КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ СМЕСЬ

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложена композиция, содержащая смесь противовоспалительных препаратов. Композиция может применяться, например, для местного нанесения на кожу.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Противовоспалительные препараты хорошо известны. Авторы настоящего изобретения считают, что есть потребность в выявлении новых комбинаций противовоспалительных препаратов, обладающих улучшенными характеристиками.

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что противовоспалительные препараты, известные как ингибиторы ядерного фактора NF-kB (ингибиторы NF-kB), обладая способностью к снижению иммунного ответа посредством сигнального пути NF-kB, иногда способствуют секреции воспалительного цитокина IL-1. Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что противовоспалительные препараты, которые имеют высокую способность к подавлению выработки цитокинов лимфоцитами человека, стимулированными активирующим рецепторы Т-клеток (TCR) агентом фитогемагглютинином, в особенности те из них, которые имеют IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее, способны снижать иммунный ответ, но иногда имеют тенденцию к активации секреции воспалительного цитокина IL-8.

Таким образом, было обнаружено, что комбинации ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата с низкой концентрацией IC50, в особенности со значением IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее, позволяют получить композиции с неожиданным снижением секреции обоих воспалительных цитокинов IL-1 и IL-8 в коже и других тканях, а также в целом обеспечивают желаемое ингибирование NF-kB в коже и других тканях.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном аспекте настоящего изобретения предлагается композиция, в состав которой входят ингибитор NF-kB и противовоспалительный препарат. Указанный противовоспалительный препарат не является ингибитором NF-kB и имеет концентрацию IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее при испытании согласно описанному в настоящей заявке ТЕСТУ НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ.

Согласно другому аспекту, в настоящем изобретении предлагается способ лечения признаков старения кожи, включающий местное нанесение на кожу, для которой требуется такое лечение, композиции, содержащей ингибитор NF-kB и противовоспалительный препарат. Указанный противовоспалительный препарат не является ингибитором NF-kB и имеет концентрацию IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее при испытании согласно описанному в настоящей заявке ТЕСТУ НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ.

Прочие отличительные особенности и преимущества настоящего изобретения будут понятны из текста подробного описания изобретения и его формулы.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Предполагается, что специалист в данной области сможет, основываясь на данном описании, использовать настоящее изобретение в максимальном объеме. Приведенные ниже характерные варианты осуществления изобретения следует рассматривать лишь в качестве примеров, которые ни в коей мере не ограничивают раскрываемую сущность настоящей заявки на изобретение.

Если не определено иное, все используемые в настоящем документе технические и научные термины имеют общепринятое значение, понятное любому специалисту в области, к которой имеет отношение настоящее изобретение. Кроме того, все публикации, заявки на получение патента, патенты и другие указанные в настоящем документе источники включены в документ путем ссылки. Если не указано иное, все процентные содержания даны в весовых процентах (то есть % вес.). Если не указано иное, все диапазоны включают конечные точки - например, диапазон «от 4 до 9» включает точки 4 и 9.

Описанные в настоящем документе продукты могут необязательно быть в готовой упакованной форме. В одном варианте осуществления упаковка представляет собой контейнер, например, пластиковую, металлическую или стеклянную тубу или банку, содержащую композицию. Также продукт может иметь дополнительную упаковку (например, пластиковую или картонную) для размещения такого контейнера. В одном варианте осуществления продукт содержит композицию, составляющую предмет настоящего изобретения, и инструкцию для пользователя по нанесению композиции на кожу или волосы для лечения признаков старения кожи. Такие инструкции могут быть напечатаны на контейнере, на вложенной аннотации или на любой дополнительной упаковке.

В настоящем документе термин «местное применение» означает непосредственное нанесение или распределение по поверхности кожи, кожи волосистой части головы или по волосам, в частности, руками или с помощью специальных средств - салфеток, валика или аэрозоля.

В настоящем документе термин «косметически приемлемый» означает, что ингредиенты, к которым относится термин, допустимы для применения в контакте с тканями (например, кожей или волосами), не оказывая при этом токсического воздействия, не проявляя несовместимости, нестабильности, не вызывая раздражения, аллергических реакций и т.п.

В ряде вариантов настоящего изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, могут применяться для лечения признаков старения кожи. В настоящем документе термин «признаки старения кожи» относится к наличию борозд, морщин, пятен, неровностей кожи и потере эластичности. В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения признаком старения является наличие борозд, морщин и (или) потеря эластичности.

В настоящем документе термин «лечение признаков старения кожи» относится к снижению, ослаблению, предотвращению, исправлению или устранению описанных выше признаков старения кожи.

В настоящем документе термин «морщина» означает тонкие борозды, тонкие морщины или глубокие морщины. К примерам морщин относятся, помимо прочего, тонкие линии вокруг глаз (например, «гусиные лапки»), морщины на лбу и щеках, межбровные морщины и мимические морщины вокруг рта.

В настоящем документе термин «потеря эластичности» относится к утрате эластичности или структурной целостности кожи или ткани, включая, помимо прочего, обвисание, вялость и дряблость ткани. Потеря эластичности или целостности структуры ткани может являться следствием многих факторов, включая, помимо прочего, заболевания, старение, гормональные изменения, механическую травму, отрицательное воздействие окружающей среды, либо результатом нанесения на ткань таких продуктов, как косметические средства и фармацевтические препараты.

В настоящем документе термин «неровная кожа» означает состояние кожи, связанное с диффузной или пятнистой пигментацией, которую можно классифицировать как гиперпигментацию, например, поствоспалительную гиперпигментацию.

В настоящем документе термин «пятнистость» означает состояние кожи, связанное с ее покраснением или эритемой.

