоантителом, связывающимся с С3-конверазой альтернативного пути, при этом взаимодействии наблюдается значительное возрастание времени полураспада конвертазы C3bBb. Результатом этих процессов является полное потребление (гидролиз) компонента С3, приводящее к функциональному дефициту С3. В результате тяжелого дефицита С3 может возрастать риск развития бактериальной инфекции.

Атипический гемолитический уремический синдром (АГУС) является заболеванием, которое встречается у детей и характеризуется микроангиопатической гемолитической анемией, тромбоцитопенией и острой почечной недостаточностью в результате МПГН. В случае этих заболеваний нарушается активация комплемента вследствие мутации фактора Н, фактора I, МСР, или фактор Н связанных белков (ФНСБ) 1, 3 или 5, которые нарушают функционирование этих ингибиторов. Кроме того, имеет значение мутации С3 и фактора В, которые приводят к нарушению регуляции активации [Sartz L., Olin A.I., Kristoffersson А.С., and Stahl A.L. A novel C3 mutation causing increased formation of the C3 convertase in familial atypical hemolytic uremic syndrome // J. of Immunol. - 2012. - V. 188, №4. - P. 2030-2037].

В настоящее время не существует доступных тест-систем для определения функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути активации системы комплемента.

Из уровня техники и наиболее близким является способ определения активности С3-конвертазы (C3bBb) альтернативного пути комплемента, основанный на гемолизе эритроцитов кролика (ЕК) с использованием 2 разных сывороток в качестве источников компонентов комплемента: на первом этапе С3-конвертаза альтернативного пути активации системы комплемента (C3bBb) генерируется предварительно на поверхности эритроцитов кролика (ЕК) с использованием исследуемой (первой) сыворотки и специфических ингибиторов компонента С5 (OmCI, ингибитор С5, выделенный из клеща Ornitodorosmoubata и рекомбинантно продуцированный из Е. Coli [Nunn M.A., Sharma A., PaesenG.C, et al. Complement inhibitorof C5 activation from the softtick Ornitodorosmoubata // J. Immunol. - 2005. - V. 174. - P. 2084-2091] или eculizumab, моноклональные антитела к C5 [Kaplan M. Eculizumab (Alexion) // Curr.Opinlnvestig Drugs. - 2002. - V. 3. - P. 1017-1023] для предотвращения формирования мебрано-атакующего комплекса (C5b-9, МАК). После, эритроциты кролика с иммобилизованными комплексами С3-конвертазы осаждают центрифугированием, супернатант декантируют и преципитированные комплексы, EKC3bBb, ресуспендируют в вероналовом буфере, содержащем ЭДТА и сыворотку морской свинки. Целью второй стадии теста является формирование МАК с использованием платформы конвертазы, образованной на первой стадии. После второй инкубации оставшиеся клетки осаждают центрифугированием, в супернатанте определяют выход гемоглобина спектрофотометрически при длине волны 405 нм. [Blom AM, Volokhina EV, Franson V, Stromberg P, et al. A novel method for direct measurement of complement convertases activity in human serum // Clinical and Experimental Immunology. - 2014. - V. 178. - P. 142-153].

Недостатком этого способа является длительность, трудоемкость, недостаточная точность в связи с тем, что используются две разные сыворотки, в которых присутствуют дополнительные ингибиторы или стабилизирующие С3-конвертазу аутоантитела к этим ингибиторам, а также потребность использования моноклональных антител (eculizumab) к компоненту С5 или специфических ингибиторов компонента С5 (OmCI).

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности метода исследования функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути активации системы комплемента с использованием сыворотки крови только одного человека, а также адаптация метода для рутинных скрининг-исследований в условиях клинико-диагностических лабораторий практического здравоохранения.

Указанный результат достигается тем, что функциональную активности С3-конвертазы альтернативного пути системы комплемента определяют путем проведения реакции лизиса эритроцитов кролика сывороткой крови человека в условиях VBS-Mg2+-EGTA при температуре 37,0±0,5°С с последующим определением степени лизиса эритроцитов спектрофотометрически при длине волны 405 нм, отличающийся тем, что лизис эритроцитов кролика проводят 3,5% сывороткой крови человека в течение 10 мин, реакцию активации комплемента останавливают добавлением 100 мкл вероналового буфера, содержащего 10 мМ ЭДТА, в контрольную пробу сразу добавляют 2,4 мл охлажденного раствора 0,15 М NaCl, центрифугируют и определяют степень лизиса эритроцитов [У(контроль),%], опытную пробу повторно инкубируют в течение 30 мин при 37°С, определяют степень лизиса эритроцитов [У(опыт),%]. Функциональную активность С3-конвертазы определяют как разность между степенью лизиса эритроцитов в опытной и контрольной пробах. При разнице степени лизиса между опытной и контрольной пробами не более 15% принимают функциональную активность С3-конвертазы альтернативного пути комплемента в сыворотке крови обследуемого за нормальную величину.

