×
27.06.2013
216.012.50a8

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКТИНОВ, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТИВОКАНДИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Культуральную жидкость, полученную после выращивания смеси штаммов Lactobacillus acidophilus NKI, 100, КШ, замораживают, удаляют слой жира, обезжиренную часть размораживают и отделяют клетки центрифугированием. Полученный супернатант стерилизуют мембранной вакуумной фильтрацией, концентрируют мембранной ультрафильтрацией в процессе центрифугирования, обрабатывают концентрат супернатанта с компонентами более 30 кDа пятикратным избытком ледяного ацетона. Полученный осадок разводят 20 мМ NaCl в соотношении 2:1 по объему и смешивают с 10% твин-80 до конечной концентрации твина 1%. Очистку и выделение целевого продукта проводят методом горизонтального изоэлектрофореза в пластине 5% полиакриламидного геля с 7-8 М мочевиной и 5% сахарозой в градиенте рН 4-8 при температуре 8-12°С в течение 8 ч. При выделении целевого продукта после электрофореза гелевые ленты нарезают по изоточкам, замораживают при температуре (-20°С) в течение 2 ч, размораживают и диспергируют, отделяют центрифугированием твердые частицы, концентрируют центрифугированием при 5500 об/мин в течение 60 мин при комнатной температуре, удаляют низкомолекулярные примеси и смешивают концентрат с фосфатным буфером в 100-кратном объеме. Гелевые ленты нарезают по изоточкам р1 (4.0-4.3) при выделении кислых лектинов и рI (7.6-8.0) при выделении щелочных пектинов. Это обеспечивает получение лектинов, обладающих противокандидной активностью. 4 з.п. ф-лы, 1 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к биотехнологии и медицине и может быть использовано для получения препаратов-пребиотиков.

В настоящее время к лектинам относят широкий спектр веществ белковой природы. Существует несколько определений лектинов (1). Первое определение (лектины как специфические агглютинины и преципитины) учитывает максимальный спектр белковых агглютининов и преципитинов, в том числе с неустановленным механизмом действия для ряда адгезинов. К таким белковым соединениям относятся, например, полилизинсодержащие, которые агглютинируют и преципитируют лиганды за счет высокой заряженности их молекул. Фосфорсодержащие аминокислоты или липиды в составе белков также могут обуславливать агглютинацию клеток или преципитацию катионных и сильно гидрофобных гликоконьюгатов. К достоинствам определения следует отнести простоту тестирования кандидатов в лектины, включение в поле зрения новых перспективных биоэффекторов и адгезинов (для ряда адгезинов уже доказана важность углеводов в биоузнавании), рассмотрение сложных поливалентных систем с позиций лиганд-рецепторного анализа с учетом вклада взаимодействий с белками, липидами, катионами металлов или углеводами. Второе определение лектинов расширяет спектр белков за счет включения моновалентных (неагглютинирующих и непреципитирующих) молекул, например некоторых токсинов растений и бактерий. К углеводсвязывающим белкам относятся также некоторые гормоны, транспортеры углеводов, но не ферменты углеводного обмена, изменяющие структуру химических связей в углеводном субстрате. Третье определение аффинитинов как любых углеводсвязывающих белков включает лектины как составную часть, наряду с ферментами углеводного обмена и иммуноглобулинами. Это определение не выделяет лектины, особенно в случае пектинов семейства I (иммуноглобулинового)-типа с иммуноглобулинподобными доменами.

На наш взгляд более приемлемо второе определение, когда к лектинам относятся белки неиммуноглобулиновой природы, способные к специфическому узнаванию гликоконъюгатов и обратимому связыванию с ними без нарушения ковалентной структуры связываемых углеводов. Согласно современным данным, некоторые из ферментов углеводного обмена, относящихся ко всем 6 классам ферментов по международной классификации, удовлетворяют условиям этого определения. Так, гликозилтрансферазы ведут себя как лектины при связывании с донорными углеводами и отсутствии акцепторных молекул. Кроме того, многие гликозидазы (например, α-амилазы, глюкоамилазы, эндоглюканазы и целлобиогидролазы) имеют не перекрывающиеся с каталитическими центрами углеводсвязывающие пространственные модули, удовлетворяющие характеристике углеводсвязывающих участков лектинового типа.

