Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АНЕМИЧЕСКОГО СИНДРОМА У ДЕТЕЙ

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики анемического синдрома в детском возрасте.

Известен способ диагностики анемии у детей, включающий исследование сыворотки крови, в которой у новорожденных определяют уровень ферритина и при значении этого показателя ниже 11,0 нг/мл диагностируют анемию (Патент РФ №2018844).

Известен способ определения прелатентного дефицита железа у детей, заключающийся в том, что в сыворотке крови детей определяют содержание ферритина и при величине его ниже 20 нг/мл назначают профилактическое лечение (Патент РФ №2115118).

Известен способ дифференциальной диагностики железодефицитной анемии и анемии хронических заболеваний, заключающийся в определении сывороточного железа в крови, при этом уровень сывороточного железа определяют до и через три часа после приема внутрь 20 мг железа с последующим вычислением его прироста относительно исходного уровня и при увеличении от исходного уровня свыше 30% диагностируют железодефицитную анемию, а при увеличении от 0 до 30% диагностируют анемию хронических заболеваний (Патент РФ №2316007).

Известен способ дифференциальной диагностики анемии у беременных путем иммунохимического исследования биологических жидкостей, для чего в сыворотке крови беременных определяют уровень гепцидина с помощью иммуноферментного анализа и при уровне гепцидина более 245 нг/мл определяют анемию хронических болезней, а при уровне гепцидина менее 230 нг/мл - железодефицитную анемию (Патент РФ №2407011).

Способ выбран в качестве прототипа.

Недостатком способа является его неопределенность, т.к. при беременности гепцидин может повышаться в зависимости от срока гестации, поэтому неизвестно как правильно интерпретировать диапазон указанных значений гепцидина в сыворотке крови беременных. В патенте РФ №2407011 указано пороговое значение гепцидина - 245 нг/мл, выше которого определяют анемию хронических болезней (АХВ). По нашим наблюдениям при АХВ интервалы колебания гепцидина составляют 20-1000 нг/мл, а у здоровых детей 3-198 нг/мл. У больных с АХВ гепцидин может быть ниже 230 нг/мл, как в предыдущем патенте, или находиться в пределах референсных величин, однако при этом могут наблюдаться повышенные уровни ИЛ-6 на фоне выраженного синдрома анемии, что свидетельствует об активации воспалительного процесса цитокинами. Т.е. пороговая величина более 245 нг/мл не может точно отвечать критериям диагностики АХВ от другого вида анемии. Значение гепцидина менее 230 нг/мл как указано в патенте РФ №2407011 служит критерием диагностики железодефицитной анемии (ЖДА). В данном патенте не указаны критерии диагностики ЖДА, и совпадают ли они с критериями ВОЗ.

В настоящее время во врачебной практике используют шаблонную оценку снижения уровня гемоглобина и железа в крови, данные изменения расцениваются как железодефицитное состояние. Поэтому в терапии, как правило, используются препараты железа, не приводящие к нормализации лабораторных показателей.

Задачей изобретения является разработка способа дифференциальной диагностики анемического синдрома при заболеваниях, сопровождающихся воспалительной реакцией, с возможностью выделения патогенетических вариантов анемического синдрома.

Технический результат заключается в возможности учитывать патофизиологические изменения, происходящие при воспалительных реакциях организма.

Сущность изобретения состоит в комплексном исследовании показателей обмена железа, для чего на гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) г/л, и индекс МСНС(г/л), отражающий среднюю концентрацию гемоглобина в эритроцитах, а также уровни ферритина и трансферрина, как наиболее чувствительные к анемическому синдрому лабораторные маркеры. На иммунологическом анализаторе определяют уровень ИЛ-6 в сыворотке, методом ИФА определяют уровень гепцидина. Следует отметить, что во всех случаях развития анемического синдрома уровень сывороточного железа и уровня гемоглобина понижается ниже референсных значений. Поэтому для дифференциальной диагностики анемического синдрома, сопровождающего воспалительные заболевания у детей, мы предлагаем использовать наиболее чувствительные показатели обмена железа и маркеры воспалительного ответа, такие как гепцидин и интелейкин 6 (ИЛ-6).

Сравнивают полученные показатели с референсными значениями, т.е. со средними значениями конкретных лабораторных показателей, которые были получены при массовом обследовании здорового населения.

При значениях: гемоглобин ≤114 г/л, МСНС ≤302 г/л, ферритин ≥45 нг/мл, трансферрин ≤250 мг/дл; ИЛ-6 ≥11 пг/мл; гепцидин ≥120 нг/мл делают вывод об анемическом синдроме, развившейся на фоне воспалительных изменений в организме при острых или хронических заболеваниях.

Референсные значения: гемоглобин 120-150 гл; МСНС - 310-370 г/л; ферритин - 15-60 нг/мл; трансферрин - 235-320 мг/дл; ИЛ-6 - 1-4 пг/мл; гепцидин - 0,1-120 нг/мл. На основании полученных совокупных данных ставят диагноз и выбирают тактику лечения.

Для диагностики анемии обязательно наличие такого синдрома анемии как снижение гемоглобина менее 120 г/л. При наличии снижения гемоглобина смотрят уровень интерлейкина и гепцидина в комплексе с уровнем ферритина, трансферрина и индексом МСНС. Отклонение пороговых значений хотя бы в одном показателе предполагает анемический синдром на фоне воспаления.