В настоящем документе термин «косметический» относится к композиции или веществу, улучшающему внешний вид, которое сохраняет, восстанавливает, придает, имитирует или повышает физическую привлекательность или создает эффект повышения привлекательности или молодости, особенно в отношении внешнего вида ткани или кожи.

В настоящем документе термин «косметически эффективное количество» означает количество физиологически активного соединения или композиции, достаточное для лечения одного или нескольких признаков старения кожи, но достаточно низкое, чтобы не вызывать серьезных побочных эффектов. Косметически эффективное количество соединения или композиции изменяется в зависимости от конкретного состояния, лечение которого осуществляется, возраста и физического состояния конечного потребителя, степени тяжести состояния, лечение/предотвращение которого осуществляется, продолжительности лечения, характера других способов лечения, конкретного применяемого соединения или продукта/композиции, конкретного используемого косметически приемлемого носителя и других подобных факторов.

В состав композиции входит ингибитор NF-kB и противовоспалительный препарат, которое не является ингибитором NF-kB, но имеет низкое значение IC50. Оба компонента обладают противовоспалительным эффектом по отношению к коже и другим тканям, при этом такие противовоспалительные эффекты взаимно дополняют друг друга. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что противовоспалительный препарат с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее в сочетании с ингибитором NF-kB подавляет увеличение секреции цитокинов IL-1 и IL-8, которое в противном случае могло бы быть вызвано использованием конкретных препаратов.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная комбинация ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее обеспечивает снижение секреции цитокина IL-1α по меньшей мере на приблизительно 35 процентов при измерении согласно описанному в примере V ТЕСТУ на IL-1α.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения указанная комбинация ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее обеспечивает снижение секреции цитокина IL-8 по меньшей мере на приблизительно 80 процентов при измерении согласно описанному в примере VIII ТЕСТУ на IL-8.

Соответственно, в настоящем изобретении также предложены способы снижения секреции цитокина IL-1α в коже или других тканях по меньшей мере на приблизительно 35 процентов при измерении согласно ТЕСТУ на IL-1α путем местного нанесения на такую кожу или другие ткани комбинации ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата, который не является ингибитором NF-kB и имеет IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее. Указанную комбинацию ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата могут использовать в виде композиции для местного применения, как более подробно описано ниже.

Также предложены способы снижения секреции цитокина IL-8 в коже или других тканях по меньшей мере на приблизительно 80 процентов при измерении согласно ТЕСТУ на IL-8 путем местного нанесения на такую кожу или другие ткани комбинации ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата, который не является ингибитором NF-kB и имеет IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее. Указанную комбинацию ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата могут использовать в виде композиции для местного применения, как более подробно описано ниже.

Ингибитор NF-kB

В настоящем документе термин «ингибитор NF-kB» означает соединение, которое ингибирует клеточный ядерный транскрипционный фактор каппа B (NF-kB). В одном варианте осуществления ингибитор NF-kB, тестируемый в соответствии с ТЕСТОМ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB, описанным ниже, обеспечивает процентную долю ингибирования NF-kB по меньшей мере приблизительно 30%, предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 50%, предпочтительнее - по меньшей мере приблизительно 70%, наиболее предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 90%, при этом концентрация в процессе тестирования предпочтительно составляет от 1 микрограмма на миллилитр до приблизительно 100 микрограмм на миллилитр. Это означает, что соединение демонстрирует указанную процентную долю ингибирования NF-kB по меньшей мере в одной концентрации в диапазоне от 1 микрограмма на миллилитр до 100 микрограмм на миллилитр. Соединение не обязательно должно обеспечивать указанную процентную долю ингибирования NF-kB во всех концентрациях от 1 микрограмма на миллилитр до 100 микрограмм на миллилитр, но должно обеспечивать указанную процентную долю ингибирования NF-kB по меньшей мере в одной концентрации из этого диапазона.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения процентная доля ингибирования NF-kB ингибитором NF-kB составляет по меньшей мере приблизительно 35%, предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 55%, более предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 70%, наиболее предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 90% при тестировании в концентрации 10 микрограмм на миллилитр.

ТЕСТ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB проводится следующим образом. Используют клетки FB293, представляющие собой стабильную линию трансфицированных человеческих эпителиальных клеток, содержащую репортерный ген для определения экспрессии NF-kB. Их можно приобрести, например, в компании Panomics (г. Фримонт, штат Калифорния). Клетки FB293 наносят на планшет в концентрации 5×10⁴ клеток/мл в соответствующей среде, например, в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM), с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Invitrogen, г. Сан-Диего, штат Калифорния). Клетки FB293 стимулируют раствором 100 нг/мл фактора некроза опухолей α (TNF-α, поставляется компанией Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури) в присутствии тестируемого образца. Отдельно тестируют контрольный образец, в который не вносится тестируемый образец. После инкубации в течение 24 часов при температуре 37°C в атмосфере 5% CO₂ клетки лизируют 40 мкл буфера для лизиса репортера (компания Promega, г. Мэдисон, штат Висконсин). Аликвоту лизата объемом 20 мкл анализируют с помощью комплекта для люциферазного анализа (Promega) и выполняют подсчет в течение 10 с в люминометре Lmax (Molecular Devices, г. Саннивейл, штат Калифорния). Полученные данные выражают в относительных световых единицах в секунду. Процентную долю ингибирования NF-kB для тестового образца вычисляют следующим образом:

Ингибирование NF-kB=[1-(L_{образца}/L_{контроля})]*100

где L_{образца} - люминесценция образца, а L_{контроля} - люминесценция контроля.

Один или более ингибиторов NF-kB могут присутствовать в композиции, составляющей предмет настоящего изобретения, в любом допустимом количестве, например, от приблизительно 0,01% вес. до приблизительно 10% вес., предпочтительно - от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, более предпочтительно - от приблизительно 0,1% до приблизительно 5%, еще более предпочтительно - от приблизительно 0,2% до приблизительно 2%.

