×
10.05.2016
216.015.3b00

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ОСТРОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ ПОЧКИ В УСЛОВИЯХ ТЕПЛОВОЙ ИШЕМИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА И ПОЛА ЖИВОТНЫХ

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к экспериментальной медицине, онкологии и может быть использовано для прогнозирования развития острого повреждения почки в условиях тепловой ишемии в эксперименте в зависимости от возраста и пола животных. При росте содержания цистатина С у молодых самцов в 1,7 раза, у старых самок в 1,3 раза и/или при росте содержания L-FABP у молодых самцов в 1,8 раз, у старых самок в 5,8 раз при длительности ишемии 15 минут прогнозируют развитие острой почечной недостаточности. При росте содержания цистатина С в 1,2 раза у молодых самок и в 1,5 раза у старых самцов и/или при росте содержания L-FABP в 1,6 раза у старых самцов при длительности ишемии 25 минут прогнозируют развитие острой почечной недостаточности. Способ позволяет доступно провести прогнозирование развития острой почечной недостаточности за счет оценки уровня цистатина С, L-FABP в зависимости от возраста и пола животных и длительности тепловой ишемии. 2 табл.
Основные результаты: Способ прогнозирования развития острого повреждения почки в условиях тепловой ишемии в эксперименте в зависимости от возраста и пола животных, характеризующийся тем, что при росте содержания цистатина С у молодых самцов в 1,7 раза, у старых самок в 1,3 раза и/или при росте содержания L-FABP у молодых самцов в 1,8 раз, у старых самок в 5,8 раз при длительности ишемии 15 минут; при росте содержания цистатина С в 1,2 раза у молодых самок и в 1,5 раза у старых самцов и/или при росте содержания L-FABP в 1,6 раза у старых самцов при длительности ишемии 25 минут прогнозируют развитие острой почечной недостаточности.

Краеугольным камнем при резекции почки остается время тепловой ишемии. Изучение результатов резекций почек, выполненных в условиях тепловой ишемии и без нее, показало, что вероятность развития острой почечной недостаточности была значительно выше в группе пациентов, перенесших вмешательство в условиях ишемии, причем каждая минута пережатия почечных сосудов усиливала этот риск (см. Thompson R.H. Every minute counts when the renal hilum is clamped during partial nephrectomy / R.H. Thompson [et al.] // European Urology. - 2010. - Vol. 58. - P. 340-345; см. Thompson R.H. comparison of warm ischemia versus no ischemia during partial nephrectomy on a solitary kidney / R.H. Thompson [et al.] // European Urology. - 2010. - Vol.58. P. 331-336).

Имеются данные, указывающие, что продолжительная тепловая ишемия почки вызывает стойкое снижение скорости клубочковой фильтрации уже через 3 месяца после операции, без тенденции к дальнейшему ухудшению. Причем среди пациентов с исходной скоростью клубочковой фильтрации >30 мл/мин/1,73 м2 и резекцией почки, выполненной с тепловой ишемией, риск развития хронической болезни почек тяжелой стадии в течение 3 лет после операции был гораздо выше (см. Porpiglia F. Long-term functional evaluation of the treated kidney in a prospective series of patients who underwent laparoscopic partial nephrectomy for small renal tumors / F. Porpiglia [et al.] // European Urology. - 2012. - Vol. 62. - P. 130-135).

На сегодняшний день рекомендованная максимальная продолжительность тепловой ишемии год от года становится все меньше, и рассчитывать на хорошие ранние и отдаленные функциональные результаты резекции можно, если продолжительность тепловой ишемии не превышает 20 минут (см. Becker et al. Assessing the impact of ischaemia time during partial nephrectomy // European Urology. - 2009. - Vol. 56. - P. 625-635).

Была исследована связь между шкалами оценки опухоли и временем тепловой ишемии в ходе открытой резекции почки. По данным КТ опухоли 78 пациентов были охарактеризованы с использованием трех систем: нефрометрической шкалы R.E.N.A.L.1, PADUA и С index. Средние значения для трех систем составили соответственно 7, 8 и 3,9. Среднее время тепловой ишемии равнялось 23,4 мин. Диаметр опухоли, близость к полостной системе, передняя/задняя локализация, медиальная/латеральная локализация и вовлечения полостной системы были чрезвычайно связаны с продолжительностью ишемии. Со временем ишемии были значительно связаны только высокие значения R.E.N.A.L. и PADUA, но не С index (см. Lavallee L.T. The association between renal tumour scoring systems and ischemia time during open partial nephrectomy / L.T. Lavallee [et al.] // Can Urol Assoc J. - 2012. - Vol. 15. - P.1 - 8.1).

