×
25.08.2017
217.015.cad0

Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к биотехнологии. Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola МТ-5.21 обладает способностью продуцировать липиды в условиях погруженного культивирования, с высоким содержанием липидной фракции. Штамм Fomitopsis pinicola депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ГосНИИгенетика под номером ВКПМ F-1285 и может быть использован в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической отраслях промышленности. Изобретение позволяет повысить выход липидной фракции. 2 табл., 5 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Область техники

Изобретение относится к биотехнологии и касается штамма базидиомицета Fomitopsis pinicola, продуцирующего липиды. Липиды, полученные микробиологическим путем, могут быть использованы в качестве сырья для получения биодизельного топлива, в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической отраслях промышленности.

Уровень техники

Из уровня техники известны штаммы базидиомицетов Ganoderma tsugae var. jannieae Tay-1 [WO 2009017462 A2, 2007] и Pleurotus ostreatus CBS 101937 [US 6372964 B1, 2002], содержащие в составе мицелия до 10,2 и 7,2% липидов от сухого веса грибов соответственно. Недостатком указанных штаммов является низкое содержание липидной фракции.

Наиболее близким к заявленному штамму является штамм Laetiporus sulphureus LS 1-06, способный накапливать в составе мицелия до 8,4% липидов от сухого веса грибов. Недостатком указанного штамма являются низкая скорость роста и низкое содержание липидной фракции [Уфимцева О.В., Миронов П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS 1-06 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях //Хвойные бореальной зоны. - 2009. - Т. 26. -№. 2. - С. 294-296].

Раскрытие изобретения

Целью изобретения является получение нового штамма базидиомицета Fomitopsis pinicola, продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования, с высоким содержанием липидной фракции.

Поставленная цель достигается тем, что выделен новый штамм Fomitopsis pinicola (F. pinicola), задепонированный во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика под регистрационным номером ВКПМ F-1285.

Новый штамм выделен из природного плодового тела, найденного на мертвой древесине Betula pendula. Кусочки гриба, вырезанные из середины плодового тела, в асептических условиях были перенесены на селективную плотную питательную среду (сусловый агар), содержащую 30 мг/л ампициллина и 4 мг/л беномила. Выросший мицелий был идентифицирован как чистая базидиальная культура по наличию пряжек на мицелии. Таксономическая принадлежность заявляемого штамма к виду Fomitopsis pinicola подтверждена молекулярно-генетическим методом. Штамм базидиального гриба F. pinicola депонирован.

Характеристики штамма Fomitopsis pinicola

Выделенный штамм относится к классу Basidiomicetes, подклассу Agaricomycetidae, порядку Polyporales, семейству Fomitopsidaceae, роду Fomitopsis, виду pinicola.

Вид F. pinicola не патогенен для человека и не образует токсичные метаболиты ни на одной из стадий морфогенеза.

Условия культивирования: сусловый агар, температура +28°С.

Условия хранения: в пробирках с сусловым агаром при +4°С в течение 12-18 месяцев без пересева.

Макроморфологические признаки: на сусловом агаре колония округлая с ризоидным краем, пушится вокруг инокулюма, профиль приподнятый. Воздушный мицелий белого цвета, субстратный мицелий бесцветный, обратная сторона колонии не окрашена. Структура колонии ватно-пушистая, слабошероховатая, плотная. По мере старения мицелий становится плотным.

Гифы воздушного мицелия до 4 мкм в диаметре, разветвленные, короткие. На мицелии имеются округлые медальонные пряжки стабильной формы.

Вегетативный мицелий базидиомицета выращивают в погруженной культуре в асептических аэробных условиях.

Культивирование осуществляют в качалочных колбах объемом 750 мл на орбитальной качалке при температуре 28°С.

Среда для погруженного культивирования содержит: глюкозу - 10-30 г/л, соевую муку - 5-15 г/л, дигидрофосфат калия - 2-3 г/л, сульфат магния - 0,2-0,3 г/л и водопроводную воду. Значение рН среды доводят до 5,5-6,2. Питательную среду автоклавируют при температуре 121°С в течение 30 минут. Длительность процесса получения жидкого посевного мицелия составляет 4 суток, ферментации - 6 суток.

