×
20.04.2014
216.012.ba70

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТАБИЛЬНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ У БЕРЕМЕННЫХ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицины, а именно к методам медицинской диагностики. Сущность способа: в сыворотке крови определяют TNFα, в липидах мембран эритроцитов ω-6 и ω-3 полиненасыщенные жирные кислоты, затем вычисляют коэффициент соотношения K=Σω-6/Σω-3, где Σω-6 - сумма показателей линолевой и арахидоновой кислот в %, Σω-3-сумма показателей α-линоленовой, эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот в %. При содержании в сыворотке крови TNFα 110±1,97 пг/мл и значениях K больше 0,67 прогнозируют развитие гемической гипоксии. Предлагаемый способ позволил с высокой точностью прогнозировать развитие нестабильного состояния эритроцитов у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции на ранних стадиях клинических проявлений гемической гипоксии. 1 пр.
Основные результаты: Способ прогнозирования развития гемической гипоксии у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции, включающий забор крови, определение в сыворотке крови TNFα, выявление в липидах мембран эритроцитов ω-6 и ω-3 полиненасыщенных жирных кислот, после чего вычисляют коэффициент соотношения K=Σω-6/Σω-3, где Σω-6 - сумма показателей линолевой и арахидоновой кислот, %, Σω-3 - сумма показателей α-линоленовой, эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот, %, и при содержании в сыворотке крови TNFα 110±1,97 пг/мл и значениях K больше 0,67 прогнозируют развитие гемической гипоксии.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам медицинской диагностики, и может быть использовано для диагностики стабильности эритроцитов у беременных с вирусными заболеваниями, такими как цитомегаловирусная инфекция.

Известно, что фосфолипиды и входящие в их состав насыщенные и полиненасыщенные жирные кислоты являются основной составной частью мембраны эритроцита (2, 6). Деструкция фосфолипидного слоя и жирнокислотных остатков, вызванная высокой фосфолипазной активностью, приводит к увеличению микровязкости мембран, трансформации эритроцитов, что в свою очередь вызывает преждевременный гемолиз клеток, развитие застойных явлений в микроциркуляторном русле и, как следствие, гипоксию (1, 3, 8).

Особенно важно выделять неустойчивое предгемолитическое состояние эритроцитов у беременных с вирусными инфекциями герпетической группы (ВПГ-1, 2, ЦМВ) для профилактики развития внутриутробной гипоксии плода, когда требуется сохранить здоровье будущего ребенка.

Выявление нестабильного предгемолитического состояния эритроцитов имеет решающее значение для профилактики гемической гипоксии. Однако реальные возможности оценки данного состояния ограничены отсутствием адекватных способов диагностики. Известные способы оценки устойчивости мембран эритроцитов основаны на анализе данных показателей периферической крови, например осмотической, кислотной и(или) механической стойкости эритроцитов. Однако все известные способы могут выявить только уже сформированные морфофункциональные изменения эритроцитов, являющиеся критерием патологического состояния, в том числе гипоксии. Это приводит к тому, что гипоксия у беременных переходит в клиническую форму, сопровождается угрозой развития внутриутробной гипоксии плода, может вызвать осложнения беременности и требует адекватной терапии.

Известный способ оценки осмотической резистентности эритроцитов (4), оценивающий морфофункциональное состояние эритроцитов, основан на определении кинетики гипоосмотического (0,55% NaCl) гемолиза эритроцитов. Такая оценка морфофункционального состояния эритроцитов в известном способе является основой для диагностики некоторых форм гемолитических анемий.

Недостатком известного способа является то, что он не позволяет провести раннюю диагностику нестабильного предгемолитического состояния эритроцитов и, таким образом, диагностировать нарушение структуры мембран эритроцитов и прогнозировать развитие гемической гипоксии.

Мы предлагаем способ диагностики стабильности мембран эритроцитов, включающий выявление в сыворотке крови беременных TNFα и расчет показателя коэффициента соотношения ω-6/ω-3 жирных кислот, что имеет значение для определения скрытых повреждений клеточных мембран и характера обменных процессов организма в целом.

ω-3 и ω-6 жирные кислоты относят к классу полиненасыщенных жирных кислот с противоположным эффектом по воздействию на обменные процессы. ω-3 жирные кислоты (α-линоленовая, эйкозапентаеновая, докозагексаеновая) предотвращают развитие тромбоэмболических осложнений, угрозу прерывания беременности, улучшают маточно-плацентарное кровообращение, ω-6 жирные кислоты (линолевая, арахидоновая), являясь предшественниками провоспалительных эйкозаноидов (лейкотриены, тромбоксаны), усиливают микроциркуляторные расстройства в тканях, вызывают гипоксию и метаболические нарушения (7, 10).

