×
27.02.2013
216.012.2c59

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для диагностики гестоза тяжелой степени на поздних сроках беременности. Для этого проводят биохимическое исследование крови беременной в третьем триместре для определения концентрации гормонов лептина и грелина в венозной крови методом иммуноферментного анализа. При увеличении концентрации гормона лептина в сыворотке крови более 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации гормона грелина в плазме крови ниже 0,26 нг/мл диагностируют гестоз тяжелой степени. Способ позволяет повысить достоверность диагностики гестоза тяжелой степени для определения тактики ведения беременности. 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл., 2 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицины, в частности к исследованию биологических материалов путем физико-химического анализа крови, основанного на иммунологических испытаниях и может быть использовано для диагностики гестоза в акушерской практике.

Гестоз - одно из наиболее распространенных осложнений беременности и наблюдается у 5-10% беременных женщин. Известно, что развитие гестоза протекает в два этапа:

- первый этап характеризуется нарушением инвазии трофобласта и гестационной трансформации спиральных артерий матки. Неравномерная перфузия плаценты приводит к местной ишемии и окислительному стрессу с образованием активных форм кислорода.

- второй этап связан с материнским ответом на пока неизвестный плацентарный фактор и последующее повреждение функции эндотелия сосудов, в итоге затрагивающее все материнские органы и приводящее к появлению симптомов заболевания (Olsson, M.G. Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha(l)-microglobulin in preeclampsia / M.G.Olsson, M.Centlow, S.Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol.48, №2. - P.284-291 [1]. Borekc, B. Placental tissue cyclo-oxygenase 1 and 2 in pre-eclamptic and normal pregnancy / B.Borekc, H.Aksoy, A.Toker, A.Ozkan // International Journal of Gynecology and Obstetrics. - 2006. - №95. - P.127-131 [2]. Hung, Т.Н. Hypoxia and reoxygenation: a possible mechanism for placental oxidative stress in preeclampsia / Т.Н.Hung, G.J.Burton // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2006. - Vol.45, №3. - P.189-200) [3]. Развитие морфологических нарушений плаценты ассоциировано с развитием биохимических и физиологических патологических явлений.

В настоящее время известны следующие лабораторные способы диагностики гестоза:

- способ, основанный на определении антифосфолипидных антител в сыворотке крови (RU 2135999, МПК 6 G01N 33/53, опубликовано: 27.08.1999) [4].

Для ранней доклинической диагностики гестоза (в сроки 13-14 недель беременности) определяют уровни антифосфолипидных антител (аФЛ) к кардиолипиду (CL), фосфатидилсерину (PS) и фосфатидилхолину (PC) классов IgM и IgG в сыворотке периферийной крови, и повышение хотя бы одного из которых в 1,5 и более раза по отношению к нормативным показателям указывает на развитие гестоза. Это обусловлено тем, что аФЛ способны оказывать влияние на функциональное состояние эндотелиальных клеток и приводить к спазму сосудов, в результате чего возникают нарушения трофической функции плаценты, что влечет за собой развитие гестоза.

В стерильных условиях производят забор периферической венозной крови, затем в сыворотке крови определяют антифосфолипидные антитела IgM и IgG классов к: кардиолипину, фосфатидилсерину и фосфатидилхолину.

Указанные аФЛ могут быть определены иммуноферментным анализом и другими способами. Повышение уровней аФЛ классов IgM и IgG в 1,5 и более раз в I триместре по сравнению с показателями при физиологически протекающей беременности свидетельствуют о развитии гестоза.

Однако в известном способе недостаточно высокая достоверность диагностики гестоза. Это обусловлено тем, что антифосфолипидные антитела не являются специфическими маркерами диагностики при данной патологии, а также используются при диагностике сердечно-сосудистых (Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y.Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, №1. - P.13-16 [5]. Urbanus, R.T. Antiphospholipid antibodies-we are not quite there yet / R.T.Urbanus, P.G. de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, №2. P.97-106 [6]), аутоиммунных (Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, S.R.Kahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006. - Vol.33. - P.2214-2221 [7]), гинекологических (Кулаков В.И. Основные направления научных исследований по гинекологии в 90-е г. / В.И.Кулаков, В.А.Голубев // Акуш. и гинекол. - 1995. - №3. - С.3-5 [8]) и других заболеваний.

Другой известный способ диагностики гестоза состоит в периодическом определении концентрации порфириновых фракций (копропорфиринов и протопорфиринов) эритроцитов венозной крови спектрально-флуоресцентным методом (RU 2190848, МПК 7 G01N 33/52, G01N 33/48, опубликовано: 10.10.2002) [9].

Начиная с 12 недель беременности с интервалом четыре недели в динамике, осуществляют забор венозной крови и измеряют концентрацию порфириновых фракций - протопорфиринов (ПП) и копропорфиринов (КП) в эритроцитах крови беременных женщин методом спектрально-флуоресцентного анализа (Гуринович Г.П., Грубина Л.А., Гуринович И.Ф., Некрашевич С.Ф. // Вопр. онкол., 1991, т.37, 2, с.158-161.1) [10]. Затем определяли отношение концентрации протопорфиринов к концентрации копропорфиринов.

