×
26.08.2017
217.015.dc4c

СПОСОБ ОЦЕНКИ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к диагностике, а именно к способу оценки фибринолитической активности слезной жидкости. Способ оценки фибринолитической активности слезной жидкости включает отбор слезы из нижнего конъюнктивального свода глаз, титрование анализируемой слезной жидкости путем проведения серии из двукратных разведений с помощью буферного раствора, добавление к полученным образцам латексного реагента, содержащего мышиные моноклональные антитела к Д-димеру фибрина, далее смесь перемешивают, регистрируют реакцию агглютинации в пробе при наибольшей величине разведения и рассчитывают концентрацию Д-димера по формуле: С(Д-димер)=200×d, нг/мл, где С - концентрация Д-димера (нг/мл), d - наибольшая величина разведения, 200 - чувствительность реагента, при этом концентрацию Д-димера 3200 нг/мл считают пороговой для подтверждения повышения активности системы фибринолиза слезной жидкости для оценки фибринолитической активности слезной жидкости с использованием в качестве маркера концентрацию Д-димера в слезной жидкости в слезной жидкости. Вышеописанный способ позволяет эффективно проводить оценку фибринолитической активности слезной жидкости. 2 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для оценки фибринолитической активности слезной жидкости /далее «СЖ»/ с использованием в качестве маркера концентрацию Д-димера в слезной жидкости в СЖ.

В настоящее время для диагностики различных заболеваний глаз, помимо инструментальных способов, используют СЖ как информативную биологическую среду, профиль изменения биохимических показателей которой имеет выраженный характер по сравнению с сывороткой крови.

Известно, что СЖ продуцируется главным образом слезной железой, которая кровоснабжается слезной артерией, являющейся ветвью глазничной артерии. Это дает основание полагать, что состав СЖ отражает процессы, протекающие в сосудистой системе глаза. Слеза - единственная доступная жидкость, которая может дать прижизненную информацию о состоянии локальных систем, в частности коагуляционного и фибринолитического звена, поэтому исследование фибринолитической и коагуляционной активности СЖ является более информативным для пациентов с острой сосудистой патологией сетчатки в отличие от анализа крови из локтевой вены [Мошетова Л.К., Яценко О.Ю., Яровая Г.А., Нешкова Е.А. Роль слезной жидкости в диагностике острой сосудистой патологии сетчатки и зрительного нерва // Росс. мед. Вести. - 2004. - №4. - С. 50-53].

Система фибринолиза - протеолитическая система, осуществляющая разрушение фибринового сгустка по мере восстановления поврежденной ткани. Плазминоген является проферментом фибринолитической системы, активация молекулы которого активаторами, обнаруженными во многих тканях и биологических жидкостях организма, ведет к образованию плазмина. Основной физиологической функцией плазмина является протеолиз фибрина, в результате чего образуются продукты его деградации разной молекулярной массы, в том числе Д-димер.

К настоящему времени функциональная оценка системы фибринолиза остается нерешенной проблемой. Основным, если не единственным, методом функциональной оценки системы фибринолиза в сыворотке крови является время лизиса эуглобулинового сгустка. Однако тест эуглобулинового лизиса не учитывает влияния ингибиторов фибринолиза, свойства самого фибринового сгустка с точки его резистентности фибринолизу, а его результаты в сильной степени зависят от концентрации фибриногена.

Современные исследования дают основание полагать, что D-димер является уникальным маркером деградации фибрина и поэтому в последние годы определение его содержания в плазме крови становится важным диагностическим и прогностическим тестом диагностики и мониторинга тромбозов различной этиологии [Мамаев А.Н. Коагулопатии: руководство. - Москва. 2012]. Концентрация Д-димера позволяет судить как о тромбообразовании, так и о тромболизисе независимо от локализации тромба, его объема и причины образования. Измерение концентрации Д-димера в крови является наиболее приемлемым и эффективным неинвазивным диагностическим тестом при ведении пациентов с подозрением на тромбоз не только для подтверждения факта тромбоза, но и для его исключения.

