×
10.11.2014
216.013.03a6

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЦИДИВИРОВАНИЯ САРКОМ МЯГКИХ ТКАНЕЙ

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива. Сущностью изобретения является то, что определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход. Разработанный способ обеспечивает повышение точности и информативности прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей. 2 пр., 1 табл.
Основные результаты: Способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей, включающий иммуногистохимическое исследование ткани удаленной опухоли, отличающийся тем, что определяют наличие клеток, экспрессирующих белки EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, при выявлении клеток с гиперэкспрессией белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, при выявлении клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют благоприятный исход.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива.

Из литературных источников известен способ прогнозирования метастазов у больных раком желудка, в котором в качестве одного из маркеров метастазирования используется фактор ингибитора апоптоза bcl-2 (RU 2445632 C1, опубл. 20.03.2012 г., Бюл. №8, G01N /33). Способ включает в себя определение маркера пролиферативной активности Ki-67 и маркера апоптоза p53, отличающийся тем, что у больных раком желудка различного морфологического строения проводят иммуногистохимическое исследование (ИГХ), дополнительно определяют маркер апоптоза bcl-2 и устанавливают, что при абсолютных значениях при перстневидно-клеточном раке: p53 - 10%, bcl-2 - 10%, Ki-67 - 12%; при недифференцированном раке: p53 - 13%, bcl-2 - 11%, Ki-67 - 9%; при аденокарциноме: p53 - 10%, bcl-2 - 9%, Ki-67 - 12% прогнозируют возникновение метастазов в лимфоузлах, а при p53 - 6%, bcl-2 - 5%, Ki-67 - 10% прогнозируют отсутствие метастатического поражения лимфоузлов.

Известен способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров апоптоза Bax и Bcl-2 (см. RU 2242766 C1, G01N 33/68, опубл. 20.12.2004). Способ включает иммуногистохимическое определение в удаленной опухоли наличия клеток, экспрессирующих Bax, и отличается тем, что дополнительно определяют наличие клеток, экспрессирующих Bcl-2, и если первые выявляют, а вторые не выявляют, то прогнозируют высокую вероятность метастазирования. Однако приведенные известные исследования в совокупности факторов, выявляемых при иммуногистохимическом исследовании не обеспечивают прогнозирование неблагоприятного течения сарком мягких тканей.

Известен способ прогнозирования рецидива заболевания, в котором до и после операции по удалению саркомы мягких тканей у мужчин и женщин проводят биохимическое определение уровня креатинкиназы в крови больного и при показателях фермента до и после операции в пределах нормы прогнозируют длительный безрецидивный период, а при уровне фермента, значительно превышающем норму после операции, прогнозируют появление рецидива в ближайшие месяцы после операции (RU 2471191 C2, опубл. 27.12.2012, Бюл. №36).

Однако на наш взгляд предлагаемый авторами способ прогнозирования рецидива опухолевого образования по уровню креатинкиназы не совсем специфичен для сарком мягких тканей.

Техническим результатом предлагаемого нами изобретения является повышение точности и информативности способа прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей.

Технический результат достигают тем, что дополнительно определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход.

Выбор в качестве маркеров метастазирования сарком мягких тканей таких белков, как EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, обусловлен их ролью в развитии рецидивирующего процесса. Так, белок CD34 локализуется в клетках эндотелия новообразованных тонкостенных сосудов и регулирует неоангиогенез. Белок bcl-2 экспрессируется на мембранах клеток опухолей, регулирует процессы апоптоза. Белок EGFR - трансмембранный гликопротеин, запускает внутриклеточный сигнальные каскады, приводящие к повышению пролиферации и росту клеток, ангиогенезу, метастазированию. Белок bcl-6 регулирует степень пролиферации и роста клеток опухоли.

Выбранный нами набор белков позволил оценить биологические потенции мягкотканных сарком, позволяющие дать оценку их прогрессии, рецидивирования, неоангиогенеза.

В таблице 1 представлены результаты ретроспективного исследования иммуногистохимических маркеров EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 в срезах тканей опухолей у 20 пациентов с рецидивирующей саркомой мягких тканей в анамнезе (1 группа) и у 20 пациентов с благоприятным исходом (без рецидивов) (2 группа). При сравнении результатов исследования между двумя группами пациентов обнаружено, что у пациентов с рецидивирующей саркомой мягких тканей наблюдалась гиперэкспрессия EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 белков, а у пациентов с саркомой мягких тканей без рецидивов наблюдалась слабая экспрессия белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2.