При этом концентрации указанных фракций эритроцитов определяются с относительной погрешностью не более 10% и высокой чувствительностью (1 мкг/л).

Однако необходимость динамического наблюдения беременных приводит к увеличению частоты забора крови. Отсутствует доказательство специфичности использования фракций эритроцитов для диагностики гестоза.

Известен способ прогнозирования гестоза, основанный на определении уровня карбонильных производных белков в ранние сроки (с 5 недель) в плазме крови беременной (RU 2249212, МПК 7 G01N33/48, опубликовано: 27.03.2005) [11], согласно которому в ранние сроки (с 5 недель) в плазме крови беременной определяют уровень карбонильных производных белков и при величине, равной 51,7 ед/г и выше прогнозируют развитие гестоза.

Однако в известном способе нельзя прогнозировать развитие гестоза при концентрациях карбонильных производных белков, находящихся в пограничных значениях нормы и патологии. Так, в примере 2 указано, что у пациентки Я-ко, 24 лет, уровень окислительной модификации белков находился в пределах нормы и соответствовал 51,6 ед оптической плотности/г белка, а в формуле изобретения при уровене карбонильных производных белков равном 51,7 ед оптической плотности/г белка и выше прогнозируют развитие гестоза.

Известен способ прогнозирования гестоза, основанный на определении активности катепсина D в сроке 6-13 недель гестации в периферической венозной крови (RU 2263913, МПК G01N 33/49, опубликовано: 10.11.2005) [12].

В 6-13 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют активность катепсина D и при значениях этого показателя, равных или более 0,021 Ед. акт. ф./ч (единиц активности фермента в час), прогнозируют развитие гестоза в третьем триместре беременности с точностью 80,64%, чувствительностью 84,44% и специфичностью 70,58%. Катепсин D является лизосомальным ферментом класса эндопептидаз. Активность катепсина D, как и других лизосомальных ферментов, является отражением процессов свободнорадикального окисления в организме, патологическая активация которого является одним из пусковых механизмов развития гестоза. Также доказано участие катепсина D в процессах апоптоза и плацентации. Предполагается, что изменение активности катепсина D в ранние сроки беременности отражает развитие патологических процессов, которые в дальнейшем способствуют развитию гестоза.

Однако определение изменения активности катепсина D проводится только в ранние сроки беременности, что не позволяет использовать известный способ после 13-й недели беременности.

Для раннего прогнозирования развития гестоза используют два способа, основанных на определении в периферической венозной крови относительного содержания CD3+CD16+ лимфоцитов и содержания CD5+CD20+ лимфоцитов в популяции CD20+ клеток на сроке с 6 до 12 недель гестации (RU 2265221, МПК 7 G01N 33/577, опубликовано: 27.11.2005) [13], (RU №2271541 МПК G01N 33/577 (2006.01), опубликовано: 10.03.2006) [14].

В одном способе в 6-12 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют относительное содержание CD3+CD16+ лимфоцитов и при значениях этого показателя, равных или более 5,4%, прогнозируют развитие гестоза легкой степени тяжести в третьем триместре беременности с точностью 78,12%, чувствительностью 75% и специфичностью 87,5%. При этом повышение уровня CD3+CD16+ клеток в ранние сроки гестации отражает развитие патологических процессов при беременности с усилением цитотоксических реакций как на системном, так и на локальном уровне, что в дальнейшем приводит к развитию гестоза.

В другом способе в 6-12 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют содержание CD20+ и CD5+CD20+ клеток и математически вычисляют процентное содержание CD5+CD20+ лимфоцитов в общей популяции CD20+ лимфоцитов по формуле и при значениях этого показателя более 30% прогнозируют развитие гестоза с точностью. 86,67%.

Однако определение в периферической венозной крови относительного содержания CD3+CD16+ лимфоцитов и CD20+ и CD5+CD20+ клеток проводится только на сроке с 6 до 12 недель гестации, что ограничивает диагностику в более поздние сроки гестации. Кроме того, для осуществления данных способов необходимо дорогостоящее оборудование, что также ограничивает его широкое практическое использование.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому изобретению является способ диагностики тяжелых форм гестоза на поздних сроках (в третьем триместре) беременности (RU 2259568, МПК 7 G01N 33/68, опубликовано 27.08.2005) [15], принимаемый за прототип, заключающийся в определении уровня гомоцистеина в плазме венозной крови методом иммуноферментного анализа, и при увеличении его более чем в 2,2 раза от нормы диагностируют гестоз тяжелой степени.

Отмечается выраженное увеличение концентрации гомоцистеина в плазме по мере утяжеления течения гестоза: при легкой степени гестоза - 4,7±0,3 мкМ/л (от 2,82 мкМ/л до 6,9 мкМ/л), при средней - 5,0±0,4 мкМ/л (от 3,3 мкМ/л до 7,6 мкМ/л) и тяжелой - 7,7±0,7 мкМ/л (от 4,8 мкМ/л до 11,8 мкМ/л). У беременных с тяжелым гестозом уровень гомоцистеина был достоверно выше (р<0,01), чем у женщин с легкой и средней степенью гестоза.

Однако гомоцистеин не является специфическим метаболитом беременности. Его уровень может увеличиваться и при различных патологических состояниях (Кашежева А.З., Ефимов B.C. Гипергомоцистеинемия в патогенезе заболеваний коронарных сосудов // Кардиология. Хирургия. - 2007. - №11. [16]. Сидоренко Г.И., Мойсинок А.Г. Роль гомоцистеина в тромбогенезе и атерогенезе // Кардиология. Тез.: докл. - М., 2002 - С 56-61. [17]. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J. Frank, S.C. Beck, A. Flaccus, H.K. Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol.46, №5. - P.286-292. [18]. Bao, X.M. Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38MAPK / X.M.Bao, C.F.Wu, G.P.Lu // Atherosclerosis. - 2010. - Vol.210, №1. - P.114-121. [19]).

Следовательно, способ-прототип не позволяет достоверно диагностировать гестоз, так как содержание гомоцистеина может меняться в зависимости от наличия соматической патологии и употребляемой пищи.

Техническим результатом настоящего изобретения является повышение достоверности диагностики гестоза тяжелой степени для определения тактики ведения беременности и своевременного проведения необходимого комплекса лечебно-профилактических мероприятий.

Сущность изобретения заключается в том, что в известном способе диагностики гестоза тяжелой степени на поздних сроках (в третьем триместре) беременности, заключающемся в заборе в венозной крови с последующим ее исследованием на содержание специфических биохимических маркеров обмена веществ, согласно изобретению, в качестве биохимических маркеров обмена веществ используют гормоны лептин и грелин, при этом при увеличении концентрации лептина в сыворотке крови более 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации грелина в плазме крови менее 0,26 нг/мл диагностируют гестоз тяжелой степени.

Другие отличия состоят в том, что концентрацию лептина определяют в сыворотке венозной крови, а концентрацию грелина в плазме венозной крови.

Использование гормонов лептина и грелина в качестве биохимических маркеров энергетического обмена для диагностики гестоза тяжелой степени не известно из уровня техники.

В таблице 1 приведена динамика гормонов энергетического обмена в крови у женщин с физиологическим течением беременности и с гестозом тяжелой степени.

В таблице 2 приведены пороговые значения гормонов энергетического обмена в крови у женщин с гестозом тяжелой степени, полученные в результате анализа ROC-кривых (Receiver Operating Characteristics - кривая операционных характеристик приемника).

На фиг.1 приведен калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации в калибровочных образцах грелина, в нг/мл.

На фиг.2 приведен калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации в калибровочных образцах лептина в нг/мл.

На фиг.3 приведены результаты описательного статистического анализа концентраций гормонов энергетического обмена у женщин с гестозом тяжелой степени.

На фиг.4 приведены результаты описательного статистического анализа концентраций гормонов энергетического обмена у женщин с физиологическим течением беременности.

На фиг.5 приведена ROC-кривая лептина как биохимического маркера энергетического обмена.

На фиг.6 приведены координаты и результаты статистического анализа ROC-кривой лептина.

На фиг.7 приведена ROC-кривая грелина как биохимического маркера энергетического обмена.

На фиг.8 приведены координаты и результаты статистического анализа ROC-кривой грелина.

Определение концентрации лептина основано на иммуноферментном анализе с использованием двухшагового сэндвич-анализа. Использовались высокоспецифичные моноклональные антитела: моноклональные антитела специфичные к лептину иммобилизованы в лунках микропланшета и другие моноклональные антитела специфичные к другому эпитопу лептина конъюгированы с биотином. Во время первого этапа лептин, присутствующий в образцах и стандартах, связывается с иммобилизованными антителами и с биотинилированными антителами, образуя сэндвич-комплекс. Избыток и несвязавшиеся биотинилированные антитела удаляют на этапе промывки. На втором этапе вносят конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена, который специфически связывается с биотинилированными антителами. Затем несвязавшийся конъюгат удаляют при промывке. После этого вносят субстрат тетраметилбензидина, который в результате ферментативной реакции образует продукт голубого цвета, при этом окраска прямо пропорциональна количеству присутствующего лептина. Ферментативную реакцию останавливают добавлением стоп-реагента, в результате голубая окраска превращается в желтую. Абсорбция при 450 нм измеряется с помощью микропланшетного спектрофотометра. Для построения калибровочной кривой используется набор стандартов. Концентрацию лептина в исследуемых образцах рассчитывают непосредственно из калибровочной кривой.

При определении содержания грелина использован иммунопланшет, предварительно сорбированный вторыми антителами и обработанный реагентом, блокирующим неспецифические сайты связывания. Вторые антитела могут связываться с Fc-фрагментом первичных антител, чей Fab-фрагмент конкурирует за связывание как биотинилированного грелина, так и грелина образцов и стандартов. Биотинилированный грелин связывается с пероксидазой хрена, конъюгированной со стрептавидином, которая катализирует реакцию раствора, содержащего тетраметилбензидин и перекись водорода, с развитием голубой окраски. Фермент-субстратная реакция останавливается добавлением соляной кислоты в качестве стоп-раствора. Раствор меняет цвет на желтый. Интенсивность развивающейся окраски пропорциональна количеству биотинилированного грелина, связавшегося с иммобилизованными в планшете антителами и обратно пропорциональна концентрации грелина в образце. Концентрацию грелина в неизвестном образце определяют по стандартной кривой.

Способ осуществляли следующим образом.

I. Производили забор крови из локтевой вены утром натощак у беременной в третьем триместре. В сыворотке крови определяли содержание лептина и в плазме содержание грелина методом иммуноферментного анализа.

II. Определение лептина проводили с помощью тест-систем производства Diagnostics Biochem Canada Inc (Canada):

1. Приготовили рабочие растворы стрептавидин/HRP и промывочного буфера.

2. Внесли по 20 мкл каждого стандарта (0, 1, 5, 10, 20, 50, 100 нг/мл) контроля и образца в дублях в соответствующим образом помеченные ячейки.

3. Внесли по 80 мкл раствора моноклональных антител к лептину, конъюгированных с биотином, во все ячейки.

4. Инкубировали 1 час при комнатной температуре на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 при 200 об/мин.

5. Промыли ячейки 3 раза, используя по 300 мкл разведенного буфера для промывок на ячейку, а затем постучали микропланшетом по фильтровальной бумаге, убедились, что ячейки сухие.

6. Внесли по 100 мкл раствора стрептавидин/HRP в каждую ячейку.

7. Инкубировали на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 в течение 30 минут при комнатной температуре при 200 об/мин.

8. Промыли ячейки, как указано в п.5.

9. Внесли по 100 мкл субстрата ТМБ в каждую ячейку.

10. Инкубировали на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 в течение 10-15 минут при комнатной температуре.

11. Внесли по 50 мкл стоп-раствора во все ячейки.

12. Определили оптическую плотность ячеек при длине волны 450 нм на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Alisei».

Определение грелина проводили с помощью тест-систем производства Peninsula Laboratories (USA):

1. Приготовили рабочий буфер: развели концентрат рабочего буфера до 1000 мл деионизированной водой и тщательно перемешали. Полученный раствор использовали для растворения всех других компонентов набора и разведения образцов.

2. Разведение лиофилизированного стандарта: добавили 1 мл Рабочего буфера во флакон с лиофилизированным стандартом и тщательно перемешали, избегая вспенивания.

3. Разведение исходного стандарта: приготовили 6 пробирок 12×75 мм. В каждую пробирку добавили Рабочий буфер. В пробирку #1 внесли исходный раствор стандарта (1000 нг/мл). Перенесли 100 мкл полученного раствора из пробирки #1 в пробирку #2, тщательно перемешали на вортексе BioSan microspin FV-2400. Выполнили разведения в 4 раза до концентрации 0,02 нг/мл.

4. Разведение лиофилизированных первичных кроличьих антител к грелину IgG: добавили 5 мл Рабочего буфера и тщательно перемешали.

5. Разведение биотинилированного аналита: добавили 5 мл рабочего буфера и тщательно перемешали.

6. Внесли в каждую ячейку, исключая ячейку «бланк», по 25 мкл раствора первичных антител.

7. Внесли в ячейку «бланк» 25 мкл Рабочего буфера.

8. Закрыли планшет пленкой.

9. Инкубировали планшет 1 час при комнатной температуре.

10. Внесли по 50 мкл каждого приготовленного стандарта в соответствующие ячейки.

11. Внесли по 50 мкл исследуемых образцов в соответствующие ячейки.

12. Внесли 50 мкл разбавителя в ячейку «бланк».

13. Закрыли планшет пленкой.

14. Инкубировали планшет 2 часа при комнатной температуре.

15. Внесли в каждую ячейку по 25 мкл раствора биотинилированного аналита.

16. Инкубировали планшет в течение ночи при температуре 4°С.

17. Удалили содержимое ячеек перед первой промывкой, резко стряхнув планшет.

18. Промыли планшет 5 раз 300 мкл рабочего буфера, каждый раз промокая планшет фильтровальной бумагой.

19. Процентрифугировали флакон с конъюгатом стрептавидина и пероксидазы хрена на центрифуге Eppendorf Centrifuge 5702R в течение 15 секунд при 4°С и режиме центрифугирования 500-1000 об/мин. Внесли 12 мл рабочего буфера в пробирку. Добавили 60 мкл конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена в 12 мл Рабочего буфера и тщательно перемешали на вортексе BioSan microspin FV-2400.

20. Внесли в каждую ячейку по 100 мкл рабочего раствора конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена.

21. Инкубировали планшет 1 час при комнатной температуре.

22. Удалили содержимое ячеек перед первой промывкой, резко стряхнув планшет.

23. Промыли планшет 5 раз 300 мкл рабочего буфера, каждый раз промокая планшет фильтровальной бумагой.

24. Внесли по 100 мкл раствора хромогенного субстрата ТМБ в каждую ячейку, включая «бланк».

25. Накрыли планшет пленкой.

26. Инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре.

27. Внесли по 100 мкл 2 н НСl в каждую ячейку, включая «бланк».

28. Удалили пленку, закрывающую планшет, и поместили планшет в микропланшетный ридер.

29. Считали оптическую плотность при длине волны 450 нм на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Alisei».

Результаты исследования содержания лептина и грелина в крови у женщин с физиологическим течением беременности и с гестозом тяжелой степени представлены в таблицах 1, 2.

Полученные результаты исследования свидетельствуют о том, что в сыворотке и плазме беременных женщин с гестозом тяжелой степени достоверно увеличено содержание лептина и снижено содержание грелина. Среднее значение концентрации лептина у женщин с физиологическим течением беременности составило 26,6±2,32 нг/мл, у женщин с гестозом тяжелой степени 42,4±2,93 нг/мл. Среднее значение уровня грелина у женщин с физиологическим течением беременности составило 0,3±0,02 нг/мл, у женщин с гестозом тяжелой степени - 0,2±0,02 нг/мл.

Были рассчитаны пороговые значения гормонов как биохимических маркеров энергетического обмена в крови у женщин с гестозом тяжелой степени при анализе ROC-кривых. Так, при увеличении концентрации гормона лептина в сыворотке крови более значения 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации гормона грелина в плазме крови ниже значения 0,26 нг/мл диагностировали гестоз тяжелой степени.

Пример 1.

Пациентка П., 22 лет, диагноз при поступлении: беременность 39-40 недель, отягощенный акушерский анамнез. Тазовое предлежание плода. Гестоз легкой степени второй половины беременности. Наследственность не отягощена. Из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции. Менструации без особенностей. Гинекологические заболевания - эрозия шейки матки (пролеченная). Данная беременность I, протекала в I триместре без особенностей. В III триместре с 38 недель беременности появилась пастозность нижних конечностей, АД в пределах нормы. Прибавка в весе за беременность 8 кг. В общем анализе мочи белка нет. По данным допплерометрии нарушений фето-плацентарного кровотока не выявлено, нарушения маточно-плацентарного кровотока нет. В биохимическом анализе крови белок - 69 г/л, Билирубин общий - 8 мкмоль/л, прямой - 0, непрямой - 8, глюкоза 5,0 ммоль/л, мочевина 3,8 ммоль/л. Тромботест V ст., время рекальцификации 110'', гепариновое время 40'', толерантность плазмы к гепарину 10', количество фибриногена 3,5 г/л. В клиническом анализе крови - тромбоциты 286×109, гематокрит - 0,35, эритроциты - 3,7×1012 /л, гемоглобин - 135 г/л, лейкоциты -7,9×109 /л, сегментоядерные 67%, палочкоядерные - 1%, лимфоциты - 21%, моноциты - 10%, СОЭ - 27 мм/ч.

В 40 недель гестации, учитывая тазовое предлежание плода, в плановом порядке произведено поперечное надлобковое чревосечение, кесарево сечение в нижнем маточном сегменте поперечным разрезом. Извлечен живой доношенный мальчик, масса - 3800,0, длина - 55 см. Оценка по шкале Апгар 7/8 баллов. Кровопотеря во время операции составила 600,0. Послеоперационный период протекал без осложнений. Ребенок здоров. Выписана в удовлетворительном состоянии на 6 сутки. Уровень лептина в сыворотке крови составил 28,35нг/мл, уровень грелина в плазме - 0,27 нг/мл.

Пример 2.

Пациентка А., 38 лет, диагноз при поступлении: беременность 37-38 недель, отягощенный акушерско-гинекологический анамнез. Рубец на матке. Сочетанный гестоз II п/б. Нейроциркуляторная дистония по гипертоническому типу. Наследственность не отягощена. Из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции, НЦД по гипертоническому типу. Менструальная функция без особенностей. Гинекологические заболевания - эрозия шейки матки (пролеченная). Данная беременность IV. В анамнезе: 2001 м/аб; 2004 роды 3500 (тазовое предлежание) кесарево сечение; 2007 с/аб; 2010 - настоящая беременность. Данная беременность протекала в I триместре без особенностей. В III триместре с 34 недель беременности появилась пастозность нижних конечностей, повышение АД до 130/90 мм рт.ст. Угроза по невынашиванию. Находилась на стационарном лечении в ОПБ роддома №5 с 17.11.10 по 24.11.10. В сроке 37-38 недель беременности пастозность нижних конечностей, повышение АД до 160/100. Прибавка в весе за беременность 14 кг. В общем анализе мочи белок 0, 033 г/л. По данным допплерометрии нарушений фето-плацентарного кровотока не выявлено, нарушения маточно-плацентарного кровотока IA степени. В биохимическом анализе крови белок - 54 г/л, билирубин общий - 8 мкмоль/л, прямой - 0, непрямой - 8, глюкоза 6,0 ммоль/л, мочевина 4,0 ммоль/л. Тромботест V ст., время рекальцификации 110'', гепариновое время 40'', толерантность плазмы к гепарину 10', количество фибриногена 3,5 г/л. В клиническом анализе крови - тромбоциты 222×109, гематокрит - 0,35, эритроциты - 3,7×1012/ л, гемоглобин - 123 г/л, лейкоциты -11,9×109 л, сегментоядерные 67%, палочкоядерные - 1%, лимфоциты - 21%, моноциты - 10%, СОЭ - 27 мм/ч.

Развился гестоз тяжелой степени тяжести. Проводилась антигипертензивная терапия (клофелин 0,01% - 1,0 в\м, сульфат магния в/в капельно), метаболическая седативная терапия. Уровень лептина в сыворотке крови составил 45,55 нг/мл, уровень грелина в плазме - 0,19 нг/мл.

В 37 недель гестации, учитывая рубец на матке после операции кесарево сечение, осложненное течение данной беременности (гестоз тяжелой степени), тазовое предлежание плода в плановом порядке произведено поперечное надлобковое чревосечение, кесарево сечение в нижнем маточном сегменте поперечным разрезом. Извлечен живой доношенный мальчик, масса - 3100,0, длина - 50 см. Оценка по шкале Апгар 7/8 баллов. Кровопотеря во время операции составила 800,0. Послеоперационный период протекал без осложнений. Ребенок здоров. Выписана в удовлетворительном состоянии на 6 сутки.

Источники информации

1. Olsson, M.G. Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha(1)-microglobulin in preeclampsia / M.G.Olsson, M.Centlow, S.Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol.48, №2. - P.284-291.

2. Borekc, B. Placental tissue cyclo-oxygenase 1 and 2 in pre-eclamptic and normal pregnancy / B.Borekc, H.Aksoy, A.Toker, A.Ozkan // International Journal of Gynecology and Obstetrics. - 2006. - №95. - P.127-131.

3. Hung, Т.Н. Hypoxia and reoxygenation: a possible mechanism for placental oxidative stress in preeclampsia / Т.Н.Hung, G.J.Burton // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2006. - Vol.45, №3. - P.189-200.

4. Способ доклинической диагностики гестоза RU 2135999, МПК 6 G01N 33/53, опубликовано: 27.08.1999

5. Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y.Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, №1. - P.13-16.

6. Urbanus, R.T. Antiphospholipid antibodies~we are not quite there yet / R.T.Urbanus, P.G. de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, №2. P.97-106.

7. Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, S.R.Kahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006. - Vol.33. - P.2214-2221.

8. Кулаков В.И. Основные направления научных исследований по гинекологии в 90-е г. / В.И.Кулаков, В.А.Голубев // Акуш. и гинекол. - 1995. - №3. - С.3-5.

9. Способ ранней диагностики гестоза беременных RU 2190848, МПК 7 G01N 33/52, G01N 33/48, опубликовано: 10.10.2002.

10. Гуринович Г.П., Грубина Л.А., Гуринович И.Ф., Некрашевич С.Ф. // Вопр. онкол., 1991, т.37, 2, с.158-161.1.

11. Способ прогнозирования гестоза RU 2249212, МПК 7 G01N 33/48, опубликовано: 27.03.2005.

12. Способ прогнозирования гестоза RU 2263913, МПК G01N 33/49, опубликовано: 10.11.2005.

13. Способ прогнозирования гестоза легкой степени тяжести с ранних сроков беременности RU 2265221, МПК 7 G01N 33/577, опубликовано: 27.11.2005).

14. Способ раннего прогнозирования гестоза RU №2271541 МПК G01N 33/577 (2006.01), опубликовано: 10.03.2006.

15. Способ диагностики тяжелых форм гестоза RU 2259568, МПК 7 G01N 33/68, опубликовано 27.08.2005.

16. Кашежева А.З., Ефимов B.C. Гипергомоцистеинемия в патогенезе заболеваний коронарных сосудов // Кардиология. Хирургия. - 2007. - №11.

17. Сидоренко Г.И., Мойсинок А.Г. Роль гомоцистеина в тромбогенезе и атерогенезе // Кардиология. Тез.: докл. - М., 2002 - С 56-61.

18. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J.Frank, S.C.Beck, A.Flaccus, H.K.Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol.46, №5. - P.286-292.

19. Bao, X.M. Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38MAPK / X.M.Bao, C.F.Wu, G.P.Lu // Atherosclerosis. - 2010. - Vol.210, №1. - P.114-121.

Таблица 1
Динамика гормонов энергетического обмена в крови у женщин с физиологическим течением беременности и с гестозом тяжелой степени
Исследуемый показатель Концентрация гормонов Степень значимости отличий, Р
физиологическое течение беременности (n=45) тяжелый гестоз (n=22)
Лептин, нг/мл (М±m)±95% доверительный интервал среднего 26,6±2,32 42,4±2,93 0,0002
21,9-31,3 36,3-48,6
Грелин, нг/мл (М±m)±95% доверительный интервал среднего 0,3±0,02 0,2±0,02 0,007
0,27-0,34 0,19-0,26
Соотношение лептин/грелин (М±m)±95% ДИ 107,3±11,7 236,3±39,2 0,0006
83,4-131,2 154,2-318,3

Таблица 2
Пороговые значения гормонов энергетического обмена в крови у женщин с гестозом тяжелой степени, полученные в результате анализа ROC-кривых (Receiver Operating Characteristics - кривая операционных характеристик приемника)
Исследуемый показатель Пороговое значение Направленность изменения показателя Площадь под ROC кривой Степень значимости отличий, р*
Лептин, нг/мл >37,9 0,777 <0,0001
Грелин, нг/мл ≤0,26 0,727 0,0008
Соотношение лептин/грелин >145,7 0,783 <0,0001
* р - к площади под ROC кривой, равной 0,5


СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕСТОЗА ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 51-60 of 107 items.
20.08.2015
№216.013.701c

Применение фрагмента днк транскрибируемой области рибосомного повтора для повышения устойчивости мезенхимных стволовых клеток к действию агрессивных факторов окружающей среды

Изобретение относится к области молекулярной биологии, молекулярной генетики и клеточной биологии, в частности к применению ДНК-конструкции для индуцирования в мезенхимных стволовых клетках выраженного адаптивного ответа. Указанная генетическая конструкция включает CpG- и GC-богатую вставку...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560270
Дата охранного документа: 20.08.2015
20.08.2015
№216.013.7164

Питательная среда для выращивания микроорганизмов deinococcus radiodurans

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению питательных сред для выращивания Deinococcus radiodurans. Питательная среда содержит соевое молоко, глюкозу, MgSO×7HO, MnCl, FeSO×7HO и дистиллированную воду в заданном соотношении компонентов. Изобретение позволяет упростить способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560598
Дата охранного документа: 20.08.2015
10.10.2015
№216.013.829f

Способ анализа генетического полиморфизма для определения предрасположенности к шизофрении и алкоголизму

Изобретение относится к области генетики и молекулярной биологии и касается способа анализа генетического полиморфизма в полиморфных точках генов. Охарактеризованное изобретение включает генотипирование локусов, ответственных за предрасположенность к шизофрении и алкоголизму, с помощью...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002565036
Дата охранного документа: 10.10.2015
20.11.2015
№216.013.922f

Способ неразрушающего контроля дефектов с помощью поверхностных акустических волн

Использование: для неразрушающего контроля дефектов. Сущность изобретения заключается в том, что посылают зондирующий электромагнитный сигнал на преобразователь, возбуждающий в контролируемом образце поверхностные акустические волны, при этом на преобразователь периодически подается зондирующий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002569039
Дата охранного документа: 20.11.2015
20.12.2015
№216.013.9971

1-[ω-арилоксиалкил(бензил)]замещенные 2-аминобензимидазолы, обладающие активностью в отношении вируса гриппа

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым производным бензимидазола формулы 1а-з, где а, б X=N, R=4-ClCHOCHCH, Hal отсутствует, a) R = 2-фуроил, б) R = 2-теноил; в-з Х=NCHR, R=Н, в) R=3,4-ClCHCH, R=CONH; Hal=Cl; г) R=4-FCHOCHCH, R=CONH; Hal=Cl; д) R=3,4-ClCHCH,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002570906
Дата охранного документа: 20.12.2015
27.02.2016
№216.014.c166

Способ улучшения каталитических свойств пенициллинацилазы из escherichia coli и применение мутантной пенициллинацилазы

Изобретение относится к биотехнологии, в частности, к способу улучшения каталитических свойств пенициллинацилазы. Заявленный способ включает изменение структуры пенициллинацилазы из Escherichia coli путем замены аминокислотного остатка 145 альфа-цепи на лейцин или аминокислотного остатка 71...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002576002
Дата охранного документа: 27.02.2016
27.08.2016
№216.015.4f8a

Способ автоматизированного выделения с одновременной очисткой нуклеиновых кислот из нескольких биологических образцов

Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложен способ автоматизированного выделения с одновременной очисткой нуклеиновых кислот из двух и более биологических образцов. Способ выделения с одновременной очисткой нуклеиновых кислот осуществляют в отдельном для каждого образца...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002595374
Дата охранного документа: 27.08.2016
12.01.2017
№217.015.5ee5

Способ идентификации регуляторных короткоживущих белков в протеоме человека, участвующих в специфической модуляции цитотоксического эффекта

Изобретение относится к биохимии. Получают химерные белки слияния: GST УСД HDAC6 и GST-PSMA3, путем их экспрессии в клетки E. coli за счет введения в них соответствующих векторов и последующей очистки с помощью аффинной хроматографии на глутатион-сефарозе. Проводят реакции связывания белков из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002590700
Дата охранного документа: 10.07.2016
13.01.2017
№217.015.7cf9

Противоизносная присадка к углеводородному топливу

Изобретение описывает противоизносную присадку к углеводородному топливу на основе сложных эфиров органических кислот, которая представляет собой продукт, полученный в результате смешения щавелевой кислоты с кубовым остатком производства бутиловых спиртов (КОБС) при следующем соотношении...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002600329
Дата охранного документа: 20.10.2016
13.01.2017
№217.015.7da3

