СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА С

Область техники, к которой относится изобретение

Данное изобретение относится к медицине и касается применения глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли для лечения вирусного гепатита C.

Уровень техники

Вирусный гепатит C остается одной из самых актуальных проблем здравоохранения в мире. Большое число инфицированных (почти 200 млн. человек), высокий риск развития хронической инфекции (60-80%), что является причиной цирроза печени или гепатоцеллюлярной карциномы (в 15-25% случаев), развитие системных внепеченочных поражений органов и тканей человека, отсутствие вакцины для профилактики развития и распространения инфекции обуславливают необходимость разработки эффективного лечения гепатита C [Абдурахманов Д.Т. Перспективы в лечении хронического гепатита C. Клиническая гепатология 2010; 3:3-11].

Современная терапия гепатита C пэгилированными интерферонами α2a или α2b в сочетании с рибавирином позволяет достичь устойчивый вирусологический ответ (УВО) в 54-73% случаев [Ивашкин В.Т., Лобзин Ю.В., Сторожаков Г.И. и др]. Эффективность и безопасность 48-ми недельной терапии пэгилированным интерфероном α2a и рибавирином показаны у первичных больных хроническим гепатитом C. Клин. фармакол. тера., 2007, 16(1), 1-5.]. При инфицировании субтипом 1b вируса гепатита C (ВГС), который превалирует в циркуляции на территории России, процент эффективности терапии значительно снижается и составляет 40-50%.

Таким образом, существует необходимость в разработке более эффективных, доступных и экономически целесообразных средств и схем лечения гепатита C, которые обладают меньшими побочными эффектами.

Авторами настоящего изобретения неожиданно было выявлено, что для лечения гепатита С может быть использован глутарилгистамин. При этом глутарилгистамин обладает противовирусным действием в отношении вируса гепатита C как в отдельности, так и в комбинации с пэгилированным интерфероном и рибавирином.

Ранее не предполагалось применение глутарилгистамина для лечения вирусных гепатитов. Более того, ранее не была известна комбинация глутарилгистамина с пэгилированным интерфероном и рибавирином.

Таким образом, задачей данного изобретения является предоставление нового средства для лечения гепатита C, а также предоставление комбинации лекарственных средств, которая обладает повышенной эффективностью в лечении вирусного гепатита C, в сравнении с наиболее эффективной комбинацией препаратов, которая использовалась до создания данного изобретения.

Раскрытие изобретения

Вышеприведенные задачи изобретения решаются посредством объектов изобретения, приведенных в прилагаемой формуле.

Данное изобретение относится к медицине и включает способ лечения вирусного гепатита C, предусматривающий введение пациенту эффективного количества глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли.

Дополнительно, изобретение относится к способу достижения устойчивого вирусологического ответа при лечении вирусного гепатита C, включающему введение пациенту эффективного количества пэгилированного интерферона, рибавирина и глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, глутарилгистамин вводится в составе препарата дикарбамин. Доза глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли составляет 0,1-10 мг/кг массы тела. Разовая доза глутарилгистамина может составлять 100 мг. Длительность приема глутарилгистамина может составлять от 3 недель до 12 месяцев. При лечении гепатита C обеспечивается уменьшение побочных эффектов противовирусной терапии, таких как гриппоподобный синдром, артралгия, миалгия, обострение хронического панкреатита, депрессия, выпадение волос, лейкопения или нейтропения.

Изобретение также относится к способу лечения вирусного гепатита C, предусматривающему введение пациенту эффективного количества пэгилированного интерферона, рибавирина и глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли.

Структурная формула глутарилгистамина является следующей:

Кроме того, изобретение представляет собой фармацевтическую композицию для лечения гепатита C, содержащую эффективное количество глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли. Эффективное количество глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли может составлять 0,1-10 мг/кг массы тела.

Изобретение также включает фармацевтическую комбинацию для лечения гепатита C, включающую пэгилированный интерферон, рибавирин и глутарилгистамин или его фармацевтически приемлемую соль.

Далее, изобретение относится к набору для лечения гепатита C, включающему пэгилированный интерферон, рибавирин, глутарилгистамин или его фармацевтически приемлемую соль, и инструкцию по применению.

Изобретение также относится к применению глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли для производства фармацевтической композиции для лечения вирусного гепатита C.

Дополнительно, изобретение включает применение глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с пэгилированным интерфероном и рибавирином для лечения гепатита C.

Вирусный гепатит C, который лечат в соответствии с изобретением, может представлять собой острый или хронический гепатит C.