Маркер ИГХ 1 группа пациентов, количество (%) экспрессирующих клеток, n=20 p<0,05 2 группа пациентов, количество (%) экспрессирующих клеток, n=20 p<0,05
EGFR 70% 10%
CD 34 100% 7%
Bcl 6 73% 20%
Bcl 2 65% 10%

Подобных иммуногистохимических исследований при изучении прогнозирования сарком мягких тканей в доступной нам научно-медицинской и патентной литературе не встречалось.

Сравнительный анализ известных способов прогнозирования течения заболевания и предлагаемого нами способа позволяет выявить его новизну и отличия от известных.

Новизна способа прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей заключается в использовании дополнительных маркеров, отвечающих за пролиферацию и рост клеток (EGFR, bcl 6), апоптоз (bcl 2) и за ангиогенез (CD 34) с целью повышения точности прогноза рецидивирования заболевания после оперативного удаления опухоли.

Предлагаемый нами способ прогнозирования осуществляют следующим образом.

1. После удаления опухоли мягких тканей готовили из стандартного блока с опухолью 2 парафиновых среза толщиной 3-5 микрон по стандартной методике, депарафинировали в ксилоле и регидратировали в батарее спиртов. Четыре среза использовали для проведения иммуногистохимической реакции с маркерами EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2. Последовательность этапов проведения реакции с каждым из маркеров совпадала.

2. Иммуногистохимическое исследование по оценке экспрессии EGFR, CD 34, Вс12, Вс16 проводили по стандартной методике. Для открытия антигенных детерминант проводили обработку срезов в цитратном буфере [pH 6,0] в течение 30 минут при 95°C на водяной бане.

3. Инкубацию с первичными антителами проводили в течение ночи при 4°C. В качестве первичных антител при оценке экспрессии EGFR, CD 34, Вс12, Вс16 использовали мышиные моноклональные антитела к данным маркерам (разведение EGFR - 1:70, CD 34-1:150, bcl 6 - RTU, bcl-2 - 1:100, фирма производитель DAKO Corp).

4. Для визуализации реакции антиген-антитело использовали стрептавидин-биотиновую тест-систему [DAKO Corp] согласно инструкции. В качестве хромогена использовали ДАБ+[DAKO Corp].

5. Затем срезы докрашивали гематоксилином и заключали в бальзам.

6. Реакцию оценивали с применением светового микроскопа (увеличение ×40) по следующим критериям. Количество положительных клеток оценивали в зонах, содержащих их максимальное количество. В качестве негативного контроля использовали иммуногистохимическую реакцию без добавления первичных антител.

При наличии клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 оценивали прогноз для пациента как неблагоприятный (развитие рецидивов в короткие сроки), а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогноз расценивался как благоприятный (без рецидивов).

Приводим клинический пример использования способа

Пример 1

Больной А, 49 лет. История болезни №23425/ц.

Образование мягких тканей правого бедра заметил в августе 2007 года. Самостоятельно обратился в РНИОИ.

Отлечен комплексным методом лечения.

21.11.2007 года выполнена операция - удаление опухоли мягких тканей правого бедра.

Гистологическое заключение №982276-282/07 - злокачественная фиброзная гистиоцитома, гигантоклеточный вариант, обширные очаги некроза, степень дифференцировки G2 (умереннодифференцированная).

Данные иммуногистохимического исследования парафинового среза опухоли: выявлено EGFR - позитивных клеток 70%, CD 34 - позитивных клеток 100%, bcl 6 - позитивных клеток 73%, bcl 2 - позитивных клеток 65%. Больного отнесли в группу высокого риска развития метастазов и сократили интервалы между визитами к врачу.

С 20.12.2007 г. по 30.12.2007 г. прошел лучевое лечение в СОД 50 Гр на послеоперационный рубец и пути лимфооттока.

С 17.01.2008 г. по 22.01.2008 г. прошел 2 курса адъювантной химиотерапии:

Доксорубицин 100 мг, Циклофосфан 1600 мг, Цисплатин 100 мг.

В марте 2009 года обнаружено образование в послеоперационном рубце. Диагностирован рецидив опухоли.

30.03.2009 г. выполнена операция: широкое иссечение рецидива опухоли мягких тканей правого бедра.

Пример 2

Больная Б, 74 года. История болезни №2251/ф.

В сентябре 2004 г. заметила опухоль в левой пахово-подвздошной области, обратилась к врачу по месту жительства, направлена в РНИОИ.

Отлечена комплексным методом лечения.