Набор олигонуклеотидных праймеров и зондов для генотипирования полиморфных локусов днк, ассоциированных с риском развития спорадической формы болезни альцгеймера в российских популяциях

Изобретения относятся к области генетики, молекулярной биологии и медицины и касаются способа для анализа генетического полиморфизма в локусах ДНК ApoE, ApoJ и GAB2 и набора олигонуклеотидных праймеров и зондов. Охарактеризованный способ включает стадии: (а) амплификация полиморфных фрагментов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002600874
Дата охранного документа: 27.10.2016
Showing 51-60 of 78 items.
20.11.2014
№216.013.0758

Мини-гэс

Изобретение относится к преобразователям энергии потока, расположенным вдоль него и отбирающим гидравлическую энергию на расстоянии, определенном длиной преобразователя. Мини-ГЭС содержит шнек, состоящий из цилиндра с лопастями на его поверхности. Цилиндр соединен с генератором и расположен...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002533281
Дата охранного документа: 20.11.2014
20.11.2014
№216.013.075f

Ингибиторы калиевых каналов как лекарственные средства при лимфомах и лейкозах

Изобретение относится к области молекулярной биологии, молекулярной генетики и биотехнологии и может быть использовано в медицине, а также в сельском хозяйстве и в промышленной биотехнологии для разработки принципиально нового подхода в противолейкозной терапии с помощью низкомолекулярных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002533288
Дата охранного документа: 20.11.2014
10.12.2014
№216.013.0d30

Термо-, топливостойкая силоксановая герметизирующая композиция холодного отверждения

Изобретение может быть использовано для герметизации агрегатов самолетных конструкций, эксплуатирующихся в широком интервале температур. Термо-, топливостойкая герметизирующая композиция на основе полидиметилметил(гексафторалкил)силоксанового полимера формулы где Rf n=99-50, m=1-50, l=3-15,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002534793
Дата охранного документа: 10.12.2014
10.12.2014
№216.013.0d4a

Штамм vibrio aquamarinus, способ определения токсичности проб с его помощью и тест-культура для определения токсичности проб

Группа изобретений относится к биотехнологии и может быть использована для биотестирования токсичности объектов окружающей среды. Заявлены штамм бактерий Vibrio aquamarinus, способ определения токсичности проб с его помощью и применение штамма в качестве тест- культуры для определения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002534819
Дата охранного документа: 10.12.2014
10.12.2014
№216.013.0d4c

Способ диагностики окислительного стресса измерением экспрессии кислородчувствительных генов (варианты)

Группа изобретений относится к области медицины и молекулярной биологии. Способ предусматривает измерение экспрессии следующих кислородчувствительных генов: Pdk4, Nid2, Golph2, Actr1a, Api5, Mrp13, Scn7a, Асох3, Lamr1, Sv2b, Stmn2, Тrрс3, Crebzf, Herс1, Ssc1, Snrpb, Zfhx1b, sc125b, Rn. 48050,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002534821
Дата охранного документа: 10.12.2014
27.12.2014
№216.013.1677

Способ получения радиоиммунного препарата для диагностики и терапии онкологических заболеваний

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ получения терапевтического радиоконъюгата специфически связывающегося вещества с короткоживущим радиоизотопом для доставки в патологические области. При осуществлении способа проводят мечение рекомбинантных гуманизированных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002537175
Дата охранного документа: 27.12.2014
20.02.2015
№216.013.29f9

Способ извлечения элементов-примесей из минерального сырья

Изобретение относится к извлечению цветных, редких и благородных металлов из минерального сырья, например, из углей, отходов их обогащения и сжигания. Исходное минеральное сырье измельчают до фракции 0,25-0,5 мм, смешивают с водой в равном соотношении, загружают в рабочий объем автоклавной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542202
Дата охранного документа: 20.02.2015
10.04.2015
№216.013.3ecc

Способ определения жизнеспособности некультивируемых форм vibrio cholerae о1/о139 по экспрессии рибулозодифосфаткарбоксилазы

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для определения жизнеспособности некультивируемых форм (НФ) Vibrio cholerae O1/O139 в водных объектах при мониторинговых исследованиях, в научно-исследовательской работе с НФ в экспериментах по индукции НС, при изучении...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002547564
Дата охранного документа: 10.04.2015
20.04.2015
№216.013.418c

Пьезоэлектрический керамический материал

Изобретение относится к пьезоэлектрическим керамическим материалам и может быть использовано при создании высокочастотных акустоэлектрических преобразователей. Пьезоэлектрический керамический материал содержит оксиды натрия, ниобия, стронция, лития, алюминия, висмута и железа при следующем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002548278
Дата охранного документа: 20.04.2015
27.04.2015
№216.013.46f4

Способ лечения преэклампсии средней степени тяжести у женщин с алиментарным ожирением

Группа изобретений относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использована при лечении преэклампсии средней степени тяжести у женщин с алиментарным ожирением и без ожирения. Для этого пациентке с алиментарным ожирением предварительно определяют клиренс осмотически...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549668
Дата охранного документа: 27.04.2015
+ добавить свой РИД