СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОПУХОЛЕЙ

Изобретение относится к экспериментальной медицине и ветеринарии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики опухолей у животных.

Известен способ дифференциальной диагностики опухолей, при котором получают биопсийный материал путем пункции опухоли либо интраоперационно и проводят ее гистологическое исследование. Материал фиксируют 10% раствором нейтрального формалина, заливают в парафин, приготавливают ультратонкие срезы и окрашивают различными красителями. Затем под микроскопом наблюдают признаки доброкачественных либо злокачественных новообразований и тем самым проводят дифференциальную диагностику опухолей. (Пальцев М.А.. Аничков Н.М. Патологическая анатомия: Учебник. В 2 т. T.1. - М.: Медицина, 2000. - 528 с.).

Метод трудоемкий, требует продолжительной подготовки материала к исследованию и квалифицированного специалиста - морфолога.

Задачей изобретения является сокращение времени исследования и упрощение способа.

Сущность предложенного способа состоит в том, что в опухоль чрескожно вводят игольчатые электроды с активным токопроводящим концом и по мере их продвижения вглубь опухоли пятикратно измеряют показатели биоимпеданса (БИМ) на частоте тока 2 кГц и напряжении 1,02 V, и, если при проведении электродов вглубь показатели БИМ постепенно уменьшаются, то опухоль является доброкачественной, если показатели БИМ колеблются либо увеличиваются, то опухоль является злокачественной.

Частота измерения электрического импеданса опухолевой ткани - 2 кГц была определена экспериментальным путем и наиболее информативно показывает биофизические особенности опухолевой ткани. Используемое напряжение является стандартным для аппарата BIM-II.

Для измерения БИМ использовали аппарат BIM-II, разработанный ООО «Центр трансфера инновационных разработок», г.Смоленск (Заявка на патент на промышленный образец №2010503263 от 08.11.2010) и оригинальные измерительные электроды (Патент №2318435).

Схема предлагаемого способа изображена на чертеже, где 1 - электрод для измерения импеданса, 2 - ткань опухоли, 3 - окружающая ткань.

Пример 1. У беспородной собаки массой 50 кг, возраст 10 лет выявлена опухоль в области шеи 60×30×30 мм. Образование при пальпации каменистой плотности, имело кровоточащее изъязвление площадью 10×10 мм. На УЗИ определялось неоднородное образование с четкими контурами, повышенной эхогенности.

Проведена биоимпедансометрия опухоли при помощи игольчатых электродов из инертного металла с активным токопроводящим концом, для чего электроды чрескожно вводили в ткань и проводили снаружи внутрь через всю толщу опухоли на глубину 30 мм. Глубина введения зависела от толщины опухоли в месте измерения и контролировалась пальпаторно. По мере введения электродов, производили измерение электрического импеданса опухоли. Импеданс замеряли в пяти разных точках через каждые 5 мм, (Z₁ Z₂ Z₃ Z₄, Z₅), что определяли по насечкам на электродах. Биоимпедансометрию проводили на частоте тока 2 кГц и напряжении 1,02 V.

Были получены следующие данные: Z₁=437 Ом, Z₂=340 Ом, Z₃=332 Ом, Z₄=296 Ом, Z₅=263 Ом, затем полученные показатели электрического импеданса сравнивали. Выявлено постепенное уменьшение показателей электрического импеданса от поверхностного слоя опухолевой ткани до глубокого, на основании чего был сделан вывод, что опухоль имеет доброкачественный характер.

Далее опухоль удаляли оперативным путем и проводили гистологическое исследование. Методом микроскопии выявляли наличие признаков хронического воспаления: при микроскопии определялись мышечная, жировая и соединительная ткани, обильно инфильтрированные клетками лимфоидного ряда, макрофагами и нейтрофилами, местами в виде полей.

Пример 2. У беспородной собаки массой 20 кг, возраст 9 лет выявлена опухоль в области левого яичка 20×20×20 мм. Образование при пальпации плотное, спаяно с подлежащими тканями.