Способ лечения гепатита C, в соответствии с изобретением, обеспечивает уменьшение побочных эффектов противовирусной терапии. Данные побочные эффекты противовирусной терапии могут представлять собой гриппоподобный синдром, артралгии, миалгии, обострение хронического панкреатита, депрессию и/или выпадение волос.

Предпочтительно, глутарилгистамин вводится в составе препарата дикарбамин. Доза глутарилгистамина или его фармацевтически приемлемой соли составляет 0,1-10 мг/кг массы тела.

Пэгилированный интерферон, используемый в сочетании с глутарилгистамином и рибавирином, может представлять собой пэгилированный интерферон α2a или пэгилированный интерферон α2b.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, доза глутарилгистамина составляет 100 мг при введении 1 раз в день; доза пэгилированного интерферона составляет 100 мкг при введении 1 раз в неделю; доза рибавирина составляет 1000 мг в сутки при введении ежедневно.

Длительность приема глутарилгистамина, предпочтительно, составляет от 3 недель до 12 месяцев.

Глутарилгистамин может использоваться в виде фармацевтически приемлемых солей, полученных путем взаимодействия, например, с гидроксидом натрия, гидроксидом калия, карбонатом магния, гидроксидом лития, карбонатом кальция рутинными способами, широко описанными в литературе.

Положительные эффекты, достигаемые при осуществлении изобретения, являются следующими. Неожиданно выявлено новое лекарственное средство для лечения гепатита C, обладающее выраженным противовирусным действием. Кроме того, разработана эффективная комбинация лекарственных средств для лечения вирусного гепатита C. Также неожиданно были получены значительные улучшения важнейших показателей эффективности противовирусной терапии, таких как быстрый вирусологический ответ (отсутствие РНК вируса гепатита C в сыворотке крови при исследовании чувствительной тест-системой через 4 недели после начала лечения), ранний вирусологический ответ (отсутствие РНК вируса гепатита C в сыворотке крови при исследовании чувствительной тест-системой через 12 недель после начала лечения), непосредственный вирусологический ответ (отсутствие РНК вируса гепатита C в сыворотке крови при исследовании чувствительной тест-системой через 24 и 48 недель после начала лечения) и устойчивый вирусологический ответ у больных хроническим гепатитом C (отсутствие РНК вируса гепатита C в сыворотке крови при исследовании чувствительной тест-системой через 24 недели после окончания лечения).

Дополнительно, при проведении лечения ВГС по изобретению достигнуто существенное снижение частоты побочных эффектов противовирусной терапии, таких как лейкопения, нейтропения, гриппоподобный синдром, артралгии, миалгии, обострение хронического панкреатита, депрессия, выпадение волос.

Осуществление изобретения

До сих пор непреодолимой трудностью было проведение скрининга лекарственных средств на экспериментальных моделях инфекции, вызванной вирусом гепатита C.

Для этой цели была разработана экспериментальная модель инфекции, вызванной вирусом гепатита C in vitro, в культурах первичных и перевиваемых клеток, чувствительных к репликации вируса гепатита C. В результате были выделены и идентифицированы цитопатогенные варианты ВГС, относящиеся к разным генотипам, в том числе, и к наиболее распространенному в РФ, наиболее патогенному, инфекции которым трудно поддаются лечению интерфероном, генотипу 1b. Воспроизведены острая и хроническая инфекция, вызванные вирусом гепатита C в культурах клеток различного происхождения. Таким образом, в отношении гепатита C появилась уникальная возможность не только для скрининга соединений, но и для доклинической оценки противовирусной активности препаратов.

Пример 1

Задача настоящего исследования заключалась в оценке противовирусной активности глутарилгистамина на экспериментальной модели инфекции, вызванной вирусом гепатита C в культурах клеток.

В работе использовали цитопатогенный штамм вируса гепатита C (ВГС), относящийся к генотипу 1b. Штамм был выделен из сыворотки крови больной хроническим вирусным гепатитом C, идентифицирован как вирус гепатита C. В работе использовали инфекционные дозы ВГС, равные 10,0 тканевых цитопатогенных доз (ТЦД₅₀)/20 мкл.

Были использованы высокочувствительные к цитопатогенному действию ВГС первичные фибробласты, полученные после трипсинизации 9-дневных куриных эмбрионов (ФЭК), а также культуры клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ), полученные из коллекции клеточных культур НИИ вирусологии РАМН. Их использовали в виде однодневного монослоя клеток, выращенного в 24-луночных пластиковых панелях. Культуры клеток СПЭВ и ФЭК выращивали на среде 199 с 10% сыворотки эмбриона телят, с добавлением глютамина и антибиотиков (100 ЕД/мл).