Нашими исследованиями показано, что при герпес-вирусной инфекции в эритроцитах периферической крови беременных увеличивается количество ω-6 полиненасыщенных жирных кислот при одновременном уменьшении содержания ω-3 кислот, что свидетельствует о конформационных перестройках клеточных мембран (5). Важным следствием изменения содержания в эритроцитах периферической крови беременных при герпес-вирусной инфекции ω-3 и ω-6 жирных кислот является изменение вязкостных свойств мембран, повышенной трансформации клеток и их усиленного разрушения, однако для целей диагностики стабильности эритроцитов при цитомегаловирусной инфекции и действии на мембраны TNFα выявленные закономерности в виде расчета коэффициента соотношения ω-6 (линолевая, арахидоновая) и ω-3 (α-линоленовая, эйкозапентаеновая, докозагексаеновая) полиненасыщенных жирных кислот еще не использовались.

Задачей изобретения явилась разработка способа диагностики стабильности эритроцитов у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции.

В основе предлагаемого способа лежит повышение точности оценки снижения стабильности эритроцитов к токсическому действию цитомегаловируса на уровне мембранного комплекса, что достигается путем определения в сыворотке крови беременных TNFα и расчета коэффициента соотношения ω-6/ω-3. Чувствительность способа диагностики нестабильного состояния мембран эритроцитов повышается и позволяет на ранней стадии клинических проявлений прогнозировать нарушения структуры клеток и развитие гемической гипоксии у беременных. Практическая значимость способа определяется возможностями формирования групп риска и определения показаний к проведению ранней профилактики гемической гипоксии у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции.

Способ осуществляют следующим образом.

Для получения диагностических критериев была исследована периферическая кровь 25 беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции и 25 беременных, не болевших на всем протяжении гестации. У обследуемых беременных производили забор крови из вены в пробирку с гепарином (1:25), центрифугировали, отбирали плазму, в которой методом иммуноферментного анализа определяли IgM и титр антител IgG к цитомегаловирусу, содержание TNFα. Осадок эритроцитарной массы использовали для выявления методом газожидкостной хроматографии ω-6 и ω-3 полиненасыщенных жирных кислот. Метилирование жирных кислот осуществляли по методу Carren J.P. и Dubacy J. (9). Обсчет и идентификацию полученных пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса «Хроматек Аналитик 2,5» по мере удерживания с использованием стандартов фирмы «Supelco» (USA). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли в % к общей сумме площадей пиков метилированных продуктов высших жирных кислот. Полученные результаты содержания ω-6 и ω-3 использовали для вычисления коэффициента их соотношения (K) по формуле: К=Σω-6/Σω-3, где Σω-6 - сумма показателей линолевой и арахидоновой кислот, %; 2 Σω-3 - сумма показателей α-линоленовой, эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот, %. При значениях TNFα 110±1,97 пг/мл и коэффициента соотношения Σω-6/Σω-3 (K) больше 0,67 диагностируют нестабильное состояние мембран эритроцитов и с вероятностью 95% прогнозируют развитие гемической гипоксии.

Предлагаемый способ позволил прогнозировать развитие нестабильного состояния эритроцитов у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции на ранних стадиях клинических проявлений гемической гипоксии.

Правильность выводов и возможность диагностики нестабильного состояния эритроцитов для оценки развития гемической гипоксии была подтверждена результатами комплексного обследования 25 беременных с цитомегаловирусной и 25 беременных без проявлений заболевания в период беременности. У беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции, которое подтверждалось наличием IgM и в динамике через 10 дней высоким 1:1600 титром антител IgG, отмечалось увеличение содержания в сыворотке крови TNFα до 110±1,97 пг/мл и в мембранах эритроцитов ω-6 жирных кислот: линолевой до 5,43±0,22% и арахидоновой до 3,26±0,12% при снижении ω-3 жирных кислот: α-линоленовой до 0,13±0,04%, эйкозапентаеновой 1,10±0,05% и докозагексаеновой 6,10±0,18%, коэффициент соотношения Σω-6/Σω-3 (K) составил 1,19±0,07, что позволило с 95% вероятностью диагностировать нестабильное состояние эритроцитов. У беременных без проявлений заболевания в период гестации содержание в сыворотке крови TNFα составило 20±0,86 пг/мл и в мембранах эритроцитов ω-6 жирных кислот линолевой не превышало значений 4,81±0,16% и арахидоновой до 2,94±0,10%. Показатели ω-3 жирных кислот α-линоленовой определялось на уровне 0,22±0,02%, эйкозапентеновой 1,19±0,08% и докозагексаеновой 8,54±0,27%. Коэффициент соотношения Σω-6/Σω-3 (K) составил 0,67±0,04.