02.03.2005 года выполнена операция: удаление саркомы мягких тканей левой паховой области.

Гистологическое заключение №95234-235/05 - злокачественная фиброзная гистиоцитома, гигантоклеточный вариант, обширные очаги некроза, степень дифференцировки G3.

По данным иммуногистохимического исследования парафинового среза опухоли выявлено EGFR - позитивных клеток 10%, CD 34 - позитивных клеток 7%, bcl 6 - позитивных клеток 24%, bcl 2 - позитивных клеток 10%, что расценено нами как благоприятный прогноз.

Прошла курс в СОД 40 Гр после операции на послеоперационный рубец и пути лимфооттока.

С 7.05.2005 г. по 15.05.2005 г. - прошла 3 курса адъювантной химиотерапии по схеме:

Винкристин 2 мг, доксорубицин 100 мг, циклофосфан 1200 мг

Больная планово проходила диспансерное наблюдение в РНИОИ, данных за рецидив в послеоперационном рубце, метастазирование нет.

Последняя явка 14.12.2012 г. - состояние больной удовлетворительное, жалоб не предъявляет. Послеоперационный рубец без признаков рецидивирования.

Таким способом был рассчитан прогноз 20 больным.

Разработанный способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей является промышленно применимым. С помощью этих прогностических факторов можно прогнозировать исход заболевания и планировать лечебные мероприятия.

Способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей, включающий иммуногистохимическое исследование ткани удаленной опухоли, отличающийся тем, что определяют наличие клеток, экспрессирующих белки EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, при выявлении клеток с гиперэкспрессией белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, при выявлении клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют благоприятный исход.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 101-110 of 110 items.
20.01.2018
№218.016.187a

Способ прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки рта

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта. Сущностью изобретения является то, что в ткани опухоли, взятой во время оперативного вмешательства, определяют уровень...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002635535
Дата охранного документа: 13.11.2017
20.01.2018
№218.016.1e33

Способ прогнозирования прогрессирования рака пищевода

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении рака пищевода для прогнозирования развития его прогрессирования. Способ прогнозирования прогрессирования рака пищевода отличается тем, что в гомогенатах образцов ткани опухоли и визуально неизмененной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002640954
Дата охранного документа: 12.01.2018
17.02.2018
№218.016.2dcf

Способ расчета прогноза раннего прогрессирования меланомы кожи

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогноза раннего прогрессирования меланомы кожи. Способ по изобретению включает определение в гомогенатах образцов ткани опухоли и прилежащей к ней визуально неизмененной ткани (перитуморальной зоне), взятых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002643761
Дата охранного документа: 05.02.2018
04.04.2018
№218.016.3543

Способ лечения лучевых повреждений мочевого пузыря

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения лучевых повреждений мочевого пузыря. Способ заключается в том, что во все вершины ромба Михаэлиса вводят по 0,3 мл аутологичной дендритно-клеточной вакцины, полученной с использованием антигенов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002645957
Дата охранного документа: 28.02.2018
11.03.2019
№219.016.d609

Способ премедикации у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией, контролируемой ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента

Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и онкоурологии, и может быть использовано при проведении премедикации и последующего анестезиологического пособия при оперативных вмешательствах у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией I-II степени, принимающих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681496
Дата охранного документа: 06.03.2019
27.04.2019
№219.017.3caf

Способ выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей

Изобретение относится к медицине, а именно к детской онкологии, хирургии и лучевой диагностике, и может быть использовано для выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей. В предоперационном периоде пациентам выполняют компьютерную томографию грудной клетки. Измеряют объем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686043
Дата охранного документа: 23.04.2019
31.05.2019
№219.017.7013

Способ прогнозирования рецидивов менингиом в послеоперационный период

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии и онкологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидивов менингиом в послеоперационном периоде. Для этого во время операции по удалению менингиомы получают фрагмент опухолевой ткани. После чего фрагмент замораживают и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689795
Дата охранного документа: 29.05.2019
01.06.2019
№219.017.71d3

Способ коррекции дерматологических реакций у онкологических больных при применении терапии ингибиторами egfr

Изобретение относится к медицине, в частности онкологии, и может быть использовано для лечения больных с кожной токсичностью. Способ включает выполнение лечебного плазмафереза при развитии кожной токсичности 2-3-й степени в сроки за 24 часа до и через 24 часа после введения ингибитора EGFR, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689993
Дата охранного документа: 30.05.2019
02.08.2019
№219.017.bb85

