Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХИ ОПУХОЛЕВОГО ГЕНЕЗА

Изобретение относится к медицине и биохимии и может быть использовано для дифференциальной диагностики механической желтухи опухолевого и неопухолевого генеза, например, желчнокаменная болезнь, склерозирующий холангит, воспалительные и посттравматические стриктуры холедоха.

Длительный желтушный период повышает вероятность развития осложнений в до- и послеоперационном периоде. Летальность при хирургических вмешательствах у больных механической желтухой достигает 30%, что значительно выше, чем у больных с ликвидированной механической желтухой до операции, а при развитии печеночной недостаточности у пожилых больных - 80%. Для определения лечебной тактики и прогноза необходимо как можно более четко определить причину механической желтухи. Излишнее обследование приводит к потере времени и более частым развитиям острой печеночной недостаточности. Поэтому необходима разработка оптимального алгоритма обследования пациентов с механической желтухой.

Для установления причин механической желтухи в настоящее время используют в основном инструментальные методы. Известен способ диагностики причины возникновения механической желтухи (Патент №2199744 Способ установления причины возникновения механической желтухи / Потехина Ю.П., Страхов А.В., Зубеев П.С., Бузоверя М.Э., Щербак Ю.П., 2000). При обследовании состояния желчевыводящих путей с помощью чрескожной чреспеченочной пункционной холангиографии под контролем УЗИ дополнительно осуществляют забор порции желчи, наносят каплю желчи объемом 0,02 мл на предметное стекло, высушивают при комнатной температуре при минимальном движении воздуха в течение 18-24 ч. Исследуют с помощью микроскопа и при обнаружении в центральной зоне образца кристаллов ромбовидной формы с отходящими от них дендритами диагностируют опухолевый генез механической желтухи. При наличии только дендритоподобных кристаллов или при аморфной центральной зоне высушенной капли диагностируют неопухолевый генез механической желтухи.

Недостатки прототипа: относительно низкая информативность, дороговизна, выявление "опухолевых" желтух уже при неоперабельных стадиях онкологического процесса, малое количество специалистов, владеющих методом проведения ретроградной холангиопанкреатографии.

Технический результат: ускорение и упрощение способа при высокой точности.

Указанный результат достигается путем определения содержания меди в плазме крови больных механической желтухой. При его значении в плазме крови, равном и выше 30,88 мкмоль/л, определяют механическую желтуху опухолевого генеза.

Способ осуществляют следующим образом: полученную при венепункции кровь в объеме 2,0 мл центрифугируют 10 мин. при 3000 оборотах/минуту. Плазму крови используют для дальнейшего анализа.

Содержание меди определяют по методу (Landers J.W., Zak В. Determination of serum copper and iron in a single small sample // Am J. Clin. Pathol. - 1958. - V. 29, №6. - P. 590-592). Принцип метода - взаимодействие ионов меди с раствором 2,9-диметил-4,7-дифенил-1,10-фенантролин-3,6-дисульфоната с образованием устойчивого комплексного соединения оранжевого цвета.

Для приготовления рабочего раствора 1 в мерную колбу вместимостью 100 мл отмеряют пипеткой точно 1,00 мл Реактива 1 (медь сернокислая 3 ммоль/л) и разбавляют дистиллированной водой до метки. Раствор содержит 30 мкмоль меди/л. Устойчивость: несколько недель при t от +15°С до +25°С. Для приготовления рабочего раствора 2 всю навеску Реактива 3 (гидроксиламин сернокислый 1,25 г/флакон) растворяют во всем объеме Реактива 4 (трихлоруксусная кислота 0,6 моль/л + соляная кислота 2 моль/л). Устойчивость: 3 месяца при t от +2°С до +8°С. В трех пробирках смешивают 1 мл раствора 2 и 1 мл сыворотки (проба), раствора 1 (стандарт) или дистиллированной воды (контрольный раствор). Перемешивают и через 30 мин пробу центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. В следующих трех пробирках смешивают 1 мл надосадочной жидкости, стандарта или контрольного раствора и 1 мл Реактива 2. Перемешивают и через 30 мин измеряют оптическую плотность пробы (A1) и стандарта (А2) против контрольного раствора при длине волны 480 нм в кювете 1 см при температуре с +15 до +25°С. Далее проводят расчет по формуле: Медь (мкмоль/л) = 30*А1/А2, где A1 - оптическая плотность опытной пробы, А2 - оптическая плотность стандарта.

При значении содержания меди в плазме крови, равном и выше 30,88 мкмоль/л, определяют механическую желтуху опухолевого генеза.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Здоровый Б., муж., 57 лет. Содержание меди в плазме крови - 17,7 мкмоль/л, что соответствует нормальным известным величинам.

Пример 2. Больной К., муж., 60 лет. Диагноз - ЖКБ, опухоль головки ПЖ, механическая желтуха. Содержание меди в плазме крови - 37,65 мкмоль/л. В данной ситуации в плазме крови больного механической желтухой содержание меди повышено в 2 раза по сравнению с содержанием меди в плазме крови здоровых людей, что свидетельствует об опухолевой этиологии механической желтухи.

Пример 3. Больная К., жен., 75 лет. Диагноз - ЖКБ, механическая желтуха. Содержание меди в плазме крови - 27,2 мкмоль/л. В плазме крови больной механической желтухой содержание меди повышено в 1,5 раза по сравнению с содержанием меди в плазме крови здоровых людей, что свидетельствует о наличии камней во внепеченочных желчных протоках и, соответственно, не опухолевой этиологии механической желтухи.

Пример 4. Больная К., жен., 84 года. Диагноз - опухоль головки ПЖ, механическая желтуха. Содержание меди в плазме крови - 34,7 мкмоль/л. В данном случае в плазме крови больной механической желтухой содержание меди повышено в 2 раза по сравнению с содержанием меди в плазме крови здоровых людей, что свидетельствует об опухолевой этиологии механической желтухи.

Определение содержания меди в плазме крови проведено у 15 здоровых людей (17,8±3,98 мкмоль/л). Содержание меди в плазме крови всех больных с механической желтухой (34,82±6,86 мкмоль/л) оказалось в 2 раза выше, чем в плазме крови здоровых лиц. В плазме крови 13 больных с механической желтухой опухолевого генеза содержание меди достоверно выше (38,33±6,25 мкмоль/л), чем в плазме крови больных с механической желтухой, обусловленной наличием камней во внепеченочных желчных протоках (25,16±4,54 мкмоль/л). Содержание меди в плазме крови 8 больных с желчнокаменной болезнью без механической желтухи (23,4±1,9 мкмоль/л) достоверно не отличалось от контроля.

Положительный эффект.

Исследуемый параметр - содержание меди в плазме крови - сохраняет свою значимость в течение всего желтушного периода.

При значении содержания меди в плазме крови, равном и выше 30,88 мкмоль/л, определяют механическую желтуху опухолевого генеза.