В работе использовали раствор глутарилгистамина, который делали на питательной среде, используемой для выращивания инфицированных культур клеток. Для изучения противовирусной активности препарата, его раствор в объеме 50 мкл в различных разведениях вносили в культуры ФЭК в момент заражения, за 24 часа до заражения и через 24 часа после заражения вирусом клеток.

Инфекционную активность ВГС учитывали по результатам титрования на культурах клеток СПЭВ проб культуральной жидкости, отобранной из инфицированных ВГС культур ФЭК или СПЭВ на 2 и 5 дни после заражения. Результаты учитывали, как правило, на 6-7 день после инфекции, когда развивалось максимальное цитопатогенное действие вируса, используя формулу Рида и Менча для подсчета титра вируса гепатита C.

Полученные результаты приведены в таблицах 1-4.

Показано, что в ранние сроки после обработки клеток ФЭК глутарилгистамином, наиболее выраженными противовирусными свойствами он обладает в случае внесения его в культуры ФЭК через 24 часа после инфекции. Как было показано при исследовании проб культуральной жидкости, отобранных через 48 часов после заражения клеток, в этих условиях глутарилгистамин полностью подавлял инфекционную активность ВГС в культурах ФЭК. В контрольных, необработанных глутарилгистамином ФЭК титры ВГС в этот период достигали 6,5 lg ТЦД₅₀/20 мкл. Внесение глутарилгистамина непосредственно сразу после инфекции также приводило к снижению титров ВГС на 1,0-1,5 lg. На 2,0 lg титры ВГС снижались при условии обработки клеток глутарилгистамином за 24 часа до инфекции.

Культуры клеток СПЭВ (линия клеток почки эмбриона свиньи) заражали цитопатогенным вариантом ВГС - С-13 и обрабатывали глутарилгистамином за 24 часа до инфекции, непосредственно сразу после заражения культур и через 24 часа после заражения. Пробы культуральной среды отбирали на 3-й, 4-й и 5-е дни после инфекции и титровали на свежих культурах клеток СПЭВ.

Полученные результаты приведены в таблицах 2-4. Из данных таблиц видно, что глутарилгистамин, как и в культурах клеток ФЭК, инфицированных ВГС, существенно подавляет репликацию ВГС в культурах клеток СПЭВ в случае его добавления в культуры через 24 часа после заражения клеток. Эти результаты оставались стабильными независимо от срока взятия проб культуральной жидкости из культур клеток СПЭВ, обработанных препаратом. На 5-й день после инфекции и одновременной обработки клеток препаратом была обнаружена способность глутарилгистамина подавлять инфекционную активность ВГС на 2,2-2,7 lg ТЦД₅₀/20 мкл. В пробах среды, отобранных через 5 дней после инфекции, было отмечено значительное подавление продукции ВГС под влиянием глутарилгистамина по сравнению с контролем: на 2,2 lg ТЦД₅₀/20 мкл.

Таким образом, глутарилгистамин обладает способностью подавлять репликацию вируса гепатита С в инфицированных культурах фибробластов 9-дневных куриных эмбрионов, приводя к существенному снижению титров инфекционной активности вируса. Показано, что противовирусная эффективность глутарилгистамина не снижается при использовании инфицированных ВГС культур клеток иного происхождения - линии клеток СПЭВ-ВГС. На модели инфекции культур клеток СПЭВ-ВГС показано, что глутарилгистамин эффективно подавляет инфекцию ВГС не только при добавлении его в культуры через 24 часа после заражения, но и за 24 часа до заражения клеток вирусом. Полученные результаты свидетельствуют о значительной противовирусной активности глутарилгистамина при инфекции, вызванной вирусом гепатита C.

Пример 2

Проведенное исследование направлено на изучение клинической и лабораторной эффективности глутарилгистамина у пациентов с вирусным гепатитом С при проведении комбинированной противовирусной терапии (ПВТ) пэгилированными интерферонами в сочетании с рибавирином.

Критериями включения явились: 1) наличия у больного признаков ВГС-инфекции - выявление антител к ВГС методом ИФА; наличие в сыворотке крови РНК ВГС (количественный тест), 1b генотип; 2) содержание лейкоцитов в общем анализе крови от 3,9 до 3,0×10⁹/л, количество нейтрофилов от 2,0 до 1,5×10⁹/л; 3) отсутствие поверхностного антигена вируса гепатита B; 4) отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека; 5) отсутствие других клинически значимых заболеваний печени (алкогольная болезнь печени, прием гепатотоксичных лекарственных препаратов, аутоиммунный хронический гепатит, гемахроматоз); 6) отсутствие цирроза печени.