В другом исследовании была показана ценность шкалы R.E.N.A.L. для прогноза времени тепловой ишемии, объема кровопотери и интраоперационного повреждения полостной системы почки в ходе лапароскопической и робот-ассистированной резекции (см. Mayer W.A. Higher RENAL Nephrometry Score is predictive of longer warm ischemia time and collecting system entry during laparoscopic and robotic-assisted partial nephrectomy / W.A. Mayer [et al.] // Urology. - 2012. - Vol. 79 (5). - P. 1052-1056). Авторы делают вывод, что шкала R.E.N.A.L. в целом, а также уровни N и R могут помочь спрогнозировать время тепловой ишемии и вероятность нарушения целостности полостной системы почки в ходе указанных операций, что позволит спланировать ход оперативного вмешательства.

Интересно, что опыт хирурга, размер и другие анатомические характеристики опухоли, определенные по шкале PADUA, а также необходимость восстановления полостной системы почки являются независимыми предикторами времени тепловой ишемии >20 мин.

Аналогично, опыт хирурга, размер опухоли, другие анатомические характеристики опухоли, определенные по шкале PADUA, являются независимыми предикторами осложнений в целом (см. Ficarra V. Predictors of warm ischemia time and perioperative complications in a multicenter, international series of robot-assisted partial nephrectomy / V. Ficarra [et al.] // European Urology. - 2012. - Vol. 61 (2). - P. 395-402).

Таким образом, не определен безопасный порог времени тепловой ишемии, т.к. каждая ее минута вносит свой вклад в развитие острого повреждения почки (ОПП) и снижение почечной функции.

Необходимо выявлять повреждение почки на самом раннем этапе, чтобы предотвращать развитие острой, а затем и хронической почечной недостаточности (см. Мосоян М.С., Аль-Шукри С.Х., Есаян A.M., Ильин Д.М., Корза С.В. Резекция почки в условиях регионарной ишемии// Вестник Национального медико-хирургического центра им. Н.И. Пирогова, 2013. - Т. 8. - №2. - С. 43-47). Для этого необходимо изучение на этапах ишемии основных функциональных показателей повреждения почек. Неоценимую помощь в этом вопросе может дать эксперимент.

На сегодняшний день совершенствование методов диагностики и прогноза развития ОПП связывают с определением биологических маркеров, не зависящих от фильтрационной функции почек и связанных с ранней стадией развития ОПП (см. Devarajan P. Emerging urinary biomarkers in the diagnosis of acute kidney injury // Expert. Opin. Med. Diag. 2008; 2 (4): 387-398). К ним относятся липокалин-2 (neutrophil gelatinase-associated lipocalin-NGAL), интерлейкин-18 (ИЛ-18), молекула почечного повреждения-1 (Na+/H+ обменник типа 3 - NHE-3), ряд ферментов, обычно локализующихся в щеточной кайме проксимальных канальцев, и другие показатели (см. Melnikov V.Y., Molitoris В.A. Improvements in the diagnosis of acute kidney injury // Saudi J Kidney Dis Transpl. 2008; 19 (4): 537-544; Waikar S.S., Liu K.D., Chertow G.M. Diagnosis, epidemiology and outcomes of acute kidney injury // Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2008; 3 (3): 844-861).

Техническим результатом является прогнозирование развития острой почечной недостаточности в зависимости от длительности тепловой ишемии, возраста и пола животныхт

Технический результат достигается тем, что при росте содержания цистатина С у молодых самцов в 1,7 раза, у старых самок в 1,3 раза и/или при росте содержания L-FABP у молодых самцов в 1,8 раз, у старых самок в 5,8 раз при длительности ишемии 15 минут; при росте содержания цистатина С в 1,2 раза у молодых самок и в 1,5 раза у старых самцов и/или при росте содержания L-FABP в 1,6 раза у старых самцов при длительности ишемии 25 минут прогнозируют развитие острой почечной недостаточности.

Способ осуществляется следующим образом.

Моделирование ишемического повреждения проводят на правой почке. Наркотизированных животных размещают в положении «на спине». Шерсть на животе удаляют, операционное поле обрабатывают антисептиками (хлоргексидин и 70% этанол).

Разрез проводят вдоль белой линии живота от мечевидного отростка грудины до лобка, рассекают кожу и соединительную ткань.

Выделяют почечную ножку, подводят под нее шелковую лигатуру, затягивают простым узлом.