Ранее предпринимались немногочисленные попытки разработать способы определения фибринолитической активности в СЖ, но все они имели недостатки и применения в лабораторной практике не получили.

Так, известен способ оценки фибринолитической системы СЖ у пациентов с тромбозом центральной вены сетчатки и ее ветвей с помощью определения зоны лизиса на фибриновой пластине [В.В. Никольская, 1987; Л.А. Кацнельсон, Т.М. Форофонова, А.Я. Бунин. Сосудистые заболевания глаза, М.: Мед. 1990]. В.В. Бржеский (1990) помимо оценки фибринолитической активности СЖ по вышеуказанной методике, определял коагуляционную активность СЖ путем смешивания цитратной донорской плазмы с СЖ и регистрации времени образования сгустка. Несмотря на то что авторы в своих исследованиях отмечали снижение общей фибринолитической активности СЖ у пациентов с окклюзией вены сетчатки /далее «ОВС»/, эти способы весьма продолжительны по времени, имеют низкую чувствительность, специфичность, плохую воспроизводимость и дают возможность определения лишь суммарной фибринолитической активности СЖ, кроме того, недостатком этих способов является сложность, большая трудоемкость и отсутствие возможности произвести дифференциальную диагностику.

Известен способ оценки фибринолитической активности СЖ путем определения уровня плазминогена (А.И. Муха, 1988).

Несмотря на доступность, этот способ малоинформативен, так как повышение уровня плазминогена может свидетельствовать не только о снижении фибринолитической активности СЖ (замедление образования плазмина и тем самым накопление плазминогена), но и об ее активации: повышение уровня плазминогена за счет увеличения его продукции.

Также известен способ оценки фибринолитической активности СЖ по активности тканевого активатора плазминогена /далее «tPA»/ с использованием иммуноферментного анализа [RU 2107917 C1, RU 2119315 С1].

Однако, помимо трудоемкости, длительности и необходимости дополнительной аппаратуры, этот способ обладает низкой специфичностью, а также предназначен лишь для определения показаний к лазерной коагуляции сетчатки у пациентов с окклюзией вены сетчатки, а также для выбора способа медикаментозного лечения.

В качестве ближайшего аналога принят способ оценки показателей состояния СЖ (индекса коагуляции, фибринолитической активности, уровня а2-макроглобулина) с целью диагностики острой сосудистой патологии глаза [Мошетова Л.К, Яценко О.Ю., Яровая Г.А., Нешкова Е.А. Роль слезной жидкости в диагностике острой сосудистой патологии сетчатки и зрительного нерва // Росс. мед. Вести. - 2004. - №4. - С. 50-53], но помимо трудоемкости выполнения и сложности математических расчетов, данный способ позволяет оценить лишь суммарный потенциал фибринолитической системы СЖ, и не пригоден для дифференциальной диагностики ОВС в сомнительных случаях.

Задачей изобретения является создание эффективного, простого и точного способа оценки активности фибринолитической активности СЖ, позволяющего производить мониторинг изменений системы фибринолиза СЖ, в том числе на фоне лечения антикоагулянтными и фибринолитическими препаратами.

Способ дает возможность полуколичественно определить концентрацию Д-димера в СЖ у пациентов с сосудистыми патологиями сетчатки, в частности с ОВС, что является достаточным для оценки фибринолитической активности СЖ на фоне лечения.

Авторами впервые предложен способ, который объективно на основе полуколичественного анализа дает возможность определить концентрацию Д-димера в СЖ, что позволяет быстро, без использования дополнительного оборудования, и своевременно дать представление об активности фибринолитической системы СЖ.

