СПОСОБ СНИЖЕНИЯ ГОРМОНАЛЬНО ОБУСЛОВЛЕННОГО ИММУНОСУПРЕССИВНОГО ЭФФЕКТА КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ГОМЕОПАТИЧЕСКИМИ ПРЕПАРАТАМИ in vitro

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в лабораторной работе для снятия иммуносупрессивного эффекта гормональных стероидных препаратов при изучении клеточного иммунитета животных.

Известен «Модулятор клеточного иммунитета» (патент РФ №2146528, кл. A61K 35/78 от 20.03.2000), включающий приготовление растительного экстракта из свежих листьев Geranium robertanium, сухих листьев Plantago lanceolata и сухих листьев Calendula officinales. Листья настаивают в течение 8 дней при комнатной температуре, при одно- или многократных ежедневных помешиваниях.

Недостатком известного способа является длительность срока приготовления препарата (до 15 дней), необходимость наличия лабораторных животных и ограниченный срок его хранения.

Ближайшим техническим решением к данному изобретению является способ оценки клеточного иммунитета в опсонофагоцитарной реакции (ОФР) нейтрофилов крупного рогатого скота, которую проводили по методике (Оценка естественной резистентности сельскохозяйственных животных: Метод, рекомендации / Россельхозакадемия, Сиб. Отд-ие, ГНУ ИЭВС и ДВ, ГНУ ВИЕВ, ФГОУ НРИПК АПК МСХ РФ, НГАУ. - Новосибирск, 2003. - 32 с.). Оценку снижения иммуносупрессивного влияния препарата глюкортин клеточного иммунитета учитывали по изменению фагоцитарной активности (ФА) нейтрофилов, фагоцитарного числа (ФЧ) нейтрофилов, фагоцитарного индекса (ФИ) нейтрофилов, фагоцитарной емкости (ФЕ) нейтрофилов и переваривающей способности крови (ПСК).

Задача изобретения - расширение арсенала способов снижения гормонально обусловленного иммуносупрессивного эффекта клеточного иммунитета гомеопатическими препаратами в условие in vitro.

Указанная задача достигается тем, что в способе снижения гормонально обусловленного иммуносупрессивного эффекта клеточного иммунитета гомеопатическими препаратами in vitro, включающем использование лейкоцитарной взвеси, гомеопатического и гормонального препаратов, разведенных в физиологическом растворе в выбранном разведении (Д15, С6, С12, С30, С200), согласно изобретению, к лейкоцитарной взвеси в объеме 0,5 мл добавляют 0,01 мл гормонального препарата (Глюкортин-20), затем полученный раствор помещают в термостат на 2 часа при Т=37±0,5°C, после этого, вносят по 0,5 мл гомеопатического препарата, разведенного в физиологическом растворе в выбранном разведении, раствор вновь помещают в термостат на 4 часа при Т=37±0,5°C, затем вносят взвесь микроорганизмов референтного штамма Staphylococcus albus №182 по 0,5 мл, содержащую 10⁹ КОЕ / в 1 мл физиологического раствора, далее помещают в термостат на 30 минут при Т=37±0,5°C, после инкубации, мазки крови фиксируют в спирт-формалине 1:9 (40% раствор формалина и 96° спирт) в течение 10 минут и окрашивают по Романовскому-Гимза в течение 30 минут.

Для определения достоверности полученные результаты сопоставляли с результатами исследований в контрольных группах. В 1-й контрольной группе использовали глюкортин и 0,85% водный раствор NaCl, во 2-й контрольной группе использовали 0,85% водный раствор NaCl. Оценку роста показателя активности клеточного иммунитета проводили по отношению к показателям контрольных групп.

Пример. Снижение гормонально обусловленного иммуносупрессивного эффекта клеточного иммунитета гомеопатическими препаратами показало, что при применении 30% исследуемых препаратов в зависимости от вида и степени разведения, отмечен рост или тенденция к росту показателя (ФИ, ФЧ нейтрофилов). Так, активацию клеточного иммунитета (ФИ и ФЧ) наблюдали при контакте с Фитолаккой (С6, С200) от 57,6 до 120%, с Фенугросци (С6, С12) от 30 до 49%, с Ипекакуана (С6, С200) от 17 до 32% относительно контрольной группы (табл.1).

Снижение иммуносупрессивного эффекта гормоносодержащего препарата (Глюкортин) на клеточный иммунитет гомеопатическими лекарственными средствами выражается в стимулирующем влияние показателей ФА и ФЕ нейтрофилов у 20 (100%) исследуемых препаратов. Так, максимальный рост показателей ФА и ФЕ отмечен при применении Фенугросци (С6, С12) от 34 до 110%, Кониума (С30) от 98 до 120%, Аконита (С6, С12) от 59 до 192%, Лахезиса (Д15, С12, С30, С200) от 42,3 до 204%, Арсеникум альбум (С6, С30, С200) от 76,9 до 221,7%.

Снижение гормонально обусловленного иммуносупрессивного эффекта клеточного иммунитета гомеопатическими препаратами привело к выраженному росту показателя ПСК при одновременном воздействии препарата с различными разведениями. Так, рост показателя ПСК при применение Арсеникум альбум (С6, С30, С200) составил от 36 до 133%, а при использовании Лахезис (С12, С30, С200) - от 40 до 183%.