Способ осуществляют следующим образом. У ребенка берут кровь из вены в две пробирки. В одну - с консервантом К2ЭДТА для исследования на гематологическом анализаторе, в другую - без консерванта для биохимических исследований. На все исследования достаточно 2-3 мл крови. На гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови: гемоглобин г/л и индекс МСНС г/л, а также уровни ферритина нг/мл и трансферрина мг/дл. На иммунологическом анализаторе определяют уровень ИЛ-6 в сыворотке пг/мл, методом ИФА определяют уровень гепцидина нг/мл. Значения сравнивают с референсными интервалами. Для определения референсных интервалов были проведены исследования крови группы здоровых детей. Результаты сравнения этих групп были статистически значимыми (р<0,01). Заявляемым способом проведены исследования у 162 детей в возрасте от 1 до 15 лет.

Клинические примеры осуществления способа.

Пример 1. Ребенок 5 лет, наблюдался амбулаторно у педиатра по поводу анемии, болен в течение 1 года. После перенесенной ОРВИ при обследовании была выявлена анемия (гемоглобин 98 г/л), и назначены препараты железа, которые ребенок принимал в течение длительного времени, однако полной нормализации картины крови не наблюдалось. При обследовании определены показатели красной крови: НВ 100 г/л; МСНС 214 г/л. В сыворотке крови определили уровни: гепцидин 149,6 нг/мл; ИЛ-6 858,2 пкг/мл; ферритин 233 нг/мл, трансферрин 183 мг/дл. Проведено дополнительное обследование, в результате которого были выявлены воспалительные изменения в суставах. Назначена противовоспалительная и специфическая терапия биопрепаратами основного заболевания в течение 2-х месяцев. При повторном исследовании крови наблюдалась нормализация показателей крови: НВ - 121 г/л; МСНС - 322 г/л. В сыворотке крови определили уровни: гепцидин 50,6 нг/мл; ИЛ-6 39,6 пкг/мл; ферритин 21 нг/мл, а трансферрин 268 мг/дл.

Сделано заключение о развитии анемического синдрома на фоне воспалительных изменений в организме - ОРВИ, который сопровождается функциональным дефицитом железа. Даны рекомендации по дальнейшему лечению ребенка, обращено внимание на проведение профилактики анемии препаратами железа.

Пример 2. Ребенок, 6 мес. При плановом обследовании перед вакцинацией выявлена анемия: НВ 115 г/л; МСНС 352 г/л. В сыворотке крови определили: гепцидин 53,6 нг/мл; ИЛ-6 26,3 пкг/мл; ферритин 12,5 нг/мл, трансферрин 342 мг/дл.

При комплексной оценке параметров метаболизма железа и гемограммы выявлено превышение уровня ИЛ-6 интервала нормальных величин на фоне отсутствия повышения уровня других маркеров воспаления. При дополнительном обследовании методом ПЦР обнаружен вирус Эбштейна-Барр (ЭБВ) в слюне. Изменения картины крови расценивают как сочетанный вариант: вирус-ассоциированный синдром цитопении (анемии) + железодифицитная анемия. Проведена противовирусная терапия, по окончании которой в схему лечения добавлены препараты железа, в течение 6-ти месяцев. При контрольном обследовании в динамике через 6 месяцев отмечали нормализацию картины крови: НВ 125 г/л; МСНС 324 г/л. В сыворотке крови определили: гепцидин 39,6 нг/мл; ИЛ-6 8,2 пкг/мл; ферритин 18 нг/мл, трансферрин 301 мг/дл. Вирус ЭБВ в слюне не обнаружен. Рекомендовано дальнейшее наблюдение за показателями крови и соблюдение рекомендаций по вскармливанию.

Пример 3. Ребенок два года, при обследовании крови на фоне хронического заболевания ЖКТ (болезнь Крона) выявлено снижение уровня железа в сыворотке и уровня гемоглобина: НВ 102 г/л; МСНС 218 г/л. В сыворотке крови определили уровни: гепцидин 108 нг/мл; ИЛ-6 24,69 пкг/мл; ферритин 16,3 нг/мл, трансферрин 205 мг/дл. При комплексной оценке данные изменения крови расценены как анемический синдром при хроническом воспалении с низкой степенью активности. Проведена терапия основного заболевания в сочетании с препаратами железа. При исследовании крови в динамике отмечали снижение уровня воспалительных маркеров и нормализацию индексов красной крови. НВ 130 г/л; МСНС 319 г/л. В сыворотке крови определили: гепцидин 60,6 нг/мл; ИЛ-6 13,5 пкг/мл; ферритин 23,8 нг/мл, трансферрин 259 мг/дл.

Предлагаемый способ диагностики анемического синдрома представляет собой комплексное исследование показателей обмена железа: ферритина, трансферрина, гепцидина, интерлейкина - 6 (ИЛ-6) в сыворотке совместно с показателями красной крови: НВ и МСНС. Это дает возможность учитывать патофизиологические изменения, происходящие при воспалительных реакциях организма, в частности, в системе эритрона.

Преимущество предлагаемого способа диагностики анемического синдрома у детей состоит в возможности адекватной оценки воспалительного ответа организма при хронических и острых воспалительных заболеваниях. По характеру изменения данных показателей можно определить степень активности воспаления.