Способ комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в качестве комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости. Для этого перед проведением хирургического лечения проводят два курса деносумаба по 120 мг 1 раз в месяц в качестве неоадъювантной таргетной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696097
Дата охранного документа: 31.07.2019
07.07.2020
№220.018.3032

Способ патологоанатомического вскрытия коронарных артерий после стентирования

Изобретение относится к медицине, в частности к патологической анатомии, судебно-медицинской экспертизе, сердечно-сосудистой хирургии и может быть использовано для патологоанатомического вскрытия коронарных артерий после их стентирования. Способ позволяет сопоставить данные аутопсии с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002725858
Дата охранного документа: 06.07.2020
Showing 111-120 of 166 items.
26.10.2018
№218.016.9617

Способ прогнозирования роста опухоли в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для прогнозирования роста опухоли в эксперименте. Способ прогнозирования заключается в том, что белым беспородным крысам или крысам линии Wistar с привитой в подкожную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670656
Дата охранного документа: 24.10.2018
26.10.2018
№218.016.9632

Способ устранения дефектов век и окружающих зон лица после удаления опухолей данной зоны

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии. Осуществляют пересадку донорского материала. При этом предварительно производят забор крови из лучевой вены пациента. Получают методом двойного центрифугирования плазму, богатую тромбоцитами. Осуществляют липоаспирацию, смешивают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670659
Дата охранного документа: 24.10.2018
13.12.2018
№218.016.a6a1

Способ прогнозирования течения заболевания у больных локальным почечно-клеточным раком почки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения патологического процесса у больных локальным почечно-клеточным раком почки после хирургического лечения. Сущностью способа является то, что в образцах опухолевой ткани и в образцах...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002674677
Дата охранного документа: 12.12.2018
19.12.2018
№218.016.a88b

Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы (РМЖ) на основе анализа экспрессии генов MAGEA2, MAGEB1 и XAGE3. Проводят амплификацию в режиме реального времени в присутствии красителя EvaGreen Dye с использованием...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002675236
Дата охранного документа: 18.12.2018
26.12.2018
№218.016.aab6

Способ коррекции эстрогендефицитных состояний у больных пременопаузального периода с диагнозом гормонпозитивный рак молочной железы при формировании устойчивой невротической и соматической симптоматики в виде острого стресса и проявлений постовариэктомического синдрома

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении онкологических больных с диагнозом гормонпозитивный рак молочной железы при формировании устойчивой невротической и соматической симптоматики в виде острого стресса и проявлений постовариэктомического...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002675773
Дата охранного документа: 24.12.2018
10.01.2019
№219.016.ae1e

Способ стимуляции хронической болью злокачественного роста в лёгких крыс

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии и может быть использовано для стимуляции хронической болью злокачественного роста в легких крыс. За 2 недели до перевивки опухоли создают модель хронической боли путем перевязки седалищных нервов с двух сторон. Проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002676641
Дата охранного документа: 09.01.2019
26.01.2019
№219.016.b4ad

Малоинвазивный способ диагностики рака легкого на основании изменения копийности локуса мтднк hv2

Изобретение относится к биотехнологии. Определение копийности генетического локуса HV2 относительно референсного гена GAPDH проводят методом ПЦР-РВ в присутствии красителя EVA-Green. Используют высокоспецифичные праймеры: для HV2 F - GGGAGCTCTCCATGCATTTGGTA, R - AAATAATAGGATGAGGCAGGAATC; для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002678227
Дата охранного документа: 24.01.2019
02.02.2019
№219.016.b619

Способ модифицированного химиолучевого лечения рака прямой кишки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для модифицированного химиолучевого лечения рака прямой кишки. Для этого выполняют катетеризацию верхней прямокишечной артерии через бедренную артерию, в которую вводят цисплатин 50 мг на 5% глюкозе 50 мл и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002678642
Дата охранного документа: 30.01.2019
11.03.2019
№219.016.d5d9

Способ визуализации эффективности лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, урологии и лучевой диагностике, и может быть использовано для визуализации эффективности лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы. Проводят мультипараметрическую магнитно-резонансную томографию органов малого таза с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681508
Дата охранного документа: 06.03.2019
11.03.2019
№219.016.d609

Способ премедикации у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией, контролируемой ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента

Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и онкоурологии, и может быть использовано при проведении премедикации и последующего анестезиологического пособия при оперативных вмешательствах у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией I-II степени, принимающих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681496
Дата охранного документа: 06.03.2019
+ добавить свой РИД