ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ И ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯ ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ И СИНДРОМА КАШЛЯ

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения острых и хронических заболеваний верхних и нижних дыхательных путей, в том числе инфекционно-воспалительной и аллергической природы, и синдрома кашля, в том числе сопровождающего заболевания верхних и нижних дыхательных путей.

Из уровня техники известно лекарственное средство в виде фармацевтической композиции для лечения синдрома кашля на основе активированных форм сверхмалых доз антител к морфину и активированных форм сверхмалых доз антител к брадикинину (RU 2199344 C1, A61K 39/395, 27.02.2003). Однако данное лекарственное средство не во всех случаях бронхолегочных заболеваний обеспечивает достаточную терапевтическую эффективность.

Изобретение направлено на создание препарата с расширенным терапевтическим диапазоном для лечения острых и хронических заболеваний верхних и нижних дыхательных путей инфекционно-воспалительной и аллергической природы и синдрома кашля на основе активированных форм сверхмалых доз антител к морфину, активированных форм сверхмалых доз антител к брадикинину и активированных форм сверхмалых доз антител к гистамину.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что фармацевтическая композиция для лечения острых и хронических заболеваний дыхательной системы и синдрома кашля, в том числе сопровождающего заболевания дыхательной системы, содержащая активированную-потенцированную форму антител к брадикинину и активированную-потенцированную форму антител к морфину, согласно изобретению содержит в качестве дополнительного компонента активированную-потенцированную форму антител к гистамину.

При этом активированную-потенцированную форму антител к брадикинину, активированную-потенцированную форму антител к морфину и активированную-потенцированную форму антител к гистамину используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.

Причем фармацевтическая композиция может быть выполнена в твердой лекарственной форме и содержать эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью активированной- потенцированной формой антител к брадикинину с активированной- потенцированной формой антител к морфину и активированной-потенцированной формой антител к гистамину, и фармацевтически приемлемые добавки, которые включают изомальт, цикламат натрия, сахарин натрия, лимонную кислоту безводную и магния стеарат.

Водные или водно-спиртовые растворы активированных-потенцированных форм антител к брадикинину, к морфину и к гистамину получены путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия из матричных растворов аффинно- очищенных антител к брадикинину, к морфину и к гистамину с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

При этом каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно-очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений, приготовленных по гомеопатической технологии.

Фармацевтическая композиция содержит активированную-потенцированную форму антител к брадикинину, активированную-потенцированную форму антител к морфину и активированную-потенцированную форму антител к гистамину в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного соответственно в 100¹², в 100³⁰ и в 100⁵⁰, что эквивалентно смеси сотенных разведений С12, С30 и С50 по гомеопатической технологии.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в способе лечения острых и хронических заболевания дыхательной системы и синдрома кашля путем введения в организм фармацевтической композиции, содержащей активированную-потенцированную форму антител к брадикинину и активированную-потенцированную форму антител к морфину, согласно изобретению дополнительно (одновременно и сочетано) вводят усиливающий компонент в виде активированной- потенцированной формы антител к гистамину.

При этом используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных разведений антител к брадикинину и к морфину в сочетании со смесью различных разведений антител к гистамину, приготовленных по гомеопатической технологии.

Кроме того, активированную-потенцированную форму антител к брадикинину, активированную-потенцированную форму антител к морфину и активированную-потенцированную форму антител к гистамину используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения. При этом в качестве дополнительных компонентов используют вспомогательные вещества, например мальтитол, глицерол, сорбат калия, лимонную кислоту безводную.

При этом каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно-очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений, приготовленных по гомеопатической технологии.

Кроме того, заявленное лекарственное средство, как комплексное, содержит действующие компоненты в объемном соотношении 1:1:1, при этом каждый компонент используют в виде смеси трех матричных растворов, разведенных соответственно в 100¹², 100³⁰ и 100⁵⁰ раз, что эквивалентно сотенным разведениям С12, С30, С50, приготовленным по гомеопатической технологии.

Предложенное введение в заявленную фармацевтическую композицию активированной-потенцированной формы сверхмалых доз антител к гистамину, которые не обладают самостоятельным значимым противокашлевым эффектом (RU 2191602 C1, A61K 39/395, 27.10.2002), обеспечивают получение неожиданного терапевтического эффекта, который заключается в том, что, помимо усиления противокашлевого действия, фармацевтическая композиция приобретает дополнительно более выраженное противовоспалительное, противоотечное, антиаллергическое, спазмолитическое и анальгезирующее действие и позволяет эффективно лечить продуктивный и непродуктивный кашель, в том числе при гриппе, ОРВИ, остром фарингите, ларинготрахеите, остром обструктивном ларингите, хроническом бронхите и других заболеваниях дыхательных путей, и непосредственно купировать симптомы указанных заболеваний. Экспериментально показано, что компоненты препарата модифицируют активность лиганд-рецепторного взаимодействия эндогенных регуляторов с соответствующими рецепторами: антитела к морфину - с опиатными рецепторами; антитела к гистамину - с H1 гистаминовым рецепторами; антитела к брадикинину - с В1-рецепторами брадикинина; при этом совместное применение компонентов приводит к усилению противокашлевого эффекта. Заявленный препарат за счет модификации гистамин-зависимой активации H1-рецепторов и брадикинин-зависимой активации В2-рецепторов избирательно снижает возбудимость кашлевого центра продолговатого мозга, тормозит центральные звенья кашлевого рефлекса. Угнетая центры болевой чувствительности в таламусе, блокирует передачу болевых импульсов к коре головного мозга. Ингибирует поток болевой импульсации с периферии вследствие уменьшения высвобождения тканевых и плазменных альгогенов (гистамина, брадикинина, простогландинов и др.). Заявленный препарат не вызывает угнетения дыхания, лекарственной зависимости, не обладает наркогенным и снотворным действием. Облегчает проявления острого фарингита, ларингита и бронхита, уменьшая бронхоспазм. Купирует системные и местные симптомы аллергических реакций за счет влияния на синтез и высвобождение гистамина и брадикинина из тучных клеток.

Фармацевтическую композицию приготовляют преимущественно следующим образом.

Для приготовления активированной-потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или преимущественно поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55. Для проведения экспериментальных исследований могут быть использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.

Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением веществом - антигеном: брадикинином, морфином и гистамином. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной-потенцированной формы. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.

Пример 1

Поликлональные антитела к брадикинину получают, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу брадикинина следующей последовательности:

RPPGFSPFR.

Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN₃ до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С (или без добавления NaN₃ - при температуре -70°С). Для выделения из антисыворотки антител к брадикинину производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:

1) 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl добавляют 6,26 г Na₂SO₄, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;

2) выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;

3) после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;

4) фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.

Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к брадикинину, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.

Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антитела к брадикинину, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной - потенцированной формы по гомеопатической технологии.

Получение поликлональных антител к морфину может быть произведено по вышеуказанной методике получения поликлональных антител к брадикинину с использованием в качестве иммуногена морфина гемисукцината, конъюгированного с KLH.

Поликлональные антитела к гистамину, который является биогенным амином (4-(2-Аминоэтил)-имидазол или бета-имидазолил-этиламин с химической формулой С₅Н₉N₃), получают по вышеуказанной методике, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и промышленно выпускаемый дигидрохлорид гистамина.

Предпочтительным для приготовления заявленной фармацевтической композиции является использование поликлональных антител к брадикинину, морфину и гистамину, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, преимущественно 2,0÷3,0 мг/мл, используют для последующего приготовления активированной-потенцированной формы по гомеопатической технологии.

Активированную-потенцированную форму антител каждого компонента (т.е. форм антител к брадикинину, к морфину и к гистамину, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним воздействием - неоднократным вертикальным встряхиванием каждого компонента (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью, обусловленной технологией потенцирования, в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения острых и хронических заболевания дыхательной системы и синдрома кашля, в том числе сопровождающего заболевания дыхательной системы) готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения D) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального растворителя в сочетании с многократным (не менее 10 раз) вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).

Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к брадикинину с концентрацией 2,5 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 70% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-е сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к брадикинину с концентрацией 2,5 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, приготовленный разведением матричного раствора в 100¹² раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений С30 и С50.

При использовании в качестве компонента (например, активированной-потенцированной формы антител к брадикинину) смеси различных, преимущественно сотенных, разведений, каждое разведение компонента (например, С12, С30, С50) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С49) и затем вносят в одну емкость по одной части каждого полученного предпоследнего разведения и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную-потенцированную форму антител к брадикинину в сверхмалой дозе, приготовленную сверхразведением матричного раствора в 100¹², 100³⁰ и 100⁵⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных разведений С12, С30 и С50, приготовленных по гомеопатической технологии.

Возможно использование каждого компонента в виде смеси других различных разведений по гомеопатической технологии, например, десятичных и/или сотенных, (С12, С30, С100; D20, С30, С100 или D20, С30, М100 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.

Для получения заявленной фармацевтической композиции водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов смешивают преимущественно в объемном соотношении 1:1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.

Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество частиц нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной-потенцированной формой антител к брадикинину, активированной-потенцированной формой антител к морфину и активированной-потенцированной формой антител к гистамину, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие преимущественно изомальт, цикламат натрия, сахарин натрия, лимонную кислоту безводную и магния стеарат.

Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Huttlin Pilotlab» производства компании Huttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой частиц нейтрального вещества - изомальта - смесью предварительно полученных водных или водно-спиртовых растворов активированных-потенцированных форм антител к брадикинину, активированных-потенцированных форм антител к морфину и активированных-потенцированных форм антител к гистамину преимущественно в соотношении 1 кг смеси растворов антител на 5 или 10 кг нейтрального вещества (1:5-1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°С. Расчетное количество 0,96÷0,98 от массы твердой оральной формы высушенных частиц изомальта, насыщенных активированной-потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с цикламатом натрия, вводимым в количестве 0,5÷0,7 масс. частей от общей массы загрузки, с 0,05÷0,07 масс. частей сахарина натрия от общей массы загрузки, с 1,0÷1,5 масс. частями лимонной кислоты безводной от общей массы загрузки и с 1÷1,5 масс. частями стеарата магния от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет-прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток. После таблетирования получают таблетки массой 550 мг (диаметр 13 мм), пропитанные водно-спиртовыми растворами активированных-потенцированных форм антител к брадикинину, к морфину и к гистамину в сверхмалой дозе, эквивалентной смеси сотенных разведений С12, С30, С50, приготовленных по гомеопатической технологии.

Предпочтительно заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.