Пациенты получали пэгинтерферон-α2b подкожно в дозе 100 мкг 1 раз в неделю и рибавирин 1000 мг в сутки, ежедневно в течение 48 недель. В период лечения проводился ежемесячный клинический и биохимический мониторинг. РНК ВГС определяли через 1 месяц от начала терапии, затем каждые три месяца лечения. Всем пациентам проводили ультразвуковое трансабдоминальное сканирование органов брюшной полости до начала терапии, далее каждые 6 месяцев. Проведенное исследование было одобрено Этическим комитетом, и все пациенты давали информированное согласие на участие в исследовании.

В соответствии с рандомизацией (проводилась с применением «метода конвертов») все пациенты были разделены на две группы, сопоставимые по полу и возрасту в зависимости от схемы лечения: 1-я группа (n=52) получала пэгинтерферон-α2b+рибавирин, 2-я группа (n=58) - пэгинтерферон-α2b+рибавирин+дикарбамин 100 мг 1 раз в день, курсом 21 день от начала ПВТ. В последующем дикарбамин назначался по аналогичной схеме каждые три месяца терапии.

Статистическая обработка и графическая визуализация данных производилась в соответствии с технологией современного компьютерного анализа на IBM-совместимом персональном компьютере с использованием приложений Microsoft Excel пакета Office 2007 и Statistica (StatSoft) версии 6.0, функционировавших в операционной среде Microsoft Windows 7 Professional.

Результаты исследования и их обсуждения. Под наблюдением находилось 110 пациентов, из них - 69 мужчин (63%) и 41 женщина (37%) с гепатитом C в возрасте от 19 до 52 лет (средний возраст 32,2±5,1 лет). Средняя масса тела составила 76,4±8,1 (от 55 до 84 кг). Давность инфицирования, которую определяли от момента появления хотя бы одного фактора риска, составила от 2,5 до 8 лет (табл.5). Достоверных межгрупповых различий зарегистрировано не было.

Ведущими синдромами у всех пациентов, страдающих гепатитом С, были астеновегетативный (нарушение сна, утомляемость, потливость, снижение аппетита, эмоциональная лабильность), зарегистрированный у 75 (67,95%) пациентов; диспепсический (тошнота, отрыжка, чувство распирания, тяжесть в эпигастрии и в правом подреберье, запор и/или понос) имел место у 62 (56,3%) пациентов. Самым частым клиническим проявлением заболевания было увеличение печени у 94 (85,2%) пациентов. Спленомегалия зарегистрирована у 35 (31,95%) пациентов. Частота встречаемости основных клинических синдромов в разных группах больных представлена в табл.6. Как видно из данных табл.6, до начала терапии достоверных различий между пациентами 1-й и 2-й групп зарегистрировано не было.

Гиперферментемия регистрировалась у 38% пациентов и превышала норму в 3-4 раза, что соответствовало малой и умеренной активности трансаминаз, у остальных пациентов уровень АЛАТ был повышен в 1,5-2 раза или не превышал норму. В ряде случаев отмечалась небольшая гипербилирубинемия с повышением уровня билирубина до 2-х норм преимущественно за счет неконъюгированной фракции. Значимых различий по указанным показателям у пациентов сравниваемых групп не было. Диспротеинемия с гипергаммаглобулинемией отмечалась у 34-36% больных.

По полу, возрасту, условиям питания, быта и трудовой деятельности, а также по месту проживания, группы наблюдаемых пациентов были однородны.

Пациенты 1-й группы наблюдения переносили лечение хуже, побочные реакции регистрировались чаще, чем у пациентов 2-й группы данные представлены в табл.7.

У пациентов второй группы побочные эффекты в виде гриппоподобного синдрома, частоте появления миалгии, депрессии, выпадению волос и цитопеническому синдрому были зарегистрированы в меньшем проценте случаев по сравнению с пациентами 1-й группы (p<0,05).

При этом наблюдение показало, что у 62,2% пациентов, получавших комбинированную противовирусную терапию + дикарбамин, зарегистрировано субъективное улучшение самочувствия (повышение работоспособности и исчезновение слабости) по сравнению с 1-й группой - 15,4%, p<0,05.