Технический результат достигается за счет того, что на основании сопоставления офтальмологической картины и данных об уровне Д-димера в СЖ авторами предложены критерии оценки фибринолитической активности СЖ, по которым можно судить об эффективности лечения антикоагулянтными и фибринолитическими препаратами. Способ может быть эффективно использован в клинических лабораториях для оценки активности системы фибринолиза СЖ.

Способ осуществляется следующим образом.

Слезу собирают из нижнего конъюнктивального свода глаз обследуемых одноканальной микропипеткой со специальным одноразовым пластиковым наконечником и в ближайшие часы подвергают исследованию. Анализируемую слезную жидкость объемом 18 мкл титруют, производя серию из двукратных разведений образца (1:2, 1:4, 1:8 и 1:16) с помощью буферного раствора. К полученным разведениям образцам добавляют латексный реагент, содержащий мышиные моноклональные антитела к Д-димеру фибрина (DD-3B6/22), и аккуратно перемешивают смесь пластиковой палочкой. Способ основан реакции латекс-агглютинации, с чувствительностью теста ~ 200 нг/мл. Показатели ниже этой концентрации являются отрицательными, показатели более высоких концентраций - положительные. Тест определяет поперечно сшитые продукты деградации - Д-димер. Регистрацию реакции агглютинации проводят визуально в течение 3-х минут при комнатной температуре, для лучшей регистрации слабой реакции используют боковую подсветку. При полуколичественном анализе оценивают агглютинацию при наибольшей величине разведения. Концентрацию Д-димера рассчитывают по формуле:

Где С - концентрация Д-димера (нг/мл), d - наибольшая величина разведения, 200 - чувствительность реагента.

В качестве контроля произведен анализ СЖ у 30 пациентов, не имеющих глазных заболеваний, связанных с изменением в фибринолитической системе. Все пациенты проходили лечение в филиале №1 ГБУЗ ГКБ им. СП. Боткина по поводу катаракты. В результате биохимических исследований определения концентрации Д-димера в СЖ у данных пациентов получены следующие результаты: у 9 пациентов (30%) концентрация Д-димера в СЖ составила 800 нг/мл, у остальных 21 пациента (70%) концентрация Д-димера в СЖ составила 1600 нг/мл.

Пример 1

Больная С., 57 лет. Поступила на лечение в филиал №1 ГБУЗ ГКБ им. СП. Боткина с диагнозом: тромбоз в/височной ветви центральной вены сетчатки правого глаза.

Анамнез заболевания: 3 дня назад снизилось зрение правого глаза, при обращении к врачу поставлен диагноз: ОД-тромбоз в/височной ветви центральной вены сетчатки.

Анамнез жизни: страдает гипертонической болезнью II ст., 2 ст. в течение 3-х лет.

Глазной статус:

Острота зрения: ОД 0,2 н/к / ОС - 1,0.

Глазное дно: ОД - диск зрительного нерва бледно-розовый, границы четкие, вены расширены, извиты, по ходу в/височной сосудистой аркады свежие геморрагии, в макулярной области признаки отека.

ОС - диск зрительного нерва б/розовый, границы четкие, в макулярной области и по периферии без патологии.

В слезной жидкости пораженного и здорового глаза определен уровень Д-димера. В пораженном глазу он составил 6400 нг/мл, а в интактном - 800 нг/мл. Полученные данные свидетельствуют о повышении уровня Д-димера в пораженном глазу в 8 раз по сравнению со здоровым глазом.

Пациентке была назначена комплексная терапия, включающая также фибринолитические и антикоагулянтные препараты.

После проведенного лечения: острота зрения ОД - 0,4 н/к, глазное дно: геморрагии и отек сетчатки частично резорбировались.

ОС - без динамики.

В слезной жидкости: ОД - концентрация Д-димера - 3200 нг/мл. ОС - 800 нг/мл.

Учитывая эти результаты, можно сделать вывод, что при окклюзии вены сетчатки происходит повышение уровня Д-димера в СЖ, которое имеет тенденцию к нормализации при назначении лечения.

Пример 2

Больной К., 77 лет. Поступил на амбулаторное лечение в филиал №1 ГБУЗ ГКБ им. С.П. Боткина с диагнозом: ОС-тромбоз центральной вены сетчатки.

Анамнез заболевания: 2 месяца назад был поставлен диагноз ОС - тромбоз центральной вены сетчатки, проходил консервативное лечение в 67 ГКБ с временным улучшением остроты зрения.

Анамнез жизни: страдает гипертонической болезнью III ст., 3 ст. в течение 15 лет, перенес инфаркт миокарда в 2007 году.

Глазной статус: Острота зрения: ОД с корр. 0,4; ОС 0,05 н/к.

Глазное дно: ОД - диск зрительного нерва бледно-розовый, границы четкие, детали за флером из-за наличия катаракты.

ОС - диск зрительного нерва гиперемирован, границы стушеваны, отечен, по ходу сосудистых аркад геморрагии, отек сетчатки, распространяющийся на макулярную область.

Слезная жидкость: ОД - уровень Д-димера - 1600 нг/мл. ОС - 3200 нг/мл.

В данном случае отмечается повышение концентрации Д-димера в 2 раза в СЖ пораженного глаза, по сравнению с интактным.

В данном случае лечение с использованием фибринолитических препаратов было нецелесообразно в связи с давностью заболевания. Было определено, что повышенная концентрация Д-димера в СЖ пораженного глаза у пациентов с ОВС может сохраняться длительное время, что, скорей всего, отражает тяжесть окклюзии вены сетчатки.

Интерпретация результатов. Концентрация Д-димера в СЖ, составляющая от 3200 нг/мл и более, свидетельствует о повышении активности системы фибринолиза СЖ.

Способ испытан на кафедре офтальмологии ГБОУ ДПО Российской медицинской академии последипломного образования Минздрава Российской Федерации на базе ГКБ им. С.П. Боткина, Филиал 1.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 41-50 of 127 items.
10.05.2018
№218.016.436e

Способ определения оптимального лапаротомного доступа при операциях на поперечно-ободочном отделе толстой кишки

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано при выборе доступа оперативного вмешательства. Выполняют спиральную компьютерную томографию брюшной полости. Используют изображения, полученные в плоскости аксиального, фронтального, сагиттального, косо-аксиального...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002649571
Дата охранного документа: 03.04.2018
10.05.2018
№218.016.4970

Способ остеосинтеза перелома нижней челюсти с одновременным устранением адентии

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии, и предназначено для использования при остеосинтезе перелома нижней челюсти с одновременным устранением адентии и дальнейшей имплантацией зубов. Проводят обследование, включающее компьютерную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002651363
Дата охранного документа: 19.04.2018
10.05.2018
№218.016.4d6e

Способ местного лечения воспалительных заболеваний пародонта

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для местного комбинированного, антимикробного и противовоспалительного лечения воспалительных заболеваний пародонта. Сущность способа местного лечения воспалительных заболеваний пародонта заключается в том, что...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002652349
Дата охранного документа: 25.04.2018
16.06.2018
№218.016.622d

Способ диагностики спондилогенной шейной миелопатии без компрессии спинного мозга

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии, неврологии и лучевой диагностике, и может быть использовано для диагностики спондилогенной шейной миелопатии без компрессии спинного мозга. Выполняют МРТ шейного отдела позвоночника при помощи томографа, обладающего электромагнитным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002657845
Дата охранного документа: 15.06.2018
29.06.2018
№218.016.6909

Комбинация двух криопротекторных сборов для адаптации человека к охлаждающему микроклимату

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к комбинации фитосборов для профилактики заболеваний человека, имеющего профессиональный контакт с охлаждающим микроклиматом. Комбинация фитосбора 1 и фитосбора 2 для профилактики заболеваний человека, имеющего профессиональный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002659172
Дата охранного документа: 28.06.2018
08.07.2018
№218.016.6e22