Рану на протяжении периода ишемии прикрывают салфеткой, смоченной антисептиками.

Через определенные промежутки времени животных забивают декапитацией, не выводя из наркоза.

Для исследования забирают правую (ишемизированную) почку.

100 мг ткани промывают 1х фосфатно-солевым буфером (PBS), гомогенизируют в 1 мл lx PBS и оставляют на ночь при -20 C.

Для полного разрушения клеточных мембран проводят два цикла замораживания-оттаивания. Полученную суспензию центрифугируют 5 мин при 5000g (2-8°C).

Супернатант отбирают, делят на аликвоты и хранят при -20°C или -80°C.

Перед измерением размороженные образцы центрифугируют.

Исследование проводят в ткани коркового вещества ишемизированной почки методом ИФА с применением стандартных тест-систем изучают уровень цистатина С, нг/г тк (BioVendor, Чехия), L-FABP, нг/г тк (HycultBiotechnology, Нидерланды).

При росте содержания цистатина С у молодых самцов в 1,7 раза, у старых самок в 1,3 раза и/или при росте содержания L-FABP у молодых самцов в 1,8 раз, у старых самок в 5,8 раз при длительности ишемии 15 минут; при росте содержания цистатина С в 1,2 раза у молодых самок и в 1,5 раза у старых самцов и/или при росте содержания L-FABP в 1,6 раза у старых самцов при длительности ишемии 25 мин прогнозируют развитие острой почечной недостаточности.

Были исследованы 170 белых беспородных крыс обоего пола массой 180-200 г (молодые животные) и 300-350 г (старые животные).

Из них интактную группу составили 40 животных соответствующего возрата (по 10 животных на каждую возрастную группу).

Статистический анализ результатов проводили с помощью пакета Statistica 6,0 (Stat-Soft, 2001).

Оценку достоверности производили с использованием t-критерия Стьюдента. Уровень р<0,05 принимали как значимый.

Результаты содержания цистатина С и L-FABP в тканях почки, подвергнутой острой ишемии, представлены в табл. 1-2.

Через 15 мин ишемии в корковом веществе ишемизированной почки обнаружено повышение уровня цистатина С в 1,7 раза относительно интактных групп животных у молодых самцов и в 1,3 раза у старых самок.

В ткани ишемизированной почки молодых самок и старых самцов исследуемый маркер оставался на уровне интактной ткани.

Через 20 мин ишемии уровень маркера продолжал достоверно повышаться у старых самок (в 1,5 раза) и у молодых самцов (в 1,7 раза - так же, как и в предыдущем сроке).

В ткани ишемизированной почки молодых самок и старых самцов исследуемый маркер оставался на уровне интактной ткани.

Через 25 мин ишемии наблюдалось продолжающееся повышение роста содержания цистатина С у старых самок (в 1,6 раза). У молодых самцов этот показатель сохранялся на том же повышенном уровне.

Однако, в ткани ишемизированной почки молодых самок наблюдался рост этого показателя в 1,2 раза и у старых самцов в 1,5 раз, по сравнению с интактными животными.

Такие изменения содержания цистатина С свидетельствуют о нарушении его метаболизма вследствие ишемии почек: у молодых самцов и у старых самок уже через 15 мин ишемии, а у молодых самок и старых самцов через 25 мин.

В процессе ишемизации обнаружена различная динамика маркера, также зависящая от пола и возраста животных.

Через 15 мин ишемии в корковом веществе ишемизированной почки молодых самцов наблюдалось повышение этого показателя (в 1,8 раз) с той же динамикой через 20 мин и 25 мин тепловой ишемии (табл. 2).

У старых самок через 15 мин ишемии в 5,8 раза возрастало содержание L-FABP с последующим, хотя и незначительным, нарастанием в сроки 20 мин (в 6,7 раза) и 25 мин (в 6,7 раза).

Иная динамика содержания L-FABP обнаружена в тканях ишемизированных почек старых самцов и молодых самок. Так, в корковом веществе ишемизированной почки старых самцов повышение уровня маркера в 1,6 раза зарегистрировано лишь через 25 мин.

Не найдено увеличение содержания L-FABP в корковом веществе ишемизированной почки молодых самок. Поскольку считается, что увеличение содержания L-FABP в моче при ОПП происходит преимущественно за счет повреждения проксимальных канальцев, логично предположить более раннее развитие событий в почках старых самок и молодых самцов, наступающее уже через 15 мин ишемии.