Биомассу отделяют от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань. Липиды выделяют из влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) по методу Фолча [Folch J. et al. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // J biol chem. - 1957. - Vol. 226. - №. 1. - pp.497-509].

Максимальный выход липидной фракции составляет 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы через 6 суток культивирования при температуре 28°С.

Осуществление изобретения

Сведения, подтверждающие возможность осуществления предлагаемого изобретения

Пример 1. Получение погруженного мицелия F. pinicola

Погруженное культивирование штамма F. pinicola проводили на орбитальном шейкере со скоростью вращения 250 об/мин при температуре 28°С в качалочных колбах объемом 750 мл, содержащих 100 мл питательной среды следующего состава: глюкоза - 20 г/л, соевая мука - 10 г/л, дигидрофосфат калия - 2,5 г/л и сульфат магния - 0,25 г/л. Уровень рН среды доводят до 5,5-6,2. Процесс погруженного культивирования проводили в два этапа. На первом этапе получали жидкий посевной материал, на втором этапе осуществляли ферментацию.

Для приготовления посевного материала использовали культуру, выращенную в пробирках на сусловом агаре. Кусочки агара размером не более 3×3 мм в количестве 30-40 штук асептически вносили в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивировали в течение 4 суток. Затем 10 мл посевного материала в асептических условиях вносили в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивировали в течение 6 суток. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 6,7 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы.

Пример 2. Получение погруженного мицелия F.pinicola

Получение погруженного мицелия F. pinicola проводили, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносили в количестве 10 г/л, 5 г/л, 3 г/л и 0,3 г/л соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 4,9 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 19,3% от веса воздушно высушенной биомассы.

Пример 3. Получение погруженного мицелия F. pinicola

Получение погруженного мицелия F. pinicola проводили, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносили в количестве 30 г/л, 15 г/л, 2 г/л и 0,2 г/л соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 5,2 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 19,7% от веса воздушно высушенной биомассы.

Пример 4. Получение липидов F. pinicola

Получали погруженную культуру F. pinicola, как описано в примере 1. Биомассу отделяли от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань и однократно промывали дистиллированной водой. Навеску влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) растирали с песком в жидком азоте до пастообразного состояния и экстрагировали смесью хлороформа и метанола (1:1 по объему). Экстракт фильтровали через бумажный фильтр, твердый остаток подвергали повторной экстракции. К объединенному фильтрату добавляли дистиллированную воду. Водно-метанольную и хлороформную фазы разделяли в делительной воронке. Хлороформный слой, содержащий липиды, сушили над слоем безводного сульфата натрия, растворитель упаривали на вакуумном ротационном испарителе.

Пример 5. Динамика накопления липидов штаммом F. pinicola

Получали погруженную культуру F. pinicola, как описано в примере 1. Отбор проб для определения содержания липидов в мицелии проводили каждые 24 часа. Липиды из биомассы выделяли, как описано в примере 5. Максимальный выход липидной фракции составлял 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы на 6 сутки культивирования (таблица 1).

Жирнокислотный состав липидов, выделенных из F. pinicola, определяли методом газовой хроматографии. В составе липидной фракции преобладают линолевая, олеиновая и пальмитиновая кислоты (таблица 2).

Штамм базидиального гриба Fomitopsis pinicola, продуцирующий липиды в условиях погруженного культивирования, депонированный во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика под регистрационным номером ВКПМ F-1285.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 38 items.
27.01.2013
№216.012.1fe3

Способ получения синтетических авиационных топлив из углеводородов, полученных по методу фишера-тропша, и катализатор для его осуществления

284 Изобретение описывает технологию получения синтетических топлив для летательных аппаратов из синтетических углеводородов. Изобретение касается способа получения синтетического авиационного топлива из углеводородов, полученных по методу Фишера-Тропша, включающего выделение из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002473664
Дата охранного документа: 27.01.2013
27.08.2013
№216.012.638e