Таким образом, представленные результаты показывают, что при содержании в сыворотке крови TNFα 110±1,97 пг/мл и значениях коэффициента соотношения K=Σω-6/Σω-3 больше 0,67 определяют нестабильное состояние эритроцитов, что подтверждает диагностическую значимость определения данного коэффициента для прогнозирования гемической гипоксии.

Представленный способ повышает чувствительность методов оценки нестабильного состояния эритроцитов и позволяет на ранних стадиях, до клинических проявлений, прогнозировать с вероятностью 95% развитие гемической гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции.

Пример

Беременная Б., 25 лет, поступила в акушерское отделение патологии беременных при ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН на сроке гестации 12 недель с обострением цитомегаловирусной инфекции. По результатам первоначального обследования в периферической крови выявлен IgM и в динамике через 10 дней определено четырехкратное нарастание титра антител IgG к цитомегаловирусу до 1:1600. Содержание TNFα в сыворотке крови на момент поступления составило 111 пг/мл. При исследовании жирнокислотного состава липидов мембран эритроцитов выявлено, что содержание представителей ω-3 жирных кислот α-линоленовой, эйкозапентаеновой и докозагексаеновой составило 0,14%, 1,05% и 6,07% соответственно. Показатели ω-6 жирных кислот линолевой и арахидоновой определялись на уровне 5,4% и 3,2% соответственно. В соответствие с предлагаемой формулой произведен расчет коэффициента соотношения Σω-6/Σω-3, который составил K=5,4+3,2/0,14+1,05+6,07=1,18. Диагностировано нестабильное состояние эритроцитов и сделан прогноз развития гемической гипоксии, который подтвердился при проведении дополнительных клинических исследований и определялся в снижении общего числа эритроцитов до 3,4·1012, количества дискоцитов до 77% и повышении доли эхиноцитов и дегенеративных форм соответственно до 14% и 6%, уменьшении pO2 артериальной крови до 74 мм рт.ст., что подтвердило точность применяемого способа.

Литература

1. Буриходжаева Н.К., Каримова Д.Х., Баширова Н.С. Фосфолипидный состав эритроцитов матери и плода при беременности, осложненной гестозом // Медицинский журнал Узбекистана. 1991. №5. С.56-59.

2. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 256 с.

3. Ворожцова С.И., Овчинников В.В., Садков С.А. Показатели вязкости крови у женщин репродуктивного возраста с неосложненным течением беременности // Клиническая лабораторная диагностика. 2010. №10. С.6.

4. Идельсон Л.И. Справочник по функциональной диагностике / Под ред. И.А.Кассирского. М.: Медицина, 1970. с.401.

5. Ишутина Н.А. Взаимосвязь изменений ω-3 и ω-6 полиненасыщенных жирных кислот при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией // Фундаментальные исследования. 2010. №10. С.55-62.

6. Кучеренко Н.Е., Васильев А.Н. Липиды. Киев: Вища школа, 1985. 247 с.

7. Сидельникова В.М. Применение омега-ЗПНЖК для профилактики и комплексного лечения тромбоэболических нарушений при беременности // Русский медицинский журнал. 2008. Т.16, №6. С.1-6.

8. Титов В.Н., Лисицин Д.М. Жирные кислоты. Физическая химия, биология и медицина. М. - Тверь: ООО «Издательство триада», 2006. 672 с.

9. Carren J.P., Dubacy J. Adaptacion of a micro-seale method to the micro-seale for fatty acid methyl trausestenif: cation of biological lipid extracts // Chromatography. 1978. Vol.151. P.384-390.