Если первоначально исследователи не называли углеводсвязывающие рецепторы пектинами, то теперь это отмечается повсеместно. То же самое наблюдается и в отношении углеводсвязывающих бактериальных токсинов и вирусных гемагглютининов, которые на равных правах с прочими белками стали называть пектинами. Имеется много публикаций по лектиноидным (лектинподобным) ферментам с литическим действием в отношении клеток.

Известен способ получения антиадгезивного компонента на основе лектинсвязывающих структур, заключающийся в культивировании колоний штамма L. fermentum 90 TS-4, отобранных по признаку агглютинации 0,1%-ным раствором конканавалина А в концентрации не ниже 1,75·10-3 мг/мл в жидкой среде МРС-1; отделении клеток центрифугированием и концентрировании полученного супернатанта культуральной жидкости над мембраной UM-20 «Диафло», удалении полученного осадка и очистке и выделении целевого продукта методом аффинной хроматографии на конканавалин-А-сефарозе, что обеспечивает получение субстанции с выраженной модулирующей активностью в отношении высокоадгезивных штаммов дрожжеподобных грибов вида Candida albicans и условно-патогенных штаммов микроорганизмов вида Escherichia coli (2).

Недостатком известного способа является то, что он позволяет выделять только антиадгезивный компонент на основе лектинсвязывающих структур, но никак не лектины, обладающие противокандидной активностью.

Известен способ получения бактериального лектина, специфичного к сиаловым кислотам, предполагающий использование в качестве сырья непатогенной культуры Bacillus mesentericus ВКПМ В-2466, способной синтезировать внеклеточные сиалоспецифичные лектины; выращивание продуцента в течение 14-16 ч глубинным способом на полусинтетической среде с биостимулятором-автолизатом из пивных дрожжей, получение целевого продукта с выходом 46,8-60% осаждением культуральной жидкости сульфатом аммония при насыщении 60-70% и диализом, хранение целевого продукта в замороженном состоянии при (-10°С) (3).

Недостатком известного способа является то, что выделяемые с его помощью белки не обладают противокандидной активностью.

Известно, что противокандидной активностью обладают метаболиты культур ацидофильных лактобацилл, однако такая активность менее выражена, чем антибактериальная (4).

В основу заявляемого изобретения положена задача выделения лектинов, обладающих противокандидной активностью, из культуральной жидкости смеси штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш24) после выращивания микроорганизмов.

Задача решена тем, что культуральную жидкость замораживают, удаляют слой жира, обезжиренную часть размораживают и отделяют клетки центрифугированием, супернатант стерилизуют мембранной вакуумной фильтрацией, концентрируют мембранной ультрафильтрацией в процессе центрифугирования, обрабатывают концентрат супернатанта с компонентами более 27 кDа пятикратным избытком ледяного ацетона, выделяют центрифугированием образовавшийся осадок, удаляют надосадок и проводят очистку и выделение целевого продукта методом горизонтального изоэлектрофореза. Отделение клеток микроорганизмов, мембранную ультрафильтрацию супернатанта, отделение осадка после инкубации отфильтрованного супернатанта с избытком ледяного ацетона осуществляют центрифугированием при скорости вращения ротора 5500 об/мин в течение 90 мин. Перед электрофорезом осадок разводят 20 мМ NaCl в соотношении 2:1 по объему и смешивают с 10% твин-80 до конечной концентрации твина 1%. Очистку и выделение целевого продукта проводят методом горизонтального изоэлектрофореза в пластине 5% полиакриламидного геля с 7-8 М мочевиной и 5% сахарозой в градиенте рН 4-8 при температуре (10±2)°С в течение 8 ч. При выделении целевого продукта после электрофореза гелевые ленты нарезают по изоточкам, замораживают при температуре (-20°С) в течение 2 ч, размораживают и диспергируют, отделяют центрифугированием твердые частицы, концентрируют центрифугированием при 5500 об/мин в течение 60 мин при комнатной температуре, удаляют низкомолекулярные примеси и смешивают концентрат с фосфатным буфером в 100-кратном объеме. Гелевые ленты нарезают по изоточкам pI (4.0-4.3) при выделении кислых лектинов и pI (7.6-8.0) при выделении щелочных лектинов.