При проведении комбинированной противовирусной терапии были выявлены следующие побочные явления в виде снижения общего числа лейкоцитов и нейтрофилов (табл.8). В 1-й группе в период ПВТ лейкопения наблюдалась с ранних сроков (4 нед. терапии) у 71% пациентов, и нейтропения у 69% пациентов, данные показатели сохранялись достоверно сниженными в течение всего курса лечения по сравнению с 2-й группой (p<0,05). У пациентов второй группы лейкопения отмечена в 35% случаев, нейтропения зарегистрирована у 4 6% пациентов. Резко сниженных показателей лейкоцитов и нейтрофилов, которые могли бы стать причиной коррекции дозы или отмены ПВТ в данной группе пациентов зарегистрировано не было.

Оценивая эффективность применения дикарбамина в комплексной терапии пациентов ХГС авторы изучили его влияния на биохимические показатели и вирусологический ответ.Наиболее значимые данные представлены в табл.9 и 10).

Как видно из данных, представленных в табл.9, в 2-й группе пациентов было достигнуто более выраженное улучшение показателей цитолиза и холестаза.

Непосредственный вирусологический ответ (снижение РНК ВГС до неопределяемого уровня) был зарегистрирован у 79,3% пациентов 2-й группы, дополнительно принимавших дикарбамин, что явилось статистически значимым в сравнении с результатами пациентов 1-й группы (p=0,035) получавших только комбинированную

противовирусную терапию, данные представлены в табл.10. Как видно из табл.10, ранний вирусологический ответ также достоверно чаще регистрировался у пациентов 2-й группы (p<0,05).

Таким образом, применение комбинированной терапии • для лечения больных гепатитом C, включающей в себя пэгинтерферон, рибавирин и глутарилгистамин (в составе дикарбамина), является более эффективным для лечения гепатита C. Отмечена хорошая переносимость противовирусной терапии у пациентов с гепатитом С при применении предложенной схемы лечения.

Пример 3.

Целью исследования являлось изучение влияния глутарилгистамина (дикарбамина) на эффективность противовирусной терапии у больных с lb генотипом вируса хронического гепатита C с исходно сниженным количеством лейкоцитов и нейтрофилов.

Под наблюдением находилось 86 пациентов ХГС (анти HCV «+», РНК HCV «+», генотип 1b) в возрасте от 20 до 52 лет (средний возраст - 32±1,2 года). Мужчин - 46 (53,5%), женщин - 40 (46,5%).

Для реализации поставленной цели все пациенты были разделены на две группы, сопоставимые по полу и возрасту в зависимости от схемы лечения: 1-я группа (n=44) получала пэгинтерферон-α2b+рибавирин, 2-я группа (n=42) пэгинтерферон-α2b+рибавирин+дикарбамин. Пэгинтерферон- α2b назначался подкожно в дозе 100 мкг 1 раз в неделю, рибавирин 1000 мг в сутки, ежедневно, курсом 48 недель. В соответствии с рандомизацией (проводилась с применением «метода конвертов»), дикарбамин назначался по 100 мг 1 раз в день, курсом 9 недель от начала противовирусной терапии, далее - за 9 недель перед ее окончанием.

Эффективность лечения оценивалась по устойчивому вирусологическому ответу на 24 неделе наблюдения после завершения ПВТ. Изучение уровня лейкоцитов и нейтрофилов в крови проводилось до лечения и на этапах контроля ПВТ (4, 8, 12, 24, 36, 48 недели). Достоверных межгрупповых различий зарегистрировано не было. Перед началом проведения двойной ПВТ у всех больных отмечались лабораторные признаки лейко- и нейтропении (содержание лейкоцитов в общем анализе крови от 3,5 до 3,0×10⁹/л, количество нейтрофилов от 2,0 до 1,5×10⁹/л). Проведенное исследование было одобрено Этическим комитетом, и все пациенты давали информированное согласие на участие в исследовании.

Статистическая обработка и графическая визуализация данных производилась в соответствии с технологией современного компьютерного анализа на IBM-совместимом персональном компьютере с использованием приложений Microsoft Excel пакета Office 2007 и Statistica (StatSoft) версии 6.0, функционировавших в операционной среде Microsoft Windows 7 Professional.

В таблице 11 представлена характеристика наблюдаемых пациентов ХГС разных групп до начала ПВТ.

У всех пациентов ХГС зарегистрированы следующие основные синдромы: у 98% астеновегетативный синдром (повышенная утомляемость, раздражительность, расстройство сна, снижение работоспособности и общая слабость, недомогание, неустойчивость настроения, головная боль), у 90,9% диспепсический синдром (снижение аппетита, неприятные ощущения в животе, тошнота, метеоризм, отрыжка, а у отдельных больных рвота). У 81% отмечалась тяжесть и/или боль в эпигастрии и/или в правом подреберье (синдром правого подреберья), имевшая преимущественно тупой, ноющий характер. Гепатомегалия регистрировалась у 81% пациентов данной группы, увеличение печени сопровождалось уплотнением ее консистенции и умеренной болезненностью при пальпации. Эти ведущие синдромы у большинства пациентов (88,2%) регистрировались одновременно. Частота встречаемости основных клинических синдромов в разных группах больных представлена в таблице 12. До начала терапии достоверных различий между пациентами 1-й и 2-й групп зарегистрировано не было.

