Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ЯЗВЕННОГО КОЛИТА И БОЛЕЗНИ КРОНА У ДЕТЕЙ

Изобретение относится к медицине, а именно к детской гастроэнтерологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний кишечника у детей.

Неспецифический язвенный колит (НЯК) и болезнь Крона относятся к хроническим воспалительным заболеваниям толстой кишки, которые все чаще встречаются в детском возрасте.

Несмотря на общность этих заболеваний по клиническим проявлениям и схожесть патогенетических механизмов проводить дифференциальную диагностику этих заболеваний необходимо для выбора терапевтического алгоритма.

В консенсусе ЕССО и F.SPGHAN принято, что дифференциальный диагноз данных заболеваний должен быть основан на сочетании анамнеза, клиники, илеоколоноскопии с гистологическим исследованием биоптатов.

Однако практика показывает, что даже комплексный подход в установлении формы воспалительного заболевания кишечника вызывает у практических врачей значительные трудности, и у многих пациентов с момента появления первых симптомов заболевания до постановки диагноза проходит длительное время. Этот период по данным европейских и американских исследований составляет в среднем 9-16 месяцев, у детей моложе 10 лет - 22 месяца, по данным отечественных наблюдений соответственно - 7,3 года и 5 лет.

На современном этапе развития гастроэнтерологии для дифференциальной диагностики неспецифнческого язвенного колита и болезни Крона у детей используют способы диагностики, основанные на инструментальных методах исследования слизистой прямой кишки и способы, основанные на определении различных показателей биологических субстратов организма больного, ассоциированных с местным воспалением слизистой кишечника.

Обе группы способов не обеспечивают точности диагностики.

Так низкая точность инструментальных способов обусловлена научно установленным фактом, свидетельствующим о том, что у детей клинические проявления болезни не соответствуют гистологии в 70%, а эндоскопия не соответствует гистологии в 42% случаев (Василенко. И.В. Морфологическая диагностика неспецифического язвенного колита / И.В. Василенко // Гастроэнтерология: тематический номер "В помощь практикующему врачу". - 2010. - №313. - С.37-43). (Severe pediatric ulcerative colitis: a prospective multicenter study of outcomes and predictors of response / D. Turner, D. Mack. N. Leieiko [et al.] // Gastroenterology. - 2010 - Vol.138. - P. 2282-2291.).

Известные способы, основанные на определении различных показателей биологических субстратов организма больного, таких как сывороточные и фекальные маркеры воспаления, патогенетически значимые иммунные агенты, а также ассоциации определенных полиморфных вариантов в генах, хотя и необходимы для дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона детей, но также недостаточны для обеспечения точности дифференциальной диагностики (Diagnostic precision of anti-Saccharomyces cerevisiae antibodies and perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibodies in inflammatory bowel disease / G.E. Reese. V.A. Constantinides. C. Simillis [et al.] // Am. J. Gastroenterol. - 2006. - Vol.101. P. 2410-2422.) (Генетические факторы предрасположенности к болезни Крона / Ю.А. Насыхова. Т.Э. Иващенко. Н.В. Семенов (и др.) // Медицинская генетика. - 2007. - Т. 6, №5. - С. 35-38.).

Наиболее близким аналогом предлагаемого изобретения является способ, основанный на интегральном методе определения различных показателей биологических субстратов организма больного, ассоциированных с местным воспалением слизистой кишечника, ранее разработанный тем же коллективом соавторов на базе двух научных организаций.

За прототип способа дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона у детей взят способ, включающий лабораторное исследование биологической жидкости больного методом инфракрасной спектроскопии и определение высоты пиков полос поглощения (Способ дифференциальной диагностики язвенного колита и болезни Крона у детей: пат. РФ №2366956, МПК G01N 33/52 (2006.01) / Э.Н. Федулова, А.С. Гордецов, О.А. Тутина, А.В. Лебедев; заявитель и патентообладатель ФГУ "Нижегородский НИИ детской гастроэнтерологии Росмедтехнологий". №2007126007/15, заяв. 09.07.2007, опубл. 10.09.2009.).

Данный способ основан на том. что проводят инфракрасный спектроскопический анализ сыворотки крови, определяют высоту пиков полос поглощения в области 1170-1025 см^-1, определяют количественные показатели спектра поглощения, выражают их в виде областей «образов болезни» в системе координат (х, y) и при частотах: (0,3281; 0,7400), (0,7119; 0.4950). (0,7106; 0.3850), (0,4069; 0.5500), (0.3044; 0.6400) диагностируют неспецифического язвенный колит, а при частотах: (0.2919: 0.6300), (0.6844; 03425), (0,3519; 0.2800), (0,2481; 0.4563), (0,2606; 0.5925) диагностируют болезнь Крона.

Точность дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона у детей при использовании предлагаемого способа составляет 92-95%.

Однако несмотря на высокую точность (92-95%) данного способа дифференциальной диагностики способ имеет ряд недостатков: используется сыворотка крови больного и требуется интерпретация большого числа спектров.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка менее инвазивного и более простого способа дифференциальной диагностики НЯК и болезни Крона у детей.

Поставленная задача решается тем, что в известном способе дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона у детей, включающем лабораторное исследование биологической жидкости больного методом инфракрасной спектроскопии и определение высоты пиков полос поглощения, в качестве биологической жидкости исследуют слюну больного, вычисляют значение отношения высоты пика с максимумом при 1070 см^-1 к высоте пика с максимумом 1025 см^-1 и при значении отношения в пределах от 1,1 до 1,9 диагностируют неспецифический язвенный колит, а при значении данного отношения от 2.0 до 4.6 диагностируют болезнь Крона.

Техническим результатом выполнения данного способа является упрощение и ускорение постановки диагноза.

Новизна способа подтверждается отсутствием в источниках информации ссылок ни использование предлагаемого технического решения для решения поставленной задачи.

Предлагаемое изобретение отвечает требованию научно-технического уровня, поскольку для решения поставленной задачи использованы результаты научных исследований в области детской гастроэнтерологии, которые были получены путем инфракрасного спектроскопического анализа слюны больных детей, в результате которых были получены новые диагностические параметры и достигнут новый технический результат.

Сущность способа основана на том, что при пропускании через раствор органического вещества инфракрасного света в области тех или иных узких диапазонов длин волн обычно происходит ослабление интенсивности света, затем при пропускании через спектрофотометр получается спектр поглощения или абсорбции света.

Соответствующие области спектра обычно используют для идентификации вещества, поскольку каждое вещество имеет только для него характерный набор полос поглощения. Эти полосы находятся в области 1500-700 см^-1, которую называют областью "отпечатков пальцев" (поскольку она подобно карточке в картотеке отпечатков пальцев, дает возможность найти "'химический индивидуум").

Работоспособность способа подтверждена статистическими данными. Предлагаемым способом были обследованы с предварительным диагнозом НЯК 22 ребенка, 8 детей с болезнью Крона.

Верификация диагнозов была проведена на основе клинико-лабораторных данных. результатов эндоскопического и морфологического исследования.

Совпадение диагнозов после дообследования в группе с НЯК было в 100% случаев, в группе с болезнью Крона в 100%.

Таким образом, точность предлагаемою способа 100%.

Время, необходимое для постановки диагноза, при этом составляет 30 мин (по сравнению с ближайшим аналогом).

Способ достаточно прост, неинвазивен и может производиться в поликлинических условиях, а также в стационарах, при проведении способа больной не чувствует дискомфорта.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Натощак у пациента берут 3 мл слюны в центрифужную пробирку, слюну больного высушивают, измельчают, готовят суспензию в вазелиновом масле, образец исследуют методом инфракрасной спектроскопии приготовленного путем центрифугирования, высушивания надосадочной части слюны, измельчения cvxoro осадка и суспензирования в вазелиновом масле, осуществляют метолом ИК-спектроскопии в области 1200-1000 см^-1, для этого определяют высоту пика полос поглощения с максимумами 1025, 1070 см^-1 и затем вычисляют значения высоты пика с максимумом при 1070 см^-1 к высоте пика с максимумом 1025 см^-1, после чего полученные значения отношений высот пиков сравнивают со значениями отношений высот пиков пациентов с неснецифическим язвенным колитом, которые составляют 1,1-1,9, и со значениями отношений высот пиков пациентов с болезнью Крона, которые составляют 2,0-4,6, и если полученные значения отношений высот пиков пациента входят в соответствующие интервалы, то у пациента диагностируют тин (вид) воспалительного заболевания кишечника.

Примеры конкретного выполнения предлагаемого способа даны в виде выписок из историй болезни.

Пример 1: Пациентка Б., 12 лет. Диагноз при поступлении: неспецифический язвенный колит.

Проведено исследование образца смешанной слюны больной методом ИК-спектроскопии, который предварительно был подготовлен путем центрифугирования. высушивания надосадочной жидкости, измельчения и суспензирования в вазелиновом масле.

После регистрации спектра определили высоту пиков полос поглощения с максимумами 1025 и 1070 см^-1, вычислили значение отношений высот пиков, которое составило 1,1. Полученную величину сравнили с интервалами значений болезней неспецифического язвенного колита и болезни Крона. Значение отношений высот пиков полос поглощения вошло в интервал значений неспецифического язвенного колита. При последующем дополнительном обследовании (колоноскопия, морфологическое исследование биоптатов) диагноз НЯКа был подтвержден.

Пример 2: Пациент Н., 13 лет. Диагноз при поступлении: неспецифический язвенный колит

Предлагаемым способом был исследован образец смешанной слюны больной методом ИК-спектроскопии.

Значение отношений высот пиков полос поглощения с максимумами 1025, 1070 см^-1 составило 1,0.

Диагноз НЯКа был снят, был поставлен диагноз хронический колит постинфекционной этиологии.

Диагноз подтвержден последующим дополнительным обследованием (колоноскопия, морфологическое исследование биоптатов).

Пример 3: Пациентка Г., 16 лет. Диагноз при поступлении: болезнь Крона

Предлагаемым способом был исследован образец смешанной слюны больной методом ИК-спектроскопии.

Значение отношения высот пиков полос поглощения с максимумами 1025, 1070 см составило 2,0.

Диагноз: болезнь Крона.

Пример 4: Пациент Е., 11 лет. Диагноз при поступлении: болезнь Крона.

Значение отношении высот пиков с максимумами 1025 и 1070 см^-1 составило 4,70.

Диагноз болезни Крона был снят.

Для подтверждения результатов инфракрасной спектроскопии слюны проведено дополнительное обследования (колоноскопия, морфологическое исследование биоптатов). Окончательный диагноз: хронический колит аллергической этиологии.