В результате проведенных исследований нами показано, что стерилизация супернатанта мембранной вакуумной микрофильтрацией позволяет не только исключить контаминацию продукта посторонней микрофлорой, но и удалить примесные микрочастицы из супернатанта. Мембранная ультрафильтрация в центрифугах с качалочным ротором обеспечивает удаление из материалов низкомолекулярных компонентов с молекулярной массой менее 30 кDа, как на стадии переработки супернатанта, так и при выделении целевого продукта из полиакриламидного геля. Инкубация отфильтрованного супернатанта с пятикратным избытком ледяного ацетона в течение 8 ч гарантирует переход основной массы целевого продукта в осадок, что значительно повышает качество последующего выделения и очистки лектинов. Применение горизонтального изоэлектрофореза в 5% полиакриламидном геле с 7-8 М мочевиной и 5% сахарозой в градиенте рН 4-8 обеспечивает высокую степень очистки от примесных белков и выделения целевого продукта. Изофокусирование в процессе электрофореза в двух точках рI (4.0-4.3) и рI (7.5-8.0) позволяет выделять не только кислые, но и щелочные лектины. Вся же совокупность последовательных операций и процессов, предложенная в заявляемом изобретении, обеспечивает получение лектинов с противокандидной активностью.

Согласно изобретению, способ получения лектинов, обладающих противокандидной активностью, из культуральной жидкости смеси штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш24) после выращивания микроорганизмов обеспечивается тем, что культуральную жидкость замораживают, удаляют слой жира, обезжиренную часть размораживают и отделяют клетки центрифугированием, супернатант стерилизуют мембранной вакуумной фильтрацией, концентрируют мембранной ультрафильтрацией в процессе центрифугирования, обрабатывают концентрат супернатанта с компонентами более 30 кDа пятикратным избытком ледяного ацетона, выделяют центрифугированием образовавшийся осадок, удаляют надосадок и проводят очистку и выделение целевого продукта методом горизонтального изоэлектрофореза. Отделение клеток микроорганизмов, мембранную ультрафильтрацию супернатанта, отделение осадка после инкубации отфильтрованного супернатанта с избытком ледяного ацетона осуществляют центрифугированием при скорости вращения ротора 5500 об/мин в течение 90 мин. Перед электрофорезом осадок разводят 20 мМ NaCl в соотношении 2:1 по объему и смешивают с 10% твин-80 до конечной концентрации твина 1%. Очистку и выделение целевого продукта проводят методом горизонтального изоэлектрофореза в пластине 5% полиакриламидного геля с 7-8 М мочевиной и 5% сахарозой в градиенте рН 4-8 при температуре (10±2)°С в течение 8 ч. При выделении целевого продукта после электрофореза гелевые ленты нарезают по изоточкам, замораживают при температуре (-20°С) в течение 2 ч, размораживают и диспергируют в физрастворе, отделяют центрифугированием твердые частицы, концентрируют центрифугированием при 5500 об/мин в течение 60 мин при комнатной температуре, удаляют низкомолекулярные примеси и смешивают концентрат с фосфатным буфером в 100-кратном объеме. Гелевые ленты нарезают по изоточкам pI (4.0-4.3) при выделении кислых лектинов и pI (7.6-8.0) при выделении щелочных лектинов.

Заявляемый способ получения лектинов, обладающих противокандидной активностью, является новым и в литературе не описан.

Техническим результатом заявляемого изобретения является выделение лектинов, обладающих противокандидной активностью, из культуральной жидкости смеси штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш24) после выращивания микроорганизмов.

Сущность изобретения поясняется на следующем примере, показывающем выделение лектинов, обладающих противокандидной активностью, из культуральной жидкости смеси штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш24) после выращивания микроорганизмов.

Пример. Для выделения лектинов использовали культуральную жидкость (КЖ) смеси трех штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш24), применяемых в производстве пробиотика «Ацилакт», полученную в соответствии с патентом (5).

КЖ замораживали в течение 8 ч при температуре минус 20°С, удаляли механическим способом жировой слой и размораживали обезжиренную КЖ. Температура замораживания и размораживания КЖ, а также продолжительность этих процессов не оказывают влияния на технический результат.