10. Elias S.L., Innis S.M. Infant plasma trans, n-6 and n-3 fatty acid and conjugated linolic are related to maternal plasma fatty acid, length of gestation and birth weight and length // American Journal Clinical Nutrition. 2008. V.87, №4. P.887-895.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 81 items.
10.01.2013
№216.012.1a09

Способ прогнозирования течения беременности, учитывая интенсивность формирования плацентарных гормонов эстриола и прогестерона, изменяющийся в связи с обострением герпес-вирусной инфекции во время гестации

Изобретение относится к области медицины, а именно к прогностическим методам, и может быть использовано для прогнозирования течения беременности при обострении во время гестации герпес-вирусной инфекции. Сущность способа: при обострении в третьем триместре герпес-вирусной инфекции (титр...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472157
Дата охранного документа: 10.01.2013
20.04.2013
№216.012.37d2

Способ выявления влияния герпес-вирусной инфекции на активность сквалендегидрогеназы на гистологических срезах плаценты при введении в инкубационный раствор содержимого герпесных пузырьков беременной

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выявления влияния герпес-вирусной инфекции на активность сквалендегидрогеназы у беременных. Сущность способа: на гистологических срезах плаценты при введении в инкубационный раствор содержимого герпесных пузырьков проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002479843
Дата охранного документа: 20.04.2013
20.05.2013
№216.012.4217

Способ диагностики повреждающего действия nk(cd)-лимфоцитов на плаценту беременных, перенесших герпес-вирусную инфекцию, увеличивающего число ядер синцитиотрофобласта в состоянии апоптоза

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения наличия повреждений синцитиотрофобласта плаценты у беременных с герпес-вирусной инфекцией. Для этого в периферической крови беременных определяют количество NK(СD)-лимфоцитов, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482489
Дата охранного документа: 20.05.2013
20.06.2013
№216.012.4dd3

Способ оценки действия герпес-вирусной инфекции на устойчивость мембран эритроцитов новорожденных от матерей, перенесших в третьем триместре беременности обострение герпес-вирусной инфекции

Изобретение относится к области медицины и может найти применение для оценки действия герпес-вирусной инфекции на устойчивость мембран эритроцитов новорожденных от матерей, перенесших в третьем триместре беременности обострение герпес-вирусной инфекции. Сущность способа: в периферической крови...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485505
Дата охранного документа: 20.06.2013
20.06.2013
№216.012.4de2

Способ определения подавления переноса липидов с помощью липидпереносящих белков h-fabp через фетоплацентарный барьер у беременных, перенесших в третьем триместре гестации герпес-вирусную инфекцию

Изобретение относится к области медицины и применяется для определения подавления переноса липидов через фетоплацентарный барьер у беременных, перенесших в третьем триместре гестации герпес-вирусную инфекцию. Сущность способа: в гомогенате плаценты определяют липидпереносящие белки H-FABP. При...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485520
Дата охранного документа: 20.06.2013
20.06.2013
№216.012.4de3

Способ оценки влияния герпес-вирусной инфекции беременной на проникновение повышенного количества арахидоновой кислоты в пуповинную кровь новорожденного

Настоящее изобретение относится к области медицины и описывает способ оценки влияния герпес-вирусной инфекции на проникновение арахидоновой кислоты в пуповинную кровь новорожденного от матерей, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в период гестации, характеризующийся тем, что в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485521
Дата охранного документа: 20.06.2013
20.07.2013
№216.012.57e8

Способ оценки действия герпес-вирусной инфекции на устойчивость мембран эритроцитов новорожденных от матерей, перенесших в третьем триместре беременности обострение герпес-вирусной инфекции

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки устойчивости мембран эритроцитов новорожденного на фоне обострения у беременной герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности. Способ осуществляется следующим образом: в периферической крови новорожденного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488112
Дата охранного документа: 20.07.2013
10.09.2013
№216.012.68cf

Способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом а(h3n2) во втором триместре беременности при анемическом синдроме

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, и касается способа прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом А(Н3N2) во втором триместре беременности при анемическом синдроме. Сущность изобретения состоит в том, что определяют содержание...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492478
Дата охранного документа: 10.09.2013
10.09.2013
№216.012.68d9

Способ прогнозирования летального исхода у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано при прогнозировании летального исхода у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени. Сущность способа: в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата исследуют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492488
Дата охранного документа: 10.09.2013
10.09.2013
№216.012.68da

Способ доклинической диагностики степени тяжести респираторного дистресс-синдрома при внутриутробном гриппе a(н3n2) у недоношенных новорожденных

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано для доклинической диагностики респираторного дистресс-синдрома различной степени тяжести у недоношенных новорожденных при внутриутробном гриппе A(H3N2). Сущность способа: исследуют концентрацию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492489
Дата охранного документа: 10.09.2013
Showing 1-1 of 1 item.
20.09.2013
№216.012.6a1c

Способ определения фетоплацентарной недостаточности у беременных, перенесших в третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции

Изобретение относится к области медицины. Для определения фетоплацентарной недостаточности у беременных, перенесших в третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции, проводят измерение у беременной в момент обострения в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, а...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492815
Дата охранного документа: 20.09.2013
+ добавить свой РИД