При оценки динамики содержания лейкоцитов и нейтрофилов в крови у пациентов ХГС на фоне ПВТ без учета варианта лечения установлено, что доля лиц с I степенью лейко- и нейтропении перед началом лечения составляла 83,7% человек. По мере продолжения ПВТ закономерно нарастало число пациентов со снижением количества лейкоцитов и нейтрофилов в зависимости от выбранной тактики лечения. В таблице 13 представлена динамика абсолютных значений лейкоцитов и нейтрофилов у больных в зависимости от тактики лечения. Сравнивая различные варианты терапии, авторы установили, что применение пэгинтерферона-α2b в сочетании с рибавирином вызвало достоверно более выраженное снижение исследуемых показателей по сравнению с группой пациентов, которая получала дикарбамин. Так, в 1-й группе пациентов минимальное значение лейкоцитов составило 2,1±0,16×10⁹/л, нейтрофилов - 1,0±0,03×10⁹/л, тогда как во 2-й группе - 3,4±0,11×10⁹/л; 1,9±0,05×10⁹/л соответственно (p<0,05).

Проведенный анализ данных по эффективности противовирусной терапии показал достоверно лучшие результаты лечения у пациентов 2-й группы по сравнению с 1-й (p<0,05), данные представлены в табл.14.

Таким образом, можно предположить возможность потенцирования противовирусного эффекта препаратом дикарбамин при назначении его в комбинации с ПВТ. Это свойство препарата дикарбамин было зарегистрировано при изучении отдаленных результатов проведенного лечения, а именно устойчивого вирусологического ответа.

Также была проведена сравнительная характеристика основных биохимических показателей в 2-х группах у пациентов ХГС до ПВТ и через 24 недели после окончания ПВТ. Наиболее значимые данные представлены в табл.15.

Как видно из данных, представленных в табл.15, показатели цитолиза и холестаза достоверно улучшались у пациентов 2-й группы через 24 недели после проведенной терапии. Применение дикарбамина у пациентов во 2-й группе показало достоверно значимый лучший отдаленный результат в восстановлении метаболических показателей печени.

Таким образом, назначение препарата дикарбамин в комплексе с двойной противовирусной терапией является новым способом лечения инфекции ВГС.

Включение дикарбамина в комбинированную противовирусную терапию привело к повышению частоты устойчивого

вирусологического ответа у больных хроническим гепатитом C (ХГС), что повысило эффективность лечения на 20,7%.

Пример 4

Целью исследования являлось изучение влияния лечения дикарбамином на эффективность противовирусной терапии у первичных больных ХГС в достижении устойчивого вирусологического ответа.

Под наблюдением находилось 142 больных ХГС (мужчин 66, женщин 76 в возрасте от 18 до 62 лет, средний возраст 36,5±1,4 лет). Критерием включения в исследование являлось наличие у пациентов подтвержденного (анамнестическими, клинико-лабораторными данными) ХГС в фазе репликации (РНК HCV+), генотипы вируса 1b и 3a. Отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека; отсутствие других клинически значимых заболеваний печени (алкогольная болезнь печени, прием гепатотоксичных лекарственных препаратов, аутоиммунный хронический гепатит, гемохроматоз); отсутствие цирроза печени. Все больные были комплексно обследованы с помощью клинических и лабораторно-инструментальных методов исследования. Диагноз ХГС подтверждался выявлением в сыворотке крови специфических антител к антигенам вируса гепатита C (анти HCV IgG, анти HCV сумм.) и РНК HCV - методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с определением генотипа и количества вируса. В период лечения проводился ежемесячный клинический и биохимический мониторинг. РНК HCV определяли через 1 месяц от начала терапии, затем каждые три месяца лечения. Всем пациентам проводили ультразвуковое трансабдоминальное сканирование органов брюшной полости до начала терапии, далее каждые 6 месяцев. Кроме того, в качестве контрольной группы обследовано 56 практически здоровых лиц с индексом массы тела менее 25 кг/м², отсутствием маркеров вирусных гепатитов и нормальными показателями иммуно-биохимических параметров.