Обезжиренную КЖ центрифугировали в течение 90 мин при 5500 об/мин в центрифуге Р-6 (Россия) по 60 мл КЖ в каждом стакане. Клетки микроорганизмов удаляли деконтацией. Далее осуществляли стерилизацию супернатанта мембранной вакуумной микрофильтрацией в патронах Steriflip (Millipore, США) по 40 мл супернатанта в патроне, создавая вакуум водоструйным насосом. Одновременно со стерилизацией происходит процесс удаления микрочастиц из супернатанта.

Затем, при той же температуре (10°С), проводили процесс мембранной ультрафильтрации в течение 90 мин при 5500 об/мин для удаления из супернатанта низкомолекулярных компонентов с молекулярной массой менее 30 кДа, используя центрифугу с качалочным ротором Rotina-45R (Германия) с вставкой в каждый стакан объемом 1 л по 4 патрона Centricon Plus-20 (Millipore, США), завинченных снизу на пластмассовые 50 мл сборники фильтрата, по 10 мл стерилизованного супернатанта в патроне. Выход отфильтрованного супернатанта составлял 100 мкл из каждого патрона.

Для образования осадка целевого продукта отфильтрованный супернатант обрабатывали 5-кратным избытком ледяного ацетона в течение 8 ч при температуре (5±2)°С. Образовавшийся осадок отделяли на центрифуге РС-6 при 5500 об/мин в течение 90 мин.

Далее осадок разбавляли 20 мМоль NaCl в соотношении 2:1 по объему и разливали по эппендорфам по 50 мкл, инкубировали в термостате при 80°С в течение 3 мин, охлаждали до комнатной температуры и добавляли по 5 мкл 10% твин-80 (Sigma). Перемешанную суспензию наносили на помещенную на пластину геля параллельно нитевому платиновому электроду ацетатцеллюлозную ленту шириной 0,5 см по 20 мкл на 1 см ленты и осуществляли изофокусирование (Multiphore II, Amersham, Швеция; 600-700 В; на аноде - 10 мМ H3PO4, на катоде - 0,1 М NaOH) в градиенте рН 4-8, обеспеченном Servalit (Serva, Германия) 4-6 (40% w/v) и Biolyte (Bio-Rad, США) 6-8 (40% w/v) из расчета по 1 мл каждого на 10 мл геля) в пластине (15×25×0,1 см) 5% полиакриламидного геля с 7-8 М мочевиной и 5% сахарозой при температуре (10±2)°С в течение 8 ч. Через 30 мин изофокусирования повторяли нанесение концентрата на ленту.

Гелевые ленты с продуктом нарезали из пластины геля параллельно электродам по изоточкам в интервале pI (4.0-4.3) при выделении кислых пектинов и pI (7.6-8.0) при выделении щелочных и помещали в термостойкие пробирки с 5 мл физраствора, замораживали при минус 20°С в течение 2 ч, размораживали, измельчали в объеме пробирки, центрифугировали при 5500 об/мин в течение 60 мин и декантировали надосадок.

Далее повторяли операции мембранной микрофильтрации и ультрафильтрации, как описано выше.

Полученные концентраты целевого продукта (лектинов) переносили в эппендорфы и замораживали.

Выход полученного препарата лектинов из супернатанта после концентрирования составляет 1-5 мг из 1 г белка концентрата.

В таблице приведены сравнительные данные по противокандидной активности (против клинических щтаммов Candida albicans, свежевыделенных и из музея ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского»), определеяемой методом диффузии в агар, лектинов в концентрации менее 1 мкг/мл, полученных согласно заявляемому способу, и различных субстанций «Ацилакта» (прототип), приготовленного согласно патента (5).

Как следует из представленных в таблице сравнительных данных, лектины, полученные заявляемым способом из культуральной жидкости смеси штаммов лактобактерий Lactobacillus acidophilus (NK1, 100аш, К3Ш34) после выращивания микроорганизмов, обладают явным противокандидным действием, значительно превышающим таковую способность прототипа.