Способ получения катализатора гидроочистки дизельного топлива

Изобретение относится к каталитической химии, в частности к способу получения алюмоникельмолибденовых катализаторов гидроочистки дизельного топлива методом самораспространяющегося высокотемпературного синтеза через стадию интерметаллидных сплавов. Способ получения катализатора заключается в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491123
Дата охранного документа: 27.08.2013
20.09.2013
№216.012.6bc2

Способ получения дизельного топлива из твердых синтетических углеводородов, полученных по методу фишера-тропша, и катализатор для его осуществления

Изобретение относится к технологии получения синтетического дизельного топлива. Описан способ получения дизельного топлива из твердых синтетических углеводородов, полученных по методу Фишера-Тропша, включающий гидрокрекинг/изодепарафинизацию твердых углеводородов на катализаторе, содержащем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493237
Дата охранного документа: 20.09.2013
20.11.2013
№216.012.8254

Способ получения средства, обладающего противоопухолевой активностью

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ предусматривает приготовление посевного мицелия базидиомицета, выбранного из группы Flammulina velutipes (Curtis) Singer и/или Hericium erinaceus (Bull.) Pers. Приготовление питательной среды, содержащей измельченный подсолнечный жмых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002499040
Дата охранного документа: 20.11.2013
10.12.2013
№216.012.87e9

Способ активации катализаторов гидроочистки дизельного топлива

Настоящее изобретение относится к способу активации катализаторов гидроочистки дизельного топлива и может быть использовано в нефтеперерабатывающей и нефтехимической областях промышленности. Описан способ активации алюмоникельмолибденовых катализаторов гидроочистки дизельного топлива путем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500475
Дата охранного документа: 10.12.2013
10.12.2013
№216.012.88a3

Способ выделения метана из газовых смесей

Изобретение относится к способу выделения метана из газовых смесей путем контактирования смеси с водным раствором циклического простого эфира концентрацией не выше 20% мол. при температуре не выше 20°C и давлении до 3,0 МПа с получением конденсированной фазы, содержащей смешанные гидраты метана...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500661
Дата охранного документа: 10.12.2013
27.12.2013
№216.012.90d9

Буровой раствор на углеводородной основе

Изобретение относится к нефтяной и газовой промышленности, в частности к буровым растворам на углеводородной основе, предназначенным для проходки интервалов неустойчивых, глинистых пород, интервалов многолетних мерзлотных пород, продуктивных пластов и бурения горизонтальных участков скважин....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002502774
Дата охранного документа: 27.12.2013
10.04.2014
№216.012.b1ae

Способ получения наночастиц металлов

Изобретение относится к порошковой металлургии, в частности к получению наночастиц металлов. Предварительно подготовленную суспензию зародышевых наночастиц металла вводят в ростовую среду, содержащую водный раствор соединения металла концентрацией 10-10 М, восстанавливающий агент концентрацией...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002511202
Дата охранного документа: 10.04.2014
20.07.2014
№216.012.de48

Способ добычи вязкой нефти

Изобретение относится к нефтедобывающей промышленности. Технический результат - повышение эффективности добычи высоковязкой нефти. В способе добычи вязкой нефти предварительно в призабойную зону пласта для формирования на забое катализаторной подушки с проницаемостью не ниже проницаемости...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522690
Дата охранного документа: 20.07.2014
20.07.2014
№216.012.de5b

Способ диагностики дефектов на металлических поверхностях

Изобретение относится к методам неразрушающего контроля и предназначено для определения дефектов и трещин на поверхности металлического оборудования и трубопроводов. На поверхность контролируемого объекта наносят напылением наночастицы золота цилиндрической формы длиной не более 100 нм и с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522709
Дата охранного документа: 20.07.2014
Showing 1-10 of 261 items.
27.01.2013
№216.012.1fe3

Способ получения синтетических авиационных топлив из углеводородов, полученных по методу фишера-тропша, и катализатор для его осуществления

284 Изобретение описывает технологию получения синтетических топлив для летательных аппаратов из синтетических углеводородов. Изобретение касается способа получения синтетического авиационного топлива из углеводородов, полученных по методу Фишера-Тропша, включающего выделение из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002473664
Дата охранного документа: 27.01.2013
27.08.2013
№216.012.638e

Способ получения катализатора гидроочистки дизельного топлива

Изобретение относится к каталитической химии, в частности к способу получения алюмоникельмолибденовых катализаторов гидроочистки дизельного топлива методом самораспространяющегося высокотемпературного синтеза через стадию интерметаллидных сплавов. Способ получения катализатора заключается в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491123
Дата охранного документа: 27.08.2013
20.09.2013
№216.012.6bc2

Способ получения дизельного топлива из твердых синтетических углеводородов, полученных по методу фишера-тропша, и катализатор для его осуществления

Изобретение относится к технологии получения синтетического дизельного топлива. Описан способ получения дизельного топлива из твердых синтетических углеводородов, полученных по методу Фишера-Тропша, включающий гидрокрекинг/изодепарафинизацию твердых углеводородов на катализаторе, содержащем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493237
Дата охранного документа: 20.09.2013
20.11.2013
№216.012.8254

Способ получения средства, обладающего противоопухолевой активностью

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ предусматривает приготовление посевного мицелия базидиомицета, выбранного из группы Flammulina velutipes (Curtis) Singer и/или Hericium erinaceus (Bull.) Pers. Приготовление питательной среды, содержащей измельченный подсолнечный жмых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002499040
Дата охранного документа: 20.11.2013
10.12.2013
№216.012.87e9

Способ активации катализаторов гидроочистки дизельного топлива

Настоящее изобретение относится к способу активации катализаторов гидроочистки дизельного топлива и может быть использовано в нефтеперерабатывающей и нефтехимической областях промышленности. Описан способ активации алюмоникельмолибденовых катализаторов гидроочистки дизельного топлива путем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500475
Дата охранного документа: 10.12.2013
10.12.2013
№216.012.88a3

Способ выделения метана из газовых смесей

Изобретение относится к способу выделения метана из газовых смесей путем контактирования смеси с водным раствором циклического простого эфира концентрацией не выше 20% мол. при температуре не выше 20°C и давлении до 3,0 МПа с получением конденсированной фазы, содержащей смешанные гидраты метана...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002500661
Дата охранного документа: 10.12.2013
27.12.2013
№216.012.90d9

Буровой раствор на углеводородной основе

Изобретение относится к нефтяной и газовой промышленности, в частности к буровым растворам на углеводородной основе, предназначенным для проходки интервалов неустойчивых, глинистых пород, интервалов многолетних мерзлотных пород, продуктивных пластов и бурения горизонтальных участков скважин....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002502774
Дата охранного документа: 27.12.2013
10.04.2014
№216.012.b1ae

Способ получения наночастиц металлов

Изобретение относится к порошковой металлургии, в частности к получению наночастиц металлов. Предварительно подготовленную суспензию зародышевых наночастиц металла вводят в ростовую среду, содержащую водный раствор соединения металла концентрацией 10-10 М, восстанавливающий агент концентрацией...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002511202
Дата охранного документа: 10.04.2014
20.07.2014
№216.012.de48

Способ добычи вязкой нефти

Изобретение относится к нефтедобывающей промышленности. Технический результат - повышение эффективности добычи высоковязкой нефти. В способе добычи вязкой нефти предварительно в призабойную зону пласта для формирования на забое катализаторной подушки с проницаемостью не ниже проницаемости...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522690
Дата охранного документа: 20.07.2014
20.07.2014
№216.012.de5b

Способ диагностики дефектов на металлических поверхностях

Изобретение относится к методам неразрушающего контроля и предназначено для определения дефектов и трещин на поверхности металлического оборудования и трубопроводов. На поверхность контролируемого объекта наносят напылением наночастицы золота цилиндрической формы длиной не более 100 нм и с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522709
Дата охранного документа: 20.07.2014
+ добавить свой РИД