Проведена биоимпедансометрия опухоли при помощи игольчатых электродов из инертного металла с активным токопроводящим концом, для чего электроды чрескожно вводили в ткань и проводили снаружи внутрь через всю толщу опухоли на глубину 20 мм (глубина введения зависела от толщины опухоли в месте измерения и контролировалась пальпаторно). По мере введения электродов, производили измерение электрического импеданса опухоли. Импеданс замеряли в пяти разных точках, через каждые 4 мм (Z₁ Z₂ Z₃ Z₄ Z₅), что определяли по насечкам на электродах. Биоимпедансометрию проводили на частоте тока 2 кГц и напряжении 1,02 V.

Были получены следующие данные: Z₁=594 Ом, Z₂=548 Ом, Z₃=621 Ом, Z₄=691 Ом, Z₅=558 Ом, затем полученные показатели электрического импеданса сравнивали, зафиксировано колебание показателей электрического импеданса то в сторону снижения, то увеличения, что не позволило говорить о доброкачественном характере опухоли и следовательно новообразование было злокачественным.

Далее опухоль удаляли оперативным путем и проводили гистологическое исследование. Методом микроскопии выявили наличие признаков семиномы (злокачественная опухоль): мономорфные округлые клетки со светлой цитоплазмой, ближе к периферии образования определялась гиалинизированная строма, имелись очаги некрозов и грануляции.

Пример 3. У собаки породы овчарка массой 40 кг, возраст 11 лет выявлена опухоль в области молочной железы 80×64×53 мм. Образование при пальпации плотное, спаяно с подлежащими тканями.

Проведена биоимпедансометрия опухоли при помощи игольчатых электродов из инертного металла с активным токопроводящим концом, для чего электроды чрескожно вводили в ткань и проводили снаружи внутрь через всю толщу опухоли на глубину 60 мм (глубина введения зависела от толщины опухоли в месте измерения и контролировалась пальпаторно). По мере введения электродов, производили измерение электрического импеданса опухоли. Импеданс замеряли в пяти разных точках через каждые 10 мм, (Z₁ Z₂ Z₃ Z₄ Z₅), что определяли по насечкам на электродах. Биоимпедансометрию проводили на частоте тока 2 кГц и напряжении 1,02V.

Были получены следующие данные: Z₁=590 Ом, Z₂=625 Ом, Z₃=636 Ом, Z₄=691 Ом, Z₅=930 Ом, затем полученные показатели электрического импеданса сравнивали, зафиксировано колебание показателей электрического импеданса то в сторону снижения, то увеличения, что не позволило говорить о доброкачественном характере опухоли и следовательно новообразование было злокачественным.

Далее опухоль удаляли оперативным путем и проводили гистологическое исследование. Методом микроскопии выявили наличие признаков кистозной эпителиомы (злокачественная опухоль): в дерме визуализировались комплексы из высокодифференцированных эпидермоцитов с островками некроза, определялись кистозные полости и ороговение в центре опухоли.

Способ апробирован на 13 собаках и 3 кошках различных пород и возрастов, страдающих поверхностно расположенными опухолями. Всем животным была проведена биоимпедансометрия опухолей по описанной выше методике. В 50% (n=8) случаях в ходе измерения импеданса по мере введения электродов показатели уменьшались, что свидетельствовало о доброкачественном процессе. В остальных 50% (n=8) случаев изменение показателей происходило иначе, что говорило о злокачественном процессе. Во всех случаях диагноз был подтвержден гистологически.

Таким образом, предложенный способ дифференциальной диагностики опухолей у животных является простым, объективным, надежным, не занимает много времени, не требует проведения продолжительной подготовки гистологического материала для морфологического исследования и специалиста морфолога и может быть широко использован в ветеринарии и экспериментальной медицины для прижизненного исследования опухолей.