Заявленное изобретение поясняется фиг. 1 на которой представлена активность альтернативного пути активации пулированной сыворотки крови человека в зависимости от концентрации.

Способ осуществляют следующим образом. Проводят забор крови, приготовление сыворотки, проведение гемолитического теста и расчет разности степени лизиса эритроцитов между опытной и контрольной пробами. Гемолитический тест проводят с использованием стандартизованных эритроцитов кролика (1,5×108 кл/мл) (ЕК) в вероналовом солевом буфере (VBS), содержащем 7 мМ MgCl2 и 10 мМ этиленгликольтетрауксусную кислоту (VBS-Mg2+-EGTA). Время проведения экспресс-способа 40 мин.

Титрование пулированной сыворотки крови человека на активность альтернативного пути активации системы комплемента. Предварительно от 5 до 30 мкл пулированной сыворотки крови от 10 здоровых доноров были разведены до конечного объема 300 мкл буфером VBS-Mg2+-EGTA. Затем 200 мкл стандартизированных эритроцитов кролика (1,5×108 кл/мл) были добавлены и инкубированы в течение 30 мин при 37°С. После инкубации реакцию лизиса эритроцитов останавливали добавлением 2,5 мл холодного раствора 0,15М NaCl, центрифугировали 10 мин при 2500 об/мин для осаждения оставшихся ЕК и степень лизиса эритроцитов определяли по выходу гемоглобина в супернатант спектрофотометрически при длине волны 405 нм. В качестве контроля были использованы бланк (спонтанный лизис эритроцитов) (200 мкл ЕК + 300 мкл VBS-Mg-EGTA) и полный лизис эритроцитов (200 ЕК + 300 мкл H2O). Степень лизиса эритроцитов (У) определяли по формуле:

У(%)=[(X-R)/(H-R)]×100,

где Н, R и X - величины оптической плотности А405 супернатанта в гемолитических системах при полном лизисе эритроцитов, в контроле спонтанного лизиса ЕК и в опытной пробе соответственно. Полученные результаты представлены на фиг. 1. Как видно из фиг. 1, степень лизиса эритроцитов от 10 до 90% зависит линейно от концентрации сыворотки. Степень лизиса эритроцитов ЕК на уровне 50% наблюдается при концентрации сыворотки, равной 17,5 мкл в гемолитической системе, что составляет 3,5% сыворотки. Таким образом, для дальнейших исследований нами использовалась 3,5% концентрация сыворотки в тесте.

Определение гемолитической активности альтернативного пути активации системы комплемента в сыворотках крови беременных женщин. 200 мкл эритроцитов кролика (ЕК) (1,5×108 кл/мл) инкубировали с 17,5 мкл сыворотки крови человека, в общем объеме 500 мкл, доведенном буфером VBS-Mg2+-EGTA (концентрация сыворотки 3,5%). Одновременно ставили контроль на спонтанный лизис эритроцитов ЕК (200 мкл ЕК + 300 мкл VBS-Mg2+-EGTA) и контроль на полный лизис эритроцитов (200 мкл ЕК + 300 мкл H2O). Пробирки встряхивали и инкубировали 30 мин при 37°С. После инкубации в пробы добавляли по 2,5 мл холодного раствора 0,15 М NaCl, центрифугировали и определяли степень лизиса эритроцитов по величине А405 супернатанта. Полученные результаты представлены в таблице 1.

Как видно из данных, представленных в таблице 1, гемолитическая активность АПАК колебалась от 13% до 74%, что укладывается в калибровочный график (см. фиг. 1). По уровню активности АПАК тестированные пробы можно распределить на 3 группы: 1 группа - активность АПАК до 25% лизиса эритроцитов ЕК (8 проб, что составляет 36,4%)); 2 группа - от 26% до 40% лизиса эритроцитов (также 8 проб, 36,4%); 3 группа лизис эритроцитов от 41% и выше (6 проб, 27,2%).

Определение оптимальной концентрации вероналового буфера, содержащего 10 мМ ЭДТА (VBSE) для полного ингибирования системы комплемента по альтернативному пути. К 200 мкл суспензии эритроцитов кролика (ЕК) (1,5×108 кл/мл) добавляли 17,5 мкл пулированной сыворотки крови человека от 10 здоровых доноров и 20-100 мкл VBSE (интервал концентрации 0,4-2,0 ммоль/л ЭДТА в системе), доводили объем до 500 мкл буфером VBS-Mg2+-EGTA и инкубировали 30 мин при 37°С. Одновременно ставили контроль на спонтанный (200 мкл ЕК + 200 мкл VBS-Mg2+-EGTA) и полный лизис эритроцитов ЕК (200 мкл ЕК + 200 мкл H2O). После инкубации останавливали реакцию лизиса эритроцитов добавлением 2,5 мл охлажденного 0,15 М раствора NaCl, центрифугировали 10 мин. при 2500 об/мин и определяли степень лизиса эритроцитов по величине А405 супернатанта, как описано выше.

Степень ингибирования альтернативного пути активации комплемента определяли как разность показателей лизиса эритроцитов контрольной пробе и в опытных пробах, содержащих возрастающие концентрации VBS-ЭДТА, по формуле:

СИ АПАК (%)=(100-У),

где 100 - степень лизиса эритроцитов в контрольной пробе, У - степень лизиса эритроцитов в опытных пробах. Полученные данные приведены ниже (таблица 2).

Как видно из данных, представленных в таблице 2, лизис эритроцитов кролика ингибируется дозозависимо при повышении концентрации ЭДТА в гемолитической системе. Таким образом, при концентрации ЭДТА в системе выше 1,4 мМоль/л наблюдается полное ингибирование гемолитической активности системы комплемента по альтернативному пути за счет хелатирования ионов магния.

Пример 1. Определение функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути системы комплемента. Определение ФА С3-конвертазы АПАК основано на том, что после 10 мин инкубации 200 мкл (1,5×108 кл/мл) эритроцитов кролика с 17,5 мкл сыворотки крови человека в конечном объеме 500 мкл, доведенном буфером VBS-Mg2+-EGTA, реакцию активации комплемента останавливают добавлением 100 мкл вероналового буфера, содержащего 10 мМ ЭДТА (VBSE). В контрольную пробу сразу добавляют 2,4 мл охлажденного раствора 0,15 М NaCl, центрифугируют и определяют степень лизиса эритроцитов [У(контроль),%], как описано выше. Опытную пробу повторно инкубируют в течение 30 мин при 37°С. После инкубации определяют степень лизиса эритроцитов [У(опыт),%]. ФА С3-конвертазы АПАК определяют как разность между степенью лизиса эритроцитов в опытной и контрольной пробах. Проведены исследования ФА С3-конвертазы АПАК в сыворотке крови 20 здоровых доноров. Полученные результаты представлены в таблице 3.

Как видно из данных, представленных в таблице 3, во всех исследованных сыворотках ФА С3-конвертазы АПАК была не более 15% (колебания от 1 до 15%). Известно, что период полураспада С3-конвертазы составляет несколько минут, и при добавлении вероналового буфера, содержащего ЭДТА, при связывании ионов Mg2+ полностью ингибируется дальнейшая активация комплемента по всем трем путям. ФА С3-конвертазы на уровне 15% и ниже нами предварительно принято за нормальную величину.

Пример 2. Определение ФА С3-конвертазы АПАК в сыворотках крови беременных женщин. Предлагаемым способом были тестированы сыворотки крови 22 беременных женщин, пациентов отделения патологии. Полученные результаты представлены в таблице 4.

Определение ФА С3-конвертазы АПАК в этих же пробах показало, что только в 9 пробах (41%) данный показатель в пределах нормальных величин (до 15% лизиса эритроцитов ЕК), предварительно полученных в группе доноров (пример 1). В остальных 13 пробах ФА С3-конвертазы АПАК существенно различалась. В 6 пробах (27%) ФА С3-конвертазы АПАК варьировала от 16 до 28%), а в 7 пробах (32%) - лизис эритроцитов от 29% и выше.

Анализ полученных данных показывает, что скорость лимитирующей стадией активации альтернативного пути системы комплемента является функционирование С3-конвертазы, C3bBb. Только в одной пробе №19 высокая функциональная активность С3-конвертазы не дала повышенного лизиса эритроцитов по альтернативному пути (см. таблицу 1). Данный факт прямо свидетельствует о снижении уровня компонента С3, т.е. мы наблюдаем повышенное потребление за счет стабилизации С3-конвертазы. В остальных же пробах высокая ФА С3-конвертазы, возможно компенсируется повышенным синтезом компонента С3.

Таким образом, предлагаемый способ определения ФА С3-конвертазы АПАК по сравнению с известными имеет преимущества, которые заключаются в повышении точности диагностики нарушений иммунного статуса, упрощении, сокращении длительности процедуры исследования до 40 минут, удешевлении, возможности использования в рутинных исследованиях. Реализация изобретения позволит выявлять доклинические состояния вторичных иммунодефицитов, а также контролировать эффективность проводимого лечения.

Способ определения функциональной активности С3-конвертазы альтернативного пути активации системы комплемента (АПАК) путем проведения реакции лизиса эритроцитов кролика сывороткой крови человека в условиях VBS-Mg-EGTA при температуре 37,0±0,5°C с последующим определением степени лизиса эритроцитов спектрофотометрически при длине волны 405 нм, отличающийся тем, что лизис эритроцитов кролика проводят 3,5% сывороткой крови человека в течение 10 мин, реакцию активации комплемента останавливают добавлением 100 мкл вероналового буфера, содержащего 10 мМ ЭДТА, в контрольную пробу сразу добавляют 2,4 мл охлажденного раствора 0,15 М NaCl, центрифугируют и определяют степень лизиса эритроцитов [У(контроль), %], опытную пробу повторно инкубируют в течение 30 мин при 37°С, определяют степень лизиса эритроцитов [У(опыт), %] и функциональную активность С3-конвертазы АПАК рассчитывают как разность между степенью лизиса эритроцитов в опытной и контрольной пробах и при разнице степени лизиса между опытной и контрольной пробами до 15% принимают функциональную активность С3-конвертазы альтернативного пути комплемента в сыворотке крови обследуемого за нормальную величину.
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ С3-КОНВЕРТАЗЫ АЛЬТЕРНАТИВНОГО ПУТИ АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА ЧЕЛОВЕКА
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 14 items.
10.05.2018
№218.016.44eb

Способ определения долгосрочного риска смерти и нефатальных сердечно-сосудистых осложнений у больных хронической ишемической болезнью сердца

Изобретение относится к медицине, кардиологии. У пациента с хронической ишемической болезнью сердца собирают жалобы и анамнез заболевания, включая терапию, течение ИБС, наличие тяжелой хронической сердечной недостаточности, сопутствующих хронических заболеваний легких или почечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002649964
Дата охранного документа: 05.04.2018
10.07.2018
№218.016.6f17

Скрининг-тест определения контактного пути коагуляции (стокпк)

Изобретение относится к лабораторной диагностике, в частности к способам определения контактного пути коагуляции плазмы крови человека. Скрининг-тест определения контактного пути коагуляции включает смешивание цитратной плазмы крови с хлоридом кальция и последующую фотометрическую регистрацию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002660706
Дата охранного документа: 09.07.2018
28.08.2018
№218.016.8022

Способ выявления нарушений ритма и проводимости сердца у пациентов с эпилепсией при помощи имплантированного подкожного петлевого регистратора экг

Изобретение относится к области медицины, неврологии и сердечно-сосудистой терапии. Пациентам с эпилепсией, относящимся к группам высокого риска внезапной смерти, а также больным, страдающим труднокурабельными формами заболевания, осуществляют подкожную имплантацию подкожного петлевого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002665019
Дата охранного документа: 24.08.2018
19.10.2018
№218.016.93fa

Способ определения риска повторного мозгового инсульта у лиц, перенесших острое нарушение мозгового кровообращения

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и неврологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития повторного мозгового инсульта (МИ) у больных, перенесших малый ишемический инсульт, ишемический МИ, малый геморрагический инсульт, геморрагический МИ. Не ранее чем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002669895
Дата охранного документа: 16.10.2018
30.11.2018
№218.016.a1cb

Способ диагностики скрытой артериальной гипертонии

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, терапии, общей практике, неврологии. Во время врачебного приема, профилактического или диспансерного осмотра пациента с уровнем клинического АД меньше 140 и 90 мм рт.ст. без диагноза АГ и антигипертензивной терапии измеряют в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002673646
Дата охранного документа: 28.11.2018
02.03.2019
№219.016.d1ff

Способ оценки характера аутоиммунной реакции организма человека на множественно модифицированные липопротеины низкой плотности в литическом тесте

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для оценки литической активности множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности. Способ включает приготовление преципитата из сыворотки крови человека путем инкубации супернатанта,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680848
Дата охранного документа: 28.02.2019
12.08.2019
№219.017.be5a

Определение чувствительности эритроцитов человека к лизису при активации системы комплемента по тромбиновому пути