Изобретение «Способ прогнозирования развития острого повреждения почки в условиях тепловой ишемии в эксперименте в зависимости от возраста и пола животных» является промышленно применимым, так как может быть использовано в научно-исследовательских учреждениях онкологического профиля для воспроизведения экспериментальной модели прогнозирования развития острой почечной недостаточности с целью разработки методов экспериментальной терапии этой патологии.

Способ экономичен, доступен, обеспечивает возможность прогнозирования развития острой почечной недостаточности в зависимости от длительности тепловой ишемии.

Способ прогнозирования развития острого повреждения почки в условиях тепловой ишемии в эксперименте в зависимости от возраста и пола животных, характеризующийся тем, что при росте содержания цистатина С у молодых самцов в 1,7 раза, у старых самок в 1,3 раза и/или при росте содержания L-FABP у молодых самцов в 1,8 раз, у старых самок в 5,8 раз при длительности ишемии 15 минут; при росте содержания цистатина С в 1,2 раза у молодых самок и в 1,5 раза у старых самцов и/или при росте содержания L-FABP в 1,6 раза у старых самцов при длительности ишемии 25 минут прогнозируют развитие острой почечной недостаточности.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 131-140 of 175 items.
19.07.2018
№218.016.72a1

Способ прогнозирования развития метастазов в регионарные лимфоузлы у пациентов с аденокарциномой желудка

Изобретение относится к молекулярной онкологии и представляет собой способ прогнозирования метастазов в регионарные лимфоузлы при аденокарциноме желудка, отличающийся тем, что осуществляют амплификацию фрагментов локусов В2М, NFKB1 и HER2 NFKB1 и HER2 методом ПЦР в реальном времени,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002661600
Дата охранного документа: 17.07.2018
19.07.2018
№218.016.72c1

Тест-система для прогнозирования развития рецидивов у больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена esr1

Изобретение относится к молекулярной биологии, онкологии и биотехнологии. Тест-система для прогнозирования рецидивов у больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1 содержит контрольные смеси и смесь для ПЦР-РВ реакции, включающую 1 мМ dNTPs, 12,5 мМ MgCl, 5-кратный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002661599
Дата охранного документа: 17.07.2018
21.07.2018
№218.016.72f3

Способ достижения антиметастатического эффекта в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано в разработке способов достижения антиметастатического эффекта. Способ включает паратуморальное введение иммуномодуляторов мышам-опухоленосителям с меланомой В16 через 10 дней...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002661704
Дата охранного документа: 19.07.2018
09.08.2018
№218.016.788d

Способ прогнозирования метастазов в кости рака молочной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования метастазов в кости рака молочной железы. Способ включает лабораторное биохимическое исследование, при этом у больных раком молочной железы в плазме крови определяют концентрацию фибриногена....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002663467
Дата охранного документа: 06.08.2018
09.08.2018
№218.016.794c

Способ лечения местно-распространенного нерезектабельного рака поджелудочной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения местно-распространенного нерезектабельного рака поджелудочной железы. Для этого в условиях процедурного кабинета после обработки кожи передней грудной стенки раствором антисептика вводят внутрикожно по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002663468
Дата охранного документа: 06.08.2018
09.08.2018
№218.016.79fb

Способ прогнозирования риска развития послеоперационных сердечно-сосудистых осложнений лапароскопических операций при метастатическом раке толстой кишки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска осложнений сердечно-сосудистой системы после лапароскопических операций при метастатическом раке толстой кишки. У каждого больного на дооперационном этапе в качестве параметров состояния...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002663078
Дата охранного документа: 01.08.2018
19.08.2018
№218.016.7cec

Способ прогнозирования развития тромбоэмболии легочной артерии у онкологических больных с флеботромбозом нижних конечностей

Изобретение относится к медицине, а именно к сосудистой хирургии, и представляет собой способ прогнозирования развития тромбоэмболии легочной артерии у онкологических больных с флеботромбозом нижних конечностей, заключающийся в том, что при развитии венозного тромбоза в системе нижней полой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002664448
Дата охранного документа: 17.08.2018
26.10.2018
№218.016.9617

Способ прогнозирования роста опухоли в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для прогнозирования роста опухоли в эксперименте. Способ прогнозирования заключается в том, что белым беспородным крысам или крысам линии Wistar с привитой в подкожную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670656
Дата охранного документа: 24.10.2018
26.10.2018
№218.016.9632

Способ устранения дефектов век и окружающих зон лица после удаления опухолей данной зоны