Противокандидная активность препаратов культуральных жидкостей смеси пробиотических штаммов лактобацилл
Испытуемый препарат Противокандидная активность
Зона лизиса гриба вокруг диска, мм Пролонгированность действия, мес Ингибирование роста (уменьшение числа колоний, образование колоний меньшего размера)
Лектины, полученные заявленным способом 10-16 5 (для кислых пектинов при 0-15°С) да
«Ацилакт» нативный (1000-2000 мкг/мл) 2-4 (отсутствие в разведениях 1:2, 1:5 и более) нет нет
Супернатант «Ацилакта»(1000-2000 мкг/мл) 2-4 (отсутствие в разведениях 1:2, 1:5 и более) нет нет
Ультрафильтрат «Ацилакта» 3-4 (отсутствие в разведениях 1:2, 1:5 и более) нет нет

ЛИТЕРАТУРА

1. Лахтин В.М. Лектины и аспекты их изучения. / Микробиологический журнал. - Киев, 1989. - т.51, №3. - с.69-74.

2. RU, патент 2367686 C1, C12N 1/20, A61K 31/715, 20.09.2009.

3. SU, авторское свидетельство 1622397 A1, C12P 19/04, 22.09.1990.

4. Пробиотики, пребиотики, синбиотики и их роль в поддержании иммуномикроэкологического статуса человека. / Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Поспелова В.В., Николаева Т.Н., Бляхер М.С., Черепанова Ю.В., Агапова Ю.В. // MATERIA MEDICA. Тематический сборник для практикующих врачей. - М: «Фармарус Принт», 2006. - с.43-57.

5. RU, патент 2053781 C1, A61K 35/74, 10.02.1996.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 43 items.
20.02.2013
№216.012.27fc

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности с1 ингибитора по способности связываться с igal-протеазой

Группа изобретений относится к медицинской иммунологии, а именно к способу определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах и набору для его осуществления. Способ определения предусматривает:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002475756
Дата охранного документа: 20.02.2013
10.06.2013
№216.012.49a9

Способ контроля воздухопроницаемости ограждающих строительных конструкций полости замкнутого герметизированного контура

Изобретение относится к области контрольно-испытательной техники и может быть использовано в фармацевтической, медицинской, микробиологической промышленности, в частности при испытаниях асептических объектов с повышенными требованиями к воздухопроницанию их ограждающих строительных конструкций...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002484437
Дата охранного документа: 10.06.2013
27.08.2013
№216.012.6470

Способ экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды

Определяют количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц. Рассчитывают прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле: Y=0,0003(n+n)-1,2, по меньшей мере, при одном из условий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491349
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.09.2013
№216.012.6e1c

Способ лечения синдрома хронической усталости

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для лечения синдрома хронической усталости. Для этого проводят комплексную терапию, предусматривающую одновременное воздействие на три звена патологической цепи: избыточное накопление регуляторных Т-клеток,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493839
Дата охранного документа: 27.09.2013
10.10.2013
№216.012.7323

Способ молекулярно-генетического типирования штаммов bordetella pertussis

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к способу молекулярно-генетического типирования штаммов Bordetella pertussis. Способ включает выделение ДНК из штаммов B.pertussis, проведение полимеразной цепной реакции с одновременным введением специфических праймеров PF-PR...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002495132
Дата охранного документа: 10.10.2013
27.11.2013
№216.012.8487

Способ получения поликлональной моноспецифической сыворотки против секреторного иммуноглобулина а человека - siga

Изобретение относится к медицинской иммунологии, иммунохимии, а именно к способу получения поликлональной моноспецифической сыворотки против секреторного иммуноглобулина A (SIgA) человека, не содержащей в исходном состоянии примесных антител к лактоферрину. Поликлональная моноспецифическая...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002499605
Дата охранного документа: 27.11.2013
27.12.2013
№216.012.8fd0

Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций

Изобретение относится к антибактериальному средству для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии. Заявляемый препарат представляет собой смесь антибиотика и биологического компонента, где в качестве антибиотика...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002502509
Дата охранного документа: 27.12.2013
10.01.2014
№216.012.937d

Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций

Изобретение относится к антибактериальному средству для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии. Заявляемый препарат представляет собой смесь антибиотика и биологического компонента, где в качестве антибиотика...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002503451
Дата охранного документа: 10.01.2014
10.02.2014
№216.012.9fb6

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности компонента с3 комплемента человека

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения функциональной активности компонента C3 комплемента человека. В лунках микропанели сорбируют тромбин, вносят анализируемую пробу, содержащую компонент C3 комплемента человека с неизвестной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002506594
Дата охранного документа: 10.02.2014
10.06.2014
№216.012.cd34

Композиция антибактериальная, штамм бактериофага escherichia coli, используемый для получения такой композиции.

