Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НЕДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ДИСПЛАЗИИ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ У ЛИЦ МОЛОДОГО ВОЗРАСТА (17-29 ЛЕТ) БЕЗ ФОНОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ИНТОКСИКАЦИЙ

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии.

Уровень техники

Известно, что в диагностике недифференцированных форм нарушения обмена соединительной ткани наиболее широко используются биохимический, клинический и инструментальный способы. Биохимическое выявление соединительнотканной дисплазии осуществляется путем определения содержания оксипролина, гидроксилизина, галактозилоксилизина, лизилпиридинолина, дезоксипиридинолина, гидроксилизилпиридинолина, С-концевых и N-концевых телопептидов, продуктов распада коллагена I типа в сыворотке крови и пирилинкса-D в суточной моче (Кадурина Т.И., Горбунова В.Н. Дисплазия соединительной ткани. Руководство для врачей. - СПб.: Элби-СПб, 2009. - 704 с.). Кроме этого, недифференцированная дисплазия соединительной ткани выявляется путем проведения клинического и инструментального методов исследования (расспрос, осмотр, физикальное обследование, функциональные методы диагностики).

В качестве аналога выбран способ ранней диагностики хронической интоксикации бензолом и его соединениями и способ диагностики нарушений микроциркуляции путем определения эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови (Коричкина Л.Н., 2002, 2005 гг.).

В качестве прототипа выбран способ диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани по наличию совокупности внешних проявлений дисплазии соединительной ткани и клинически значимой патологии хотя бы одного внутреннего органа, в частности сердца (пролапсы клапанов, дополнительные хорды левого желудочка, аритмический синдром) (Утц И.А., Городкова Е.Н., 2008 г.).

Однако данный способ имеет некоторые недостатки:

1. Необходимость проведения сложного дорогостоящего инструментального обследования сердечно-сосудистой системы (ультразвуковое исследование сердца, холтеровское мониторирование ЭКГ).

2. Необходимость участия в обследовании специалистов (врач-кардиолог, врач функциональной диагностики).

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является осуществление диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани наиболее простым, доступным, дешевым методом без каких-либо ограничений для больного, с наименьшими затратами во времени исследования, лабораторного инвентаря, труда медицинского персонала.

Сущность изобретения

В последние годы заметно возрос интерес к феномену эндогенного ауторозеткообразования. Процесс эндогенного ауторозеткообразования является общей иммунологической реакцией организма, направленной на выведение из кровеносного русла эритроцитов с измененными в результате какого-либо патологического процесса мембранами. Ауторозетки в периферической крови представляют собой клеточные ассоциации с находящимся в центре розеткообразующим лейкоцитом. С розеткообразующими клетками тесно контактирует по их периферии от 3-х до 5-7, иногда и более, эритроцитов. При этом лейкоциты могут осуществлять экзоцитарную дегрануляцию, приводящую к освобождению литических ферментов и активных форм кислорода, обусловливая экзоцитарный лизис эритроцитов и в конечном итоге их разрушение.

Нами были проведены исследования, направленные на оценку ауторозеткообразования в периферической крови у молодых лиц в возрасте 17-29 лет с дисплазией соединительной ткани без каких-либо интоксикаций и заболеваний, в результате которых обнаружено, что у данной категории лиц выявляется разительное увеличение количества ауторозеток, особенно с экзоцитарным лизисом эритроцитов, в периферической крови (33,7 на 100 лейкоцитов) по сравнению со здоровыми людьми (0,75 на 100 лейкоцитов). Причем лишь у 13,5% обследованных обнаружены нейтрофильные ауторозетки в количестве 10-20 на 100 клеток, а у 86,5% больных с соединительнотканной дисплазией зарегистрировано 20 нейтрофильных ауторозеток и более. На основании полученных результатов можно предположить, что феномен ауторозеткообразования можно использовать в качестве наиболее простого, доступного метода диагностики дисплазии соединительной ткани.

Техническим результатом способа является повышение удобства диагностики дисплазии соединительной ткани, проявляющееся простотой метода, минимальными затратами для медицинского персонала и усилиями для больного. Забор крови осуществляется утром натощак из 4-го пальца кисти с помощью игл-скарификаторов. Самотеком кровь забирают в капилляр, из которого каплю крови наносят на стекло. Мазок производят шлифованным стеклом под углом 45°, затем высушивают при комнатной температуре. Фиксация мазков осуществляется в смеси Никифорова, состоящей из равных частей этилового 96° спирта и эфира в течение 30 мин. Окраска мазков производится по Романовскому-Гимзе в течение 30-35 минут, после чего мазки промывают и высушивают на воздухе. Подсчитываются ауторозетки с помощью результатов клинического анализа крови и световой микроскопии в абсолютном количестве на 10⁹/л и в процентах на 100 лейкоцитов. Продолжительность всей процедуры занимает не более 2-х часов, не требует проведения дорогостоящего инструментального обследования и консультаций врачей узких специальностей.

Осуществление изобретения

Поставленная задача и ее результат достигаются тем, что в диагностике нарушений соединительнотканного обмена используется метод оценки феномена эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови.

Исследования проведены на клинической базе ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава в лаборатории городской больницы №7 г.Твери.

В исследовании использованы методы световой микроскопии, клинический анализ крови.

Статистическая обработка данных включала методы описательной статистики, достоверность различий устанавливалась с помощью t-критерия Стьюдента, уровень значимости определялся при p<0,05.

В ходе обработки материала использовали персональный компьютер Intel Pentium II с помощью пакетов прикладных программ «Excel». Проведенное статистическое исследование показало нормальное распределение показателей, в связи с чем обработка данных проводилась параметрическими методами (определение t-критерия Стьюдента).

Клинический пример

Больной Ж., 25 лет, не курит, лекарственных средств на момент обращения и обследования не принимает. Обратился к кардиологу с жалобами на периодические боли в области сердца колющего характера без иррадиации, эпизоды учащенного сердцебиения, частые головные боли. Была произведена оценка интенсивности эндогенного ауторозеткорозеткообразования в периферической крови больного, используя вышеописанную методику, в результате чего обнаруженное количество нейтрофильных ауторозеток составило 10 на 100 лейкоцитов, что предполагает наличие у него соединительнотканной дисплазии. После проведения трехмерной эхокардиографии больному поставлен диагноз: «Пролапс митрального клапана II степени с миксоматозной дегенерацией створок, митральная регургитация II степени. Ложная хорда левого желудочка», подтверждающий наряду с комплексом фенотипических, клинических данных наличие у него соединительнотканной дисплазии.

Таким образом, эффективность способа диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани, включающего оценку эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови, высокая.

Больной И., 20 лет, не курит, лекарственных препаратов на момент обращения и обследования не принимает. Обратился к кардиологу с жалобами на кратковременные эпизоды колющих болей в области сердца, одышку при физической нагрузке. При оценке эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови обнаружена 1 ауторозеткообразующая клетка на 100 лейкоцитов, что характерно для здоровых лиц. Данные объективного обследования (фенотипические, клинические признаки, семейный анамнез), ультразвукового исследования сердца, органов брюшной полости и почек подтвердили отсутствие у больного дисплазии соединительной ткани. Следовательно, эффективность предлагаемого способа диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани высокая.