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии. Осуществляют пересадку донорского материала. При этом предварительно производят забор крови из лучевой вены пациента. Получают методом двойного центрифугирования плазму, богатую тромбоцитами. Осуществляют липоаспирацию, смешивают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670659
Дата охранного документа: 24.10.2018
13.12.2018
№218.016.a6a1

Способ прогнозирования течения заболевания у больных локальным почечно-клеточным раком почки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения патологического процесса у больных локальным почечно-клеточным раком почки после хирургического лечения. Сущностью способа является то, что в образцах опухолевой ткани и в образцах...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002674677
Дата охранного документа: 12.12.2018
Showing 131-140 of 181 items.
26.01.2019
№219.016.b4ad

Малоинвазивный способ диагностики рака легкого на основании изменения копийности локуса мтднк hv2

Изобретение относится к биотехнологии. Определение копийности генетического локуса HV2 относительно референсного гена GAPDH проводят методом ПЦР-РВ в присутствии красителя EVA-Green. Используют высокоспецифичные праймеры: для HV2 F - GGGAGCTCTCCATGCATTTGGTA, R - AAATAATAGGATGAGGCAGGAATC; для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002678227
Дата охранного документа: 24.01.2019
02.02.2019
№219.016.b619

Способ модифицированного химиолучевого лечения рака прямой кишки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для модифицированного химиолучевого лечения рака прямой кишки. Для этого выполняют катетеризацию верхней прямокишечной артерии через бедренную артерию, в которую вводят цисплатин 50 мг на 5% глюкозе 50 мл и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002678642
Дата охранного документа: 30.01.2019
11.03.2019
№219.016.d5d9

Способ визуализации эффективности лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, урологии и лучевой диагностике, и может быть использовано для визуализации эффективности лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы. Проводят мультипараметрическую магнитно-резонансную томографию органов малого таза с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681508
Дата охранного документа: 06.03.2019
11.03.2019
№219.016.d609

Способ премедикации у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией, контролируемой ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента

Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и онкоурологии, и может быть использовано при проведении премедикации и последующего анестезиологического пособия при оперативных вмешательствах у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией I-II степени, принимающих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681496
Дата охранного документа: 06.03.2019
14.03.2019
№219.016.def0

Способ диагностики клинически значимого рака предстательной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, урологии и лучевой диагностике, и может быть использовано для диагностики клинически значимого рака предстательной железы. Проводят перед биопсией предстательной железы мультипараметрическую магнитно-резонансную томографию органов малого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681754
Дата охранного документа: 12.03.2019
30.03.2019
№219.016.f9cd

Тест-система для прогнозирования развития метастазов у больных раком желудка на основании определения числа копий hv2 мтднк

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной биологии и онкологии. Предложена тест-система для прогнозирования развития метастазов у больных раком желудка на основании определения числа копий HV2 мтДНК, содержащая высокоспецифичные праймеры для генов HV2 и В2М с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683571
Дата охранного документа: 29.03.2019
25.04.2019
№219.017.3b8a

Способ лечения больных местно-распространенными злокачественными опухолями полости рта и языка

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии. После предварительного ангиографического исследования и выявления «целевых» сосудов, кровоснабжающих опухоль, на первом этапе лечения проводят суперселективную внутриартериальную химиотерапию, максимально насыщая зону опухоли...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002685796
Дата охранного документа: 23.04.2019
27.04.2019
№219.017.3caf

Способ выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей

Изобретение относится к медицине, а именно к детской онкологии, хирургии и лучевой диагностике, и может быть использовано для выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей. В предоперационном периоде пациентам выполняют компьютерную томографию грудной клетки. Измеряют объем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686043
Дата охранного документа: 23.04.2019
02.05.2019
№219.017.4849

Способ прогнозирования развития метастазов в печени у больных раком толстой кишки

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной онкологии, и предназначено для прогнозирования развития метастазов в печени у больных раком толстой кишки. Осуществляют выделение суммарной РНК из тканевых проб с помощью метода гуанидин-тиоционат-фенол-хлороформной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686687
Дата охранного документа: 30.04.2019
02.05.2019
№219.017.4872

Способ прогнозирования перитонеальных метастазов рака желудка

Изобретение относится к медицине и предназначено для ранней диагностики метастазов рака желудка в брюшину и сальник. Во время операции по поводу рака желудка в ткани большого сальника и брюшины методом иммуноферментного анализа определяют содержание белка СА-19.9, при его уровне в сальнике,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686689
Дата охранного документа: 30.04.2019
+ добавить свой РИД