Способ лечения нарушений пищевого поведения при ожирении

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения нарушений пищевого поведения. Способ включает анализ питания, диетотерапию пониженной калорийности, составление индивидуального плана действий по изменению пищевого поведения. Перед лечением проводят оценку пищевого поведения по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002660509
Дата охранного документа: 06.07.2018
12.07.2018
№218.016.6f8a

Способ конверсии лапароскопической холецистэктомии при остром холецистите

Изобретение относится к хирургии и может быть применимо для конверсии лапароскопической холецистэктомии при остром холецистите. Выполняют мини-доступ косым разрезом на 2 см ниже вдоль реберной дуги латеральнее проекции желчного пузыря. Устанавливают устройство доступа, содержащее раневой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002661072
Дата охранного документа: 11.07.2018
12.07.2018
№218.016.6f93

Способ мануально-ассистированной лапароскопической операции при открытой травме живота

Изобретение относится к хирургии и может быть применимо для мануально-ассистированной лапароскопической операции при открытой травме живота. Первый троакар вводят в правую или левую подвздошную область, противоположную области локализации ранения брюшной стенки. Через троакар в условиях...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002661080
Дата охранного документа: 11.07.2018
03.08.2018
№218.016.7831

Способ лечения отомикоза

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и касается лечения отомикоза. Для этого промывают наружное ухо 60-70 мл раствора фурацилина с добавлением 8-10 капель АСД-2. Затем вводят турунды, смоченные в растворе 4-5 капель нитрофунгина и 1 капли препарата АСД-2. После...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002663070
Дата охранного документа: 01.08.2018
23.08.2018
№218.016.7e6c

Способ лечения диабетической ангиопатии нижних конечностей у пациентов с сахарным диабетом 2 типа

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и физиотерапии, и может быть использовано при лечении диабетической ангиопатии нижних конечностей у пациентов с сахарным диабетом 2 типа. Осуществляют общее воздействие на организм пациента магнитным полем с частотой 100 Гц, меняющимся...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002664625
Дата охранного документа: 21.08.2018
Showing 31-34 of 34 items.
17.02.2018
№218.016.2e47

Способ прогнозирования оценки эффективности терапии галоперидолом для лечения расстройств, сопровождающихся развитием психотической симптоматики

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакогенетике, клинической фармакологии, психиатрии, наркологии, и может быть использовано для подбора дозы антипсихотического лекарственного средства из группы производных бутерофенона галоперидола у пациентов с любыми нозологиями. Способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002643944
Дата охранного документа: 06.02.2018
04.04.2018
№218.016.30df

Способ прогнозирования послеоперационных осложнений после грыжесечений в отдаленный послеоперационный период

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии. Для прогнозирования послеоперационных осложнений после грыжесечений с установкой имплантатов в отдаленный период проводят ультразвуковое исследование области оперативного вмешательства через 6 месяцев после операции. Определяют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002644938
Дата охранного документа: 14.02.2018
11.03.2019
№219.016.db8b

Способ хирургического лечения первичной открытоугольной глаукомы

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для лечения первичной открытоугольной глаукомы. Производят разрез конъюнктивы у лимба протяженностью 4 мм. Из поверхностных слоев склеры выкраивают и отсепаровывают поверхностный склеральный лоскут пятиугольной формы...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002427352
Дата охранного документа: 27.08.2011
20.04.2023
№223.018.4c46

Способ диагностики состояния макулярной зоны сетчатки на фоне стентирования артерий сердца

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии. Осуществляют сканирование макулярной области методом оптической когерентной томографии с ангиографией в режиме AngioRetinaQuickVue 3×3 мм. При этом измеряют плотность сосудов в фовеа и в парафовеолярных: в поверхностном, глубоком...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002763664
Дата охранного документа: 30.12.2021
+ добавить свой РИД