Индекс массы тела у всех больных включенных в исследование составил 18-25 кг/м². Генотип 1b был зарегистрирован у 54,9% обследуемых в остальных случаях (45,1%) регистрировался генотип За. Вирусная нагрузка варьировала от 240 тыс до 12 млн. МЕ/мл.

Для уточнения степени активности и стадии заболевания 84 пациентам была выполнена пункционная биопсия печени: средний показатель ИГА по Knodell составил 6,02±0,71 баллов, а индекс фиброза по Desmet - 1,08±0,92 баллов.

Пациенты получали пэгинтерферон- α2b подкожно в дозе 1,5 мкг/кг/ в неделю и рибавирин (800-1200 мг в сутки) ежедневно. Период лечения составлял: при генотипе За и наличии быстрого вирусологического ответа - 24 недели, при генотипе lb и наличии раннего вирусологического ответа - 48 недель.

Проведенное исследование было одобрено Этическим комитетом, и все пациенты давали информированное согласие на участие в исследовании.

В соответствии с рандомизацией (проводилась с применением «метода конвертов») все пациенты были разделены на две группы, сопоставимые по полу и возрасту в зависимости от схемы лечения: 1-я группа (n=74) получала пэгинтерферон-α2b+рибавирин, 2-я группа (n=68) - пэгинтерферон-α2b+рибавирин+дикарбамин 100 мг 1 раз в день, курсом 12 недель от начала ПВТ. В последующем дикарбамин назначался в той же дозировке последние 12 недель ПВТ.

Сравниваемые группы были сопоставимы по полу, возрасту, генотипу вируса, а также биохимическим показателям (табл.16, 17).

Статистическая обработка и графическая визуализация данных производилась в соответствии с технологией современного компьютерного анализа (на IBM-совместимом персональном компьютере с использованием приложений Microsoft Excel пакета Office 2007 и Statistica (StatSoft) версии 7.0, функционировавших в операционной среде Microsoft Windows ХР Professional.

Сопутствующая терапия дикарбамином хорошо переносилась всеми пациентами. Частота возникновения нежелательных явлений у больных 2-х групп определялась известными побочными эффектами пэгинтерферона и рибавирина. Оценка содержания лейкоцитов и нейтрофилов в крови у больных ХГС на фоне ПВТ в зависимости схемы лечения представлена в табл.18.

Отмечено, что абсолютные показатели крови (лейкоциты и нейтрофилы) статистически значимо снижались на 4 недели терапии у пациентов двух групп. Однако менее выраженное снижение содержания данных показателей зарегистрировано во 2-й группе по сравнению с 1-й группой на всех контрольных точках исследования (p<0,05).

При анализе биохимических показателей авторы достоверно получили лучшие результаты у пациентов 2-й группы по сравнению с 1-й, которые представлены в таблице 19.

Как видно из данных, приведенных в таблице 19, синдром цитолиза сохранялся выраженным у пациентов в 1-й группе. Уровень АЛАТ изменялся от 30,4 до 183,2 Ед/л и превысил норму у 36% больных. Среднее значение этого показателя составило 118,32±5,88 Ед/л, что достоверно (p₀<0,001, p_1-2<0,001) отличалось от аналогичных показателей в группах сравнения. Во 2-й группе больных средний показатель АЛАТ составил 21,89+1,45 Ед/л и не превышал норму у 80% чел. Показатели ЩФ, ТП у больных 1-й и 2-й групп при сравнении также достоверно отличались как между собой, так и от группы здоровых лиц (табл.19). Отмечено увеличение тимоловой пробы и ЩФ у 86,4%, и 65,5% больных 1-й группы соответственно.

Основной результат данного исследования представлен различиями в частоте достижения быстрого, раннего и устойчивого вирусологического ответа в зависимости от генотипа вируса (таблицы 20, 21).

Прием дикарбамина сопровождается более высокой частой достижения всех видов вирусологического ответа. Так во 2-й группе пациентов частота достижения быстрого вирусологического ответа (БВО - через 4 недели ПВТ) составила при lb генотипе 75%, а при За - 98, 93% против 52, 63% и 83, 33% в группе без его применения. Частота достижение раннего вирусологического ответа (РВО - через 12 недель ПВТ) и устойчивого вирусологического ответа (УВО через 6 месяцев после окончания ПВТ) на терапию так же была выше в группе пациентов, принимавших дикарбамин: РВО, НВО, УВО - при 1b генотипе составил 82,5%, 82,5%, 67,5% при 3a -99,14%, 86,86%, 89,29% против 78,95%, 71,05%, 47,37% и 76,89%, 74,33%, 71,33% соответственно.

