Результат интеллектуальной деятельности: Способ оценки чувствительности опухоли к проводимой химиотерапии больных местно-распространенным раком молочной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для оценки эффективности химиотерапевтического лечения больных местно-распространенным раком молочной железы (МрРМЖ).

Применение данного метода в клинической практике позволит оценить непосредственный эффект проводимого лечения у больных с местно-распространенным раком молочной железы и в случае неудовлетворительного результата своевременно изменить тактику терапии.

Предлагаемое изобретение относится к исследованию биологических жидкостей химическими и физическими методами и используется в онкологии, клинической лабораторной практике для оценки эффективности химиотерапии при лечении злокачественных новообразований молочной железы, а также мониторинга лечения онкологических заболеваний.

Рак молочной железы (РМЖ) является наиболее частой злокачественной опухолью у женщин, регистрируется 1,4 млн новых случаев в год. К сожалению, в нашей стране доля III и IV стадий среди первичных больных высока, так, удельный вес для III стадии в 2012 г. составил 23,8%. Одним из основных методов лечения данной категории больных является химиотерапия, и главной задачей является повышение ее эффективности и поиск путей индивидуализации лечения.

Из литературных источников известен «Способ комплексной оценки чувствительности опухоли при раке молочной железы к химиотерапии», включающий комплексную оценку реакции опухоли на проводимое неоадъювантное лечение высокочувствительным методом с использованием препарата бромдиоксиуридина, маркера Ki-67 и анализа изменения дифференцировки злокачественных клеток (см. Патент РФ №2220418 С2, G01N 33/574).

Обнаружение отсутствия объективного ответа опухоли на лечение позволяет изменить схему химиотерапии, назначаемую в адъювантном режиме. Недостатком метода является инвазивность, так как для получения опухолевой ткани для исследования требуется выполнение трепанбиопсии.

Известен «Способ прогнозирования эффективности химиотерапии цитостатиками у больных со злокачественными новообразованиями эпителиальных тканей», включающий исследование плазмы крови до и после лечения с количественным определением содержания меди, цинка и железа (см. Алясова А.В. Клинико-неврологические и клинико-иммунологические характеристики рака молочной железы: Автореф. дис. д.м.н., Иваново, 2004, 43 с.).

Недостатком является то, что применение данной методики проводится только после 6-го курса химиотерапии, что затрудняет прогнозирование течения заболевания в более ранние сроки.

Известен «Способ определения ответа субъекта с раком молочной железы на антиэстрогенную терапию» (см. Дэниел X. Диагностика и лечение рака молочной железы // Патент России №2550925. 2015. Бюл. №14). Метод включает мультипараметрический анализ с использованием CellSearch®, которая идентифицирует пациентов с МрРМЖ с положительным статусом рецепторов эстрогенов, которые маловероятно получат выгоду от гормонотерапии, в лечении которых лучше использовать химиотерапию. Авторами разработан циркулирующие опухолевые клетки (ЦОК) - индекс эндокринной терапии (ЦОК-ИЭТ), при значении ЦОК-ИЭТ от 0-3 определяют благоприятный ответ на антиэстрогенную терапию, при значении 4-6 - умеренный ответ, а при значении 7-14 - слабый ответ.

Однако способ не может быть применен для определения ответа на различные варианты химиотерапии, а применим только при планировании гормонотерапии.

Анализ предыдущих методик показал, что несмотря на достаточно глубокие знания о прогностических факторах, используемых при оценке эффективности лечения у больных МрРМЖ, необходим поиск высокоспецифических и доступных для использования в рутинной практике маркеров, достоверно оценивающих чувствительность опухоли к проводимой химиотерапии.

Перспективным направлением исследования является определение ЦОК в периферической крови на этапах лечения у больных с местно-распространенным раком молочной железы и использование полученных значений в качестве диагностических критериев для оценки эффективности терапии.

В настоящее время определение ЦОК является новым независимым прогностическим фактором прогноза РМЖ (см. Budd G.T, Cristofanilli М, Ellis MJ, et al. Circulating tumor cells versus imaging - predicting overall survival in metastatic breast cancer. Clin Cancer Res. 2006, 12. 6403-9. Dawood S, Broglio K, Valero V, et al. Circulating tumor cells in metastatic breast cancer: from prognostic stratification to modification of the staging system? Cancer. 2008, 113(9). 2422-30. Ly A., Lester S.C., Dillon D. Prognostic factors for patients with breast cancer: traditional and new. Surgical pathology. 2012, 5. 775-785.) Прогностическая ценность выявления ЦОК была подтверждена в ряде исследований.

Особо значимая корреляция с прогнозом заболевания была отмечена при РМЖ (см. Pachmann K., Camara О., Kavallaris A., et al. Monitoring the response of circulating epithelial tumor cells to adjuvant chemotherapy in breast cancer allows detection of patients at risk of early relapse. J Clin Oncol. 2008, 26. 1208-15. Pierga J.Y., Bidard F.C., Mathiot C., et al. Circulating tumor cell detection predicts early metastatic relapse after neoadjuvant chemotherapy in large operable and locally advanced breast cancer in a phase II randomized trial. Clin Cancer Res. 2008, 14. 7004-10.). При этом проведенные исследования показали информативность метода при МрРМЖ.

По данным некоторых исследований содержание ЦОК в крови изменяется в зависимости от эффективности проводимой терапии. Диагностически значимое количество ЦОК составляет более 1 клетки в 7,5 мл. Оценка наличия/отсутствия циркулирующих опухолевых клеток в крови может быть использована в качестве мониторинга у больных, получающих системную химиотерапию (см. Бжадуг О.Б. Иммунологическая характеристика и клиническое значение опухолевых клеток, циркулирующих в периферической крови больных распространенным раком молочной железы: дисс … кандид. мед. наук. - М., 2007. - 177 с.).

До настоящего времени основными методами выявления ЦОК были иммуноцитологические (иммуноцитохимический, проточная цитометрия и EPISPOT) и молекулярно-биологические (RT-PCR) методы.

В лаборатории иммунофенотипирования опухолей ФГБУ «РНИОИ» МЗ РФ успешно апробирована система детекции циркулирующих опухолевых клеток CellSearch™ Veridex, Johnson & Johnson, США. Технология многоэтапного анализа в системе Cell Search™ основана на иммуномагнитном обогащении клеток при помощи металлических наночастиц, покрытых полимерным слоем, содержащим антитела к ЕрСАМ молекулам (маркеры эпителиальных клеток), и иммунофлуоресцентной идентификации собранных в магнитном поле клеток.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является определение эффективности проводимой химиотерапии у больных местно-распространенным раком молочной железы, улучшение качества лечения путем подбора индивидуальной схемы лечения.

Поставленный технический результат достигается тем, что проводят 6 курсов полихимиотерапии (ПХТ), при этом за сутки до первого курса ПХТ I линии определяют количество циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови, проводят 2 курса ПХТ I линии, затем за сутки до 3 курса повторно определяют количество ЦОК в периферической крови, при сохранении этого показателя на исходном уровне или при его увеличении проведенное лечение оценивают как неэффективное и меняют схему ПХТ I линии на схему ПХТ II линии, при снижении количества циркулирующих опухолевых клеток, по сравнению с исходным значением, проведенное лечение считают эффективным и продолжают химиотерапию по прежней схеме.

Способ осуществляется следующим образом.

У больных с местно-распространенным раком молочной железы проводится забор венозной крови в количестве 7,5 мл и выполняется исследование содержания ЦОК в периферической крови за сутки перед первым и за сутки перед 3-м курсом полихимиотерапии (ПХТ).

Концентрация ЦОК определяется с помощью системы детекции циркулирующих опухолевых клеток CellSearch™ Veridex, Johnson & Johnson, США. Диагностически значимым считается выявление 1 и более клеток в 7,5 мл периферической венозной крови.

Далее начинают лечение путем проведения 6 курсов противоопухолевой терапии.

ПХТ I линии осуществляется по одной из схем, например: АС (доксорубицин, циклофосфан), FAC (фторурацил, доксорубицин, циклофосфан), если у больной присутствует кардиопатология, запрещающая применение антрациклиновых антибиотиков, будет использована схема CMF (циклофосфан, метотрексат, фторурацил) (см. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний / под ред. Н.И. Переводчиковой, В.А. Горбуновой. - 4-е изд., расширенное и дополненное. - М.: Практическая медицина, 2015. - 688 с.).

За сутки перед 3-м курсом ПХТ исследование содержания ЦОК в периферической крови повторяют.

При сохранении количества ЦОК на том же уровне или в случае нарастания их концентрации, по сравнению с исходным состоянием, эффект от терапии считается неудовлетворительным и осуществляется смена на одну из более сильных схем ПХТ II линии: ТА (доксорубицин 50 мг/м², паклитаксел 175 мг/м²) или DA (доксорубицин 50 мг/м², доцетаксел 75 мг/м²).

При снижении количества ЦОК, по сравнению с исходным значением, эффект от терапии считается удовлетворительным и лечение продолжают по той же схеме.

Предлагаемое исследование отвечает критериям «новизна», так как в процессе проведения патентно-информационного исследования не выявлены источники патентной и научно-технической информации, которые бы порочили новизну изобретения.

Предлагаемое изобретение отвечает критерию «изобретательский уровень», так как не выявлено технических решений с существенными признаками предлагаемого способа.

Предлагаемое изобретение обеспечивает при его использовании следующий технический эффект:

- повышение эффективности проведения противоопухолевой терапии за счет раннего выявления прогрессирования заболевания и своевременной смены схемы лечения;

- снижение времени прогнозирования эффективности ПХТ цитостатиками;

- снижение экономических затрат на неэффективное лечение больных.

Приводим клинические примеры применения предлагаемого нами изобретения.

Пример №1

Пациентка А., 63 года.

Диагноз: рак правой молочной железы (III В стадия заболевания, T4N1M0). Диагноз заболевания подтвержден гистологически (инфильтрирующий дольковый рак с воспалением стромы опухоли).

Иммуногистохимическое исследование: экспрессия рецепторов эстрогена - 100% ядер, прогестерона - 10% ядер, высокая пролиферативная активность (Ki-67) - 60%, экспрессия Her2/neu - 0.

За сутки до первого курса ПХТ больной выполнено определение содержания ЦОК в периферической крови, было получено 7 клеток на 7,5 мл.

Больной проведены 2 курса ПХТ по схеме АС (доксорубицин, эндоксан).

После 2 курса, за сутки до 3-го курса повторно определено количество ЦОК, отмечено увеличение количества клеток до 30 в 7,5 мл. При этом у больной клинически наблюдалось прогрессирование заболевания в виде нарастания размеров первичной опухоли в пораженной железе и регионарных подкрыльцовых л/у.

Выполнена смена схемы лечения на II линию (TP).

Далее проведено 4 курса ПХТ по схеме TP (паклитаксел, карбоплатин). Клинически наблюдался регресс опухоли, больная была успешно прооперирована, проведен курс послеоперационной ДГТ.

В течение 1 года наблюдения данных за прогрессирование заболевания не выявлено.

Пример №2

Пациентка В., 66 лет.

Диагноз: рак правой молочной железы (T3N3M0, IIIC). Диагноз заболевания подтвержден гистологически (протоковый рак).

Иммуногистохимическое исследование: экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона отсутствует, высокая пролиферативная активность (Ki-67) - 30%, экспрессия Her2/neu - 0.

За сутки до первого курса лечения больной выполнено определение содержания ЦОК в периферической крови, было получено 5 клеток на 7,5 мл.

Больной проведены 2 курса ПХТ по схеме FAC (5-фторурацил, доксорубицин, эндоксан). После 2 курса за сутки до 3-го курса повторно определено количество ЦОК, отмечено снижение количества клеток до 2 в 7,5 мл. При этом у больной клинически наблюдался эффект от терапии в виде частичного регресса первичного опухолевого узла на 40%.

Продолжено лечение по той же схеме до 6 курсов.

Клинически наблюдался полный регресс опухоли, больная была успешно прооперирована, проведен курс послеоперационной ДГТ. В течение 18 месяцев наблюдения данных за прогрессирование заболевания не выявлено.

Данным способом было пролечено 35 больных. Способ позволяет улучшить качество лечения больных местно-распространенным раком молочной железы за счет оценки эффективности проводимой химиотерапии и подбора индивидуальной схемы лечения