Изобретение относится к области пищевой промышленности, биотехнологии и касается композиции антибактериальной и штамма бактериофага Escherichia coli, используемого для получения такой композиции. Охарактеризованная композиция антибактериальная включает фильтрат фаголизата Escherichia coli,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518303
Дата охранного документа: 10.06.2014
Showing 1-10 of 66 items.
20.02.2013
№216.012.27fc

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности с1 ингибитора по способности связываться с igal-протеазой

Группа изобретений относится к медицинской иммунологии, а именно к способу определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах и набору для его осуществления. Способ определения предусматривает:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002475756
Дата охранного документа: 20.02.2013
10.06.2013
№216.012.49a9

Способ контроля воздухопроницаемости ограждающих строительных конструкций полости замкнутого герметизированного контура

Изобретение относится к области контрольно-испытательной техники и может быть использовано в фармацевтической, медицинской, микробиологической промышленности, в частности при испытаниях асептических объектов с повышенными требованиями к воздухопроницанию их ограждающих строительных конструкций...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002484437
Дата охранного документа: 10.06.2013
27.08.2013
№216.012.6470

Способ экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды

Определяют количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц. Рассчитывают прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле: Y=0,0003(n+n)-1,2, по меньшей мере, при одном из условий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491349
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.09.2013
№216.012.6e1c

Способ лечения синдрома хронической усталости

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для лечения синдрома хронической усталости. Для этого проводят комплексную терапию, предусматривающую одновременное воздействие на три звена патологической цепи: избыточное накопление регуляторных Т-клеток,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493839
Дата охранного документа: 27.09.2013
10.10.2013
№216.012.7323

Способ молекулярно-генетического типирования штаммов bordetella pertussis

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к способу молекулярно-генетического типирования штаммов Bordetella pertussis. Способ включает выделение ДНК из штаммов B.pertussis, проведение полимеразной цепной реакции с одновременным введением специфических праймеров PF-PR...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002495132
Дата охранного документа: 10.10.2013
27.11.2013
№216.012.8487

Способ получения поликлональной моноспецифической сыворотки против секреторного иммуноглобулина а человека - siga

Изобретение относится к медицинской иммунологии, иммунохимии, а именно к способу получения поликлональной моноспецифической сыворотки против секреторного иммуноглобулина A (SIgA) человека, не содержащей в исходном состоянии примесных антител к лактоферрину. Поликлональная моноспецифическая...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002499605
Дата охранного документа: 27.11.2013
27.12.2013
№216.012.8fd0

Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций

Изобретение относится к антибактериальному средству для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии. Заявляемый препарат представляет собой смесь антибиотика и биологического компонента, где в качестве антибиотика...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002502509
Дата охранного документа: 27.12.2013
10.01.2014
№216.012.937d

Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций

Изобретение относится к антибактериальному средству для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии. Заявляемый препарат представляет собой смесь антибиотика и биологического компонента, где в качестве антибиотика...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002503451
Дата охранного документа: 10.01.2014
10.02.2014
№216.012.9fb6

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности компонента с3 комплемента человека

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения функциональной активности компонента C3 комплемента человека. В лунках микропанели сорбируют тромбин, вносят анализируемую пробу, содержащую компонент C3 комплемента человека с неизвестной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002506594
Дата охранного документа: 10.02.2014
10.06.2014
№216.012.cd34

Композиция антибактериальная, штамм бактериофага escherichia coli, используемый для получения такой композиции.

Изобретение относится к области пищевой промышленности, биотехнологии и касается композиции антибактериальной и штамма бактериофага Escherichia coli, используемого для получения такой композиции. Охарактеризованная композиция антибактериальная включает фильтрат фаголизата Escherichia coli,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518303
Дата охранного документа: 10.06.2014
+ добавить свой РИД