Изобретение относится к клинической иммунологии и гемостазиологии и касается определения чувствительности эритроцитов человека к лизису при активации системы комплемента по тромбиновому пути. Для определения чувствительности эритроцитов человека к лизису при активации системы комплемента по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696981
Дата охранного документа: 08.08.2019
22.10.2019
№219.017.d8e7

Способ определения фибриногена при рекальцификации цитратной плазмы и оценка его функциональности

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и может быть использовано для определения фибриногена при рекальцификации цитратной плазмы и оценки его функциональности. Суть способа заключается в рекальцификации плазмы крови хлоридом кальция с последующей регистрацией...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002703541
Дата охранного документа: 21.10.2019
01.12.2019
№219.017.e848

Способ оценки величины утреннего нарастания амбулаторного артериального давления у пациентов с артериальной гипертензией

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии. Проводят суточный мониторинг артериального давления (СМАД АД), на основании которого величину нарастания утреннего АД определяют как разницу между средним утренним АД и минимальным ночным АД. При этом среднее утреннее АД рассчитывают на...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002707660
Дата охранного документа: 28.11.2019
01.12.2019
№219.017.e920

Определение активности классического пути системы комплемента в тесте коагуляции фибриногена

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ определения активности системы комплемента по классическому пути в тесте коагуляции фибриногена, включающий использование сыворотки крови человека в качестве источника комплемента и обработанной 9,1% поливинилпирролидоном с молекулярной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002707568
Дата охранного документа: 28.11.2019
Showing 1-10 of 38 items.
27.10.2013
№216.012.7ade

Способ определения атерогенности крови человека

Настоящее изобретение относится к клинической биохимии и описывает способ определения модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) в сыворотке (плазме) крови человека путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002497116
Дата охранного документа: 27.10.2013
10.12.2013
№216.012.8a03

Способ определения минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности в сыворотке или плазме крови человека

Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека. ММ-ЛПНП агрегируют из сыворотки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002501013
Дата охранного документа: 10.12.2013
27.08.2014
№216.012.ee4d

Способ определения функциональной активности ионизированного кальция в сыворотке крови человека

Изобретение относится к лабораторной диагностике, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для определения функциональной активности ионизированного кальция (ФАИ Ca) в сыворотке крови человека. Способ определения ФАИ Ca основан на проведении реакции лизиса эритроцитов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002526824
Дата охранного документа: 27.08.2014
10.10.2014
№216.012.fd0d

Экспресс-способ определения холестерина в иммунных комплексах

Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использовано для экспресс-определения холестерина в иммунных комплексах (ХИК). Сущность изобретения состоит в том, что преципитат иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности, из сыворотки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002530627
Дата охранного документа: 10.10.2014
10.01.2015
№216.013.1c59

Способ экспресс-определения холестерина в иммунных комплексах

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для экспресс-определения холестерина в иммунных комплексах (ХИК). Сущность изобретения состоит в том, что преципитат иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538685
Дата охранного документа: 10.01.2015
27.04.2015
№216.013.462a

Экспресс-способ определения атерогенности иммунных комплексов сыворотки крови человека

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для экспресс-определения атерогенности иммунных комплексов (ИК) сыворотки крови человека. Сущность изобретения состоит в том, что в предлагаемом способе преципитат ИК из сыворотки крови человека готовят путем обработки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549466
Дата охранного документа: 27.04.2015
27.04.2015
№216.013.462b

Способ определения атерогенности иммунных комплексов

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для определения атерогенности иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности (ИК-ммЛПНП). Для этого преципитат ИК-ммЛПНП из сыворотки крови человека готовят путем обработки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549467
Дата охранного документа: 27.04.2015
27.04.2015
№216.013.462c

Способ определения стабилизации с3-конвертазы классического пути активации комплемента человека

Изобретение относится к лабораторной диагностике, а именно к клинической иммунологии. Cпособ определения стабилизации C3-конвертазы классического пути активации комплемента человека осуществляется путем проведения реакции лизиса эритроцитов барана 0,8% сывороткой крови человека в течение 10...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549468
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.06.2015
№216.013.578d

Способ диагностики инсулинорезистентности

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и касается диагностики инсулинорезистентности. Для этого у пациента определяют толщину эпикардиального жира при помощи трансторакальной эхокардиографии секторным датчиком с частотой 2500 МГц на свободной передней стенке правого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553943
Дата охранного документа: 20.06.2015
20.03.2016
№216.014.c6bf

Способ экспресс-определения резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови человека

Изобретение относится к клинической биохимии и представляет собой способ экспресс-определения резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, отличающийся...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002578027
Дата охранного документа: 20.03.2016
+ добавить свой РИД