В одном варианте осуществления ингибитор NF-kB выбирают из группы, состоящей из следующих соединений: замещенные резорцинолы, (E)-3-(4-метилфенилсульфонил)-2-пропеннитрил (такой как Bay 11-7082, который поставляется компанией Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури), тетрагидрокуркуминоиды (такие как тетрагидрокуркуминоид CG, который поставляется компанией Sabinsa Corporation, г. Пискатавэй, штат Нью-Джерси), экстракты древесины павловнии войлочной, а также их комбинаций.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения ингибитором NF-kB является замещенный резорцинол. Резорцинол представляет собой соединение на основе дигидроксифенола (например, 1,3-дигидроксибензол), имеющее следующую структуру:

В настоящем документе термин «замещенный резорцинол» означает резорцинол, содержащий по меньшей мере один заместитель в положении 2, 4, 5 или 6. Таким образом, замещенный резорцинол может содержать от одного до четырех заместителей. В положениях 1 и 3 замещенного резорцинола находятся группы -OH, как показано выше.

Весьма предпочтительно, чтобы ни одна из замещающих групп замещенного резорцинола не содержала фенильных (-C₆H₅ ароматических) остатков. В некоторых вариантах осуществления изобретения ни один из заместителей не содержит ароматических остатков (с гетероатомами или без них).

В других вариантах осуществления изобретения предпочтительно, чтобы ни один из заместителей в замещенном резорциноле не содержал кетоновых функциональных групп (карбонильных групп, связанных с двумя другими атомами углерода).

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения ни один из заместителей в замещенном резорциноле не содержит ни фенильных, ни кетоновых функциональных групп.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения замещенный резорцинол содержит по меньшей мере один заместитель, содержащий от 5 до 11 атомов углерода, предпочтительно - от 5 до 10 атомов углерода, более предпочтительно - от 5 до 9 атомов углерода, наиболее предпочтительно - от 5 до 8 атомов углерода. В некоторых других вариантах осуществления изобретения по меньшей мере один заместитель содержит алкильную группу, содержащую указанное выше количество атомов углерода. Предпочтительно, чтобы алкильная группа была ненасыщенной.

В некоторых вариантах осуществления изобретения заместитель находится в положении 4 резорцинола, а в некоторых вариантах осуществления изобретения заместитель находится только в положении 4 резорцинола. В другом варианте осуществления изобретения заместитель в положении 4 является алкильной группой. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения замещенный резорцинол имеет единственный заместитель в положении 4, содержащий алкильную группу. В некоторых других вариантах осуществления изобретения замещенный резорцинол включает единственный заместитель в положении 4, представляющий собой алкильную группу, непосредственно связанную с бензольным кольцом.

К особенно подходящим замещенным резорцинолам относятся 4-гексилрезорцинол и 4-октилрезорцинол, в особенности 4-гексилрезорцинол. Структуры 4-гексилрезорцинола и 4-октилрезорцинола показаны ниже:

4-гексилрезорцинол

4-октилрезорцинол

4-гексилрезорцинол поставляется под названием SYNOVEA HR компанией Sytheon, г. Линкольн-Парк, штат Нью-Джерси. 4-Октилрезорцинол поставляется компанией City Chemical LLC, г. Уэст-Хейвен, штат Коннектикут.

В некоторых вариантах осуществления изобретения замещенный резорцинол содержит по меньшей мере два заместителя в положениях 2, 4, 5 или 6. Такие заместители иногда могут соединяться в кольцо, как, например, циклический алифатический углеводород, который иногда может содержать гетероатомы, например, серы или кислорода. Такой соединенный заместитель может содержать от 5 до 10 атомов углерода, например, от 8 до 10 атомов углерода, и может необязательно содержать от 1 до 3 гетероатомов. Примерами соответствующих замещенных резорцинолов, содержащих циклические алифатические замещающие группы, которые соединяют положения 2 и 3, являются зеараланон и β-зеараланол:

Зеараланон

β-Зеараланол

Зеараланон и β-зеараланол поставляются компанией Sigma Chemicals, г. Сент-Луис, штат Миссури.

В некоторых других вариантах осуществления изобретения замещенный резорцинол включает галогенсодержащие и (или) нитрозосодержащие заместители. Соответствующие примеры содержат группы -Cl или -N=O, непосредственно связанные с бензольным кольцом. Такие заместители могут находиться, например, в положениях 2 и 4, 2 и 6 или 4 и 6. Примером дигалогензамещенного резорцинола является 2,6-дихлоррезорцинол. Примером динитрозозамещенного резорцинола является 2,4-динитрозорезорцинол:

2,4-динитрозорезорцинол

2,6-дихлоррезорцинол и 2,4-динитрозорезорцинол поставляются компанией City Chemical LLC, г. Уэст-Хейвен, штат Коннектикут.

Замещенные резорцинолы получают известными в данной области способами, например, с помощью технологий, описанных в патенте США № 4337370, содержание которого включено в настоящий документ путем ссылки.

Замещенные резорцинолы могут иметь любую допустимую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления изобретения молекулярная масса замещенного резорцинола находится в диапазоне от приблизительно 175 до приблизительно 300.

Павловния - род растений, происходящий из Азии и постепенно распространившийся в Европе и США. В Японии павловнию называют кири, и это название относится к одному конкретному виду, павловнии войлочной (Paulownia tomentosa), также называемой «деревом принцессы». Среди других распространенных названий следует отметить «дерево императрицы», «наперстяночное дерево», «королевская павловния», «Пао Тонг» (в Китае) и «Одонг-Наму» (в Корее). Научное названия данного растения - Paulownia tomentosa (павловния войлочная), в литературе также используются ряд его синонимов, таких как Paulownia imperialis, Paulownia recurva и Bignonia tomentosa. Павловния войлочная относится к семейству павловниевых, иногда также называемых норичниковыми. В базе данных Министерства сельского хозяйства США (plants.USDA.gov) павловнии присвоен уникальный код PATO2 с синонимами Paulownia tomentosa и Paulownia imperialis.

В целях настоящего изобретения могут использоваться любые подходящие экстракты древесины павловнии войлочной. В целом древесина павловнии войлочной включает древесину из ствола, ветвей или их комбинации. Допустимые экстракты древесины павловнии войлочной могут быть получены из древесной стружки, древесной пыли и (или) мелких фрагментов древесины и т.п.

Замещенный резорцинол присутствует в композиции в безопасном и эффективном количестве, например, от приблизительно 0,01% до приблизительно 10%, предпочтительно - от приблизительно 0,1% до приблизительно 5%, более предпочтительно - от приблизительно 0,2% до приблизительно 2%, еще более предпочтительно - от приблизительно 0,5% до приблизительно 1,5% вес. композиции.

Противовоспалительный препарат

В состав композиций, составляющих предмет настоящего изобретения, также входит противовоспалительный препарат, не являющийся ингибитором NF-kB. Более конкретно указанный противовоспалительный препарат обеспечивает процентную долю ингибирования NF-kB, измеряемую в соответствии с ТЕСТОМ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB, менее чем приблизительно 30%, предпочтительно - менее чем приблизительно 20%, более предпочтительно - менее чем приблизительно 10% при тестировании в концентрации вплоть до приблизительно 100 микрограмм на миллилитр. Иными словами, указанный препарат демонстрирует процентную долю ингибирования NF-kB менее чем приблизительно 30%, предпочтительно - менее чем приблизительно 20%, более предпочтительно - менее чем приблизительно 10% при любых концентрациях вплоть до 100 микрограмм на миллилитр.

В предпочтительном варианте осуществления указанный противовоспалительный препарат обеспечивает процентную долю ингибирования NF-kB менее чем приблизительно 30%, предпочтительно - менее чем приблизительно 20%, более предпочтительно - менее чем приблизительно 10% при тестировании в концентрации вплоть до приблизительно 10 микрограмм на миллилитр.

Указанный противовоспалительный препарат имеет IC50 (концентрация, при которой степень ингибирования воспаления препаратом достигает 50%) приблизительно 70 мкг/мл или менее для интерлейкина-2 в ТЕСТЕ НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ, описанном в настоящей заявке. В предпочтительном варианте осуществления IC50 для указанного противовоспалительного препарата составляет приблизительно 50 мкг/мл или менее, предпочтительно - приблизительно 40 мкг/мл или менее, более предпочтительно - приблизительно 30 мкг/мл или менее.

В ТЕСТЕ НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ оценивается способность соединения снижать секрецию цитокинов лимфоцитами человека, стимулированных активирующим рецепторы Т-клеток (TCR) агентом фитогемагглютинином (PHA). Тест проводится следующим образом. Используя лейкоцитоферез, у здорового взрослого мужчины забирают лейкоциты человека и доводят их плотность до 1×10⁶ клеток/мл в бессывороточной среде для выращивания лимфоцитов (ExVivo-15, компания Biowhittaker, г. Уолкерсвилль, штат Мэриленд). ЛПК стимулируют 10 мкг/мл PHA в присутствии или в отсутствии тестируемых образцов, следуя опубликованным способам (Hamamoto Y., et al. Exp Dermatol 2:231-235, 1993). После инкубации в течение 48 часов выдержки при температуре 37°C в атмосфере 5% CO₂ отбирают супернатант и исследуют его на содержание цитокина с помощью доступного в продаже набора для мультиплексного определения цитокинов.

Соответствующие целям настоящего изобретения противовоспалительные препараты с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее включают:

экстракт луба амурского бархата (Phellodendron amurense);

пиретрум девичий (Tanacetum parthenium);

имбирь (Zingiber officinale);

гинкго (Ginkgo Biloba);

скумпия (Cotinus coggygria);

дереза обыкновенная (Lycium barbarum);

экстракт чертополоха морского (Silybum marianum);

жимолость (Lonicera japonica);

перуанский бальзам (Myroxylon pereirae);

шалфей (Salvia officinalis);

экстракт клюквы (Vaccinium oxycoccos);

масло амаранта (Amaranthus cruentus);

гранатовое дерево (Punica granatum);

трава мате (экстракт листьев Ilex paraguariensis);

экстракт цветов лилии белой (Lilium Candidum);

экстракт листьев оливы (Olea europaea);

флоретин (экстракт яблока);

лифенол (экстракт хмеля обыкновенного, Humulus lupulus);

Licochalcone (лакричный корень: компонент экстракта солодки, Glycyrrhiza inflata);

симрелиф (бисаболол и экстракт имбиря).

В ряде предпочтительных вариантов осуществления указанный противовоспалительный препарат выбирается из следующих препаратов: экстракт луба амурского бархата (Phellodendron amurense), пиретрум девичий (Tanacetum parthenium), гинкго (Ginkgo Biloba), скумпия (Cotinus coggygria), дереза обыкновенная (Lycium barbarum), экстракт чертополоха морского (Silybum marianum), масло амаранта (Amaranthus cruentus), гранатовое дерево (Punica granatum), трава мате (экстракт листьев Ilex paraguariensis), экстракт цветов лилии белой (Lilium Candidum), экстракт листьев оливы (Olea europaea) и флоретин (экстракт яблока).

В ряде дополнительных предпочтительных вариантов осуществления указанный противовоспалительный препарат выбирается из следующих препаратов: пиретрум девичий (Tanacetum parthenium), дереза обыкновенная (Lycium barbarum), экстракт чертополоха морского (Silybum marianum), масло амаранта (Amaranthus cruentus), гранатовое дерево (Punica granatum), трава мате (экстракт листьев Ilex paraguariensis), экстракт цветов лилии белой (Lilium Candidum), экстракт листьев оливы (Olea europaea) и флоретин (экстракт яблока).

Под экстрактами пиретрума подразумеваются экстракты растения Tanacetum parthenium, которые могут быть получены, например, в соответствии со сведениями, приведенными в опубликованной заявке на патент США № 2007/0196523 «БИОАКТИВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ, НЕ СОДЕРЖАЩИЕ ПАРТЕНОЛИДА, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ ПИРЕТРУМА (TANACETUM PARTHENIUM), И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ». Один в особенности подходящий экстракт пиретрума в форме, содержащей приблизительно 20% активного пиретрума, поставляет компания Integrated Botanical Technologies, г. Оссининг, штат Нью-Йорк.

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, могут включать косметически эффективное количество одного или нескольких противовоспалительных препаратов. В состав указанных композиций в качестве активного препарата предпочтительно входит от приблизительно 0,1% до приблизительно 10%, более предпочтительно - от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% второго противовоспалительного препарата.

В композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, весовые соотношения ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата могут варьироваться. Например, ингибитор NF-kB и противовоспалительный препарат могут присутствовать в соотношении весовых концентраций (которое определяется путем деления массовой концентрации ингибитора NF-kB на массовую концентрацию противовоспалительного препарата) от приблизительно 0,001 до приблизительно 100, предпочтительно - от приблизительно 0,01 до приблизительно 10, более предпочтительно - от приблизительно 0,1 до приблизительно 10.

Композиции для местного применения

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, используются для местного нанесения на кожу или волосы человека. Наряду с первым и вторым противовоспалительными препаратами композиция может дополнительно включать косметически приемлемый носитель для местного применения, который может составлять от приблизительно 50% до приблизительно 99,99% веса композиции (например, от приблизительно 80% до приблизительно 99% веса композиции). В предпочтительном варианте осуществления изобретения косметически приемлемый носитель для местного применения содержит воду.

Композиции могут быть приготовлены в форме широкого ассортимента продуктов, к которым относятся, помимо прочего, лосьоны, крема, гели, карандаши, спреи, мази, очищающие жидкости и твердые бруски для умывания, шампуни и кондиционеры для волос, средства фиксации волос, пасты, пенки, порошки, муссы, крема для бритья, салфетки, пластыри, гидрогели, пленкообразующие продукты, маски для лица и кожи, пленки и средства декоративной косметики, такие как тональные крема-основы и туши. Данные типы продуктов могут содержать несколько типов косметически приемлемых носителей для местного применения, включая, помимо прочего, растворы, суспензии, эмульсии, например, микроэмульсии и наноэмульсии, гели, твердые вещества и липосомы. Ниже приведены неограничивающие примеры таких носителей. Специалист в данной сфере может приготовить и другие носители.

Композиции, используемые в рамках настоящего изобретения, могут быть изготовлены в форме растворов. Растворы, как правило, содержат водный или органический растворитель (например, от приблизительно 50% до приблизительно 99,99% или от приблизительно 90% до приблизительно 99% косметически приемлемого водного или органического растворителя). К примерам соответствующих органических растворителей относятся пропиленгликоль, полиэтиленгликоль (200-600), полипропиленгликоль (425-2025), глицерин, 1,2,4-бутантриол, сложные эфиры сорбитола, 1,2,6-гексантриол, этанол и их смеси.

Композиции, используемые в рамках настоящего изобретения, могут быть приготовлены в форме раствора, содержащего умягчитель. Такие композиции предпочтительно содержат от приблизительно 2% до приблизительно 50% умягчителя(ей). В настоящем документе термином «умягчители» называются материалы, используемые для предотвращения или устранения сухости кожи, например, путем предотвращения трансэпидермальной потери воды. К примерам умягчителей относятся, помимо прочего, растительные масла, минеральные масла, сложные эфиры жирных кислот и т.п.

Из указанного раствора может быть приготовлен лосьон. Лосьоны, как правило, содержат от приблизительно 1% до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) умягчителя(-ей) и от приблизительно 50% до приблизительно 90% (например, от приблизительно 60% до приблизительно 80%) воды.

Другим типом продукта, который может быть изготовлен из раствора, является крем. Крем, как правило, содержит от приблизительно 5% до приблизительно 50% (например, от приблизительно 10% до приблизительно 20%) умягчителя(-ей) и от приблизительно 45% до приблизительно 85% (например, от приблизительно 50% до приблизительно 75%) воды.

Несмотря на то что композиция, составляющая предмет настоящего изобретения, предпочтительно включает воду, в альтернативном варианте композиция может быть безводной или представлять собой мазь, содержащую не воду, а органические и (или) силиконовые растворители, масла, жиры и воски. Мазь может содержать простую основу из животных или растительных масел или полутвердых углеводородов. Мазь может содержать от приблизительно 2% до приблизительно 10% умягчителя(ей) и от приблизительно 0,1% до приблизительно 2% загустителя(ей).

Композиция может быть приготовлена в форме эмульсии. Если носитель для местного применения представляет собой эмульсию, то от приблизительно 1 до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2 до приблизительно 5%) данного носителя составляет(ют) эмульгатор(ы). Эмульгаторы могут быть неионными, анионными или катионными. К примерам соответствующих эмульгаторов относятся вещества, как правило, идентифицируемые как эмульгаторы в области средств личной гигиены и косметики.

Лосьоны и крема могут быть изготовлены в форме эмульсий. Как правило, такие лосьоны содержат от приблизительно 0,5 до приблизительно 5% эмульгатора(ов). Такие крема, как правило, содержат от приблизительно 1% до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) умягчителя(ей); от приблизительно 20% до приблизительно 80% (например, от 30% до приблизительно 70%) воды; и от приблизительно 1% до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2% до приблизительно 5%) эмульгатора(ов).

Препараты для ухода за кожей на основе односторонней эмульсии, такие как лосьоны и крема типа масло-в-воде и вода-в-масле, хорошо известны в косметической отрасли и могут использоваться в рамках настоящего изобретения. Многофазные эмульсионные композиции, например, типа вода-в-масле-в-воде или масло-в-воде-в-масле, также могут применяться в рамках настоящего изобретения. Как правило, такие односторонние или многофазные эмульсии содержат в качестве обязательных компонентов воду, умягчители и эмульгаторы.

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, также могут быть изготовлены в форме геля (например, водного, спиртового, водно-спиртового или масляного геля с применением подходящего гелеобразующего агента(ов)). К соответствующим гелеобразующим агентам для водных и (или) спиртовых гелей относятся, помимо прочего, натуральные камеди, акриловая кислота, акрилатные полимеры и сополимеры, производные целлюлозы (например, гидроксиметилцеллюлоза и гидроксипропилцеллюлоза). К соответствующим гелеобразующим агентам для масел (например, для минерального масла) относятся, помимо прочего, гидрированный сополимер бутилена, этилена и стирола и гидрированный сополимер этилена, пропилена и стирола. В таких гелях содержание гелеобразующих агентов, как правило, составляет от приблизительно 0,1 до 5% вес.

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, также могут быть изготовлены в твердой форме (например, в форме палочек на основе воска, брусков мыла, порошка или салфеток, содержащих порошок).

Композиции, которые можно использовать в рамках настоящего изобретения, могут содержать, в дополнение к вышеуказанным компонентам, широкий спектр дополнительных маслорастворимых материалов и (или) водорастворимых материалов, традиционно применяемых в композициях для ухода за кожей и волосами в известных специалистам концентрациях.

Дополнительные косметически активные вещества

В одном варианте осуществления изобретения композиция дополнительно содержит другое косметически активное вещество. В настоящем документе «косметически активным веществом» называется препарат (например, синтетический, или выделенный из природного источника, или натуральный экстракт), оказывающий косметическое или терапевтическое воздействие на кожу или волосы, в том числе, помимо прочего, средства против угревой сыпи, матирующие средства, противомикробные средства, дополнительные противовоспалительные средства, противогрибковые средства, противопаразитарные средства, анальгетики наружного применения, солнцезащитные средства, фотозащитные средства, антиоксиданты, кератолитические средства, поверхностно-активные вещества, увлажнители, питательные вещества, витамины, средства, повышающие энергетический уровень, антиперспиранты, средства для сужения пор, дезодоранты, укрепляющие средства, противомозольные средства и средства для кондиционирования волос и (или) кожи.

В одном варианте осуществления изобретения средство выбирают, помимо прочего, из группы, состоящей из спиртокислот, перекиси бензоила, D-пантенола, октилметоксикоричной кислоты, диоксида титана, октилсалицилата, гомосалата, авобензона, каротиноидов, аминов (например, нейтрола), ретиноидов, таких как ретинол и ретинилпальмитат, керамидов, полиненасыщенных жирных кислот, жирных кислот из эфирных масел, ферментов, ингибиторов ферментов, минеральных веществ, гормонов, таких как эстрогены, стероидов, таких как гидрокортизон, 2-диметиламиноэтанола, солей меди, таких как хлорид меди, пептидов, содержащих медь, например, Cu:Gly-His-Lys, коэнзима Q10, пептидов, аминокислот, таких как пролин, витаминов, лактобионовой кислоты, ацетил-коэнзима А, ниацина, рибофлавина, тиамина, рибозы, переносчиков электронов, таких как NADH и FADH2, а также других растительных экстрактов, таких как алоэ вера, пиретрум, толокно, и их производных и смесей. Косметически активное вещество может обычно присутствовать в композиции, составляющей предмет настоящего изобретения, в количестве от приблизительно 0,001 до приблизительно 20% вес. композиции, например, от приблизительно 0,005 до приблизительно 10%, в частности от приблизительно 0,01 до приблизительно 5%.

К примерам витаминов относятся, помимо прочего, витамин А, витамины группы В, например, витамин B3, витамин B5 и витамин B12, витамин C, витамин K и различные формы витамина E, такие как альфа-, бета-, гамма- или дельта-токоферолы, или их смеси и производные.

К примерам спиртокислот относятся, помимо прочего, гликолевая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, салициловая кислота, лимонная кислота и винная кислота.

К примерам антиоксидантов относятся, помимо прочего, водорастворимые антиоксиданты, такие как сульфгидрильные соединения и их производные (например, натрия метабисульфит и N-ацетил-цистеин), липоевая кислота и дигидролипоевая кислота, ресвератрол, лактоферрин, а также аскорбиновая кислота и производные аскорбиновой кислоты (например, аскорбилпальмитат и аскорбиловый полипептид). К жирорастворимым антиоксидантам, подходящим для использования в композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, относятся, помимо прочего, бутилированный гидрокситолуол, ретиноиды (такие как ретинол и ретинилпальмитат), токоферолы (например, токоферол-ацетат), токотриенолы и убихинон. К натуральным экстрактам, содержащим антиоксиданты, подходящие для использования в композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, относятся, помимо прочего, экстракты, содержащие флавоноиды и изофлавоноиды, а также их производные (например, генистеин и диадзеин), экстракты, содержащие ресвератрол и т.п. К примерам таких натуральных экстрактов относятся экстракты виноградных косточек, зеленого чая, сосновой коры и прополиса.

Другие материалы

В композиции могут присутствовать и другие различные материалы, известные специалистам. К ним относятся увлажнители, регуляторы pH, хелатирующие агенты (такие как ЭДТА), парфюмерные отдушки и консерванты (например, парабены).

Для использования в композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, также подходят красители, растворимые в воде и в спирте. Примерами красителей, пригодных для применения в рамках настоящего изобретения, являются карамель, кармин, производные флуоресцеина, метоксален, триоксален, азокрасители, антрахиноновые красители, синие азулены, гвайазулен, хамазулен, эритрозин, чайная роза, флоксин, цианозин, дафинин, эозин G, козин 10B, кислотный красный 51, красный краситель 4, красный краситель 40, синий краситель 1 и желтый краситель 5, или их смеси.

При использовании красителя его концентрация в композиции может варьироваться от приблизительно 0,0001 до приблизительно 0,1, предпочтительно - от приблизительно 0,0025 до приблизительно 0,025 (в процентах от общего веса композиции).

Композиция, а также составы и продукты, содержащие эти композиции, могут быть приготовлены с использованием способов, хорошо известных специалисту в данной области.

Способы применения

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, можно применять местно путем нанесения на кожу млекопитающих, нуждающихся в лечении одного или нескольких признаков старения кожи, описанных выше. В одном варианте осуществления изобретения композиции наносят на кожу, которая нуждается в лечении борозд, морщин и (или) в лечении потери эластичности. Композиции можно наносить на нуждающуюся в этом кожу в рамках соответствующей схемы лечения, например, ежемесячно, еженедельно, через день, ежедневно, дважды в день и т.д.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, также можно применять для лечения других состояний, связанных с кожей. Например, композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, можно применять для лечения поствоспалительной гиперпигментации, для уменьшения размера пор, лечения угревой сыпи, снижения секреции кожных сальных желез и уменьшения рубцов. В некоторых других вариантах осуществления изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, можно наносить одновременно или в течение нескольких часов с момента применения механического или физического скраба, например, микрошлифовки кожи, или химического скраба или кератолитического средства, например, салициловой кислоты. В некоторых других вариантах осуществления изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, наносят на слизистую или другую ткань, например, ткани влагалища, полости рта или глаза. В некоторых других вариантах осуществления изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, наносят на незначительные раны или на послеоперационные участки кожи для более быстрого заживления, на места укусов насекомых, на места ожогов ядовитым сумахом или при других подобных состояниях кожи, или в целом для снижения зуда. В некоторых других вариантах осуществления изобретения композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, наносят для снижения раздражения кожи. Раздражение может быть вызвано внешними причинами и связано с присутствием в косметических продуктах и средствах для ухода за кожей таких компонентов, как ретиноид и его производные, перекись бензоила, альфа-гидроксикислоты и их производные, салициловая кислота, ПАВ, натуральные экстракты растений, активные компоненты солнцезащитных кремов, мочевина, консерванты и т.п. Раздражение также может быть вызвано иными внешними причинами, такими как солнце, ветер или бритье. Раздражение также может быть вызвано внутренними патологическими состояниями, такими как угревая сыпь различного типа, атопический дерматит и иные патологические состояния.

Предполагается, что специалист, основываясь на данном описании, сможет использовать настоящее изобретение в максимальном объеме. Приведенные ниже характерные варианты осуществления изобретения следует рассматривать лишь в качестве примеров, которые ни в коей мере не ограничивают раскрываемую сущность настоящей заявки на изобретение. Приводимые ниже неограничивающие примеры являются дополнительной иллюстрацией изобретения.

Пример I

Описанный выше ТЕСТ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB был проведен на тестовых образцах веществ Bay 11-7082 (Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури), тетрагидрокуркуминоидов CG (Sabinsa Corporation, г. Пискатавэй, штат Нью-Джерси), а также на различных концентрациях 4-гексилрезорцинола. Результаты приведены в таблице 1, в которой для тестовых образцов и контрольного образца указано значение активации репортерного гена для NF-kB (люминесценция, L). Также приведено процентное значение ингибирования NF-kB.

Bay 11-7082 и тетрагидрокуркуминоиды CG продемонстрировали сильное ингибирование NF-kB. Неожиданным образом 4-гексилрезорцинол также вызвал существенное снижение активации NF-kB. Что еще более неожиданно, 4-гексилрезорцинол вызвал значительное ингибирование NF-kB даже при низких концентрациях.

Пример II

Описанный выше ТЕСТ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB был проведен для ряда замещенных резорцинолов, концентрация каждого из которых составляла 10 мкг/мл. Результаты приведены в таблице 2.

ТАБЛИЦА 2   Структура Процентная доля ингибирования NF-kB 4-октилрезорцинол 99,5% 4-гексилрезорцинол 92,4% β-зеараленол CAS № 71030-11-0 87,1% β-зеараланол CAS № 42422-68-4 76,56%

2,4-динитросорцинол 51,78% 4-хлоррезорцинол 51,63% 2,6-дихлорорезорцинол 51,54% Зеараланон 50,95% Фенэтилрезорцинол 31,8% 4-додецилрезорцинол 20,87% 4-капроилрезорцинол 10,25%

C-ундецилкаликс[4] -резорцинарен 4,87% 3-метоксифенол 0% 2',4'-дигидроксипропиофенон -0,7% 2,4-ДИГИДРОКСИКОРИЧНАЯ кислота -1,7% 1,3-диметоксибензол -1,7%

Из представленных в таблице 2 данных видно, что наибольшее ингибирование NF-kB обеспечивают замещенные резорцинолы, в которых заместители не содержат фениловых функциональных групп, замещенные резорцинолы, в которых заместители не содержат кетоновых функциональных групп, и замещенные резорцинолы, в которых заместитель содержит от 5 до 11 атомов углерода.

Пример III

Описанный выше ТЕСТ НА ИНГИБИРОВАНИЕ NF-kB и ТЕСТ НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ был проведен для множества соединений. Полученные результаты приведены ниже в таблицах 3a и 3b.

В таблице 3a перечислены противовоспалительные препараты в соответствии с настоящим изобретением с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее. В таблице 3b приведены для сравнения противовоспалительные препараты с IC50 более 70 мкг/мл.

Пример IV

Составляющую предмет настоящего изобретения композицию, описанную в примере 1, приготовили из компонентов, перечисленных в приведенной ниже таблице 4.

Композицию приготовили следующим способом. Приготовили навеску компонента Synovea HR, которую растворили в HYDROLITE 5, после чего добавили деионизированную воду. Таким образом, была получена фаза А. Олеосомы и Finsolv TN смешали и получили фазу В. Фазу B очень медленно, при постоянном перемешивании, добавили к фазе A. Перемешивание продолжалось в течение 15 минут до получения однородной эмульсии. К эмульсии при постоянном быстром перемешивании добавили ARISTOFLEX, в результате чего был получен густой однородный состав.

Пример V

Для изучения секреции провоспалительного медиатора, цитокина IL-1α, в эпителиальных клетках человека провели тест на IL-1α с множеством агентов.

Тест на IL-1α проводили следующим образом. Клетки линии KB приобрели у компании ATCC (ATCC № CCL-17, г. Манассас, штат Вирджиния). Клетки высевали на обработанные 96-луночные планшеты для культивирования с плотностью 5000 клеток на лунку в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM), с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Invitrogen, г. Сан-Диего, штат Калифорния). Через 48 часов клетки обрабатывали в течение 24 часов описанными ниже препаратами в указанных концентрациях, после чего отбирали супернатанты и анализировали их на уровень секреции цитокина IL-1α с использованием коммерчески доступных наборов (компания Millipore Corp., г. Биллерика, штат Массачусетс). Полученные результаты представлены в приведенной ниже таблице 5.

Полученные результаты указывают, что ингибиторы NF-kB, такие как 4-гексилрезорцинол и тетрагидрокуркуминоиды, обладая способностью ингибировать фактор NF-kB, могут повышать секрецию цитокина IL-1α.

Пример VI

Провели дополнительные тесты на IL-1α, как описано в примере 5. Для более простого сравнения результатов приведенные степени увеличения секреции IL-1α для 4-гексилрезорцинола, флоретина и их комбинаций нормировали на соответствующую величину для 4-гексилрезорцинола (20 мкг/мл, сравнительный пример 2). Приведенные степени увеличения секреции IL-1α тетрагидрокуркуминоидов, пиретрума и их комбинаций нормировали на соответствующую величину для тетрагидрокуркуминоидов (20 мкг/мл, сравнительный пример 3). Полученные результаты представлены в приведенной ниже таблице 6.

Полученные результаты показывают, что, хотя ингибиторы NF-kB могут индуцировать секрецию цитокина IL-1α, она может быть обращена при помощи ингибитора NF-kB в сочетании с противовоспалительным препаратом с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее (например, пиретрум девичий или флоретин).

Пример VII

Были проведены дополнительные тесты на IL-1α, как описано в примере 5. Для более простого сравнения результатов приведенные степени увеличения секреции IL-1α нормировали на соответствующую величину для 4-гексилрезорцинола (20 мкг/мл, сравнительный пример 2).

Полученные результаты показывают, что комбинации ингибиторов NF-kB с противовоспалительными препаратами с IC50 выше приблизительно 70 мкг/мл могут не обеспечивать столь выраженного снижения секреции цитокина IL-1α, как комбинации ингибиторов NF-kB с противовоспалительными препаратами с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее. Приведенные выше данные указывают, что комбинации ингибиторов NF-kB с противовоспалительными препаратами с IC50 выше приблизительно 70 мкг/мл обеспечивают снижение секреции цитокина IL-1α менее чем 35%.

Необходимо отметить, что в сравнительных примерах 9-14 соя не растворялась в среде для проведения теста и вместо этого диспергировалась.

Пример VIII

Используя способ, описанный в примере 5, но анализируя секрецию цитокина IL-8, на ряде композиций провели тест на IL-8. Для каждого образца рассчитали процентную степень снижения секреции IL-8. Полученные результаты приведены в таблице 8. Для образцов, содержащих комбинацию ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата, приведена процентная степень снижения секреции IL-8 по отношению к процентной степени снижения секреции IL-8 для соответствующей дозировки противовоспалительного препарата.

Приведенные результаты показывают, что комбинации ингибиторов NF-kB и противовоспалительных препаратов с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее резко снижают уровень экспрессии IL-8 по сравнению с действием любого из препаратов по отдельности.

Пример IX

Провели другой ТЕСТ на IL-8, как описано в примере 8, но варьировали соотношение ингибитора NF-kB и противовоспалительного препарата с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее. Полученные результаты представлены в приведенной ниже таблице 9.

Полученные результаты указывают на то, что выраженное повышение эффективности комбинации ингибиторов NF-kB и противовоспалительных препаратов с IC50 приблизительно 70 мкг/мл или менее наблюдается в широком диапазоне соотношений весовых концентраций двух активных компонентов (проверены весовые соотношения 10:1, 1:1 и 1:10 для примеров 13, 14 и 15 согласно настоящему изобретению, соответственно).

В целом, противовоспалительные смеси, составляющие предмет настоящего изобретения, обеспечивают снижение секреции обоих воспалительных цитокинов, IL-1 и IL-8, а также, как правило, обеспечивают ингибирование NF-kB.

Несмотря на то что раскрытие настоящего изобретения сопровождается его подобным описанием, подразумевается, что целью указанного описания является иллюстрация, но не ограничение области применения данного изобретения, которая определяется областью применения прилагаемых пунктов формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации определяются указанными пунктами формулы изобретения.