Пациенты 2-й группы наблюдения переносили лечение лучше, побочные реакции регистрировались реже, чем у пациентов 1-й группы. Данные результатов наблюдения представлены в таблице 22.

Таким образом, дикарбамин можно рассматривать как препарат, усиливающий противовирусное действие при одновременном назначении с пэгинтерфероном и рибавирином, что проявляется в повышении частоты УВО при 1b генотипе на 20,13%, при 3a генотипе на 17,96%.

Таким образом, авторы установили, что лечение больных ХГС пэгилированным интерфероном - α2b+рибавирин в сочетании с дикарбамином оказывает положительное влияние на биохимические параметры пациентов, что отражается в улучшении функциональной активности гепатоцитов. Кроме того, применение дикарбамина в лечении ХГС ассоциировано с достоверно более высокой частотой достижения УВО на фоне ПВТ у пациентов с 1b и 3a генотипами. При этом лечение дикарбамином пациентов с ХГС (генотипы 1b и 3a) сопряжено со статистически значимым снижением частоты нежелательных явлений ПВТ.

Пример 5

Лекарственные формы глутарилгистамина

Для лечения гепатита С глутарилгистамин может быть введен перорально, внутримышечно или внутривенно в виде стандартных лекарственных форм, содержащих нетоксичные фармацевтически приемлемые носители.

Глутарилгистамин может вводиться пациенту в дозах, составляющих от 0,1 до 10 мг/кг веса тела в день, предпочтительно в дозах от 0,5 до 5 мг/кг, еще более предпочтительно, 1 мг/кг, один или более раз в день.

При этом следует отметить, что конкретная доза для каждого конкретного пациента будет зависеть от многих факторов, включая возраст, вес тела, пол, общее состояние здоровья и режим питания пациента, время и способ введения лекарственного средства, скорость его выведения из организма, а также тяжести заболевания у данного пациента, проходящего лечение.

Фармацевтические композиции содержат глутарилгистамин в количестве, эффективном для достижения положительного результата при лечении гепатита C, и могут быть введены в виде стандартных лекарственных форм (например, в твердой, полутвердой или жидкой формах), содержащих глутарилгистамин в качестве активного ингредиента в смеси с носителем или наполнителем, пригодным для перорального, внутримышечного или внутривенного введения. Активный ингредиент может быть включен в композицию вместе с обычно используемыми нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями, пригодными для изготовления растворов, таблеток, пилюль, капсул, драже и любых других лекарственных форм.

В качестве наполнителей могут быть использованы различные вещества, такие как сахариды, например, глюкоза, лактоза или сахароза, маннит или сорбит, производные целлюлозы и/или фосфаты кальция, например, трикальций фосфат или кислый фосфат кальция, в качестве связующего компонента могут быть использованы такие, как крахмальная паста, например, кукурузный, пшеничный, рисовый, картофельный крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и/или поливинилпирролидон. При необходимости могут быть использованы разрыхляющие агенты, такие как вышеупомянутые крахмалы и карбоксиметилкрахмал, поперечносшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.

Также могут быть включены необязательные добавки, например, агенты, регулирующие текучесть, и смазывающие агенты, такие как диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота и ее соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция, и/или пропиленгликоль.

В качестве добавок могут быть также использованы стабилизаторы, загустители, красители и отдушки.

При приготовлении стандартной лекарственной формы количество активного ингредиента, используемого в комбинации с носителем, может варьироваться в зависимости от пациента, проходящего лечение, и от конкретного способа введения лекарственного средства.

Так, например, при использовании глутарилгистамина в виде растворов для инъекций, содержание активного агента в них составляет 0,01-5 масс.%. В качестве разбавителей могут быть использованы 0,9% раствор хлорида натрия, дистиллированная вода, раствор новокаина для инъекций, раствор Рингера, раствор глюкозы, специфические добавки для растворения. При введении в организм глутарилгистамина в виде таблеток, их количество составляет 5,0-500 мг на стандартную лекарственную форму.

Лекарственные формы глутарилгистамина для использования в соответствии с настоящим изобретением получают по стандартным методикам, таким как, например, процессы смешивания, гранулирования, формирование драже, растворение и лиофилизация.

Таблетированная форма

Таблетированную форму получают, используя приведенные ниже ингредиенты:

Компоненты смешивают и прессуют для образования таблеток весом 300 мг каждая.

Суппозитории

Пример состава суппозитория:

При необходимости возможно изготовление ректальных, вагинальных и уретральных суппозиториев с соответствующими наполнителями.

Раствор для инъекций

Пример состава раствора для инъекций: